作为cdk抑制剂的吡咯并嘧啶化合物的制作方法
【专利摘要】公开的化合物涉及蛋白激酶相关障碍的治疗和疗法。对这些化合物也有用于癌症、移植排异和自身免疫性疾病的一种或多种症状的治疗或预防或改善的需要。另外，有使用本文提供的化合物用于调控蛋白激酶例如CDK1、CDK2、CDK4、CDK5、CDK6、CDK7、CDK8和CDK9活性的方法的需要。
【专利说明】作为CDK抑制剂的吡咯并嘧啶化合物
[0001 ] 本申请是中国专利申请200980141314.0的分案申请，原申请的申请日是2009年8月20日，名称是“作为CDK抑制剂的吡咯并嘧啶化合物”。
[0002]背景
[0003]近年来对酶结构和与疾病有关的其它生物分子的更好理解为寻找新治疗剂提供了极大的帮助。已经被广泛研究的一类重要的酶是蛋白激酶。
[0004]蛋白激酶构成了负责控制细胞内多种信号转导过程的一大族结构相关的酶。(Hardie, G.和 Hanks, S.The Protein Kinase Facts Book, I and II, Academic Press,San Diego, Calif.:1995)。由于其结构和催化功能的保守性，认为蛋白激酶是由一种共同的祖先基因进化来的。几乎所有的激酶都包含相似的250-300个氨基酸催化结构域。根据其磷酸化的底物(例如，蛋白-酪氨酸、蛋白-丝氨酸/苏氨酸、脂类等)，可以将激酶分成几类。已经确定了通常与这些激酶族的各族相应的基序(参见例如，Hanks, S.K.，Hunter, T.，FASEB J.1995，9，576-596 ;Knighton 等人，Sciencel991，253，407-414 ；Hiles等人，Celll992，70，419-429 ；Kunz 等人，Celll993，73，585-596 ；Garcia-Bustos 等人，EMBOJ.1994,13,2352-2361)。
[0005]一般而言，蛋白激酶通过影响磷酰基从三磷酸核苷向参与信号发放途径的蛋白受体转移来介导细胞内信号发放。这些磷酸化事件发挥调节或调控靶蛋白生物学功能的分子开/关的开关作用。这些磷酸化事件最后触发了对各种细胞外刺激和其它刺激的应答。该类刺激的实例包括环境和化学应激信号(例如，渗透压休克、热休克、紫外线辐射、细菌内毒素和H2O2)、细胞因子(例如，白介素-1 (IL-1)和肿瘤坏死因子-α (TNF-α ))和生长因子(例如，粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和成纤维细胞生长因子(FGF))。细胞外刺激可影响一种或多种与细胞生长、迁移、分化、激素分泌、转录因子活化、肌肉收缩、葡萄糖代谢、蛋白合成控制和细胞周期调控有关的细胞应答。
[0006]许多疾病都与上述蛋白激酶介导的事件所触发的细胞应答异常有关。这些疾病包括但不限于自身免疫性疾病、炎性疾病、骨病、代谢疾病、神经病学和神经变性疾病、癌症、心血管疾病、变态反应和哮喘、阿尔茨海默病和与激素有关的疾病。因此，人们在医药化学方面进行了大量努力来寻找可有效作为治疗剂的蛋白激酶抑制剂。
[0007]哺乳动物细胞周期的开始、进行和结束受各种对细胞生长很关键的细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)复合物调控。这些复合物至少包含催化(CDK本身)和调控(细胞周期蛋白)亚基。对于细胞周期调控而言一些更重要的复合物包括细胞周期蛋白A(CDK1-也称为cdc2，和CDK2)、细胞周期蛋白B1-B3(CDK1)和细胞周期蛋白D1_D3(CDK2、CDK4、CDK5、CDK6)、细胞周期蛋白E(CDK2)。这些复合物各自参与细胞周期的特定阶段。然而，并非所有⑶K族成员均仅参与细胞周期控制。因此，⑶K7、⑶K8和⑶K9参与转录的调控，⑶K5在神经元和分泌细胞功能中起作用。
[0008]CDK的活性通过与其它蛋白的短暂缔合和通过其细胞内定位的改变而在翻译后被调控。肿瘤发生与CDK及其调控物的基因改变和失控紧密相关，这表明CDK的抑制剂可用于抗癌治疗。实际上，早期的一些结果表明变异细胞和正常细胞在其对例如细胞周期蛋白A/CDK2的需要方面有差异，研制没有用常规细胞毒性药和细胞抑制药所观察到的一般宿主毒性的新抗肿瘤药是可能的。虽然与细胞周期有关的CDK的抑制显然可用于例如肿瘤学应用中，但是对于RNA聚合酶-调控的CDK的抑制而言可能并非如此。另一方面，最近表明⑶K9/细胞周期蛋白T功能的抑制与防止HIV复制有关，因此，新⑶K生物学的发现继续开拓了 CDK 抑制剂的新治疗适应症(Sausville, E.A.Trends Molec.Med.2002，8，S32-S37)。
[0009]CDK的功能是磷酸化并因此活化或灭活某些蛋白，包括例如视网膜母细胞瘤蛋白、核纤层蛋白、组蛋白Hl和有丝分裂纺锤体的组分。CDK介导的催化步骤包括从ATP到大分子酶底物的磷酸转移反应。已经发现多组化合物(在例如Fischer, P.M.Curr.0pin.DrugDiscovery Dev.2001，4，623_634中进行了综述)凭借CDK特异性ATP拮抗作用而具有抗增殖性质。
[0010]Cdk/细胞周期蛋白复合物活性在分子水平上的介导要求一系列的刺激与抑制磷酸化或去磷酸化事件。Cdk磷酸化是由一组cdk活化酶(CAK)和/或激酶,例如weel、Mytl和Mikl进行的。去磷酸化是由磷酸酶例如cdc25 (a&c)、pp2a或KAP进行的。
