专利名称：雷洛昔芬类化合物在制备防治良性前列腺增生症药物中的应用的制作方法
雷洛昔芬类化^E制备防治良性前列腺增生症药物中的应用
駄领域
本发明涉及雷洛昔微化合鹏制备防治良性前列腺增生症药物中的細。属于医药领域。背景駄3
良性前列腺增生症(BPH)是^男性泌尿外科最常见的疾病之一。其组织学特征^分为5
种类型，即基质增生、纤维肌肉增生、肌肉增生、纤维腺瘤增生和纤维肌肉腺瘤增生。其中以纤
纟tl/l肉腺瘤增生最为常见。
多年来医学界一致公认^:及有功能的辜丸是导致BPH的两大因素。ifi^来^l^多的研究
表明，体内嫩雄麟比例增高，雌麟^^增强参与了前列腺腺体的自稳调节和间质增生的形成。
雌麟的生物学效棘着很强的组纷细胞特异性。如，处于相同麟水平的^W境中， 乳腺组织中的上皮细胞发生增殖癌变，而基质中的间质纤维母细胞则多不发生發变，前列腺增 姓要发生占前列腺^l只5-10%的移行区，而前列&鶴只发生在前列腺的夕卜周区。
雌麟在雌麟受体的介导下Mil基因组^娘和非基因组^娘发媒生物学功能。雌髓受 体主要有两种亚型，即雌 受体(1和雌 受体卩。有雌^^受体a和雌,受体P特异性配 体和^剂;还有一类配#^有混合激动齐鹏抗剂活性的化^#1可以与帷 受体高亲和力结合， 但其作用又不同刊顿雌,药物(如ICI 182,780)，在有些组织中有类雌,作用，在有些组织 中又可拮抗雌激素活性。人们将它们^^为选择性維麟受体调节剂(selective estrogen receptor modulator, SERM)o雌麟受体选择性调节剂他莫西芬舰乳月總细胞具有一定的綱鄉顿 子宫内膜细胞却发M促增殖的作用，以致有引发子宫内膜癌的报道。雷洛昔芬由于它在骨质代 谢方面具有拟雌麟的作用，拍临床上较为成熟的应用为治疗女性乡俊2后骨质疏松；而其在子宫
和乳腺组织中却呈现拮抗雌髓作用，即抑制乳腺上皮和子宫内膜增生。但迄今为止，尚无雷洛 昔芬类化，具有防治前列腺增生症的研究报道。
发明内容
本发明目的是提供雷洛昔芬类化合物在制备防治良性前列腺增生症等相关疾病药物中的应
用。
本发明戶，的雷洛昔芬类化^tf选自盐酸雷洛昔芬。具有^t雌二醇诱导前列腺增生的作用。
本发明用MTT方法检测雷洛昔芬类化^W雌二醇弓胞的前列腺间质细胞增殖的離作用。 用雌/雄,诱导去势大鼠前列腺间质增生的实验动辦莫型，检测雷洛昔芬类化合物对前列fl泉增生 的防治作用。实验结果显示盐酸雷洛昔芬对雌二醇诱导的前列腺间质细胞增殖有明显的拮抗作 用；倉辦腿著的斷氐大鼠前列腺腺鹏围的平滑鹏鹏的厚度(".01 )，具有拮抗雌二醇诱 导的前列腺增生的作用。
图1为实施例2中正常组大鼠前列膨且织的HE染色照片(100X);
图2为实施例2中對虫添加嫩維麟组大鼠前列腺组织的HE mm片(100 X);
图3为实施例2中雌/維^*+{氐浓麟酸雷洛昔芬组大鼠前列腺组织的HE染色照片(100 X);
图4为实施例2中lt/維^m+中浓麟麟洛昔芬乡狀鼠前列腺组织的HE染色照片(100 X);
图5为实施例2中lttl/緞麟+高浓mb麟洛昔芬组大鼠前列腺组织的HE染色照片(100X);
^jl例l證^*翻腿^ 洛昔芬对*|11醇引起臓列腺间质细鹏殖的影响
将体外培养的前列腺间质细鹏WPMY-1置于24 L板中，密度为2X 1()4个细膨0.5mL培养 液。在37。C C02培,中培养。细胞贴壁24小时后，向孔板中加入500ul分别含有10^M、 1(T7M 和10、的盐酸雷洛昔芬和10—7M雌二醇(E2)的培养液。加药48小时后向每孔加入100 u LMTT 溶液。将加有MTT溶液的培^^^A37X:， CQ2培鎌中温育2小时。^M微镜下可见紫色沉 淀物。小心吸去:1§ 。在銜L中加入0.2mLDMSO溶液，轻轻振动使其充分溶解。4梅孑Lt咅养 液分别吸到酶标仪专用96孔板中，测其吸鹏A570nm。实验繊以均数士标m^(x士s)^^,采 用SPSS 10.0软fm，进行方散析^^显著性检验。
