专利名称：一种杀精和治疗阴道炎的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及中药领域，具体涉中药组合物。
背景技术：
当今社会，计划外怀孕、泌尿生殖道感染等现象已经严重影响了广大妇女的日常生活，成为医学界急需解决的问题之一。目前，避孕的方法有多种，避孕套是目前全球最普遍的避孕方式，但在发展中国家的使用率很低。此外，由于避孕套会引起人体过敏反应以及影响快感，因此使用受到了相当一部分男性的抵制。避孕药应用很广，主要为口服或注射避孕药物及阴道内用药，现在世界上有数千万的人在使用女用口服避孕药，但是有严重心血管疾病，肝肾炎，内分泌疾病，肿瘤或血液病患者均不宜服用，容易引起头晕，恶心，呕吐，月经周期紊乱等不良反应，中国妇女口服避孕药的现用率呈下降趋势。女性外用避孕药有阴道栓剂、阴道隔膜等剂型，但由于操作复杂而不被许多女性接受。
90年代起，节育技术的研究已从以往单独注重避孕效果趋向于避孕与防病治病。作为屏障避孕方法之一的杀精剂，具有避孕和预防性传播疾病的双重功能且能为女性自主选择使用的优点。而目前常用的表面活性剂类避孕药如NP-9，对女性的阴道上皮组织有一定的损坏作用，有些还会影响阴道内的的正常菌群。因此，开发一种既可避孕，又可抗菌消炎，且粘膜刺激性小的复方中药避孕药有广阔的应用前景。
莪术油是莪术根茎部的提取物，具有破血行气止痛，消积散结，破血祛瘀的功效，用于治疗妇女闭经，痰湿淤血凝结而成的症瘕癖块和疼痛。莪术油在医药领域的应用十分广泛，如复方莪术油栓，每枚复方莪术油栓含硝酸益康唑50mg、莪术油0.21ml和冰片3mg，用于治疗各种阴道感染；莪术油注射液，含1％莪术油，用于早期宫颈癌的治疗；复方莪术油软胶囊，主要活性成分为莪术油和陈皮油，用于治疗由于消化不良引起的胃疾。单独用莪术油治疗阴道炎的效果并不是很理想，因此一般都和抗真菌剂搭配使用以增强其抗菌消炎的作用。
猪去氧胆酸是从猪胆汁中提取的一种胆烷酸单体化合物，能抑制胆酸的形成及溶解脂肪，降低血中胆固醇和甘油三酯；对百日咳杆菌、白喉杆菌、金黄色葡萄球菌等有一定的抑菌作用，可用作消炎药；有研究表明猪去氧胆酸还对体外培养的人阴道毛滴虫有碎解作用(詹志曾，新医学，1979，10(2)66)和较强的杀精子作用(胡卿发等，陕西新医药，1986，15(8)3)。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种杀精和治疗阴道炎的药物组合物，以进一步提高莪术油和猪去氧胆酸的抗菌消炎和杀精的作用。
本发明实现上述目的的技术方案是 一种杀精和治疗阴道炎的药物组合物，该组合物由活性成份和医学上可接受的辅料组成，其特征是含有以下重量百分比的活性成份莪术油0.5～20％、猪去氧胆酸0.5～20％；优选莪术油4％、猪去氧胆酸2％。
本发明所述的莪术油为姜科植物蓬莪术(Curcuma phaeocaulis Valeton)、温郁金(Curcumawenyujin Y.H.Chen et C.Ling)或广西莪术(Curcuma kwangsiensis S.G.Lee etC.F.Liang)等的干燥根茎经水蒸汽蒸馏或应用超临界二氧化碳萃取技术提取的脂溶性部分；猪去氧胆酸是健康猪胆汁提取的3α，6α-二羟基5β-胆烷酸，按干燥品计算，C20H40O4含量不得少于98.0％。
