本发明涉及小分子药物领域，更特别涉及一种AHU-377制备方法、AHU-377中间体及AHU-377中间体的制备方法。
背景技术：
心力衰竭是一个死亡率非常高的综合征，对于心力衰竭患者，目前为止还没有药物能够显著改善死亡率和发病率，因而一种新型的治疗药物是非常必要的。AHU-377(CAS号149709-62-6)是一种脑啡肽酶抑制剂，它是一种前体药物，可以通过水解反应失去乙酯基团，转变成有药物活性的LBQ657，有抑制内啡肽酶(NEP)的作用，NEP的主要生物学效应是使钠尿肽、缓激肽和其他血管活性肽等降解失效。AHU-377与血管紧张素缬沙坦按照摩尔比1:1组成LCZ696。LCZ696是一种血管紧张素受体脑啡肽酶抑制剂，它可以降低血压，可能成为一个治疗心力衰竭新的药物。临床数据显示，LCZ696对于治疗高血压比单独使用缬沙坦更加有效。
专利US 5,217,996和US 5,354,892最早报道了AHU-377的合成，合成路线如下：
上述路线的反应以非天然的D型酪氨酸衍生物为底物，价格较昂贵，同时在合成第二步就要用到Pd催化的Suzuki偶联反应，因此由此路线制备的AHU-377成本较高，合成路线如下：
专利US 8,115,016又报道了由焦谷氨酸出发，经过多步反应制备AHU-377的方法，该方法甲基化反应比较困难，且收率不高。专利US 8,580,974又报道了在羰基的a-位引入N,N-二甲基烯胺转化为甲基，然而上述路线对于甲基手性中心的构建都存在一些问题，不适合放大生产，合成路线如下：
关于最新的AHU377中间体的合成方法，专利WO2014032627A1报道了利用格氏试剂与环氧氯丙烷反应，较快捷的得到了化合物AHU377合成的重要中间体，合成路线如下：
然而，这个合成路线的第二步中利用丁二酰亚胺通过Mitsunobu反应引入氮原子，用盐酸水解将丁二酸除去，随后转换为Boc保护，在AHU377的最后合成过程中又要将Boc脱保护，然后又跟丁二酸酐反应引入产品结构中的丁二酸部分，因而这种方法的原子经济性和步骤经济性都较低。
技术实现要素：
为了克服现有技术中的上述问题，本发明提供了一种AHU-377的制备方法、AHU-377中间体及AHU-377中间体的制备方法。本发明的方法操作方便，安全性好且成本低，适合工业化生产。
本发明采用的技术方案是：
在一方面，本发明提供了一种AHU-377的制备方法，包括以下步骤：
(a)化合物(1)S-缩水甘油苄醚与联苯基格氏试剂在有机溶剂中发生反应生成化合物(2)：
(b)化合物(2)丁二酰亚胺或邻苯二甲酰亚胺在有机溶剂中发生Mitsunobu反应生成化合物(3)；
(c)化合物(3)在有机溶剂中在催化剂的作用下脱去苄基保护，生成化合物(4)；
(d)化合物(4)与氧化剂在有机溶剂中，发生氧化反应生成化合物(7)；
(e)化合物(7)与磷叶立德试剂在有机溶剂中反应生成化合物(8)；
(f)化合物(8)在有机溶剂中选择性催化氢化生成化合物(9)；及
(g)化合物(9)在有机溶剂中在酸存在的条件下发生酰胺水解反应生成化合物(10)，即AHU-377；
反应路线如下：
进一步地，步骤(a)中，反应温度优选为-20～0℃。
优选地，在步骤(a)中，联苯基格氏试剂与化合物(1)S-缩水甘油苄醚的摩尔比为1:1～1:1.5，联苯基格氏试剂优选为联苯基溴化镁。
优选地，在步骤(a)中，有机溶剂为四氢呋喃(THF)、甲基四氢呋喃(Me-THF)、乙醚、甲基叔丁基醚中的一种或几种。
进一步地，步骤(b)中，反应温度优选为-10～25℃。
优选地，在步骤(b)中，Mitsunobu反应在三苯基膦或三甲基膦，和偶氮二甲酸二异丙酯或偶氮二甲酸二乙酯或偶氮二甲酸甲酯存在的条件下进行。
优选地，在步骤(b)中，有机溶剂选自甲苯、二氯甲烷、1,4-二氧六环和四氢呋喃中的一种或几种。
进一步地，在步骤(c)中，催化剂用量为1％-50％，催化剂为Pd/C、钯黑等。
优选地，在步骤(c)中，有机溶剂选自甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙酸异丙酯中的一种或几种。
