1
[0030] 间歇式酶反应在分批式搅拌罐反应釜中进行，高油酸葵花籽油和乙醇按质量比为 1:5，无溶剂体系下加入8%固定化脂肪酶Lipozyme 435，常压25°C下搅拌反应3h，搅拌速度 为400r/min，反应结束后，4000r/min条件下离心10min除去脂肪酶，得到富含油酸的Sn-2-单甘酯，经HPLC分析，Sn-2-单甘酯的得率为93.26 %。
[0031] 实施例2
[0032]间歇式酶反应在分批式搅拌罐反应釜中进行，茶籽油和乙醇按质量比为1:7，在无 溶剂体系下加入5 %固定化脂肪酶Novozym 435，常压30°C下搅拌反应4h，搅拌速度为300r/ min，反应结束后，4000r/min条件下离心10min除去脂肪酶，得到富含油酸的Sn-2-单甘酯， 经HPLC分析，Sn-2-单甘酯的得率为88.15%。
[0033] 实施例3
[0034]间歇式酶反应在分批式搅拌罐反应釜中进行，鱼油和乙醇按质量比为1:4,添加的 反应物与丙酮比例为l:l(w/v)，并加入10%固定化脂肪酶NS40086,常压20°C下搅拌反应 2h，搅拌速度为500r/min，反应结束后，4000r/min条件下离心10min除去脂肪酶，得到Sn-2-单甘酯，经HPLC分析，Sn-2-单甘酯的得率为15.82 %。
[0035] 实施例4
[0036]间歇式酶反应在分批式搅拌罐反应釜中进行，二十二碳六烯酸(DHA)的藻油和乙 醇按质量比为1: 3，添加的反应物与戊烷比例为1: 0.5 (w / V )，并加入6 %固定化脂肪酶 Lipozyme RM IM，常压25°C下搅拌反应4h，搅拌速度为400r/min，反应结束后，4000r/min条 件下离心10min除去脂肪酶，得到富含二十二碳六烯酸(DHA)的Sn-2-单甘酯，经HPLC分析， Sn-2-单甘酯的得率为21.45%。
[0037] 实施例5
[0038]间歇式酶反应在分批式搅拌罐反应釜中进行，富含花生四烯酸(ARA)的藻油和乙 醇按质量比为1:8,无溶剂体系下加入10%固定化脂肪酶Lipozyme 435,常压25°C下搅拌反 应5h，搅拌速度为300r/min，反应结束后，4000r/min条件下离心10min除去脂肪酶，得到富 含花生四烯酸以1^)的311-2-单甘酯，经即^：分析，311-2-单甘酯的得率为90.33%。
[0039] 实施例6
[0040] 间歇式酶反应在分批式搅拌罐反应釜中进行，高油酸葵花籽油和乙醇按质量比为 1:6,添加的反应物与己烧比例为1:0.4(w/v)，并加入5%固定化脂肪酶Lipozyme TL IM，常 压35°C下搅拌反应3h，搅拌速度为400r/min，反应结束后，4000r/min条件下离心10min除去 脂肪酶，得到富含油酸的311-2-单甘酯，经即^：分析，311-2-单甘酯的得率为15.28%。
[0041 ] 实施例7
[0042] 间歇式酶反应在分批式搅拌罐反应釜中进行，富含花生四烯酸(ARA)的藻油和乙 醇按质量比为1:8,无溶剂体系下加入10%固定化脂肪酶Lipozyme 435,常压25°C下搅拌反 应5h，搅拌速度为300r/min，反应结束后，4000r/min条件下离心10min除去脂肪酶，得到富 含花生四烯酸以1^)的511-2-单甘酯，经!^(：分析，511-2-单甘酯的得率为91.33%。
[0043] 实施例8
[0044]间歇式酶反应在分批式搅拌罐反应釜中进行，二十二碳六烯酸(DHA)的藻油和乙 醇按质量比为1:3,在无溶剂体系下加入6%固定化脂肪酶Novozym 435,常压25°C下搅拌反 应4h，搅拌速度为400r/min，反应结束后，4000r/min条件下离心10min除去脂肪酶，得到富 含二十二碳六烯酸(DHA)的Sn-2-单甘酯，经HPLC分析，Sn-2-单甘酯的得率为89.75 %。
