专利名称：香豆素苷类化合物、其制法和其药物组合物与用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的香豆素苷类化合物，其合成方法，含有它们的药物组合物，及其作为药物的应用，属于医药技术领域。
背景技术：
慢性肾脏疾病(包括各类慢性肾炎、糖尿病肾病及高血压性肾损害等)是一种最为常见的慢性的难治性疾病。慢性肾衰竭(CRF)的自然人群年发病率为98～198/100万人口，发达国家如美国和日本的发病率高达800～1000万/100万人口，近十年来呈指数上升的趋势，我国CRF的确切发病率尚缺乏统计资料，约为每年100/100万人口。随着我国经济状况和疾病谱的不断变化，糖尿病和高血压相关肾脏病的发病率已显示出惊人的逐年上升趋势。糖尿病方面，我国的发病率97为3.2％，WHO预测到2010年糖尿病的发病率将增至14％，其中最后发展为糖尿病肾病的为40％，即从97年的1500万增加到2010年的7000万。高血压方面，我国90年代初已达到11.26％，目前正以每10年增加20％以上的速度迅速增加。糖尿病自从胰岛素应用以来，糖尿病的急性合并症如酮症酸中毒的死亡率已显著下降，但随着糖尿病人寿命的延长，40％左右的糖尿病病人可能发生糖尿病肾病，而一旦发生肾脏损害，则出现持续进展的蛋白尿、高血压和肾功能不全，病情常不可逆转，往往进行性发展直至终末期肾衰竭。据WHO预测至2020年，上述非传染病性疾病将成为我国人口死亡原因的首位，而终末期CRF是最重要的致死原因之一。
不论何种病因，肾组织病变均会从早期病变逐渐进展为肾小球硬化和/或肾间质纤维化的晚期病变。如果得不到有效治疗，终将导致慢性肾功能不全和不可逆转的终末期肾衰竭(即尿毒症)。
慢性肾脏病肾脏纤维化的进展的病理生理机制非常复杂，包括原发致病因素(如免疫炎症、代谢紊乱等)对肾脏多种细胞的作用及其继发的血流动力学异常、细胞因子相互作用以及细胞外基质(ECM)合成与降解失衡等等。
目前治疗慢性肾衰常用的方法有透析和移植两种，但均为终末期CRF的治疗手段。肾移植，脏器来源有限，经济负担高，能进行肾移植手术的人很少，约仅有2～5％的肾病患者有机会实施手术，术后还有长期服用免疫抑制剂。透析治疗虽然可以达到替代肾脏的目的，但依赖透析机器、医疗条件要求高，且存在着心血管并发病高、病人有感染危险，顺应性差，经济负担重，在我国应用极为有限。能有条件进行透析或肾移植的患者仅为极少数。因此，大量患者迫切需要能够延缓及阻止肾功能不全进展的有效药物，新型药物的研制和开发显得尤为重要。
传统应用的激素、免疫抑制、降血糖治疗等虽然在抗炎症、调节免疫和代谢方面显示了对原发病的治疗作用，但在控制慢性肾脏病变进展方面却难以奏效。药物治疗对延缓CRF患者的肾功能不全恶化至关重要。目前，世界范围内广泛用于治疗肾功能不全的有效药物主要有两类一类为血管紧张素转换酶抑制剂，即ACEI，包括Captopril、Benazapril、Ramipril等，其主要作用机理在于阻断AII合成，从而减少AII所导致的高血压、肾小球内高滤过压和促硬化因子TGF-β1的产生。另一类为血管紧张素II1型受体拮抗剂，即AT1RA，包括Losartan、Irbsartan、Versartan等，其主要作用机理在于通过阻断AII受体而减少AII的上述作用。国外通过大量的研究表明，对各类慢性肾脏疾病患者的早期有效药物治疗的确可带来明显的延缓肾功能不全恶化的效果，而且具有显著的社会效益和经济效益。
目前临床上用于治疗肾功能不全的药物主要是Benazepril和Losartan，但主要依赖进口，这类药物价格昂贵，毒副作用较大。如造成部分病人高血钾、不可克服的咳嗽、降血压作用不够强等。因此，临床上如Captopril因易致高血钾而难以长期用于慢性肾衰病人，5-15％患者因Benazapril所致的咳嗽而被迫终止治疗，许多原发性或肾性高血压的患者在应用上述药物的同时，为了达到理想血压必须同时加用多种其他降压药物。
