分支可以被指定为A区、B区或C区，其中，将实验动物小心地放入一个分支中，允许 实验动物在Y-迷宫中到处自由移动8分钟，使用计算机程序（Ethovision 3. l，Noduls，荷 兰）以通过利用安装在天花板上的照相机来观察并记录实验动物被放入的每个分支。测量 实验动物移到每个分支中的频率和顺序以评价自发变换（spontaneous alternation，％ )。 当实验动物移到三个不同的分支（实际变换）变换时，认定行为的变换；换言之，ABC、ACB、 BAC、BCA、CAB和CBA的每次移动被承认为是一次变换并且记1分。当实验动物不顺序地移 到不同的分支中时，移动不记分。通过利用[实际变换数量八变换的总数量-2) X100]的 数学等式来计算％变换率。此外，基于没有药物施用的正常小鼠的正控制组的100%变换率 和没有药物施用的转基因小鼠的负控制组的〇 %变换率，将％变换率归一化，由此获得的结 果不出在图1中。
[0066] 图1示出了阿尔茨海默病转基因小鼠的Y-迷宫行为的实验结果（鲁：多奈哌齐施 用组，▲ :EPPS和多奈哌齐施用组，以及 :EPPS施用组）。如图1中所示，多奈哌齐施用组 最初示出了在认知能力方面的快速改善，但是在5周时改善达到顶峰并在7周时下降。同 时，与多奈哌齐施用组的认知能力相比，EPPS施用组示出了在认知能力方面的逐渐改善，并 且在10周时达到与多奈哌齐施用组的认知能力相同的认知能力的水平。与多奈哌齐施用 组的认知能力相比，EPPS和多奈哌齐施用组的认知能力示出了在认知能力方面的逐渐增 强，但是示出了比EPPS施用组的认知能力快的增强。此外，在9周时，EPPS和多奈哌齐施用 组示出了在施用组之中的最好的改善并且在13周时示出了在认知能力方面的持续增强。 此外，在5周时多奈哌齐施用组的变换率比EPPS和多奈哌齐施用组的变换率大，EPPS和多 奈哌齐的组合被确定为基于不同于多奈哌齐或EPPS的单独路径的路径。
[0067] 因此，多奈哌齐示出了在认知能力方面的快速但短期的改善，EPPS示出了在认知 能力方面的长期改善，但与多奈哌齐相比改善缓慢，并且与EPPS和多奈哌齐的组合相比改 善缓慢。另一方面，与每种药物相比，EPPS和多奈哌齐的组合示出了在认知能力方面的较 好的改善和长期效果。
[0068] 示例2 :阿尔茨海默病转基因小鼠的条件恐惧测试
[0069] 为了观察EPPS和多奈哌齐的组合的效果，使在示例1中经历了 13周的Y-迷 宫行为测试的实验动物经历用于测试空间和声音的恐惧记忆的条件恐惧测试（fear conditioning test)〇
[0070] 条件恐惧测试分为测试空间的恐惧记忆的情境条件恐惧测试（fear conditioning-contextual test)和测试声音的恐惧记忆的暗示条件恐惧测试（fear conditioning-cued test)〇
[0071 ] 测试包括一对声音刺激（CS (条件刺激），30秒，85dB和30kHz)和电击（US (非条 件刺激），1秒和〇.5mA)，其重复两次。均用90秒的期限执行，在最后的电击（US)之后将小 鼠从条件箱中拿出90秒。下面的测试在24小时后执行。
[0072] 情境测试：使实验动物保持在条件箱中，在没有提供声音刺激和电击的情况下测 量冻结反应（freeze response)，其结果用作条件恐惧反应的衡量标准。冻结反应被定义为 除了呼吸之外的静止状态。
[0073] 暗示测试：为了改变在情境测试的24小时之后的环境，将小鼠放入到除了用于情 境测试的箱之外的箱中，并且提供有与情境测试（不提供电击）相同的声音刺激以测量冻 结反应。结果用作用于暗示条件的恐惧响应的衡量标准。
[0074] 情境测试的结果示出在下面的表2和图2中，暗示测试的结果示出在下面的表3 和图3中。
[0081] 图2示出了情境条件恐惧测试的实验结果，图3示出了暗示条件恐惧测试的实验 结果。
