专利名称：参与软脂酸合成的蛋白、基因和功能片段以及它们的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及参与软脂酸合成的蛋白、基因和功能片段以及它们的应用。
背景技术：
玉米作为人类最重要的能量来源之一，其籽粒脂肪酸含量与组分比例直接影响着 人类身体健康。世界卫生组织提出玉米油是最具保健作用的健康植物油，其富含人体必须 的维生素E和不饱和脂肪酸，其油酸含量为24. 4%，而亚油酸则可超过58 %，长期食用能够 防止血管粥样硬化和胆固醇积累，降低血压。高油玉米的市场前景非常广阔，但是种质资源 狭窄、种质资源的创新时间长、进度慢、花费大等种种原因使高油玉米的发展非常缓慢。随 着分子生物学的发展及其在植物育种中的应用，分子标记辅助选择和基因工程为高油玉米 种质资源的拓宽及创新进程提供了新的思路和手段。
发明内容
本发明的目的是提供参与软脂酸合成的蛋白、基因和功能片段以及它们的应用。本发明提供的蛋白质，来自玉米属玉米(Zea mays)，是如下(a)或(b)(a)由序列表中序列6、序列4或序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将序列6、序列4或序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和 /或缺失和/或添加且与软脂酸合成相关的由序列6、序列4或序列2衍生的蛋白质。为了使(a)中的蛋白质便于纯化，可在由序列表中序列6、序列4或序列2所示的 氨基酸序列组成的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表6所示的标签。表6标签的序列
权利要求
一种蛋白质，是如下(a)或(b)(a)由序列表中序列6、序列4或序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将序列表中序列6、序列4或序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与软脂酸合成相关的由序列6、序列4或序列2衍生的蛋白质。
2.编码权利要求1所述蛋白的基因。
3.如权利要求2所述的基因，其特征在于所述基因为如下1)至6)中任一所述的DNA 分子1)序列表的序列1自5’末端第23至1327位核苷酸所示的DNA；2)序列表的序列2自5’末端第23至1312位核苷酸所示的DNA；3)序列表的序列5自5’末端第23至1312位核苷酸所示的DNA；4)序列表中序列5、序列3或序列1所示的DNA分子；5)在严格条件下与1)至4)中任一所述的DNA序列杂交且编码软脂酸合成相关蛋白的 DNA分子；6)与1)至4)中任一所述的DNA序列具有90%以上同源性且编码软脂酸合成相关蛋 白的DNA分子。
4.含有权利要求2或3所述基因的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。
5.如权利要求4所述的重组表达载体，其特征在于所述重组表达载体为在pBCSK(-) 质粒的多克隆位点插入权利要求2或3所述基因得到的重组质粒。
6.如权利要求4所述的重组菌，其特征在于所述重组菌为将权利要求5所述重组质 粒导入K27菌株得到的重组菌。
7.序列表的序列7所示的DNA。
8.权利要求7所述DNA在促进软脂酸合成中的应用；所述软脂酸合成与序列表的序列 1所示基因编码的蛋白相关。
9.一种培育软脂酸合成能力增强的菌株的方法，是将权利要求2或3所述基因导入大 肠杆菌K27菌株，得到软脂酸合成能力高于K27菌株的重组菌。
10.如权利要求9所述的方法，其特征在于权利要求2或3所述基因通过权利要求4 或5所述重组表达载体导入K27菌株。
全文摘要
本发明公开了参与软脂酸合成的蛋白、基因和功能片段以及它们的应用。本发明提供了由序列表中序列6、序列4或序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；序列表中序列5、序列3或序列1所示的DNA分子和序列7所示的DNA片段。本发明中利用普通材料B73和高油系By804构建的重组近交系群体，在第九染色体9.02Bin上定位了一个控制玉米油份软脂酸的主效QTL-Pa19，它的LOD可以达到27，可以解释42％的遗传变异。本发明中利用图位克隆的方法精细定位在北京高油中控制玉米籽粒软脂酸含量和籽粒饱和/不饱和脂肪酸比例的主效QTL-Pa19，克隆QTL-Pa19的功能基因，挖掘其功能性位点，开发了功能性标记，对于玉米籽粒品质改良具有重大价值。
文档编号C12N5/10GK101948517SQ20101028561
公开日2011年1月19日 申请日期2010年9月16日 优先权日2010年9月16日
发明者严建兵, 张义荣, 李建生, 李慧, 李林, 郑德波, 郑艳萍 申请人:中国农业大学