实验结果标，盐酸雷洛昔芬具有拮M二醇弓胞的前列腺间质细胞增殖的作用(;k0.05)。 表1为测得的吸光度值。表l
ii 吸舰
正常对照组 0.323±0.210
10-7ME2 0.417±0.015
10^M盐酸雷洛昔》E2 0.347±0.013*
1(T7M盐酸雷洛昔^"E2 0.320±0.015*
10、盐酸雷洛昔》E2 0.293±0.030*
*p<0.05与10—7ME2组相比
鄉例2盐麟洛昔^lt/^^导去势大鼠前列腺间鹏生^^^的糊
盐酸雷洛昔芬(氺成苏州制辦限公司)，嫩維 ^溶液配方为丙酸睾釅±1^液(天津 氨基酸有限公司)，苯甲酸雌二麟±#液(天津^^織酸有限公司)，以就油配制嫩雄麟 比例为l: IOO的混合液，其中苯甲酸雌二瞎ilt液浓度固定为100昭/mL。
将40只Wistar雄'駄鼠鹏性饲l^周。大鼠随机分为5组，每组动物数为8只，分别为正 常组、與虫添加嫩雄麟组、嫩繪麟+^^度盐酸雷洛昔芬组、,維^m+中浓度盐酸雷洛昔芬 组和禱麟+高浓度盐鶴洛昔芬组。
正常组进行假手术，麻醉后无菌割牛下逐层切开大鼠阴囊 、，组织、提睾肌，牵拉睾 丸，然后送回繊组织内，缝合舰。其余4组行去辨术，麻醉后切开大鼠阴M^、繊组 织、提睾肌，暴露睾丸，摘除双侧睾丸和附睾，结扎辦罱，彻底止血，然后银缝合，对皮后， 生 水棉，净阴囊外《。去势后正常饲养21天后开^^药。正常组每曰皮下皿5^油 0.1mL/300g体重，嫩雄^a每日皮下激E2/T混合液0.1mL/300g体重，其余HS每曰皮下注 射E2/T混合液0.1mU300g体重，同时MK^f不同浓度的盐酸雷洛昔芬溶液，驗给药17天。 最后一次给药24小时后对大鼠称重，处死，剖开腹腔摘取前列腺，10%^1尔马林固定，HE染色， 测量并计算指标为腺泡周围平滑肌层的厚度，实验数据以均数土标准尊X土s)标，采用SPSS 10.0 软件包，进行方差分析膽异显著性检验。
实验结果表明，大鼢掛嫩維麟17雜前列腺腺泡周围平滑鹏鹏厚度与正常组相比
明显增厚(".Ol)，同时激盐酸雷洛昔芬的低、中、高三个剂影且，會腿著抑制大鼠前列腺间 质增生(p<0.05)。表2为各组大鼠前列腺腺泡周围平滑鹏鹏厚度的统计结果。
表2
组别平滑肌厚度(叉士s)，单位拜
正常组3.205±0.235
斜虫添力[ 魏6.955±0.790*
iHM素^S^m洛昔芬组0.25mg/kg5.515±0.628*
il/^(素+中^^M洛昔芬组0.5mg/kg4.870±0.806**
SM素+高離SSiW洛昔芬组0.75m^kg4.15歸.557**
与正常组比较，#/xo.oi;与单独添加嫩雄^mta比较，><o.o5 W/Ko.oi
权利要求
1.雷洛昔芬类化合物在制备防治良性前列腺增生症相关疾病药物中的应用。
2、 根据权利要求i戶;M的应用， 征在于，戶/M的雷洛昔，化^tJ选自盐酸雷洛昔芬。
3、 根据权利要求l所述的应用， 征在于，皿的雷洛昔，化，具有拮抗雌二醇诱导 前列腺增生的作用。
全文摘要
本发明属于医药领域，具体公开了雷洛昔芬类化合物在制备防治良性前列腺增生症药物中的应用。通过细胞和动物模型实验的验证，发现雷洛昔芬类化合物对前列腺间质细胞的增殖有明显的抑制作用，并且能够拮抗雌二醇对间质细胞的促增殖作用；对雌/雄激素诱导去势大鼠前列腺间质增生的病理改变有明显的治疗和改善作用。
文档编号A61P13/00GK101366716SQ20081015233
公开日2009年2月18日 申请日期2008年10月15日 优先权日2008年10月15日
发明者琚 张, 杜小玲, 睿 杨, 杨占坡, 石建党, 马洪顺 申请人:南开大学