前面或后面的人体皮肤组织(360-400μπι厚）。接受溶液由2ml含有 2%的生血清球蛋白的生理盐水组成并以600转/分的速度搅拌。这些前药及其母药穿过皮 肤的累积总量对时间的关系是用特定的高效液相色谱法来测定。以含有10%这些前药和多 肽的0.2ml pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液(0.2M)作为供体溶液，结果如图1所示。计算得到，乙 酰基-酪氨酸（乙酰基)_甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸二乙氨基乙酯盐酸盐、盐酸盐二 甲氨基丁羰基-酪氨酸（乙酰基)_甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸正丁酯、环（1，6)_乙酰 基-正亮氨酸-天冬氨酸-组氨酸-苯丙氨酸-精氨酸(二乙酰基)_色氨酸-赖氨酸二乙氨基乙 酯盐酸盐、环（1，6)_乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-组氨酸-D-苯丙氨酸(4-碘)-精氨酸（乙酰 基)-色氨酸-赖氨酸酰胺盐酸盐、环（1，6)_乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-组氨酸-D-丙氨酸 (2-萘基)-精氨酸-色氨酸-赖氨酸酰胺盐酸盐、乙酰基-缬氨酸-脯氨酸-甘氨酸-脯氨酸-精 氨酸(二乙酰基)二乙氨基乙酯盐酸盐、乙酰基-酪氨酸-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸、 环（1，6)_乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-组氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-色氨酸-赖氨酸、环（1， 6)_乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-组氨酸-D-苯丙氨酸(4-碘)-精氨酸-色氨酸-赖氨酰胺和 缬氨酸-脯氨酸-甘氨酸-脯氨酸-精氨酸透过人体皮肤的表观穿透值分别为〇.52mg、 0·55mg、0·46mg、0·34mg、0·50mg、0·60mg、0·001mg、0·001mg、0·OOlmg和0·001mg/cm 2/h。结 果说明前药透过人体皮肤的速度比多肽及相关化合物快了 340~600倍。结果说明二烷基胺 基乙基基团上的正电荷对药物穿过生物膜和皮肤屏障非常重要。
[0025] -个好的前药在血浆中应该能回到母药。我们发现本发明中的多肽前药在人的血 浆中能以较高的产率迅速回到母药多肽的结构。将lml含有20mg乙酰基-酪氨酸（乙酰基)-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸二乙氨基乙酯盐酸盐的全血在37°C保温30分钟。混合液 用HPLC分析。实验测到3%的乙酰基-酪氨酸（乙酰基)-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸二 乙氨基乙酯盐酸盐、2%的乙酰基-酪氨酸-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸二乙氨基乙酯 盐酸盐、8%的乙酰基-酪氨酸-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸、60%的酪氨酸-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸和27%其它副产物(氨基酸、二肽、三肽、四肽）。在盐酸盐二甲氨 基丁羰基-酪氨酸（乙酰基)_甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸丁酯实验中测到5%盐酸盐 二甲氨基丁羰基-酪氨酸（乙酰基)_甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸丁酯、6%的二甲氨基 丁羰基-酪氨酸-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸丁酯、10 %的二甲氨基丁羰基-酪氨酸-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸、55%的酪氨酸-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸和 24%的其它副产物。