[0082] 如图2和图3中所示，在对于空间和声音的条件恐惧测试中，EPPS和多奈哌齐施 用组示出了比多奈哌齐施用组和EPPS施用组的记忆好的记忆。在可以测量对于负责学习 和记忆的海马区的效果的情境测试中，EPPS和多奈哌齐施用组的记忆基本上优于多奈哌齐 施用组和EPPS施用组的记忆。因此，分别与EPPS和多奈哌齐相比，EPPS和多奈哌齐的组 合示出了在学习和记忆方面的显著优异的改善。
[0083] 如上面描述的，根据本发明的一个或更多个上面的实施例，当使用用于预防或治 疗认知功能障碍相关疾病的药物组合物（包括吗啉化合物或哌嗪化合物、其可药用盐或 其衍生物以及多奈哌齐、其可药用盐或其衍生物）时，可以抑制作为痴呆症的主要原因的 β -淀粉的积累，并且可以生理地增加大脑中的乙酰胆碱的量，以有效地预防或治疗认知功 能障碍相关疾病。
[0084] 应理解的是，在此描述的示例性实施例应仅被认为是描述性的含义而不是为了限 制的目的。每个实施例内的特征或方面的描述通常应被认作可用于其它实施例中的其它相 似特征或方面。
[0085] 虽然已经参照附图描述了本发明的一个或更多个实施例，但是本领域普通技术人 员将理解的是，在不脱离如权利要求限定的本发明的精神和范围的情况下，可以在此做出 形式和细节上的各种改变。
【主权项】
1. 一种用于预防或治疗认知功能障碍相关疾病的药物组合物，所述药物组合物包括： 由下面的式1表示的并且包括磺酸结构或羧酸结构的吗啉化合物或哌嗪化合物、吗啉化合 物或哌嗪化合物的可药用盐或者吗啉化合物或哌嗪化合物的衍生物；以及多奈哌齐、多奈 哌齐的可药用盐或者多奈哌齐的衍生物： 在式1中，Z是0或N; 当Z = 0时，R1不结合，当Z = N时，R 1是-(CH 2)n-OH ; R2是-(CH 2) n-R3, η是选自于1至5的整数，R3是-COOH或-SO 3H。2. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中，式1的化合物选自于由式la至式le所表 示的化合物组成的组：3. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中，认知功能障碍相关疾病是痴呆症、阿尔茨 海默病、失忆症、帕金森病或它们的任何组合。4. 一种预防或治疗认知功能障碍相关疾病的方法，所述方法包括施用由下面的式1表 示的并且包括磺酸结构或羧酸结构的吗啉化合物或哌嗪化合物、吗啉化合物或哌嗪化合物 在式1中， 的可药用盐或者吗啉化合物或哌嗪化合物的衍生物以及多奈哌齐、多奈哌齐的可药用盐或 者多奈哌齐的衍生物：Z是0或N; 当Z = 0时，R1不结合，当Z = N时，R 1是-(CH 2)n-OH ; R2是-(CH 2) n-R3, η是选自于1至5的整数，R3是-COOH或-SO 3H。5. 根据权利要求4所述的方法，其中，由式1表示的化合物选自于由式la至式le组成 的组：6. 根据权利要求4所述的方法，其中，认知功能障碍相关疾病是痴呆症、阿尔茨海默 病、失忆症、帕金森病或它们的任何组合。7. 根据权利要求4所述的方法，其中，所述方法包括向个体同时地或顺序地施用由下 面的式1表示的并且包括磺酸结构或羧酸结构的吗啉化合物或哌嗪化合物、吗啉化合物或 哌嗪化合物的可药用盐或者吗啉化合物或哌嗪化合物的衍生物以及多奈哌齐、多奈哌齐的 可药用盐或者多奈哌齐的衍生物。
【专利摘要】提供了一种用于预防或治疗认知功能障碍相关疾病的药物组合物，该药物组合物包括：N-(2-羟乙基)哌嗪-Nˊ(3-丙磺酸)、其可药用盐或其衍生物；以及多奈哌齐、其可药用盐或其衍生物。该组合物可以用于预或治疗认知功能障碍相关疾病。
【IPC分类】A61K31/445, A61K31/4965, A61K31/5375, A61P25/16
【公开号】CN105338984
【申请号】CN201480036458
【发明人】金东辰, 金泳秀, 金惠渊, 金铉真
【申请人】韩国科学技术研究院
【公开日】2016年2月17日
【申请日】2014年6月26日
【公告号】EP3013346A1, US20150005306, WO2014209033A1