药伊立替康导致的腹泻：该抑制剂与伊立替康抗肿瘤药物 合用，抑制伊立替康在胃肠道中的水解，进而降低伊立替康活性代谢物SN-38在胃肠体系 的局部暴露量，减缓其导致的迟发型腹泻严重不良反应。
[0023] 本发明提供的羧酸酯酶抑制剂在减弱抗肿瘤药导致腹泻与提高前药口服生物利 用度方面的应用，该类成分可作为单体或复方与常用辅料混合后制成剂型使用，也可与抗 肿瘤药按不同比例混合后作为药物组合物使用。
[0024] 本发明涉及一种五环三萜类化合物及其作为人羧酸酯酶抑制剂的应用，优点如 下：
[0025] 1、价廉易得：本发明提供的新型羧酸酯酶抑制剂以廉价的甘草次酸为原料，经化 学合成获得，合成工艺简单易行，收率较高。
[0026] 2、高抑制活性：该新型羧酸酯酶抑制剂在人组织微粒体中对羧酸酯酶2的半数抑 制浓度IC 5。可达nM级。
[0027] 3、高选择性：体外活性测定发现该类化合物抑制羧酸酯酶1的IC5。与抑制羧酸酯 酶2的IC 5。比率可达1020。
[0028] 4、高安全性：该新型羧酸酯酶抑制剂具有良好的安全性，其小鼠口服LD5。大于lg/ kg〇
【附图说明】
[0029] 图1?甘草次酸衍生物的结构通式；
[0030] 图2. (3-羧丙酰基）-11-脱氧-甘草次酸-30-乙酯的4-匪1?谱图；
[0031] 图3. (3-羧丙酰基）-11-脱氧-甘草次酸-30-乙酯的13C_NMR谱图；
[0032] 图4. (3-羧丙酰基）-11-脱氧-甘草次酸-30-乙酯的合成路线；
[0033] 图5. (3-羧丙酰基）-11-脱氧-甘草次酸-30-乙酯抑制hCE2的抑制曲线；
【具体实施方式】
[0034] 下面的实施例将对本发明予以进一步的说明，但并不因此而限制本发明。
[0035] 本发明所采用的设备及其型号为：荧光发射/激发光谱是由SynergyHl全功 能微孔板检测仪检测完成；iH-NMR谱图和 13C-NMR谱图是由核磁共振波谱仪（Avance II 400MHz)检测完成。
[0036] 实施例1
[0037] (3-羧丙酰基）-11-脱氧-甘草次酸-30-羧酸酯的合成
[0038] (1)化合物1 (11-脱氧-甘草次酸）的合成
[0039] 室温，将 18 0 -甘草次酸（235. 3mg，0? 5mmol)、锌粉（526. 5mg，16. 2mmol)加入到 1，4_二氧六环（9mL)溶液中，冷却反应体系到8-12°C，缓慢滴加浓盐酸（1.45 mL)，加完保 持体系8-12°C反应，薄板层析（TLC)监测反应。反应完全后，减压蒸除溶剂，加水（25mL)， 二氯甲烷萃取三次（30mLX3)，合并有机相饱和氯化钠溶液洗（20mLXl)，无水硫酸钠干 燥，蒸除溶剂，粗产物柱层析（石油醚/乙酸乙酯=20/1-5/1)得化合物1，白色固体，产率 65-75 % 〇
[0040] (2)化合物2 (11-脱氧-甘草次酸-30-乙酯）的合成
[0041] 室温，将化合物1 (167. Omg, 0. 37mmol)、无水碳酸钾（51. lmg, 0. 37mmol)加入到丙 酮（10mL)和四氢呋喃（5mL)的混合溶液中，搅拌5min后滴加溴乙烷（41 y L，0? 55mmol)，加 完升温到35°C反应，薄板层析（TLC)监测反应。反应完全后，减压蒸除溶剂，加水（20mL)， 二氯甲烷萃取三次（25mLX3)，合并有机相饱和氯化钠溶液洗（15mLXl)，无水硫酸钠干 燥，蒸除溶剂，粗产物柱层析（石油醚/乙酸乙酯=50/1-10/1)得化合物2,白色固体，产率 85-95 % 〇
[0042] (3)化合物3 ((3-羧丙酰基）-11-脱氧-甘草次酸-30-乙酯）的合成
[0043] 室温，依次将化合物 2 (89. Omg, 0? 18mmol)、4_ 二甲氨基P比啶（45. Omg, 0? 36mmol)、 琥泊酸酐（91.9mg，0. 92mmol)加入到二氯甲烧（2mL)溶液中，加完室温反应，薄板层析 (TLC)监测反应。反应完全后，加水（10mL)，1M HC1溶液调pH = 2-3,乙酸乙酯萃取三次 (25mLX 3)，合并有机相水洗（15mLX 1)、饱和氯化钠溶液洗（15mLX 1)，无水硫酸钠干燥， 蒸除溶剂，粗产物柱层析（二氯甲烷/甲醇=100/1-20/1梯度洗脱）得化合物3,白色固 体，产率70-80%。
