度化合物的培养基，经解育后，用Μ?Τ染色，继续解育后，于酶 标仪上在570nm处测定每孔的吸光度（0D值)，计算出细胞生长抑制率，从而确定化合物的 活性。
[0013] 通式（I)的化合物的体外抑酶试验证明该类化合物为有效的组蛋白去乙酷化酶 抑制剂。
[0014] 本发明的似-3- (2- (1 - (4-氯苯甲酯基）-5-甲氧基-2-甲基-1氨-吗I噪-3-基） 乙酷氨基）-N-径基下-2-締酷胺在空间上与组蛋白去乙酷化酶的活性位点相匹配，因此在 体外显示了较高的抑制活性。
[001引反应式II
反应式II中化stonedeacetylase为组蛋白去乙酷化酶，Trypsin为膜蛋白酶，4-amino-7-methylcoumarin为4-氨基-7-甲基香豆素。
[0016] 含有本发明化合物的药物组合物 本发明的部分衍生物可W游离形式或W盐形式存在。本领域技术人员已知许多化合物 类型的药学上可接受的盐及其制备方法。药学上可接受的盐包括常规的无毒性的盐，包括 运样的化合物碱与无机或有机酸形成的季锭盐。
[0017] 本发明的化合物可形成水合物或溶剂合物。本领域熟练人员已知将化合物与水一 起冻干时所形成的水合物或在溶液中与合适的有机溶剂浓缩时形成溶剂合物的方法。
[0018] 本发明包含含有治疗量本发明化合物的药物，和一种或多种药学上可接受载体和 /或赋形剂的药物组合物。载体包括如盐水，缓冲盐水，葡萄糖，7长，甘油，乙醇和它们的结合 物，下文更详细地论述。如果需要，该组合物还可W包含较小量的润湿剂或乳化剂，或抑缓 冲剂。该组合物可W是液体，悬浮液，乳剂，片剂，丸剂，胶囊，持续释放制剂或粉末。该组合 物可W用传统的黏合剂和载体如Ξ酸甘油醋配制成栓剂。口服制剂可W包括标准载体如药 物品级的甘露糖醇，乳糖，淀粉，硬脂酸儀，糖精钢，纤维素和碳酸儀等等。视需要制剂而定， 配制可w设计混合，制粒和压缩或溶解成分。在另一个途径中，该组合物可w配制成纳米颗 粒。
[0019] 使用的药物载体可W为固体或者液体。
[0020] 典型的固体载体包括乳糖，石膏粉，薦糖，滑石，凝胶，琼脂，果胶，阿拉伯胶，硬脂 酸儀，硬脂酸等等。固体载体可W包括一种或多种可能同时作为增香剂，润滑剂，增溶剂，悬 浮剂，填料，助流剂，压缩助剂，粘合剂或片剂-崩解剂的物质；它还可W是包封材料。在粉 末中，载体为精细粉碎的固体，它与精细粉碎的活性成分的混合。在片剂中活性成分与具 有必要的压缩性质的载体W合适的比例混合，W需要的形状和大小压缩。粉末和片剂优选 包含至多99%活性成分。合适的固体载体包括，例如，憐酸巧，硬脂酸儀，滑石，糖，乳糖，糊 精，淀粉，凝胶，纤维素，甲基纤维素，簇甲基纤维素钢盐，聚乙締化咯烧酬烧酬，低烙点蜡和 离子交换树脂。
[0021] 典型的液体载体包括糖浆，花生油，橄揽油，水等等。液体载体用于制备溶液，悬浮 液，乳剂，糖浆，町剂和密封的组合物。活性成分可W溶解或悬浮于药学上可接受的液体载 体如水，有机溶剂，二者的混合物或药学上可接受的油类或脂肪。液体载体可W包含其他 合适的药物添加剂如增溶剂，乳化剂，缓冲剂，防腐剂，增甜剂，增香剂，悬浮剂，增稠剂，颜 料，粘度调节剂，稳定形或渗透压-调节剂。用于口服和肠胃外给药的液体载体的合适的例 子包括水（部分地包含如同上述的添加剂，例如纤维素衍生物，优选簇甲基纤维素钢盐溶 液），醇（包括一元醇和多元醇，例如乙二醇）和它们的衍生物，和油类（例如分馈挪子油和 花生油）。用于肠胃外给药的载体还可W为油脂如油酸乙醋和异丙基肉豆違酸盐。无菌的 液体载体用于肠胃外给药的无菌的液态组合物。用于加压组合物的液体载体可W为面代控 或其他药学上可接受的推进剂。无菌溶液或悬浮溶液液体药物组合物可W用来，例如，静脉 内，肌内，腹膜内或皮下注射。注射时可单次推入或逐渐注入，入30分钟的经脉内灌注。该 化合物还可液体或者固体组合物的形式口服给药。