本发明药物组合物是临床可接受的剂型，如洗剂、软膏剂、凝胶剂、泡沫剂、栓剂、气雾剂或阴道泡腾片。所述洗剂的辅料是乳化剂和水，其中乳化剂选用吐温-80；所述软膏剂的辅料是软膏基质、保湿剂和乳化剂，其中，软膏基质选用卡波姆，保湿剂选用甘油，乳化剂选用吐温-80；所述凝胶剂的辅料是凝胶基、表面活性剂、保湿剂和乳化剂，其中，凝胶基质选用Poloxamer 407，表面活性剂选用甲基纤维素，保湿剂选用甘油，乳化剂选用吐温-80；所述泡沫剂的辅料是乳化剂、保湿剂、防腐剂、酸碱中和剂、增塑剂和表面活性剂，其中，乳化剂选用吐温-80，保湿剂选用甘油，防腐剂选用苯甲醇，酸碱中和剂选用三乙醇胺，增塑剂选用硬脂酸，表面活性剂选用平平加O；所述栓剂的的辅料是栓剂基质，如可可豆脂；所述气雾剂的辅料是乳化剂、保湿剂、防腐剂、酸碱中和剂、增塑剂、抛射剂和表面活性剂，其中，乳化剂选用吐温-80，保湿剂选用甘油，防腐剂选用苯甲醇，酸碱中和剂选用三乙醇胺，增塑剂选用硬脂酸，表面活性剂选用平平加O，抛射剂选用二甲醚；所述阴道泡腾片的辅料是包合剂和CO2发生剂，其中，包合剂选用环糊精，CO2发生剂选用硼酸、酒石酸和碳酸氢钠。
本发明药物组合物的活性成分由莪术油、猪去氧胆酸两味中药组成，以莪术油为君药，其作用是一、现代研究表明其具有抗菌消炎功能，可以抑制“阴痒之虫”；二、在阴道内可抑制精子成活率，减少受孕机率，达到避孕作用。以猪去氧胆酸为臣药，猪去氧胆酸主归肝经，善清肝胆之湿热以除邪实。二药同用共凑“清热抗菌，止痛避孕”之功，配伍后抗菌消炎作用增强，杀精有效浓度比单独使用猪去氧胆酸降低。“阴痒之虫”得灭，则阴部瘙痒之症得除；肝胆实热得清，则白带量多，色黄，质稠，臭秽；阴部红肿疼痛及其伴随症状亦平；阴道润滑，则性交疼痛可缓。
综上所述，本发明药物组合物具有两大优点首先，作为阴道给药的制剂，不仅具有治疗阴道炎的作用，同时由于药味精当，作用缓和，不具有刺激性和腐蚀性，因此同时具有治疗性和实用性；其次，本制剂还可以减少阴道内精子的成活率达到避孕的目的。
下面将通过实验进一步说明本发明所具有的优点和所能达到的的技术效果。
1、本发明药物组合物的杀精作用和避孕效果实验 (1)受试药物 本发明药物组合物乳液取本发明药物组合物，用0.9％氯化钠溶液配制成含莪术油4％、猪去氧胆酸2％和吐温-80 2％的乳液； (2)实验材料 精子取自成年健康男子(年龄25～38岁)，禁欲3～7d，手淫法取精液于洁净试管内，37℃0.5h内液化后，光镜下常规检查，精子密度50×109～80×109L-1，活动率70％以上，活动力为IV，畸形精子＜30％，无精子凝集现象。
宫颈粘液取自健康成年排卵期妇女，有拉丝度，涂片晾干后镜下可见羊齿状结晶。
(3)实验方法 a.本发明组合物对精液的作用在清洁的3个试管中各加入精液0.5ml，在一定间隔时间内分别向该3管加入本发明药物组合物乳液0.01ml、0.02ml、0.03ml，同时用不加本发明药物组合物乳液的精液平行对照。分别计时并摇匀或用吸管吹打，并用肉眼观察，分别于加药液后20S、1min、15min、30min、60min吸取试管混匀液20μl于载玻片上，加盖玻片后显微镜观察。分别记录精子活力、活率、密度等。
b.本发明组合物对宫颈粘液的作用在清洁的3个试管中各加入宫颈粘液0.15ml，分别加入药液0.01ml、0.02ml、0.03ml，摇匀或用吸管吹打数次。肉眼观察，看拉丝度，涂片晾干，光镜下看羊齿状结晶。
c.本发明组合物对精液与宫颈粘液混合液的作用取精液0.1ml与宫颈粘液0.1ml混匀，加入本发明药物组合物乳液0.02ml混匀后取混合液一滴于载玻片上，加盖玻片后显微镜下观察，记录精子活率、活力、密度等。
d.玻片穿透试验分别取3所述3个试管中本发明药物组合物乳液和宫颈粘液混合液20μl于载波片上，取等量精液相距4mm置于同一张载玻片上，压上盖玻片后用相差显微镜观察。