更优选地，在步骤(c)中，反应在30～80℃下进行，优选50～70℃，进一步优选60℃。
进一步地，步骤(d)中，反应温度优选为-10～25℃。
进一步地，在步骤(d)中，氧化剂为戴斯-马丁氧化剂或次氯酸钠等，但不不限于此，可使用具有相当效果的其他氧化剂。
优选地，在步骤(d)中，有机溶剂选自二氯甲烷、氯仿、乙腈中的一种或几种。
进一步地，在步骤(e)中，反应在室温下进行，优选20～50℃，更优选20～30℃。
更优选地，在步骤(e)中，有机溶剂选自二氯甲烷、乙酸异丙酯、乙酸乙酯、四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、乙醚、甲基叔丁基醚、甲苯中的一种或几种。
优选地，在步骤(f)中，催化氢化所使用的催化剂为Pd/C、钯黑、铂碳等，但不限于此，能起到相当催化效果的类似催化剂均可使用。
更优选地，在步骤(f)中，催化氢化在室温下进行，优选20～50℃，更优选20～30℃。
更优选地，在步骤(f)中，有机溶剂选自乙醇、甲醇、四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、甲苯、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙酸异丙酯、甲基叔丁基醚中的一种或几种。
进一步地，在步骤(g)中，酸为盐酸、醋酸或其混合物。
优选地，在步骤(g)中，水解反应在70℃～90℃下进行，优选75～85℃，进一步优选80℃。
在另一方面，本发明还提供了一种制备AHU-377的中间体，其为如下式(II)所示的化合物：
其中，X为杂原子，杂原子优选为N或O；
R1表示H或丁二酰基或邻苯二甲酰亚胺基；
R2表示苄基或取代苄基；
R3表示取代或未取代芳基基团。
更优选地，X为O，R1为H，R2为苄基，R3为苯基，即中间体具体为如下式(2)所 示的化合物：
更优选地，X为N，R1为邻苯二甲酰亚胺基，R2为苄基，R3为苯基，即中间体具体为如下式(3)所示的化合物：
在又一方面，本发明提供了一种制备AHU-377的中间体，其为如下式(III)所示的化合物：
其中，R4表示C1-C6烷基；
R5表示取代或未取代芳基基团。
优选地，R4为乙基，R5为苯基，中间体具体为如下式(8)或式(9)所示的化合物：
在另一方面，本发明还提供了一种如下式(6)的AHU-377中间体的制备方法，包括以下步骤：化合物(4)在酸性或碱性条件下在发生水解反应生成化合物(5)，化合物(5)上Boc保护基得到化合物(6)，
优选地，上述酸性条件通过使用盐酸或盐酸的其他形成，碱性条件通过使用氢氧化钠、氢氧化钾、甲醇钠、叔丁醇钠、叔丁醇钾中的一种或几种形成。
更优选地，上述化合物(4)的水解反应在加热条件下进行，优选在50℃至回流温度下进行。
其中，在本发明的上述各步骤中所使用的溶剂可使用具有等同功能的其他溶剂代替，而不限于所述溶剂，本领域技术人员可根据实际需要选择性使用。
本发明中各步骤所使用的原料和试剂均可通过商业途径购买，也可根据常规化学手段合成，例如化合物(3)可直接购买，也可通过上述方法合成。
与现有技术相比，本发明具有以下优点：本发明提供了一种AHU-377的制备方法、制备AHU-377的中间体化合物及AHU-377的中间体。本发明的方法避免使用昂贵的非天然氨基酸原料酪氨酸，且操作方便，安全性好。本发明 的反应路线使用的原料价格低廉易得，不涉及对环境有害的溶剂，中间体及产物分离纯化容易，路线较短，减少了繁琐的保护去保护过程，适合大规模生产。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步详细说明，以便本领域技术人员可更好地理解本发明，从而对本发明的保护范围做出更为清楚明确的界定。
实施例1
合成化合物2
