一种无定型组蛋白去乙酰酶抑制剂,及制备方法和用途
【专利摘要】本发明涉及一种无定型组蛋白去乙酰酶抑制剂NK-1，及制备方法和用途，所述无定型的制备方法操作简单，易于工业化，且安全性高。NK-1。
【专利说明】一种无定型组蛋白去乙酰酶抑制剂，及制备方法和用途
【技术领域】
[0001]本发明属于药物【技术领域】，具体地，涉及一种无定型组蛋白去乙酰酶抑制剂，及制备方法和用途。
【背景技术】
[0002]现有的临床研究和药理研究表明，HDAC是治疗许多疾病的(潜在)靶点，这些疾病包括:癌症，心血管疾病，免疫类疾病和神经退行性疾病等。临床前研究表明，组蛋白去乙酰化酶抑制剂可选择性地杀死癌细胞，并且和许多的抗癌药物有很好的增效作用。2006年十月，由美国默克公司研发的辛二酰苯胺异羟肟酸成为了第一个获准的HDAC靶向药物。
[0003]专利W02011/003365 Al公开了点击化学合成的具有分支结构的组蛋白去乙酰酶抑制剂，其中包括了化合物NK-1，活性测试结果表明，化合物NK-1能抑制去乙酰酶，而且对癌细胞显示出较强的抑制作用。
[0004]NK-1
但其中没有讲述化合物NK-1晶型的问题，目前未见关于化合物NK-1晶型方面的报道。本发明提供了无定型NK-1，及制备方法和用途。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于提供一种无定型组蛋白去乙酰酶抑制剂NK-1，及制备方法和用途。
[0006]NK-1
无定型NK-1具有如下特征:
在X-射线粉末衍射分析中呈一无衍射峰(2 Θ )的晕圈图。
[0007]无定型NK-1的制备方法，具体制备方法有三种:
方法一，冷冻干燥，可以为单一溶剂也可为混合溶剂:水、甲醇、甲酸、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、仲丁醇、叔丁醇、正戊醇、3-甲基1- 丁醇、乙腈、乙酸、乙醚、丙酮、乙二醇、甲酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸甲酯、乙酸异丁酯、乙酸异丙酯、异丙醚、叔丁基甲醚、丁酮、甲基异丁基酮、DMF、DMS0、四氢呋喃、氯苯、氯仿、环己烷、1，2-二氯乙烯、1、4_ 二氧六环、2-甲氧基乙醇、2-乙氧基乙醇、甲酰胺、正己烷、正庚烷、甲基丁基酮、甲基环己烷、N-甲基吡咯烷酮、硝基甲烷、吡啶、四氢噻吩、四氢化萘、1，1，2-三氯乙烯、甲苯、二甲苯、异丙基苯；
方法二，打浆，可以为单一溶剂也可为混合溶剂:水、甲醇、甲酸、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、仲丁醇、叔丁醇、正戊醇、3-甲基1-丁醇、乙腈、乙酸、乙醚、石油醚、丙酮、乙二醇、甲酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸甲酯、乙酸异丁酯、乙酸异丙酯、异丙醚、叔丁基甲醚、丁酮、甲基异丁基酮、DMF、DMS0、四氢呋喃、氯苯、氯仿、环己烷、1，2-二氯乙烯、1、4_ 二氧六环、2-甲氧基乙醇、2-乙氧基乙醇、甲酰胺、正己烷、正庚烷、甲基丁基酮、甲基环己烷、N-甲基吡咯烷酮、硝基甲烷、吡唆、四氢噻吩、四氢化萘、1，1，2_三氯乙烯、甲苯、二甲苯、异丙基苯;
方 法三，研磨。
[0008]无定型NK-1用作药物。
[0009]无定型NK-1用作治疗和预防癌症的药物。
[0010]无定型NK-1的药物制剂。
[0011]无定型NK-1的药物制剂的制备方法，其包括将权利要求1的化合物与生理可接受赋形剂和适当时其他添加剂或辅料一起制成适于给药的形式。
[0012]无定型NK-1在制备治疗和预防癌症的药物制剂中的用途。
[0013]无定型NK-1具有如下特征:
