现出自基线减少的百分比超过溶媒治疗的对照的减少幅度的两倍。
[0055] 图30描述了 ActRIIB(25-131)-mFc治疗8周在衰老小鼠模型中对血清胰岛素浓 度的作用。数据为平均值土SEM;*，P〈0.05。用ActRIIB(25-131)-mF C治疗的衰老小鼠 （η =10)中的胰岛素浓度相对于溶媒治疗的对照（η = 14)减少超过40%。
[0056] 图31描述了 ActRIIB(25-131)-mFc治疗8周对循环糖化血红蛋白（AlC)浓度的 作用。数据为平均值土SEM ;n = 5-6只/组；#，P〈0. 01。ActRIIB(25-131)-mFc显著减少 糖化血红蛋白（在长时间内的平均血糖浓度的广泛认可的指示物）的浓度。
[0057] 图32描述了 ActRIIB(25-131)-hFc治疗5周在癌症恶病质的小鼠模型中对通过 NMR分析测定的瘦组织质量的作用。数据为平均值土SEM ;***，P〈0. 001。在植入肿瘤的小 鼠中，溶媒治疗（n = 7)与瘦组织质量的7%丢失相关，而ActRIIB(25-131)-hFc治疗（η = 12)导致瘦组织质量从基线增加27%。
[0058] 详述
[0059] L 综述
[0060] 在某些方面，本公开内容涉及ActRIIB多肽。本文所用术语"ActRIIB"是指来源 于任何物种的ΠΒ型激活素受体（ActRIIB)蛋白和ActRIIB相关蛋白的家族。ActRIIB家 族的成员通常均是跨膜蛋白，由具有富含半胱氨酸的区的配体结合胞外域、跨膜结构域和 具有预测的丝氨酸/苏氨酸激酶特异性的胞质结构域组成。
[0061] 术语"ActRIIB多肽"用于指包含ActRIIB家族成员的任何天然存在的多肽及其保 持有用活性的任何变体（包括突变型、片段、融合物和肽模拟物形式）的多肽。例如ActRIIB 多肽包括来源于任何已知ActRIIB序列、具有以下序列的多肽，所述序列与ActRIIB多肽序 列有至少约80%同一性、优选至少85%、90%、95%、97%、99%或更大同一性。
[0062] 人ActRIIB前体具有以下氨基酸序列，其中信号肽用下划线表示，胞外域用黑体 字表示，潜在的N联糖基化位点加框表示（SEQ ID N0:l)(NM_001106,512aa)。
【主权项】
1. 一种核酸，其包含在严格条件下与SEQ ID N0:6的核苷酸73-396的互补序列杂交的 核酸序列。
2. 权利要求1的核酸，其中所述核酸包含SEQ ID NO:6的核苷酸73-396。
3. -种核酸，其包含在严格条件下与SEQ ID NO:4的核苷酸73-396的互补序列杂交的 核酸序列。
4. 权利要求3的核酸，其中所述核酸包含SEQ ID NO:4的核苷酸73-396。
5. -种培养细胞，所述细胞包含权利要求1-4中任一项的核酸。
6. 权利要求5的培养细胞，其中所述细胞为哺乳动物细胞。
7. 权利要求5的培养细胞，其中所述细胞为CHO细胞。
8. -种多肽，所述多肽选自： a. 以下多肽，其包含其中氨基酸序列由SEQ ID N0:8的序列组成的氨基酸序列或在不 超过五个氨基酸位置处不同于SEQ ID NO:8的氨基酸序列； b. 通过SEQ ID N0:4的核酸或在严格条件下与其互补序列杂交的核酸在哺乳动物细胞 中表达产生的多肽； c. 通过SEQ ID N0:6的核酸或在严格条件下与其互补序列杂交的核酸在哺乳动物细胞 中表达产生的多肽。
9. 权利要求8的多肽，其中所述多肽为（a)部分的多肽。
10. 权利要求8的多肽，其中所述多肽为（b)部分的多肽。
11. 权利要求8的多肽，其中所述多肽为（c)部分的多肽。
12. 权利要求8-11中任一项的多肽，其中所述多肽的氨基端具有序列ETR。
13. 权利要求8-12中任一项的多肽，其中所述多肽导致小鼠的瘦体重在以10mg/kg的 剂量水平每周两次治疗四周后统计上显著增加。
14. 权利要求13的多肽，其中平均增加是至少2g瘦组织质量。
15. 权利要求8-14中任一项的多肽，其中所述多肽导致高脂饮食喂饲的小鼠的脂肪质 量在以10mg/kg的剂量水平每周两次治疗四周后统计上显著减少。
16. 权利要求15的多肽，其中平均减少是至少5g脂肪质量。