发明内容
为了寻找高效低毒的活性先导物，发明人合成了四种新的香豆素衍生物，并进行了活性评价，结果显示它们具有明显的治疗肾功能不全的作用，而且合成方法简单，合成成本低，有望开发成具有竞争力的治疗肾功能不全的新药，故申请化合物用途专利。
为了克服已有技术的不足之处，本发明的目的在于提供四种新的香豆素苷类化合物； 本发明的另一目的在于提供四种新的香豆素苷类化合物的制备方法； 本发明的另一目的在于提供四种新的香豆素苷类化合物及其组合物作为治疗和预防肾功能不全、高血压、糖尿病和脑中风药物的应用。
本发明再一方面涉及的是四种新的香豆素苷类化合物或含有它的药物组合物在预防和/或治疗肾功能不全、高血压、糖尿病和脑中风的用途。
为了完成本发明之目的，可采用如下技术方案，具体而言 本发明的香豆素苷类化合物如下通式(I)所示，本发明还包括其异构体
本发明优选的化合物选自 伞形花内酯-7-O-β-D-全乙酰木糖苷(化合物1)
伞形花内酯-7-O-β-D-木糖苷(化合物2)
伞形花内酯-7-O-L-全乙酰阿拉伯糖苷(化合物3)
伞形花内酯-7-O-α-L-阿拉伯糖苷(化合物4)
本发明还公开的本发明化合物的制备方法，包括如下步骤
D-木糖 溴代全乙酰木糖 伞形花内酯
化合物1化合物2
L-阿拉伯糖 溴代全乙酰阿拉伯糖 伞形花内酯
化合物3 化合物4 (1)将糖加入高氯酸和醋酸酐混合溶液中，加入红磷，搅拌均匀，滴加液溴和水，室温反应3小时，得到溴代全乙酰糖；加糖时保持温度在30-40℃之间，滴加溴和水的反应温度控制在20℃以下； (2)在有机溶剂中，溴代全乙酰糖和伞形花内酯在重金属催化剂作用和氮气保护下室温反应48小时，得到化合物1或3；优选的重金属催化剂包括各种银盐和汞盐；优选的有机溶剂为喹啉或吡啶； (3)在质子溶剂中，化合物1或3在氮气保护下，在碱存在的条件下脱去乙酰基得到化合物2或4；优选的质子性溶剂为无水甲醇或无水乙醇，优选的碱是无水K2CO3或无水KOH或甲醇钠。
本发明因此还涉及以本发明化合物作为活性成份的药物组合物。该药物组合物可根据本领域公知的方法制备。可通过将本发明化合物与一种或多种药学上可接受的固体或液体赋形剂和/或辅剂结合，制成适于人或动物使用的任何剂型。本发明化合物在其药物组合物中的含量通常为0.1-95重量％。
本发明化合物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼吸道、皮肤、阴道、直肠等。
给药剂型可以是液体剂型、固体剂型或半固体剂型。液体剂型可以是溶液剂(包括真溶液和胶体溶液)、乳剂(包括o/w型、w/o型和复乳)、混悬剂、注射剂(包括水针剂、粉针剂和输液)、滴眼剂、滴鼻剂、洗剂和搽剂等；固体剂型可以是片剂(包括普通片、肠溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡腾片、口腔崩解片)、胶囊剂(包括硬胶囊、软胶囊、肠溶胶囊)、颗粒剂、散剂、微丸、滴丸、栓剂、膜剂、贴片、气(粉)雾剂、喷雾剂等；半固体剂型可以是软膏剂、凝胶剂、糊剂等。
本发明化合物可以制成普通制剂、也制成是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。
为了将本发明化合物制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种赋形剂，包括稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、助流剂。