为99.82%，其中式IV化合物的含量为0.072%。
[0183] 实施例17(式X2a化合物还原反应）
[0184] 氮气保护下，将实施例11得到的式X2a化合物(2.0g)，苯硼酸(0.28g)，无水四氢呋 喃（80ml)，加热回流30min后，冷却至室温，加入BSTFA(2.1ml)，于室温搅拌lh，冷却到-10 ~_5°C，滴加硼烷二甲硫醚络合物(0.8ml，0.94 % )，滴毕，升温10~15°C反应3.5h。用HPLC 监测，转化率为82%。然后滴加2N盐酸(4.8ml)，并加入水（160ml)，减压浓缩除去溶剂，然后 室温搅拌24h，将其上样于制备柱上，用22%的乙腈/水(0.15%的乙酸)洗脱，合并富含产物 的收集液，将其用水稀释一倍，仍旧上样于制备柱中，用90%的乙腈/水(0.15%的乙酸)洗 脱，收集产品馏分，将其冷冻冻干，得到含X2b化合物的样品1.42g，HPLC测定式XI2b含量为 0.09%〇
[0185] 实施例18(由式XI2b化合物制备式III化合物）
[0186] 氮气保护下，将按照实施例17得到的X2b化合物（1.0g)溶于甲醇(4.2ml)中，冷却 至-10~-5°C，滴加乙二胺（4.2ml)，滴毕后升温至室温反应48h，HPLC监测反应转化率为 99 %。将其滴入冰乙酸(8.3ml)的水（18.5ml)溶液，然后并将其用水稀释一倍，将其上样于 制备柱上，用22%的乙腈/水(0.15%的乙酸)洗脱，合并富含产物的收集液，将其用水稀释 一倍，仍旧上样于制备柱中，用90%的乙腈/水(0.15%的乙酸)洗脱，收集产品馏分，将其减 压浓缩到干，用溶解液（乙醇/水/醋酸= 210.0/19.7/1.0，v/v/v，10ml)将上述浓缩物溶解， 于5~20°C条件下，滴加乙酸乙酯（14ml)进行析晶，过滤得到白色结晶固体即卡泊芬净醋酸 盐(0.72g)，HPLC检测纯度为99.76%，其中式IV化合物的含量为0.06%。
[0187] 比较例3(按照CN102070707A的方法制备无式IV化合物的醋酸卡泊芬净）
[0188] 按照CN102070707A实施例的方法制备式IV化合物小于0.05 %的醋酸卡泊芬净，结 果显示制备约lg的醋酸卡泊芬净，在用制备型HPLC(装有RP C-18树脂填料），乙酸和乙腈缓 冲液纯化，所使用的有机溶剂乙腈约为6L，所使用的生产设备和树脂填料非常昂贵。
[0189] 而通过实施例4、5、6可知，制备lg式II杂质含量在0.1 %以下的式I化合物所使用 的溶剂约为0.3L，由此直接可以制备式IV化合物小于0.05%的醋酸卡泊芬净，无需再使用 制备型HPLC进行纯化。
[0190]比较例4(按照专利CN102947327A的方法制备无式IV化合物的醋酸卡泊芬净中间 体）
[0191]按照CN102947327A实施例的方法制备低丝氨酸类似物卡泊芬净中间体的醋酸卡 泊芬净中间体，按照〇附02947327六中描述的方法制备含有低于0.1%丝氨酸类似物卡泊芬 净中间体杂质的醋酸卡泊芬净中间体，其制备收率只有20%到40%，工业化生产价值非常 小。
[0192]以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用以限定本发明的实质技术内容范 围，本发明的实质技术内容是广义地定义于申请的权利要求范围中，任何他人完成的技术 实体或方法，若是与申请的权利要求范围所定义的完全相同，也或是一种等效的变更，均将 被视为涵盖于该权利要求范围之中。
【主权项】
1. 一种制备含有式I和式II所示化合物的组合物的方法，其特征在于，所述的方法包括 步骤： (a) 将式I化合物粗品溶解在有机溶剂(i)的水性溶液中； (b) 通过降温和/或添加有机溶剂（?? )，使固体从溶解液中析出，得到含式I化合物的悬 浮液； (c) 通过离心或过滤，得到含有式I和式II所示化合物的组合物A;2. 如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(a)中，所述有机溶剂（i)的水性溶 液中，水的体积百分含量为8 %-30 %，优选10 %-25 %，更优选12 %-22 %，最优选16 %-22%〇3. 如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(a)中，所述有机溶剂（i)选自：甲 醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、异丁醇、正丁醇、丙酮中的一种或多种的混合物。4. 如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(b)中，所述有机溶剂（?? )选自：C3-7 酯、己烷、正庚烷、正戊烷、二氯甲烷中的一种或多种的混合物;优选自：乙酸乙酯、乙酸异丙 月旨、正己烷中的一种或多种的混合物。