在惰性气体保护下，室温下向500mL三口瓶中加入化合物1(10g，1eq)，90mL THF溶解后，再加入CuI(4.814g,0.1eq)，将体系移至低温浴槽中降温至-20℃时，开始滴加联苯基溴化镁，控制内温不高于-10℃。滴毕关闭制冷，恢复至室温反应过夜。反应完全，将反应液倒入饱和NH4Cl(10vol，100mL)中室温下搅拌0.5h。抽滤，滤饼用少量EA淋洗，滤液转移至分液漏斗中分液，水相用EA(10vol×2，100mL×2)萃取，合并有机相，饱和NaHCO3、NH4Cl、Brine各150mL(15vol)洗一次，无水MgSO4干燥，抽滤，浓缩得到白色固体。过柱纯化得产品15.2g，收率78％。
产物的核磁数据如下：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.57(d,J＝7.6Hz,2H),7.52(d,J＝8.1Hz,2H),7.42(t,J＝7.6Hz,2H),7.38–7.25(m,8H),4.62–4.47(m,2H),4.09(dd,J＝6.7,3.5Hz,1H),3.54(dd,J＝9.5,3.5Hz,1H),3.43(dd,J＝9.4,6.9Hz,1H),2.84(d,J＝6.6Hz,2H),2.38(s,1H)。
实施例2
合成化合物3
在惰性气体保护，在室温下向500mL三口瓶中加入Ph3P(18.54g,2eq)，240mL DCM溶解，再加入丁二酰亚胺(6.44g)、化合物2(15g)，冰水浴降温至0℃左右，滴加DIAD(14mL)滴加完毕，将反应转至室温反应。原料反应完全，向体系中加入水(100mL)淬灭反应，搅拌10min；分液，水相用DCM(100mL×2)萃取，合并有机相，饱和Brine 100mL×2)洗，无水MgSO4干燥，抽滤，旋干得到白色固体；过柱纯化得产品15.4g，收率82％。
产物的核磁数据如下：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.56(d,J＝7.4Hz,2H),7.49(d,J＝8.0Hz,2H),7.42(t,J＝7.6Hz,2H),7.37–7.30(m,3H),7.27(d,J＝6.7Hz,3H),7.22(d,J＝8.0Hz,2H),4.75(s,1H),4.56(d,J＝12.0Hz,1H),4.45(d,J＝12.0Hz,1H),4.06(t,J＝9.6Hz,1H),3.70(dd,J＝10.0,5.2Hz,1H),3.23(dd,J＝13.8,10.3Hz,1H),3.14–3.00(m,1H),2.48(d,J＝4.0Hz,4H)。
实施例3
合成化合物4
惰性气体保护，室温下向1L三口瓶中加入化合物3(18.81g)，470mL EtOH溶解，加入Pd/C，置换H2三次，移至油浴上加热60℃反应。原料反应完全，将体系移出油浴，反应液用硅藻土抽滤，浓缩得粗品。过柱纯化得纯品 11.8g，收率81.2％。
产物的核磁数据如下：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.57(d,J＝7.8Hz,2H),7.51(d,J＝7.8Hz,2H),7.42(t,J＝7.5Hz,2H),7.33(t,J＝7.2Hz,1H),7.26(d,J＝7.2Hz,2H),4.55(d,J＝5.2Hz,1H),4.06–3.97(m,1H),3.86(dd,J＝12.0,3.1Hz,1H),3.16(dd,J＝8.1,2.9Hz,2H),2.58(t,J＝7.0Hz,4H),1.26(s,2H)。
实施例4
合成化合物7
惰性气体保护，室温下向25mL三口瓶中加入Dess-Martin氧化剂(767.7mg)，10mL DCM溶解，体系降温至-10℃，加入4(500mg)。原料反应完全，向体系中加入饱和NaHCO3和Na2S2O3各5mL，淬灭反应，搅拌10min；水相用DCM(10mL×3)萃取，合并有机相，饱和NaHCO3、Brine各30mL洗，无水MgSO4干燥，抽滤，旋干得到粗品，直接用于投下一步反应。
实施例5
合成化合物8