稀释剂可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素、硫酸钙、磷酸氢钙、碳酸钙等；湿润剂可以是水、乙醇、异丙醇等；粘合剂可以是淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纤维素、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、丙烯酸树脂、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等；崩解剂可以是干淀粉、微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、碳酸氢钠与枸橼酸、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠等；润滑剂和助流剂可以是滑石粉、二氧化硅、硬脂酸盐、酒石酸、液体石蜡、聚乙二醇等。
还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。
为了将给药单元制成胶囊剂，可以将有效成分本发明化合物与稀释剂、助流剂混合，将混合物直接置于硬胶囊或软胶囊中。也可将有效成分本发明化合物先与稀释剂、黏合剂、崩解剂制成颗粒或微丸，再置于硬胶囊或软胶囊中。用于制备本发明化合物片剂的各稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、助流剂品种也可用于制备本发明化合物的胶囊剂。
为将本发明化合物制成注射剂，可以用水、乙醇、异丙醇、丙二醇或它们的混合物作溶剂并加入适量本领域常用的增溶剂、助溶剂、pH调剂剂、渗透压调节剂。增溶剂或助溶剂可以是泊洛沙姆、卵磷脂、羟丙基-β-环糊精等；pH调剂剂可以是磷酸盐、醋酸盐、盐酸、氢氧化钠等；渗透压调节剂可以是氯化钠、甘露醇、葡萄糖、磷酸盐、醋酸盐等。如制备冻干粉针剂，还可加入甘露醇、葡萄糖等作为支撑剂。
此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂或其它添加剂。
为达到用药目的，增强治疗效果，本发明的药物或药物组合物可用任何公知的给药方法给药。
本发明的药理结果显示本发明的化合物具有明显的治疗肾功能不全、高血压、糖尿病和脑中风的作用。
本发明化合物药物组合物的给药剂量依照所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物的个体情况，给药途径和剂型等可以有大范围的变化。一般来讲，本发明化合物的每天的合适剂量范围为0.001-150mg/Kg体重，优选为0.1-100mg/Kg体重，更优选为1-60mg/Kg体重，最优选为2-30mg/Kg体重。上述剂量可以一个剂量单位或分成几个剂量单位给药，这取决于医生的临床经验以及包括运用其它治疗手段的给药方案。
本发明的化合物或组合物可单独服用，或与其他治疗药物或对症药物合并使用。当本发明的化合物与其它治疗药物存在协同作用时，应根据实际情况调整它的剂量。
本发明的主要优点有 直接以天然的伞形花内酯和五碳单糖为原料，经过3步反应合成了四个新化合物合成方法简单，合成成本低。
具体实施方法 通过以下具体实施方法将有助于理解本发明，但并不限制本发明的内容。
制备例溴代全乙酰木糖和溴代全乙酰阿拉伯糖的合成 D-木糖或L-阿拉伯糖5g分批加入高氯酸0.13ml和醋酐20ml的混合溶液，反应温度保持在30-40℃之间，反应完成后将温度降至20℃以下，加入红磷1.5g，搅拌均匀后滴加溴2.9ml，水1.8ml，反应温度控制在20℃以下，滴完后室温搅拌反应3小时，加入15ml氯仿，将反应物倒入40ml冰水中，分出氯仿层，水层用氯仿萃取，合并氯仿，滤出红磷，Na2CO3洗至中性，无水MgSO4干燥，蒸干得7.5g溴代全乙酰阿拉伯糖和6.8g溴代全乙酰木糖。
实施例1伞形花内酯-7-O-β-D-全乙酰木糖苷(化合物1)的合成。
在干燥的圆底烧瓶中加入伞形花内酯0.5g，及干燥喹啉50ml，搅拌溶解后，再加入0.90g Ag2O和粉末状分子筛4.0g，室温避光搅拌45分钟后，加入溴代全乙酰化木糖1.77g，氮气保护，继续反应48小时后，加入氯仿，滤去银盐，澄清液用5％盐酸洗，随后用水洗至中性，无水硫酸钠干燥，回收溶剂，残留物经过硅胶柱层析分离(洗脱剂石油醚丙酮＝31)，得到0.5g化合物1。