在X-射线粉末衍射分析中呈一无衍射峰(2 Θ )的晕圈图。
[0014]其X-射线粉末衍射谱图见图1。
[0015]
【专利附图】
【附图说明】
[0016]本发明申请中包括的附图是说明书的一个构成部分，附图与说明书和权利要求一起用于说明本发明的实质内容，用于更好地理解本发明。
[0017]图1为化合物NK-1的X-射线粉末衍射谱图。
[0018]
【具体实施方式】
[0019]为了理解本发明，下面以实施例进一步说明本发明，但不意于限制本发明的保护范围。
[0020]本发明的目的在于提供一种无定型组蛋白去乙酰酶抑制剂NK-1，及制备方法和用途。
[0021]NK-1
无定型NK-1具有如下特征:
在X-射线粉末衍射分析中呈一无衍射峰(2 Θ )的晕圈图。
[0022]无定型NK-1的制备方法，具体制备方法有三种:
方法一，冷冻干燥，可以为单一溶剂也可为混合溶剂:水、甲醇、甲酸、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、仲丁醇、叔丁醇、正戊醇、3-甲基1- 丁醇、乙腈、乙酸、乙醚、丙酮、乙二醇、甲酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸甲酯、乙酸异丁酯、乙酸异丙酯、异丙醚、叔丁基甲醚、丁酮、甲基异丁基酮、DMF、DMS0、四氢呋喃、氯苯、氯仿、环己烷、1，2-二氯乙烯、1、4_ 二氧六环、2-甲氧基乙醇、2-乙氧基乙醇、甲酰胺、正己烷、正庚烷、甲基丁基酮、甲基环己烷、N-甲基吡咯烷酮、硝基甲烷、吡啶、四氢噻吩、四氢化萘、1，1，2-三氯乙烯、甲苯、二甲苯、异丙基苯；
方法二，打浆，可以为单一溶剂也可为混合溶剂:水、甲醇、甲酸、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、仲丁醇、叔丁醇、正戊醇、3-甲基1-丁醇、乙腈、乙酸、乙醚、石油醚、丙酮、乙二醇、甲酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸甲酯、乙酸异丁酯、乙酸异丙酯、异丙醚、叔丁基甲醚、丁酮、甲基异丁基酮、DMF、DMS0、四氢呋喃、氯苯、氯仿、环己烷、1，2-二氯乙烯、1、4- 二氧六环、2-甲氧基乙醇、2-乙氧基乙醇、甲酰胺、正己烷、正庚烷、甲基丁基酮、甲基环己烷、N-甲基吡咯烷酮、硝基甲烷、吡唆、四氢噻吩、四氢化萘、1，1，2_三氯乙烯、甲苯、二甲苯、异丙基苯；
方法三，研磨。
[0023]无定型NK-1用作药物。
[0024]无定型NK-1用作治疗和预防癌症的药物。
[0025]无定型NK-1的药物制剂。
[0026]无定型NK-1的药物制剂的制备方法，其包括将权利要求1的化合物与生理可接受赋形剂和适当时其他添加剂或辅料一起制成适于给药的形式。
[0027]无定型NK-1在制备治疗和预防癌症的药物制剂中的用途。
[0028]无定型NK-1具有如下特征:
在X-射线粉末衍射分析中呈一无衍射峰(2 Θ )的晕圈图。
[0029]其X-射线粉末衍射谱图见图1。
[0030]实施例1:化合物NK-1 ( 即为化合物H)的制备:
步骤一:合成化合物C
EDC 的盐酸盐(287 mg, 1.5 mmol), 2 一氛基苯酌 Dl (131 mg, 1.2 mmol) , HOBt(270 mg, 2.0 mmol)和B (217 mg, I mmol)于室温下加入到5 mL DMF溶剂中，然后加入三乙基胺(I 44 μ L,l.0 mmol)。反应在室温下搅拌I小时。反应的混合物中加入25 mL乙酸乙醋，然后用25 mL IM的盐酸溶液，25 mL饱和碳酸氢钠溶液，和25 mL饱和氧化纳水溶液依次洗涤。有机相溶液用无水硫酸镁干燥后，减压蒸除溶剂。所得粗产物使用硅胶柱分离(流动相:石油醚/乙酸乙醋=5/1)，得到黄色固体产品C 275 mg (分离产率90% )。
