菖蒲酰胺类化合物及其制备方法与应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及中药研究领域，尤其是菖蒲酰胺类化合物及其制备方法与应用。
【背景技术】
[0002] 5-羟色胺转运体（SERT)是一种对5-HT有高度亲和力的跨膜转运蛋白，约含630 个氨基酸残基，其编码基因（SLC6A4)分别位于7号和11号染色体上，由跨度约为35kb的 14个外显子组成。SERT蛋白包含12-13个跨膜区，N端及C端位于胞质中，靠近N端处有 cAMP依赖性蛋白激酶结合位点，在第三与第四跨膜区之间有一位于细胞外的环状部分，是 N-连接的糖基化位点。
[0003] SERT属于Na+/Cl依赖型转运蛋白，主要位于5-HT能神经元。SERT从神经突触 间隙中重新摄取5-HT进入突触前神经元，直接影响突触间隙5-HT浓度，改变突触后受体介 导信号的量和作用持续时间。此外，发现SERT在胎盘组织、骨髓、肾、肺、心、肾上腺、肝、甲 状旁腺、甲状腺、胰腺和小肠等器官亦有分布，提示SERT参与多种生理功能。
[0004] SERT是转运5-HT的重要分子，与情绪、食欲、睡眠、记忆、学习等许多生理心理功 能相关，SERT及5-HT表达改变可引起焦虑、抑郁、强迫症、恐惧症，甚至精神分裂症，并与药 物成瘾性密切相关；此外，发现SERT在胃肠道功能性疾病中扮演了重要角色，如临床上慢 传输性便秘、肠道易激综合征、功能性腹胀等胃肠功能性疾病，采用针对SERT的抗抑郁药、 抗焦虑药物取得了疗效。
[0005] SERT是临床药物研发的重要靶点，选择性5-羟色胺再摄取抑制药（SSRI)包括氟 西汀、帕罗西汀、舍曲林、氟伏沙明、西酞普兰等，临床常用于治疗抑郁症、焦虑症和强迫症 等，此类药物镇静作用小，也不损伤精神运动功能，对心血管和自主神经系统功能影响很 小。
[0006] 石菖蒲Acorus tatarinowii是天南星科菖蒲属植物，具有化湿和胃，开窍豁痰，醒 神益智功效，石菖蒲已经报道的生物活性包括（1)作用于神经系统，如抗抑郁、镇静和抗惊 厥、脑保护和益智，（2)作用于心血管系统，如降脂和减慢心律，（3)作用于呼吸系统，如治 疗慢性支气管炎、支气管哮喘，（4)抑菌，（5)抗癌等；石菖蒲的化学成分包括挥发油、木脂 素、酚酸、生物碱、黄酮等，研究表明，石菖蒲挥发性成分和非挥发性成分都有较好的抗抑郁 活性，而在活性物质基础方面，挥发性成分报道较多，非挥发性成分鲜有报道。
【发明内容】
[0007] 本发明所要解决的技术问题在于提供菖蒲酰胺类化合物。
[0008] 本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述菖蒲酰胺类化合物的制备方法。
[0009] 本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述菖蒲酰胺类化合物的应用。
[0010] 为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：
[0011] -种菖蒲酰胺类化合物，（E)-阿魏酰基-y-丁氨酸酰胺{(E)-methy14-[3-(4-h ydroxy-3_methoxyphenyl)acrylamido]butanoate，I}，具有下述结构式（I)式：
[0013] (Z)-阿魏酰基-y - 丁氨酸酰胺稀醇异构体{(Z) -methyl4- [3- (4-hydroxy-3-met hoxyphenyl) acrylamido]butanoate enol isomer, II }，具有下述结构式（II )式：
[0014]
[0015] 优选的，上述菖蒲酰胺类化合物，其物理化学和波谱性质为：
[0016] (E)-阿魏酰基-y - 丁氨酸酰胺{(E) -methyl4-[3-(4-hydroxy-3_methoxyphen yl)acrylamido]butanoate，I}，为白色无定形粉末（甲醇），UV(MeOH) XmaxJSOnnb1H-NMR 和130匪1?数据为【具体实施方式】部分表1 ;(+)43頂3 111/2 294.28[]\1+11]+，（-)43頂3 111/2 292. 02[M-H]；
[0017] (Z)-阿魏酰基-y- 丁氨酸酰胺稀醇异构体{(2)1161:11714-[3-(4-117(11'(?7-3-methoxyphenyl) acrylamido] butanoate enol isomer, II }，为白色无定形粉末（甲酉享）， UV (MeOH) X nax: 272nm，1H-NMR 和 13C-NMR 数据为【具体实施方式】部分表1 ; (+) -ES頂S m/z 295.30[M+H]+，（-)-ES頂S m/z 293. 10[M-H]。