[0045] 实施例9
[0046] 间歇式酶反应在分批式搅拌罐反应釜中进行，鱼油和乙醇按质量比为1:4，在无 溶剂体系下加入10%固定化脂肪酶!^?〇271116 435，常压20°(3下搅拌反应211，搅拌速度为 500r/min，反应结束后，4000r/min条件下离心10min除去脂肪酶，得到Sn-2-单甘酯，经HPLC 分析，Sn-2-单甘酯的得率为90.82 %。
[0047]由此可见，本发明的合成路线如下：
[0048]
[0049] 1、本发明采用固定化酶催化乙醇反应，由于反应溶剂极性原因使酶在反应中表现 出了强sn-Ι (3)特异性，催化效率高，甘油酯转化率高。
[0050] 2、本发明通过酶的选择性以及控制反应条件来抑制酰基迀移副反应，有效减少了 反应的步骤，反应过程简单易操作。
[0051] 3、本发明具有耗能低、转换率高、产品安全性能高、反应时间短和无环境污染问题 等优点，通过对酶的回收利用可大大降低成本，应用潜力巨大。
[0052]应说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳 实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术 方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发 明的权利要求范围当中。
【主权项】
1. 一种酶法合成Sn-2-单甘酯的方法，其特征在于:包括， 将甘油酯和乙醇按质量比1:1~10混合，在无溶剂体系下，加入脂肪酶，在一定温度下 搅拌反应一段时间，进行醇解反应，得到含有Sn-2-单甘酯的产物。2. 如权利要求1所述的酶法合成Sn-2-单甘酯的方法，其特征在于:所述甘油酯为茶籽 油、高油酸葵花籽油、鱼油、花生四烯酸的藻油或二十二碳六烯酸的藻油的一种或几种。3. 如权利要求1或2所述的酶法合成Sn-2-单甘酯的方法，其特征在于:所述脂肪酶为固 定化酶LipozymeRMIM、固定化酶NS40086、固定化酶LipozymeTLIM、固定化酶Novozym 435、固定化酶Lipozyme435中的一种或几种，其加入量占甘油酯和乙醇总质量的1 %~ 15%〇4. 如权利要求3所述的酶法合成Sn-2-单甘酯的方法，其特征在于:所述脂肪酶为固定 化酶Lipozyme435,其加入量占甘油酯和乙醇总质量的8%~12%。5.如权利要求3所述的酶法合成Sn-2-单甘酯的方法，其特征在于：所述固定化酶 Novozym 435,其加入量占甘油酯和乙醇总质量的5%~6%。6. 如权利要求1、2、4或5任一所述的酶法合成Sn-2-单甘酯的方法，其特征在于:所述搅 拌，其搅拌转速为50~800r/min，时间为12~18min。7. 如权利要求6所述的酶法合成Sn-2-单甘酯的方法，其特征在于:所述一定温度下搅 拌反应一段时间，其温度为10~40°C，反应时间为0.5~15h。
【专利摘要】本发明公开了一种酶法合成Sn-2-单甘酯的方法，将甘油酯和乙醇按质量比1：1～10混合，在无溶剂体系下，加入脂肪酶，在一定温度下搅拌反应一段时间，进行乙醇解反应，得到含有Sn-2-单甘酯的产物。本发明通过利用酶的专一性、高效性以及控制反应条件来抑制酰基迁移副反应，反应转化率很高，同时，也缩短了合成时间，整个过程易于控制，反应条件温和，同时通过对酶的回收利用可大大降低成本，便于大规模工业化推广，其应用潜力巨大。
【IPC分类】C12P7/64
【公开号】CN105483170
【申请号】CN201610013042
【发明人】王小三, 陆继源, 王盈盈, 黄健花, 金青哲, 王兴国
【申请人】江南大学
【公开日】2016年4月13日
【申请日】2016年1月8日