[0031]步骤二:合成化合物D
在室温下，将酰胺C (100 mg),三苯基磷(206 mg,0.79 mmol)和4A分子筛(4g/mmolC)溶于4 mL四氢呋喃，搅拌I小时，然后温度降低至O °C，并滴加DIAD (0.16 mL，0.79mmol)的四氢呋喃(I mL)溶液。反应液的温度逐渐升至室温，并继续搅拌8个小时。减压旋蒸除去溶剂，然后加入乙醚(5 mL)，并在室温下搅拌I小时。过滤，蒸除溶剂，使用硅胶柱分离(流动相:石油醚/乙酸乙醋=15/1)得到白色固体D 79 mg,(分离产率74% )步骤三:合成化合物E
将D (290 mg, I mmol)的二氯甲烷(10 mL)溶液冷却至O °C，加入催化量的三氟乙酸，
让温度逐渐升至室温，持续搅拌直至原料D消失。然后，反应液用饱和碳酸氢钠溶液洗涤。所得到的有机相溶液待用。
[0032]在另一个反应瓶中，加入刚制备的TfN3 (3 mmo I)试剂的二氯甲烷(10 mL)溶液和催化量的硫酸铜固体和碳酸纳溶液。将前述的有机溶液加入。加入甲醇，直至水相和有机相互相融合为一相溶液。在室温下搅拌过夜。于减压下旋蒸除去溶剂，然后加入30 mL的二氯甲烷溶剂，并用水(30 mL X 3)洗涤，干燥后减压下旋蒸除去溶剂，使用硅胶柱分离(流动相:石油醚/乙醚=20/1)得到无色液体E 165 mg (分离产率80% )。
[0033]步骤四:合成化合物G
白色固体F(1 mmol)溶于20 mL四氢呋喃中，在这个溶液中，顺序加入188 mg (1.3mmol)叠氮化合物 E 350 mg (I mmol)催化剂 P (OEt) 3CuI 和 0.33 mL (2 mmo I)的二异丙基乙胺。在室温下搅拌，反应过夜，并用TLC板检验反应完全。减压蒸馏除去溶剂，残余的固体用100 mL的二氯甲烷和100 mL 1%的硫酸铜溶液分离。水相再用100 mL的二氯甲烷萃取两次。混合的二氯甲烷用无水硫酸钠干燥，然后减压蒸馏除去二氯甲炕，过硅胶柱(展开剂:甲醇:二氯甲烷=1:100)纯化产物，得到325 mg白色固体G (分离产率72%)。
[0034]步骤五:合成化合物H
在含有20 mL 二氯甲烷的圆底烧瓶中，顺序加入200 mg GU mL(二氯甲烷体积的5%)的三氟乙酸和0.3 mL的三异丙基硅烷。混合物在室温下搅拌，并用TLC板检测反应的程度。反应完全后，将反应混合物溶于50 mL乙睛中，并用DOWEX MARATHONE WBA阴离子交换树脂中和。树脂用25 mL的乙腈洗涤两次。混合的乙腈减压蒸馏得到固体。用C-18反相柱(展开剂冰:乙腈=5:广1:1)纯化产物得到白色的固体120 mg。
[0035]1H NMR (400 MHz, DMS0-d6) δ 10.80 (br, s, 1H)，9.10 (br, s, 1H)，
8.66 (s, 1H), 7.82 (d, J = 7.9 Ηζ,ΙΗ), 7.76 (d, J = 7.4 Hz)，7.39 7.48 (m,3Η), 6.65 (d, J= 15.7 Hz), 6.11 (d, J = 9.2 Hz, 1H)，2.88 2.97 (m, 1H)，
1.03 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.86 (d, J = 6.6 Hz, 3H) ; 13C NMR (100 MHz, DMS0_d6)δ 162.3, 161.6, 150.1, 143.3， 139.9， 126.6，126.1, 125.0，124.7，120.2，120.1, 111.2, 63.4, 31.4, 19.0, 18.3.HRMS( ESI)计算值 C16H16N503 [Μ H]326.1259;测量值 326.1265.实施例2:无定型NK-1的制备