[0011]Cdk/细胞周期蛋白复合物活性可进一步地由两族内源性细胞蛋白抑制剂调控:Kip/Cip族或INK族。INK蛋白特异性地与cdk4和cdk6结合。pl6ink4(也称作MTSI)在大量的原发癌中是变异或缺失的潜在的肿瘤抑制基因。Kip/Cip族包含例如p21apl’Wafl、p27Kipl和p57kip2的蛋白。如前面讨论的p21是由p53诱导的并且能够灭活cdk2/细胞周期蛋白(E/A)和cdk4/细胞周期蛋白(D1/D2/D3)复合物。在乳腺癌、结肠癌和前列腺癌中已观察到非典型的低水平的P27表达。相反地细胞周期蛋白E在实体肿瘤中的过度表达已显示与差的患者预后相关。细 胞周期蛋白Dl的过度表达与食管癌、乳腺癌、鳞状细胞癌和非小细胞肺癌相关。
[0012]以上已概括描述了 Cdk及其相关蛋白在增殖细胞中统筹与驱动细胞周期中的关键作用。还描述了 Cdk起到关键作用的一些生化途径。在一般的cdk或特异性cdk上使用靶向治疗，用于增殖性障碍例如癌症治疗的单一疗法的开发因此是潜在地十分需要的。可以想象Cdk抑制剂也可以用于治疗其他病症，例如病毒性感染、自身免疫性疾病和神经变性疾病等。在前面描述的疾病治疗中，当Cdk靶向治疗与现有的、新的治疗药的组合治疗中使用时也可提供临床益处。Cdk靶向抗癌治疗可潜在地具有比许多当前的抗肿瘤药更多的优点，因为它们不直接与DNA相互作用，并且因此应当能够降低继发的肿瘤发展的风险。
[0013]因此，仍然需要寻找用于治疗人类疾病的新治疗剂。相应地，十分需要开发蛋白激酶如 CDK1、CDK2、CDK4、CDK5、CDK6、CDK7、CDK8 和 CDK9 的抑制剂。
[0014]发明概述
[0015]仍然需要用于与蛋白激酶有关的障碍的新治疗和疗法。还需要可用于治疗或预防或改善癌症、移植物排斥和自身免疫性疾病的一种或多种症状的化合物。此外，还需要用本文所提供的化合物调节蛋白激酶如⑶K1、⑶K2、⑶K4、⑶K5、⑶K6、⑶K7、⑶K8和⑶K9活性的方法。在一方面，本发明提供了式I化合物:
[0016]在一个实施方案中，本发明包括式I化合物或其药学上可接受的盐，其中:
[0017]
【权利要求】
1.式I化合物或其药学上可接受的盐:
2.根据权利要求1的式I化合物或其药学上可接受的盐，其中R3为H、甲基、乙基、丙基、异丙基、CH2OH 或 CH2CH2OH。
3.根据权利要求1的式I化合物或其药学上可接受的盐，其中Y为以下基团的部分，
4.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中m是2且η是I。
5.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R8是甲基、乙基、丙基、丁基、氧代，或两个R8可形成桥接的基团。
6.根据权利要求1-5的任意一项的化合物或其药学上可接受的盐，其中L为价键。
7.选自以下的化合物或其药学上可接受的盐: 7-环戊基-2- [5- ((R) -3-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-2-基氨基]-7Η-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺；7-环戊基-2- [5- ((S) -3-甲基哌嗪-1-基)-吡啶-2-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； 7-环戊基-2-[5-(3-甲基哌嗪-1-基)-吡啶-2-基氨基]-7H-吡咯并[2，3_d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； 7-环戊基-2- {5- [4- (3-羟基丙基)-哌嗪-1-基]-吡啶-2-基氨基} -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； 7-环戊基-2- {5- [4- (2-羟基-乙基)-哌嗪-1-基]-吡啶-2-基氨基} -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； 7-环戊基-2- {5- [4- ((S) -2，3- 二羟基丙基)-哌嗪-1-基]-吡啶_2_基氨基} -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； 7-环戊基-2- {5- [4- (2-羟基-1-甲基乙基)-哌嗪-1-基]-吡啶-2-基氨基} -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； 7-环戊基-2- {6- [4- (2 -羟基乙基)-哌嗪-1-基]-哒嗪-3-基氨基} -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； 7-环戊基-2- {5- [4- (2，3- 二羟基丙基)-哌嗪-1-基]-吡啶-2-基氨基} -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； 7-环戊基-2- {5- [4- ((R) -2，3- 二羟基丙基)-哌嗪_1_基]-吡啶_2_基氨基} -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； 7-环戊基-2-[5-(哌嗪-1-羰基)-吡啶-2-基氨基]-7H-吡咯并[2，3d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； 7-环戊基-2-[5-((S)-3-甲基哌嗪-1-基甲基)_吡啶-2-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； 