e.毛细管爬高试验取b中的第1管精液于专用塑料贮精池内，将毛细管充满宫颈粘液，顶端用橡皮泥封闭，另一端插入贮精池，浸入精液深度约2mm.确保毛细管中宫颈粘液柱长5cm以上。放入37℃环境，计时并分别在30min、60min、120min把毛细管平放在倒置相差显微镜下观察。第2管、第3管精液试验方法同上，同时用不加本发明药物组合物乳液的精液平行对照。
(4)实验结果 a.本发明组合物对精液的作用，如表3所示，本发明药物组合物乳液用药1小时后各组精液中精子的活力和活率均降为0，密度降为20-40；本发明药物组合物乳液用药3ml在20s后精子的活力和活率均为0，密度为20×109～40×109L-1。在0.024％浓度时可瞬间使精子失活，0.008％浓度时，1h内可使全部精子失活，杀精子效果较单独使用要好，可见本发明组合物有很好的杀精作用。 表3 药液对精液作用的结果 b.本发明组合物对宫颈粘液的作用加入本发明组合物乳液后立即出现白色絮状物，用吸管吹打时可见乳白色凝固团，凝固程度与所加药液量成正比，用镊子检查拉丝度消失。将混合物涂片烘干后，光镜下见凝固团部位无羊齿状结晶，析出液部位可见羊齿状结晶，说明本发明组合物能改变宫颈粘液的理化性质。
c.本发明组合物对精液与宫颈粘液混合液的作用加本发明药物组合物乳液0.02ml混匀后镜下。可见精子全部制动。密度下降，并且丝状物增多。
d.玻片穿透试验结果加入本发明药物组合物乳液后.无一使精子穿透。镜下见精液与之接触处有指样突出，但每一突出的交界面精子也被制动。并且随着乳液的流入，与乳液接触的活动精子也被制动。
e.毛细管爬高试验结果，结果见表4。
表4 毛细管爬高试验结果 结论莪术油、猪去氧胆酸组合物不但有较强的杀精作用，而且可改变精液、宫颈粘液的理化性质，阻止受孕。
2、抗阴道感染实验 (1)受试药物 本发明药物组合物A.莪术油4％、猪去氧胆酸2％、吐温-80 2％和0.9％氯化钠的乳液， B.莪术油2％、猪去氧胆酸1％、吐温-80 2％和0.9％氯化钠的乳液； 聚维酮碘软膏(批号06060305，广东众生药业股份有限公司生产)用生理盐水配制成含聚维酮碘10％的溶液。
(2)实验材料 新西兰白兔，购自广州中医药大学实验动物中心。
金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、乙型链球菌、白色念珠菌。标准菌株由中国药品生物制品检定所提供。
(3)实验方法 a.体外抑菌实验 取本发明药物组合物A做2倍比稀释(平皿法)，多点定量接种加入标准菌液，37℃恒温箱中培养7d，同时对照和菌种对照同样培养7d，观察各浓度的抑菌效果。
b.实验性家兔阴道炎的治疗作用 取体重3kg左右雌性家兔36只，其中4只作为正常对照组，其余32只分别给予按1∶1∶1混合的乙型链球菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌培养菌液，按照0.4ml/只，将混合菌液注人家兔阴道内。注入菌液后自由活动，8h后再用相同方法重复感染一次。3d后取其阴道分泌物做镜检及培养，阴道分泌物3种菌检都为阳性者为合格受试动物。将检验阳性的合格动物随机分为4组，模型组、原浓度莪术油、猪去氧胆酸组合物组、50％浓度莪术油、猪去氧胆酸组合物组和10％聚维酮碘软膏对照组。每只于每日8:00Am和8:00Pm各给药一次，连续给药10d，对照组给与等容量生理盐水。给药方法是动物仰卧位，用乳胶管冲洗阴道，给药容积都是每只2mL，每次给药后动物立即自由活动任由药液流出，不进行清洁冲洗。末次给药后2h，处死所有动物，解剖各家兔阴道，沿阴道纵轴剖开，肉眼观察阴道和子宫颈处粘膜有无充血红肿、水肿、脓肿，然后用10％甲醛固定做病理组织学检查。
(4)结果 a.体外抑菌实验具体结果见表1和表2。