下列实施例所采用的分析仪器为下列型号:X-ray:CuKa 40 kv 100 mA。
[0036]实例一:
取化合物H 1.0 g，加入500 mL乙腈与水的混合溶液(比例:1:1)，搅拌，完全溶解至澄清，得到的溶液使用冷冻干燥机处理，48h后得到无定型NK-1。
[0037]实例二:
取化合物H l.0g,加入20 mL乙腈搅拌至完全溶解，使用机械搅拌剧烈搅拌，缓慢加入蒸馏水1000 mL，析出大量固体，加水完毕后，剧烈搅拌24小时打浆，打浆结束后，静置沉淀24小时，过滤，真空干燥，得到无定型NK-1。
[0038]实例三:
将化合物H直接加入20 mL乙腈与1000 mL蒸馏水的混合液体，剧烈搅拌24小时打浆后，静置沉淀24小时，过滤，干燥，也可得到无定型NK-1。
[0039]实例四:
化合物H的粗品1.0 g,加入研钵，充分研磨、粉碎，得到无定型NK-1。
[0040]本发明提供的晶型和方法已经通过具体的实施例进行了描述。本领域技术人员可以借鉴本发明的内容适当改变原料、工艺条件等环节来实现相应的其它目的，其相关改变都没有脱离本发明的内容，所有类似的替换和改动对于本领域技术人员来说是显而易见的，都被视为包括在本发明的范围之内。
【权利要求】
1.一种无定型组蛋白去乙酰酶抑制剂NK-1,
2.权利要求1所述的无定型NK-1的制备方法，具体制备方法有三种: 方法一，冷冻干燥，可以为单一溶剂也可为混合溶剂:水、甲醇、甲酸、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、仲丁醇、叔丁醇、正戊醇、3-甲基1- 丁醇、乙腈、乙酸、乙醚、丙酮、乙二醇、甲酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸甲酯、乙酸异丁酯、乙酸异丙酯、异丙醚、叔丁基甲醚、丁酮、甲基异丁基酮、DMF、DMS0、四氢呋喃、氯苯、氯仿、环己烷、1，2-二氯乙烯、1、4_ 二氧六环、2-甲氧基乙醇、2-乙氧基乙醇、甲酰胺、正己烷、正庚烷、甲基丁基酮、甲基环己烷、N-甲基吡咯烷酮、硝基甲烷、吡啶、四氢噻吩、四氢化萘、1，1，2-三氯乙烯、甲苯、二甲苯、异丙基苯； 方法二，打浆，可以为单一溶剂也可为混合溶剂:水、甲醇、甲酸、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、仲丁醇、叔丁醇、正戊醇、3-甲基1-丁醇、乙腈、乙酸、乙醚、石油醚、丙酮、乙二醇、甲酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸甲酯、乙酸异丁酯、乙酸异丙酯、异丙醚、叔丁基甲醚、丁酮、甲基异丁基酮、DMF、DMS0、四氢呋喃、氯苯、氯仿、环己烷、1，2-二氯乙烯、1、4_ 二氧六环、2-甲氧基乙醇、2-乙氧基乙醇、甲酰胺、正己烷、正庚烷、甲基丁基酮、甲基环己烷、N-甲基吡咯烷酮、硝基甲烷、吡唆、四氢噻吩、四氢化萘、1，1，2_三氯乙烯、甲苯、二甲苯、异丙基苯； 方法三，研磨。
3.权利要求1要求的化合物用作药物。
4.权利要求1要求的化合物用作治疗和预防癌症的药物。
5.含有权利要求1的化合物的药物制剂。
6.权利要求5的制剂的制备方法，其包括将权利要求1的化合物与生理可接受赋形剂和适当时其他添加剂或辅料一起制成适于给药的形式。
7.权利要求1的化合物在制备治疗和预防癌症的药物制剂中的用途。
【文档编号】A61P35/00GK103613585SQ201310655880
【公开日】2014年3月5日 申请日期:2013年12月5日 优先权日:2013年12月5日
【发明者】邱传将 申请人:天津尚德药缘科技股份有限公司