化合物1C20H20O10；FW420.38 1H-NMR(500MHz，CDCL3)δ7.65(1H，d，J＝9.0Hz，H-4)，7.40(1H，d，J＝9.0Hz，H-5)，6.96(1H，d，J＝2.5Hz，H-8)，6.92(1H，dd，J＝8.5，2.5Hz，H-6)，6.31(1H，d，J＝9.0Hz，H-3)，5.27(1H，d，J＝6.0，H-1’)，5.25(1H，t，J＝7.5Hz，H-3’)，5.19(1H，t，J＝6.0Hz，H-2’)，5.02(1H，m，H-4’)，4.24(1H，dd，J＝12.5，4.5Hz，H-5’a)，3.60(1H，dd，J＝12.5，7.5Hz，H-5’b)，2.09(9H，s，OAc×3). 实施例2伞形花内酯-7-O-β-D-木糖苷(化合物2)的合成。
0.5g化合物1，无水甲醇60ml，氮气保护下加入1.0g无水K2CO3，搅拌，溶液由澄清变混浊，反应4小时，稀盐酸调节pH6-7，过滤，蒸去溶剂，得到化合物2。
化合物2C14H14O7；FW294.26 1H-NMR(500MHz，DMSO-d6)δ8.00(1H，d，J＝9.5Hz，H-4)，7.64(1H，d，J＝8.5Hz，H-5)，7.02(1H，d，J＝2.0Hz，H-8)，6.99(1H，dd，J＝8.5，2.0Hz，H-6)，6.32(1H，d，J＝9.5Hz，H-3)，5.41(1H，d，J＝4.0Hz OH)，5.14(1H，d，J＝4.0HzOH)，5.09(1H，d，J＝4.0Hz OH)，5.04(1H，d，J＝6.5，H-1’)3.24-3.74(5H，H-2’，3’，4’，5’a，5’b)； 13C-NMR(125MHz，DMSO-d6)δ160.1(C-7)，159.9(C-2)，154.9(C-9)，144.1(C-4)，129.4(C-5)，113.4(C-6)，113.3(C-10)，113.1(C-3)，103.0(C-8)，100.3(C-1’)，76.2(C-3’)，72.8(C-2’)，69.2(C-4’)，65.6(C-5’) 实施例3伞形花内酯-7-O-L-全乙酰阿拉伯糖苷(化合物3)的合成。
在干燥的圆底烧瓶中加入伞形花内酯0.5g，及干燥喹啉50ml，搅拌溶解后，再加入0.90g Ag2O和粉末状分子筛4.0g，室温避光搅拌45分钟后，加入溴代全乙酰阿拉伯糖1.77g，氮气保护，继续反应48小时后，加入氯仿，滤去银盐，澄清液用5％盐酸洗，随后用水洗至中性，无水硫酸钠干燥，回收溶剂，残留物经过硅胶柱层析分离(洗脱剂石油醚丙酮＝31)，得到0.6g化合物3。
化合物3C20H20O10；FW420.38 1H-NMR(400MHz，CDCL3)δ7.65(1H，d，J＝9.6Hz，H-4)，7.40(1H，d，J＝8.4Hz，H-5)，6.97(1H，s，H-8)，6.92(1H，dd，J＝8.8，2.4Hz，H-6)，6.31(1H，d，J＝9.6Hz，H-3)，5.44(1H，dd，J＝2.0，6.4Hz，H-2’)，5.34(1H，s，H-1’)，5.19(2H，m，H-3’，4’)，4.13(1H，dd，J＝12.8，4.4Hz，H-5’a)，3.60(1H，dd，J＝12.8，1.6Hz，H-5’b)，2.14(3H，s，2-OAc)，2.10(3H，s，4-OAc)，2.08(3H，s，3-OAc). 实施例4伞形花内酯-7-O-α-L-阿拉伯糖苷(化合物4)的合成。
0.5g化合物2，无水甲醇60ml，氮气保护下加入1.0g无水K2CO3，搅拌，反应4小时，稀盐酸调节pH6-7，蒸去溶剂，加少量水溶解，调pH6-7，放置析出化合物4的针状结晶。