[0044] 产物的核磁共振波谱具体如下：
[0045] 虫匪1?(4001抱，〇)(：13)5 5.26(8，111)，4.61-4.43(111，111)，4.29-3.98(111，211)，2.69-4. 24 (m，4H)，2. 03-1. 82 (m，6H)，1. 80-1. 74 (m，1H)，1. 69-1. 47 (m，7H)，1. 47-1. 38 (m，1H)，L 37-1. 21 (m, 8H), 1. 14(s, 3H), 1. 12 (s, 3H), 1.09-0. 99 (m, 2H), 0. 96 (s, 6H), 0. 83-0. 87 (m, 8H )，0.78(s，3H);13CNMR(101MHz，CDC13)S177.2，171.9，144.6，122.4,81.6,60.0,55.3,48. 2, 47. 56, 44. 1, 42. 8, 41. 5, 39. 8, 38. 3, 38. 2, 37. 8, 36. 8, 32. 6, 31. 9, 31. 3, 29. 4, 28. 8, 28. 5 ,28. 2, 28. 0, 27. 0, 26. 2, 25. 9, 23. 5, 18. 2, 16. 8, 16. 7, 15. 5, 14. 3.
[0046] 实施例2.
[0047] (3-羧丙酰基）-11-脱氧-甘草次酸-30-羧酸酯对羧酸酯酶2抑制能力的定量评 估
[0048] 以对荧光素二乙酸酯的水解代谢为探针反应，借助人肝微粒体体外孵育体系，测 定甘草次酸及其衍生物对羧酸酯酶2抑制的IC 5。：
[0049] a. 200微升体外代谢反应体系中，含有pH为7. 4的磷酸缓冲液，人肝微粒体蛋白浓 度为2 y g/ml，抑制剂终浓度范围为0. 001 yM-100 yM，于37°C条件下震荡预孵10分钟；
[0050] b?向反应体系中加入底物（终浓度10 yM)，起始反应；于37 °C条件下反应30分 钟后，加入200 y 1乙腈，剧烈震荡后，终止反应；
[0051] c.采用高速冷冻离心机，在20, 000 Xg的条件下，高速离心上述体系5分钟后，取 上清，进行酶标仪检测分析；对代谢水解产物进行定量检测。
[0052] 实施例3.
[0053] (3-羧丙酰基）-11-脱氧-甘草次酸-30-羧酸酯对羧酸酯酶1抑制能力的定量评 估
[0054] 以对荧光素二乙酸酯的水解代谢为探针反应，借助人肝微粒体体外孵育体系，测 定甘草次酸及其衍生物对羧酸酯酶1抑制的IC 5。：
[0055] a. 200微升体外代谢反应体系中，含有pH为7. 4的磷酸缓冲液，人肝微粒体蛋白浓 度为2 y g/ml，抑制剂终浓度范围为0. 001 yM-120 yM，于37°C条件下震荡预孵10分钟；
[0056] b.向反应体系中加入底物（终浓度10 yM)，起始反应；于37 °C条件下反应30分 钟后，加入200 y 1乙腈，剧烈震荡后，终止反应；
[0057] c.采用高速冷冻离心机，在20, 000Xg的条件下，高速离心上述体系5分钟后，取 上清，进行酶标仪检测分析；对代谢水解产物进行定量检测。
[0058] 表1甘草次酸及其衍生物对羧酸酯酶的抑制
[0059]
[0061] 甘草次酸及其衍生物对hCE2呈现出很好的抑制活性，各化合物的半数抑制浓度 如表1所示。从所得实验数据可以看出，改造甘草次酸（3位羟基酰化、脱除11位羰基、30 位羧基酯化）可以明显提高其对hCE2的抑制活性，同时显著增强对hCE2的选择性。改造 后（3-羧丙酰基）-11-脱氧-甘草次酸-30-乙酯对hCE2抑制活性是甘草次酸的3463倍， 抑制羧酸酯酶1的IC 5。与抑制羧酸酯酶2的1C 5。比率可达1020. 5。
[0062] 实施例4.
[0063] (3-羧丙酰基）-11-脱氧-甘草次酸-30-羧