5. 如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(a)-(c)可以重复一次或一次 以上。6. -种由如权利要求1-4任一所述的制备方法所获得的含有式I化合物的悬浮液，其特 征在于，所述悬浮液中固体颗粒直径大于等于O · Ium，优选直径大于等于O · 2um，更优选大于 等于O · 3um。7. -种由如权利要求1-5任一所述的制备方法所获得的含有式I和式II所示化合物的 组合物A，其特征在于，所述组合物中含有1 %至40%有机溶剂（质量百分含量），优选5%-35%，更优选10-30% ;所述组合物还含有1%至15%的水（质量百分含量），优选2%-12%， 更优选3 %-10 %; 其中，所述有机溶剂选自：甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、异丁醇、正丁醇、丙酮、乙酸乙 酯、乙酸异丙脂、正己烷、二氯甲烷。8. 如权利要求7所述的组合物A，其特征在于，所述的组合物A中，式I所示化合物的折干 后含量大于95% ;式II所示化合物的折干后含量为0.0001 %-2.0% ;优选0.0001 %-0·49%;更优为0·0001%-0·2%;最优为0·0001%-0·l%。9. 如权利要求8所述的组合物A，其特征在于，所述组合物中各组分的折干后含量用 HPLC测定。10. 如权利要求9所述的组合物A，其特征在于，所述HPLC测定方法为： 色谱柱：Symmtry C18 3.5um 2.1X150mm; 流动相：乙腈/水= 39/61; 流速:〇 .4ml/min; 柱温:30 C; 样品稀释剂：乙臆/水= 39/61; 进样温度:5°C; 检测波长：205nm〇11. 如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(c)之后还包含以下步骤： (d)将步骤(c)获得的组合物A进一步干燥，得到干燥的组合物B。12. 如权利要求11所述的制备方法，其特征在于，所述组合物B的水分含量小于等于 5%〇13. 如权利要求11所述的制备方法，其特征在于，所述干燥的组合物B中，式I所示化合 物的折干后含量大于95% ;式11所示化合物的折干后含量为0.0001 %-2.0% ;优选 0·0001%-0·49% ;更优为0·0001%-0·2% ;最优为0·0001%-0·1%。14. 一种含有式I和式II所示化合物的组合物B;所述组合物中式I所示化合物的折干后含量大于95% ; 所述组合物中式II所示化合物的折干后含量为0.0001 %-2.0% ;优选0.0001 %-0.49%;更优为 0·0001%-0·2%;最优为 0·0001%-0·1%。15. 如权利要求14所述的组合物B，其特征在于，所述组合物中各组分的折干后含量用 HPLC测定。16. 如权利要求15所述的组合物B，其特征在于，所述HPLC测定方法为： 色谱柱：Symmtry C18 3.5um 2.1X150mm; 流动相：乙腈/水= 39/61; 流速:〇 .4ml/min; 柱温:30 C; 样品稀释剂：乙臆/水= 39/61; 进样温度:5°C; 检测波长：205nm〇17. -种如权利要求14-16任一所述组合物B的用途，其特征在于，用于制备结构如式X 所示的化合物；18. -种含有结构如式X和式XI所示化合物的组合物；19. 如权利要求18所述的组合物，其特征在于，所述组合物中式X所示化合物的含量大 于 95%。20. 如权利要求18所述的组合物，其特征在于，所述组合物中式XI化合物的HPLC含量为 0·0001%-2·0%，优选0·0001%-0·49%，更优选0·0001%-0·2% ;最优选0·0001%-0·1%。21. 如权利要求18-20任一所述的组合物的用途，其特征在于，用所述的组合物制备式 III所示化合物；〇22. -种式III所示化合物，其特征在于，所述式III化合物由权利要求1所述的方法制 备得到的组合物A或权利要求11所述的方法制备得到的组合物B作为原料制备得到；
【专利摘要】本发明公开了一种含氮杂环六肽前体的组合物的制备方法，以及由此方法获得的含有式I和式II化合物的含氮杂环六肽前体组合物A和B，以及所述组合物用于制备式III化合物的用途。<!-- 2 -->
【IPC分类】C07K1/36, C07K7/56, C07K1/34, C07K1/30
【公开号】CN105481952
【申请号】CN201510859655
【发明人】刘石东, 王修胜, 季晓铭
【申请人】上海天伟生物制药有限公司
【公开日】2016年4月13日
【申请日】2015年11月30日
【公告号】WO2016101904A1