表1.本发明药物组合物体外抑菌实验结果 注E表示莪术油、猪去氧胆酸组合物，J表示聚维酮碘软膏；-表示无相应菌生长，+表示有相应菌生长，±表示有微弱相应菌生长。
结果显示，莪术油、猪去氧胆酸组合物与聚维酮碘软膏均能抑制多种细菌的生长。
表2 本发明组合物与莪术油、猪去氧胆酸的对各种致病菌的MIC(g/ml) 注MIC是指完全抑制试验菌种生长所含的最小药物浓度。
结果表明本发明组合物对各种阴道炎致病菌的MIC比莪术油和猪去氧胆酸的都有所降低，且有的降幅高达10倍，可见本发明组合物有很强的抗菌作用。
b.实验性家兔阴道炎实验 以阴道壁的炎性浸润、粘膜增生和间质水肿为主要组织学指标，进行半定量分级，以模型对照组为参照系(等级指数M＝0)，等级指数法进行组间差异的显著性检验，结果见表2。 表2 对感染性阴道炎病理形态学的影响结果 表2-1 表2-2 表2-3 注M为等级指数，正值说明形态学指示好于模型组，数值越大，形态学越好。T为与模型组进行t检验的值，T0.05＝1.98。+表示偶见少量白细胞浸润，黏膜红肿充血，轻微水肿；++表示有少量炎症浸出液，黏膜轻微增生，有水肿；+++表示有炎症浸出液渗出明显，黏膜增生明显，有明显水肿；#表示炎症浸出液严重渗出，黏膜严重增生，严重水肿。
结果如表2所示，本发明组合物能对多种细菌混合感染所致家兔阴道炎的阴道黏膜病变有明显的保护作用，能有效治疗阴道炎，其疗效与聚维酮碘相当。
综上所述，本发明组合物能杀灭多种阴道致病菌，并治疗多种细菌混合感染造成的实验性阴道炎。
具体实施例方式 例1(洗剂) 1、本发明药物组合物莪术油0.5g、猪去氧胆酸20g 2、洗剂的制备取70ml去离子水，加入猪去氧胆酸，滴加10％氢氧化钠溶液约20ml使猪去氧胆酸溶解，过滤，得猪去氧胆酸水溶液；取莪术油与2g吐温80混合，加入猪去氧胆酸水溶液中，用去离子水调整重量至100g，混匀，即得。外用，每次取本品1～10ml，加入1000ml清水稀释后，抹洗或坐浴。
例2(洗剂) 1、本发明药物组合物莪术油4g、猪去氧胆酸2g。
2、洗剂的制备取70ml去离子水，加入猪去氧胆酸，滴加10％氢氧化钠溶液约2ml使猪去氧胆酸溶解，过滤，得猪去氧胆酸水溶液；取莪术油与8g吐温80混合，加入猪去氧胆酸水溶液中，用去离子水调整重量至100g，混匀，即得。外用，每次取本品1～10ml，加入1000ml清水稀释后，抹洗或坐浴。
例3(软膏剂) 1、本发明药物组合物莪术油20g、猪去氧胆酸0.5g。
2、软膏剂的制备取20ml去离子水，加入猪去氧胆酸，滴加10％氢氧化钠溶液约0.5ml使猪去氧胆酸溶解，过滤，得猪去氧胆酸水溶液，加入1g卡波姆，4g甘油，混匀，得水相；取莪术油与20g吐温80混合，得油相，将水相和油相混合，高速均质机乳化，用去离子水调整重量至100g，加入猪去氧胆酸水溶液中，混匀，即得。外用，每次取本品1～2g，抹于患处。
例4(软膏剂) 1、本发明药物组合物莪术油10g、猪去氧胆酸2g。
2、软膏剂的制备取20ml去离子水，加入猪去氧胆酸，滴加10％氢氧化钠溶液约2ml使猪去氧胆酸溶解，过滤，得猪去氧胆酸水溶液，加入1g卡波姆，4g甘油，混匀，得水相；取莪术油与10g吐温80混合，得油相，将水相和油相混合，高速均质机乳化，用去离子水调整重量至100g，混匀，即得。外用，每次取本品1～2g，抹于患处。
例5(凝胶剂) 1、本发明药物组合物莪术油4g、猪去氧胆酸2g。
2、凝胶剂的制备取80ml去离子水，加入猪去氧胆酸，滴加10％氢氧化钠溶液约2ml使猪去氧胆酸溶解，过滤，得猪去氧胆酸水溶液，加入40g Poloxamer 407，3g甲基纤维素，4g甘油，混匀，得水相；取莪术油与8g吐温80混合，得油相，将水相和油相混合，高速均质机乳化，用去离子水调整重量至100g，混匀，即得。外用，每次取本品1～2g，抹于患处。