17. 权利要求8-16中任一项的多肽，其中所述多肽导致高脂饮食喂饲的小鼠的血清甘 油三酯水平在以l〇mg/kg的剂量水平每周两次治疗四周后统计上显著减少。
18. 权利要求17的多肽，其中平均减少是至少50mg/dl甘油三酯。
19. 权利要求8-18中任一项的多肽，其中所述多肽导致高脂饮食喂饲的小鼠的血清游 离脂肪酸水平在以l〇mg/kg的剂量水平每周两次治疗四周后统计上显著减少。
20. 权利要求19的多肽，其中平均减少是至少500微摩尔/dl游离脂肪酸。
21. 权利要求8-20中任一项的多肽，其中所述多肽导致高脂饮食喂饲的小鼠的血清胰 岛素水平在以l〇mg/kg的剂量水平每周两次治疗四周后统计上显著减少。
22. 权利要求21的多肽，其中平均减少是至少lng/ml胰岛素。
23. 权利要求8-22中任一项的多肽，其中所述多肽包含至少一个N联糖。
24. 权利要求8-23中任一项的多肽，其中所述多肽在CHO细胞中产生。
25. 权利要求8-24中任一项的多肽，其中所述多肽与权利要求8-24中任一项的第二多 肽共价连接。
26. 权利要求8-24中任一项的多肽，其中所述多肽与第二多肽共价连接以形成同二聚 体。
27. -种包含来源于ActRIIB的部分和一个或多个异源部分的多肽，其中来源于 ActRIIB的部分包含由SEQ ID NO: 1的氨基酸25-131的序列组成的氨基酸序列或在不超过 五个氨基酸位置处不同于SEQ ID NO: 1氨基酸25-131的序列的氨基酸序列。
28. 权利要求27的多肽，其中所述异源部分包含免疫球蛋白的恒定结构域。
29. 权利要求27的多肽，其中所述异源部分包含免疫球蛋白的Fc结构域。
30. 权利要求27的多肽，其中所述异源部分包含人IgGl的Fc结构域。
31. 权利要求27-30中任一项的多肽，其中来源于ActRIIB的部分包含由SEQ ID NO: 1 的氨基酸25-131的序列组成的氨基酸序列。
32. -种药物制剂，所述药物制剂包含权利要求8-31中任一项的多肽。
33. -种用于治疗具有与肌肉丢失或肌肉生长不足相关的病症的受试者的方法，所述 方法包括给予受试者有效量的权利要求32的药物制剂。
34. -种用于增加有需要的受试者的瘦质量或降低有需要的受试者的瘦质量丢失速度 的方法，所述方法包括给予受试者有效量的权利要求32的药物制剂。
35. -种用于减少受试者的体脂肪含量或降低受试者的体脂肪含量增加速度的方法， 所述方法包括给予受试者有效量的权利要求32的药物制剂。
36. -种用于治疗受试者中与非所需体重增加相关的病症的方法，所述方法包括给予 受试者有效量的权利要求32的药物制剂。
37. -种用于治疗受试者的代谢病症的方法，所述方法包括给予受试者有效量的权利 要求32的药物制剂。
38. 权利要求37的方法，其中所述患者具有一种或多种以下特征： d. 高血清甘油三酯水平； e. 高游离脂肪酸水平；或 f. 高血清胰岛素水平。
39. 权利要求37或38的方法，其中所述代谢病症选自：2型糖尿病、代谢综合征、胰岛 素抵抗和肥胖症。
【专利摘要】在某些方面，本发明提供包含来源于ActRIIB的多肽的组合物，其用于调节(促进或抑制)组织例如骨、软骨、肌肉、脂肪、褐色脂肪和/或神经元组织的生长和用于治疗代谢病症例如糖尿病和肥胖症以及与任一种前述组织相关的病症。
【IPC分类】C07K19-00, A61P3-06, A61P1-16, A61P35-00, A61P3-04, A61K38-17, A61P21-00, A61P3-10, A61P3-00, A61P25-28, C12N15-62, C12N5-10, A61K47-48
【公开号】CN104805105
【申请号】CN201510192573
【发明人】J.西拉, R.库马
【申请人】阿塞勒隆制药公司
【公开日】2015年7月29日
【申请日】2010年6月8日
【公告号】CA2765108A1, CN102656187A, EP2440577A1, EP2440577A4, US8293881, US20100316644, US20130177559, WO2010151426A1