惰性气体保护，室温下向500mL三口瓶中加入7(497.5mg)，10mL DCM 溶解冰水浴降温，加入磷叶立德试剂(880.6mg)，将体系移出冰水浴，室温下反应。原料反应完全停止反应，向体系中加入水(5mL)淬灭反应。分液，水相用DCM(10mL×2)萃取，合并有机相，饱和Brine 20mL×2洗，无水MgSO4干燥，抽滤，旋干得粗品。过柱纯化得产品563mg，产率90％。
产物的核磁数据如下：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.60–7.53(m,2H),7.51(d,J＝8.1Hz,2H),7.42(t,J＝7.6Hz,2H),7.33(d,J＝7.3Hz,1H),7.23(d,J＝8.1Hz,2H),7.13(dd,J＝9.2,1.5Hz,1H),5.26(td,J＝9.5,6.9Hz,1H),4.25–4.05(m,2H),3.40(dd,J＝13.7,9.7Hz,1H),3.13(dd,J＝13.8,6.7Hz,1H),2.53(d,J＝2.2Hz,4H),1.85(d,J＝1.4Hz,3H),1.30(t,J＝7.1Hz,3H)。
实施例6
合成化合物9
惰性气体保护，室温下向50mL三口瓶中加入8(365mg,1eq)，9mL乙醇搅拌溶解，将体系用氢气置换三次，加入Pd/C(25％w/w)室温下反应。原料反应完全停止反应，向体系中加入水(5mL)淬灭反应。反应液用硅藻土抽滤，浓缩得粗品。过柱纯化得产品，收率80.2％，纯度97.2％。
实施例7
合成化合物10
向装有化合物9(100mg)的反应瓶中加入醋酸(9mL)，盐酸(1mL)。油浴加热80℃反应。原料反应完全停止反应，向体系中加入水(5mL)淬灭反应。饱和NaHCO3中和后用EA萃取浓缩得粗品。过柱纯化得产品90mg，收率84％。
产物的核磁数据如下：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.61–7.54(m,2H),7.53–7.48(m,2H),7.41(dd,J＝10.5,4.9Hz,2H),7.31(dd,J＝8.3,6.4Hz,1H),7.22(d,J＝8.2Hz,2H),5.93(t,J＝9.7Hz,1H),4.34–4.00(m,3H),2.91–2.71(m,2H),2.68–2.57(m,2H),2.55(ddd,J＝9.4,7.0,4.3Hz,1H),2.42(dt,J＝13.3,6.8Hz,2H),1.97–1.74(m,1H),1.64–1.46(m,1H),1.23(td,J＝7.1,3.3Hz,3H),1.14(dd,J＝7.1,3.9Hz,3H)。
实施例8
合成化合物5
例8-1：反应瓶中加入化合物4(1eq)加入水(2Vol)，浓盐酸(2Vol)，油浴加热110℃反应过夜，原料转化完全，HPLC峰面积97％。加入10％的NaOH溶液调节pH至10左右，过滤得产品。收率85％。
例8-2：反应瓶中加入化合物4(1eq)加入乙醇(5Vol)，水(5Vol)，氢 氧化钾(8eq)，油浴加热110℃反应过夜，原料转化完全，HPLC峰面积99％。加入水(5Vol)，过滤得产品。收率95％。产品溶于甲苯，加入盐酸乙醇，析出化合物5的盐酸盐。
产物的核磁数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.31(s,3H),7.70-7.61(m,4H),7.47(t,J＝7.6Hz,2H),7.42-7.31(m,3H),4.09(dq,J＝42.6,7.1Hz,1H),3.62-3.51(m,1H),3.50-3.41(m,1H),3.11-3.00(m,1H),2.95-2.84(m,1H),1.30-1.10(m,1H)。
以上对本发明的特定实施例进行了说明，但本发明的保护内容不仅仅限定于以上实施例，在本发明的所属技术领域中，只要掌握通常知识，就可以在其技术要旨范围内进行多种多样的变更。