例6(气雾剂) 1、本发明药物组合物莪术油4g、猪去氧胆酸2g。
2、泡沫剂的制备取20ml乙醇，加入猪去氧胆酸，使猪去氧胆酸溶解，过滤，得猪去氧胆酸乙醇溶液，加入苯甲醇5g，莪术油4g，吐温808g，甘油4g，三乙醇胺1g、硬脂酸2g和平平加O10g，混匀，高速均质机乳化，加蒸馏水调整至100g；与二甲醚一起灌入密封容器中，即得。外用，每次取本品1～2g，喷于患处。
例7(泡沫剂) 1、本发明药物组合物莪术油4g、猪去氧胆酸2g。
2、气雾剂的制备取20ml乙醇，加入猪去氧胆酸，使猪去氧胆酸溶解，过滤，得猪去氧胆酸乙醇溶液，加入苯甲醇5g，莪术油4g，吐温80 8g，甘油4g，三乙醇胺1g、硬脂酸2g和平平加O 10g，混匀，高速均质机乳化，加蒸馏水调整至100g；灌入密封容器中，即得。外用，每次取本品1～2g，喷于患处。
例8(栓剂) I、本发明药物组合物莪术油4g、猪去氧胆酸2g。
2、栓剂的制备取可可豆脂80g，加入猪去氧胆酸和莪术油共熔后共制成100粒栓剂。外用，每次取本品1粒，置于女性阴道中。
例9(泡腾片) 1、本发明药物组合物莪术油4g、猪去氧胆酸2g。
2、泡腾片的制备取20g环糊精，加入莪术油，搅拌使环糊精包合莪术油，加入猪去氧胆酸2g，硼酸7.5g、酒石酸22.5g、碳酸氢钠30g，加入淀粉调整重量至100g，压片，每片1～2g，即得。外用，每次取本品1粒，置于女性阴道中。
权利要求
1、一种杀精和治疗阴道炎的药物组合物，该组合物由活性成份和医学上可接受的辅料组成，其特征是含有以下重量百分比的活性成份莪术油0.5～20％、猪去氧胆酸0.5～20％。
2、根据权利要求1所述的杀精和治疗阴道炎的药物组合物，其特征是含有以下重量百分比的活性成份莪术油4％、猪去氧胆酸2％。
3、权利要求1或2所述的杀精和治疗阴道炎的药物组合物，其特征是所述的组合物是洗剂、软膏剂、凝胶剂、泡沫剂、栓剂、气雾剂或阴道泡腾片。
4、权利要求3所述的杀精和治疗阴道炎的药物组合物，其特征是所述洗剂的辅料是吐温-80和水。
5、权利要求3所述的杀精和治疗阴道炎的药物组合物，其特征是所述软膏剂的辅料是卡波姆、甘油和乳化剂吐温-80。
6、权利要求3所述的杀精和治疗阴道炎的药物组合物，其特征是所述凝胶剂的辅料是Poloxamer 407、甲基纤维素、甘油和吐温-80。
7、权利要求3所述的杀精和治疗阴道炎的药物组合物，其特征是所述栓剂的的辅料是可可豆脂。
8、权利要求3所述的杀精和治疗阴道炎的药物组合物，其特征是所述气雾剂的辅料是吐温-80、甘油、苯甲醇、三乙醇胺、硬脂酸、平平加O和二甲醚。
9、权利要求3所述的杀精和治疗阴道炎的药物组合物，其特征是所述阴道泡腾片的辅料是环糊精、硼酸、酒石酸和碳酸氢钠。
10、权利要求3所述的杀精和治疗阴道炎的药物组合物，其特征是所述泡沫剂的辅料是吐温-80、甘油、苯甲醇、三乙醇胺、硬脂酸和平平加O。
全文摘要
本发明提供了一种兼具避孕与杀菌为一体的杀精和治疗阴道炎的药物组合物，该组合物由活性成份和医学上可接受的辅料组成，其特征是含有以下重量百分比的活性成份莪术油0.5～20％、猪去氧胆酸0.5～20％。该组合物不但有较强的杀精作用，而且可改变精液、宫颈粘液的理化性质、阻止受孕，同时还具有抗菌，消炎的作用，能杀灭多种引起阴道感染的微生物，可以用于制备避孕药以及防治微生物感染所致的阴道炎的药物。
文档编号A61K9/06GK101066409SQ200710028179
公开日2007年11月7日 申请日期2007年5月25日 优先权日2007年5月25日
发明者苏子仁, 赖小平, 陈建南 申请人:广州中医药大学