[0018] 上述菖蒲酰胺类化合物的制备方法，具体步骤如下：
[0019] (1)每20kg石菖蒲根茎分别用8、6、6倍重量的水煎煮3次，每次1. 5小时，合并提 取液，减压浓缩至提取液体积的1/5-1/10,得粗提物浓缩液；
[0020] (2)所得粗提物浓缩液，经DlOl大孔树脂柱层析，乙醇-水（v/v)梯度洗脱，得到 30%、50%、70%、95% 4个乙醇洗脱物，分别减压回收溶剂至无醇味；
[0021] (3)将30%乙醇洗脱物水分散后用甲酸调节pH = 3-4,等体积正丁醇萃取3次， 回收溶剂得正丁醇层浸膏；
[0022] (4)正丁醇层浸膏经ODS柱层析，甲醇-水（v/v)梯度洗脱，收集50%甲醇水洗 脱流份，所得流分经S印hadex LH-20凝胶柱50%甲醇水（v/v)分离得9个组分，其中组 分SDB4-3经硅胶G柱层析以二氯甲烷-甲醇溶剂（v/v)梯度洗脱，二氯甲烷：甲醇=15:1 洗脱下来的流份再经半制备型高效液相色谱分离得到（E)-阿魏酰基-y- 丁氨酸酰胺和 (Z)-阿魏酰基-y - 丁氨酸酰胺烯醇异构体。
[0023] 上述菖蒲酰胺类化合物在制备促进5-羟色胺转运体（SERT)活性药物方面的应 用。
[0024] 优选的，上述菖蒲酰胺类化合物在制备抗抑郁症、焦虑症、精神分裂症、强迫症、神 经退行性疾病、药物成瘾性或消化系统功能紊乱疾病的治疗药物方面的应用。
[0025] 具有上述菖蒲酰胺类化合物的药物组合物，包含治疗和/或预防有效量的菖蒲酰 胺类化合物以及任选的药学可接受的赋形剂。
[0026] 上述药学可接受的赋形剂可以是药物制剂领域中任何常规的赋形剂，特定赋形剂 的选择将取决于用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态，用于特定给药模式的合 适药物组合物的制备方法完全在药物领域技术人员的知识范围内。例如，可以作为药学可 接受的赋形剂包括药学领域常规的稀释剂、载体、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促 进剂、表面活性剂、吸附载体和润滑剂等，必要时，还可以在药物组合物中加入香味剂、防腐 剂和甜味剂等。
[0027] 上述药物组合物可以制成片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、膏剂、霜剂、注射乳 剂、注射用无菌粉针等多种形式，各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。
[0028] 本发明的有益效果是：
[0029] 本发明所述菖蒲酰胺类化合物，从天南星科菖蒲属植物石菖蒲Acorus tatarinowii的根茎中分离纯化而得，具有促进5-羟色胺转运体（SERT)活性的作用，可作 为抑郁症、焦虑症、精神分裂症、强迫症、神经退行性疾病、药物成瘾性或消化系统功能紊乱 等疾病的治疗药物，具有重要的药物开发价值。
【附图说明】
[0030] 图1是菖蒲酰胺类化合物的关键NOESY相关图；
[0031 ] 图2是菖蒲酰胺类化合物对SERT活性的促进作用，其中，A : (E)-阿魏酰基-丫-丁 氨酸酰胺，B : (Z)-阿魏酰基-y-丁氨酸酰胺烯醇异构体，阳性对照药2 y M Fluoxetine (氟 西汀）和 I y M Tianeptine (噻奈普汀），**p〈0. 01，***p〈0. 001 ;
[0032] 图3是化合物（E)-阿魏酰基-y - 丁氨酸酰胺的1H-NMR和13C-NMR谱图；
[0033] 图4是化合物（Z)-阿魏酰基-y - 丁氨酸酰胺烯醇异构体的1H-NMR和13C-NMR谱 图。
【具体实施方式】
[0034] 为了使本领域的技术人员更好的理解本发明的技术方案，下面结合附图及具体实 施方式对本发明所述技术方案作进一步的详细说明。
[0035] 实验仪器与试剂：傅里叶变换核磁共振波谱仪（瑞士 Bruker公司，AVIII型 400MHz及600MHz);显色剂：10%硫酸乙醇。
[0036] 实施例1
[0037] 活性成分菖蒲酰胺类化合物的制备（提取分离流程）
[0038] 石菖蒲药材饮片购自安徽济人药业有限公司（批号：120519,规格：1kg/袋，产地： 安徽），约20kg，分别用8、6、6倍水量煎煮3次，每次I. 5h，合并提取液，减压回收至小体 积