一种抗菌肽、其制备方法及应用与流程

文档序号:12242551阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种抗菌肽,其特征在于,所述抗菌肽包含如SEQ ID NO.1-2所示的氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的抗菌肽,其特征在于,所述抗菌肽包含如SEQ ID NO.3-4所示的核苷酸序列;

优选地,所述抗菌肽包含的氨基酸序列的分子量为SEQ ID NO.1链:4074;SEQ ID NO.2链:4297。

3.根据权利要求1或2所述的抗菌肽,其特征在于,所述抗菌肽来自于三黄鸡回肠菌群。

4.一种表达载体,其特征在于,所述表达载体含有至少一个拷贝的如权利要求2所述的核苷酸序列。

5.一种重组的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞含有权利要求4所述的表达载体;

优选地,所述宿主细胞为大肠杆菌、枯草芽孢杆菌或乳酸乳球菌中的任意一种,优选为乳酸乳球菌。

6.一种如权利要求1-3中任一项所述的抗菌肽的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)提取三黄鸡回肠菌群宏基因组;

(2)根据抗菌肽ABP-118设计引物,以提取的三黄鸡回肠菌群宏基因组为模板进行扩增;

(3)将步骤(2)扩增出的片段的前导肽替换为宿主的分泌表达信号肽,再进行全合成整个片段,得到完整的分泌表达抗菌肽;

(4)构建分泌表达抗菌肽重组质粒,导入宿主细胞,得到表达抗菌肽的表达工程菌。

7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)所述引物为SEQ ID NO.5-6所示的序列。

8.根据权利要求6或7所述的制备方法,其特征在于,步骤(4)所述构建分泌表达抗菌肽重组质粒为将得到的分泌表达抗菌肽连接到pNZ8148质粒的BtgI和HindⅢ克隆位点。

9.一种如权利要求1-3中任一项所述的抗菌肽、如权利要求4所述的表达载体、如权利要求5所述的宿主细胞在制备动物饲料中的应用。

10.一种如权利要求1-3中任一项所述的抗菌肽、如权利要求4所述的表达载体、如权利要求5所述的宿主细胞在制备治疗药物中的应用。

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