7-环戊基-2- {5- [4-(⑶-2-羟基丙基)-哌嗪-1-基]-吡啶-2-基氨基} -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； 7-环戊基-2- {5- [4- ((R) -2-羟基丙基)-哌嗪-1-基]-吡啶-2-基氨基} -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； 7-环戊基-2-[5-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-吡啶-2-基氨基]-7H-吡咯并[2，3d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； 7-环戊基-2- [5- (4-异丙基-哌嗪-1-羰基)-吡啶-2-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； 7-环戊基-2- {5- [4- (4-甲基-戊基)-哌嗪-1-基]-吡啶-2-基氨基} -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； 7-环戊基-2- {5- [4- (2-羟基-2-甲基丙基)-哌嗪-1-基]-吡啶-2-基氨基} -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； 7-环戊基-2- [5- (3，3- 二甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-2-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺；
环戍基-2-[5-(3,8- 二氮杂_双环[3.2.1]羊-3-基甲基)-批卩定~2~基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； 7-环戊基-2-[5-(4-乙基-哌嗪-1-基)_吡啶-2-基氨基]-7H-吡咯并[2，3_d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； .7-环戊基-2-{5-[(R)-4-(2-羟基乙基)-3-甲基-哌嗪-1-基]-吡啶_2_基氨基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； .7-环戊基-2- {5-[⑶-4- (2-羟基乙基)-3-甲基-哌嗪-1-基]-吡啶-2-基氨基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； .7-环戊基-2- {5- [4- (2-羟基乙基)-哌嗪-1-基甲基]-吡啶-2-基氨基} -7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； .7-环戊基-2-{5-[4-(2-乙基-丁基)哌嗪-1-基]-吡啶-2-基氨基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺； .7-环戊基-2-[5-(4-异丁基哌嗪-1-基)-吡啶-2-基氨基]-7H-吡咯并[2，3d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺；和 .7-环戊基-2-{5-[4-(2-甲基-丁基)哌嗪-1-基]-吡啶-2-基氨基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基酰胺。
8.药物组合物，其包含根据权利要求1-7的任意项的化合物或其药学上可接受的盐和可药用载体。
9.组合产品，其包含根据权利要求1-7的任意项的化合物或其药学上可接受的盐和另一个活性剂。
10.根据权利要求1-7的任意项的化合物或其药学上可接受的盐用于制备治疗癌症的药物的用途。
11.根据权利要求10的用途，其中所述的癌症选自乳腺癌、胰腺癌、结直肠癌、肺癌和黑素瘤、肉瘤、白血病、神经胶质瘤、家族性黑素瘤和黑素瘤、套细胞淋巴瘤和非小细胞肺癌。
12.根据权利要求10的用途，其中所述的癌症为膀胱癌、乳腺癌、结肠癌、肾癌、表皮癌、肝癌、肺癌、食道癌、胆囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、宫颈癌、甲状腺癌、鼻癌、头颈癌、前列腺癌或皮肤癌；淋巴系的造血细胞肿瘤；髓系造血细胞肿瘤；甲状腺滤泡癌；源于间质细胞肿瘤；中枢或周围神经系统肿瘤；黑素瘤；精原细胞瘤；畸胎瘤；骨肉瘤；着色性干皮病；角化棘细胞瘤；甲状腺滤泡癌或卡波西肉瘤。
13.根据权利要求12的用途，其中所述的淋巴系的造血细胞肿瘤为白血病、急性淋巴性白血病、慢性淋巴细胞白血病、B-细胞淋巴瘤、T-细胞淋巴瘤、多发性骨髓瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、毛细胞淋巴瘤或伯基特氏淋巴瘤。
【文档编号】A61K31/519GK103788100SQ201410068898
【公开日】2014年5月14日 申请日期:2009年8月20日 优先权日:2008年8月22日
【发明者】G·贝松, C·T·布雷恩, C·A·布鲁克斯, M·S·康格莱夫, C·达格斯汀, G·何, Y·侯, S·霍华德, Y·李, Y·陆, P·莫藤森, T·史密斯, M·孙, S·伍德海德, W·罗纳 申请人:诺华股份有限公司, 阿斯泰克斯治疗有限公司