化合物4C14H14O7；FW294.26 1H-NMR(500MHz，DMSO-d6)δ8.00(1H，d，J＝9.5Hz，H-4)，7.64(1H，d，J＝8.5Hz，H-5)，7.01(1H，s，H-8)，6.98(1H，d，J＝8.5，H-6)，6.32(1H，d，J＝9.5Hz，H-3)，5.27(1H，d，J＝4.0Hz OH)，4.86(1H，d，J＝4.0Hz OH)，4.67(1H，d，J＝4.0Hz OH)，5.01(1H，d，J＝6.5，H-1’)3.46-3.74(5H，H-2’，3’，4’，5’a，5’b)； 13C-NMR(125MHz，DMSO-d6)δ160.1(C-7)，160.0(C-2)，154.9(C-9)，144.2(C-4)，129.4(C-5)，113.5(C-6)，113.1(C-3，10)，103.0(C-8)，100.2(C-1’)，72.3(C-2’)，70.0(C-3’)，67.4(C-4’)，65.8(C-5’). 药理实验 实验例1 实验方法 雌性昆明小鼠，体重15～17g，按体重随机分组。设正常对照组、模型对照组、氯沙坦(Losartan)阳性对照组，各个样品不同浓度的治疗组，每组7～9只。均为灌胃给药(20ml/kg体重)，每日一次，连续7天。
于给药后3天，除正常对照组外，给小鼠腹腔注射10mg/kg顺铂造成急性肾损伤模型，观察化合物保护肾功能作用。
造摸后第4天，检测肾功能指标BUN和Scr。
实验结果
以上实验结果表明化合物化合物3有一定的肾保护作用。
权利要求
1、一种如下通式(I)所示的香豆素苷类化合物及其异构体
I R＝H
II R＝Ac
(I)。
2、根据权利要求1的化合物，其特征在于，所述的化合物选自
伞形花内酯-7-O-β-D-全乙酰木糖苷(化合物1)
伞形花内酯-7-O-β-D-木糖苷(化合物2)
伞形花内酯-7-O-L-全乙酰阿拉伯糖苷(化合物3)
伞形花内酯-7-O-α-L-阿拉伯糖苷(化合物4)
3、制备权利要求1-2的化合物的方法，其特征在于，包括如下步骤
(1)将糖加入高氯酸和醋酸酐混合溶液中，加入红磷，搅拌均匀，滴加液溴和水，室温反应3小时，得到溴代全乙酰糖；加糖时保持温度在30-40℃之间，滴加溴和水的反应温度控制在20℃以下；
(2)在有机溶剂中，溴代全乙酰糖和伞形花内酯在重金属催化剂作用和氮气保护下室温反应48小时，得到化合物1或3；
(3)在质子溶剂中，化合物1或3在氮气保护下，在碱存在的条件下脱去乙酰基得到化合物2或4。
4、根据权利要求3的制备方法，其特征在于，步骤(2)中的重金属催化剂选自银盐和汞盐；有机溶剂选自喹啉或吡啶。
5、根据权利要求3的制备方法，其特征在于，步骤(3)中的质子性溶剂选自无水甲醇或无水乙醇，碱选自无水K2CO3或无水KOH或甲醇钠。
6、一种药物组合物，其特征在于，包括有效剂量的权利要求1-2的至少一个化合物和药效学上可接受的载体。
7、权利要求的1-2化合物在制备预防和/或治疗肾功能不全疾病的药物中的应用。
8、权利要求的1-2化合物在制备预防和/或治疗高血压的药物中的应用。
9、权利要求的1-2化合物在制备预防和/或治疗糖尿病的药物中的应用。
10、权利要求的1-2化合物在制备预防和/或治疗脑中风的药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了一类新的香豆素苷类化合物，其合成方法，含有它们的药物组合物，及其作为药物，尤其是治疗肾功能不全药物的用途。该类香豆素苷的结构式为R＝Ac或H。本发明合成方法简单，合成成本低，通过活性评价，结果显示它们具有明显的治疗肾功能不全、高血压、糖尿病和脑中风的作用。
文档编号A61P3/00GK101397315SQ200710122239
公开日2009年4月1日 申请日期2007年9月24日 优先权日2007年9月24日
发明者张东明, 陈晓光, 穆丽华, 李洪燕, 杨敬芝 申请人:中国医学科学院药物研究所