[0022] 载体或赋形剂可W包括本领域已知的时间延迟材料，如单硬脂酸甘油醋或二硬脂 酸甘油醋，还可包括蜡，乙基纤维素，径丙基甲基纤维素，异下締酸甲醋等等。当制剂用于口 服时，公认P册SALPG-50 (憐脂（phospholipid)与 1,2-丙二醇浓缩，A.化ttermann&Cie. GmbH)中的0. 01%吐溫80用于其他化合物的可接受的口服制剂的配制，可W适应于本发明 各种化合物的配制。
[0023] 给予本发明化合物时可W使用各式各样的药物形式。如果使用固体载体，制剂可 W为片剂，被放入硬胶囊中的粉末或小药丸形式或锭剂或糖锭形式。固体载体的量在很大 程度上变化，但是优选从约25mg到约1.Og。如果使用液体载体，制剂可W为糖浆，乳剂，软 胶囊，在安飯或小瓶或非水的液体悬浮液中的无菌注射溶液或悬浮液。
[0024] 为了获得稳定的水溶性的剂型，可W将化合物或其药学上可接受的盐溶于有机或 无机酸的水溶液，0. 3M班巧酸或巧樣酸溶液。选择性地，酸性的衍生物可W溶于合适的碱 性溶液。如果得不到可溶形式，可将化合物溶于合适的共溶剂或它们的结合。运样的合适 的共溶剂的例子包括，但是不局限于，浓度范围从0-60%总体积的乙醇，丙二醇，聚乙二醇 300,聚山梨酸醋80,甘油，聚氧乙締脂肪酸醋，脂肪醇或甘油径脂肪酸醋等等。
[00巧]各种释放系统是已知的并且可W用于化合物或其他各种制剂的给药，运些制剂包 括片剂，胶囊，可注射的溶液，脂质体中的胶囊，微粒，微胶囊，等等。引入的方法包括但是不 局限于皮肤的，皮内，肌内，腹膜内的，静脉内的，皮下的，鼻腔内的，肺的，硬膜外的，眼睛的 和（通常优选的）口服途径。化合物可W通过任何方便的或者其它适当的途径给药，例如 通过注入或快速浓注，通过上皮的或粘膜线路（例如，口腔粘膜，直肠和肠粘膜，等等）吸收 或通过负载药物的支架W及可W于其他生物活性剂一起给药。可W全身或局部给药。用于 鼻，支气管或肺疾病的治疗或预防时，优选的给药途径为口服，鼻给药或支气管烟雾剂或喷 雾器。
[0026] 本发明中的化合物似-3-(2-(1-(4-氯苯甲酯基）-5-甲氧基-2-甲基-1氨-吗I 噪-3-基）乙酷氨基）-N-径基下-2-締酷胺对组蛋白去乙酷化酶的抑制活性优于阳性对 照药，具有良好的开发前景，并可作为发现新型高效组蛋白去乙酷化酶抑制剂的先导化合 物。此外，化合物似-3-(2-(1-(4-氯苯甲酯基）-5-甲氧基-2-甲基-1氨-吗I噪-3-基） 乙酷氨基）-N-径基下-2-締酷胺在体外抗肿瘤细胞增殖的试验中显示出优于阳性对照 Vorinostat(SAHA)的活性，具有良好的开发前景。
【具体实施方式】
[0027] 下面结合实施例对本发明做进一步的说明，但不限于此。
[002引 实施例1 本发明化合物的合成 合成路线： 巧)-甲基3-(2-(1-(4-氯苯甲酯基）-5-甲氧基-2-甲基-1氨-吗I噪-3-基）乙酷 氨基）下-2-締酸醋 吗I噪美辛（1.97g，5mmol)溶于50血四氨巧喃中，加入Ξ乙胺（0.55g，5. 5mmol),加入0-苯并Ξ氮挫-N，N，Ν'，Ν'-四甲基脈四氣棚酸灯BTU) (1.8g，5. 5mmol)。 室溫反应20分钟后，加入3-氨基己豆酸甲醋（1.8g, 5mmol),再加Ξ乙胺（0.5g, 5 mmol)。室溫反应6小时后，蒸除反应液中的四氨巧喃，用乙酸乙醋溶解产物，分别用1mol/ L的巧樣酸溶液，饱和碳酸氨钢溶液，饱和食盐水各洗涂3遍，无水硫酸儀干燥，蒸干溶剂得 粗品，粗品经乙酸乙醋重结晶得1. 37g浅白色固体。产率：60%，ESI-MSm/z:455. 9[M+H+]。
[0029] 氯苯