在环（1，6)_乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-组氨酸-苯丙氨酸-精氨酸(二 乙酰基)_酪氨酸-赖氨酸二乙氨基乙酯盐酸盐的实验中测到4 %的环（1，6)-乙酰基-正亮氨 酸-天冬氨酸-组氨酸-苯丙氨酸-精氨酸(二乙酰基)_酪氨酸-赖氨酸二乙氨基乙酯盐酸盐、 8%的环（1，6)_乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-组氨酸-苯丙氨酸-精氨酸（乙酰基)-酪氨酸-赖氨酸、10%的环（1，6)_正亮氨酸-天冬氨酸-组氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-酪氨酸-赖氨酸、 45%的环（1，6)_乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-组氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-酪氨酸-赖氨酸和 33%的其它副产物。结果显示大多数多肽前药回到了母肽的结构，说明多肽的透皮给药系 统是成功的。
[0026]肠抑素(Enterostatins)[缬氨酸-脯氨酸-天冬氨酸-脯氨酸-精氨酸(VPDPR)，缬 氨酸-脯氨酸-甘氨酸-脯氨酸-精氨酸(VPGPR)和丙氨酸-脯氨酸-甘氨酸-脯氨酸-精氨酸 (APGPR)]是五肽，衍生自经胰蛋白酶剪切的辅脂肪酶前酶(pro co 1 i pas e)的NH2端，属于肠_ 脑多肽家族。它们调控脂肪的摄入，可用于治疗肥胖(Erlanson-Albertsson C，York D， Obes.Rev.1997 Jul；5(4)：360-72 and Sorhede M,Mei J,Erlanson-Albertsson C.,J Physiol. 87:273-275，1993)。在饥饿过夜的Osborne-Mendel大鼠中腹腔注射缬氨酸-脯氨 酸-天冬氨酸-脯氨酸-精氨酸，产生了剂量依赖性的摄食减少。在高脂食物喂养的大鼠中观 察到了摄食抑制，但在高碳水化合物低脂食物喂养的大鼠中未观察到（Okada S.et al.PhysiolBehav.，1991 Jun;49(6) :1185-9)。在黑暗的喂食期间开始时，将溶于0.5ml水 中的5mg/kg的乙酰基-缬氨酸-脯氨酸-天冬氨酸(氧乙基)-脯氨酸-精氨酸(二乙酰基)-二 乙氨基乙酯盐酸盐透皮给药于大鼠背部（每组5只大鼠，一组为饥饿过夜后供给食物的大 鼠，另一组为自由采食的大鼠）。实验观察到脂肪摄取的选择性抑制。
[0027] 黑素细胞皮质激素II(melanocortin II)是一个内酰胺类的环肽(cyclic lactam peptides)，即环（1，6)_乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-组氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-色氨酸-赖 氨酸。它是帕拉丁公司（Palatin，AMEX: PTN)的一个新型候选药物，用于治疗男性和女性性 功能障碍。作为黑素细胞皮质激素激动剂这一新的药物种类的第一个药物，黑素细胞皮质 激素II有望有效治疗男性勃起功能障碍(ED)和女性性功能障碍而且不会产生其它ED药物 常见的心血管副作用。黑素细胞皮质激素II通过与中枢神经系统相关的作用机制起效，而 不是直接作用于血管系统。因此，它的安全性和有效性显著优于目前的产品。本发明中的新 型前药能以非常快的速度穿过人的皮肤（~〇 . 3-0.5mg/h/cm2)，而且为治疗勃起功能障碍 或提高女性性兴奋提供了一种几乎没有副作用的方法。将溶于〇.2ml pH值7.0的磷酸盐缓 冲溶液(0.1M)的环（1，6)_乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-组氨酸-苯丙氨酸-精氨酸(二乙酰 基）_色氨酸-赖氨酸二乙胺基乙酯盐酸盐（肽A)和溶于0.2ml pH值7.0的磷酸盐缓冲溶液 (0.1M)的环（1，6)_乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-组氨酸-苯丙氨酸-精氨酸(硝基)-色氨酸-赖氨酸二乙胺基乙酯盐酸盐(肽B)以2mg/kg的剂量涂于雄性大鼠（30只）的背部，每天一次 连续五天。实验结果显示:与未给药肽A或肽B的大鼠相比，给药肽A的大鼠和给药肽B的大鼠 的性冲动分别增加了 5倍和6倍，给药肽A的大鼠和给药肽B的大鼠性交次数都增加了 3倍。将 溶于0.2ml pH值7.0的磷酸盐缓冲溶液(0.1M)的等量的环（1，6)_乙酰基-正亮氨酸-天冬氨 酸-组氨酸-苯丙氨酸-精氨酸(双乙酰基)_色氨酸-赖氨酸二乙氨基乙酯盐酸(肽A)和环（1， 6)_乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-组氨酸-苯丙氨酸-精氨酸(硝基)_色氨酸-赖氨酸二乙氨 基乙酯盐酸盐(肽B)透皮给药于雄性大鼠（30只）和雌性大鼠（30只）的背部，每天一次连续5 天，结果显示与不用药的大鼠相比，给药肽A或给药肽B的大鼠的性冲动增加了 6倍，性交配 次数增加了 5倍。
[0028] 阿片肽，如，蛋氨酸-脑啡肽(酪氨酸-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸），亮氨酸-脑啡肽(酪氨酸-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-亮氨酸），酪氨酸-D-丙氨酸-甘氨酸-N-甲基-苯 丙氨酸-蛋氨醇(氧）（H-Tyr-D-Ala-Gly-N-Me-Phe-Met(0)_0L)，酪氨酸-D-丙氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-亮氨酸及其它许多多肽都显示出类吗啡样的镇痛作用。对小鼠腹腔注射醋酸溶 液后出现的扭体次数进行计数，并基于空白组计算抑制率。在注射醋酸溶液30分钟前，在小 鼠颈部透皮给药酪氨酸（乙酰基）-D-丙氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-亮氨酸正己酯盐酸盐 (10mg/kg，B)，乙酰基-酪氨酸（乙酰基)-D-丙氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-亮氨酸二乙胺基乙 乙酯盐酸盐（l〇mg/kg，C)和酪氨酸（乙酰基)-D-丙氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨醇(氧)盐酸 盐（lOmg/kgjhA组为对照组。结果见表1所示。
[0029] 表1.脑啡肽及相关化合物的前药对扭体的抑制率
[0030]
[0031 ]上述结果显示多肽前药的透皮给药系统可有效治疗肥胖和疼痛，以及治疗男性和 女性的性功能障碍。
[0032] 多肽及相关化合物亲水性高，它们很难穿过皮肤和膜屏障。当口服多肽时，多肽及 相关化合物会在几分钟内被胃肠道中的蛋白水解酶迅速分解。注射多肽给药时会产生疼 痛，很多时候为治疗慢性病要经常到医院注射，花费电增加。当多肽前药局部涂于皮肤给药 时，它们能迅速地溶于皮肤表面的水分中。这些前药分子的氨基上的正电荷可与皮肤膜的 磷酸盐端基的负电荷键合。因此，膜外面的药物局部浓度很高，有利于药物通过高浓度区域 到低浓度的区域。这些前药分子进入生物膜后，前药分子中的亲水性部分将推动前药进入 细胞质中。
[0033] 上述通式（1)"结构式Γ所表示的化合物可以通过标准的多肽合成方法合成。通式 (4-C) "结构式4-C1'中的环肽及相关化合物的制备中，多肽链可通过标准的多肽合成方法合 成，亮氨酸侧链可通过2_，或4-Pyoc保护基团保护，多肽的环化可在树脂上完成。
[0034]优点
[0035]本发明中的多肽及相关化合物的这些前药结构中都有一个脂溶性部分和一个水 溶性部分(在生理pH值时以质子化形式存在的胺基）。这些前药中带正电荷的氨基有两大好 处。首先，它使这些前药可溶于水;当这些新型前药以诸如溶液、喷剂、乳液、软膏、乳胶或凝 胶等剂型透皮给药时，其能迅速与皮肤、眼睛、生殖部位、嘴、鼻子或身体其他部位表面的水 分迅速混合。第二，这些前药氨基上的正电荷可与生物膜的磷酸盐端基负电荷键合。因此， 生物膜外侧的局部浓度很高从而促进这些前药通过高浓度区域到低浓度区域。前药分子的 亲脂性部分(通过对极性基团用亲脂性的烷基修饰)有助于药物进入皮肤膜。当这些前药分 子进入生物膜后，亲水性部分会推动前药分子进入细胞质，一种半液态的浓缩水溶液或悬 浮液。由于在皮肤、眼睛、生殖部位、嘴巴、鼻子或身体其它部位停留的时间很短，前药不会 引起皮肤、眼睛、生殖部位、嘴巴、鼻子或身体其它部位的瘙痒、灼烧或疼痛。实验结果显示 超过40%的前药可以在几分钟内变回母肽结构。前药甚至可以很容易地穿过血脑屏障。多 肽及相关化合物的透皮给药系统可使多肽激素在医药领域得到应用。这些前药透皮给药的 另一大好处是给药更加方便，特别是对儿童给药。
【附图说明】
[0036]图1:通过Franz池(η = 5)中分离的人体皮肤组织的乙酰基-酪氨酸（乙酰基)-甘氨 酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸-二乙胺基乙酯盐酸盐、二甲氨基丁羰基-酪氨酸（乙酰基)_甘 氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