专利名称:新的ε-戊内酰胺，其药理活性组合物，制备方法和它们的医疗应用的制作方法
本发明涉及一种新的有药理活性的ε-戊内酰胺、它从芸香料黄皮属植物中的分离、所述内酰胺的某些衍生物和它作为药理活性物的应用。本发明亦涉及到含所述内酰胺或其衍生物的药用组合物及它们的制造。
芸香料黄皮属Rutaceae Clausena anicata在非洲某些地区作为民间药物应用(I.Mester等，Planta Medica.32(1)81，1977)。亦曾报道印度黄皮Clausena indica Oliv的粗提取物有心血管活性作用，从五叶黄皮Clausena Pentaphylla分离(TLC)的两种香豆精衍生物，黄皮香豆精A和B(Clausmarins A，B)，在动物试验中显示出解痉活性(Dhan Prakash等，Phytochem.17，1194，1978;Aboo Shoeb等，J.C.S.Chem.Commun.281，1978)。从黄皮属的不同种的根、茎等已分离有约五十种成分。这些成分大部分是香豆精、卡唑和萜的衍生物;到目前仅两种直链羧酸酰胺普报道存在于黄皮植物的叶中(S.R.Johns等，Aust.J.Chem，20，2795，1967;Dhan Drakash等，Indian J.Chem.Sect.B19B(12)，1075，1980)。
现发现了在黄皮Clausena lansium的叶中含一种带有两个苯取代基的ε-戊内酰胺。发现该化合物及其衍生物有多种有价值的药理性质。这些化合物的结构已由其化学衍生物化和光谱数据得以确定。
本发明是指向通式(Ⅰ)的化合物 其中R表示氢或有1至18个碳原子的酰基按照通式(Ⅰ)较好的化合物是其中R表示氢或有1至4碳原子的酰基更好的是那些化合物，其中R代表氢或乙酰基。
本发明亦指向下式化合物的分离
包括下列步骤a)黄皮Clausena lansium的叶用沸水处理，b)在浓缩的水提取液中加稀酸(如Hcl)，c)将上层清液通过一阳离子交换树脂，最好为其H+型的柱子，d)树脂用碱处理，最好为氨水，e)树脂用有机溶剂提取，如醚类、氯仿、二氯甲烷、C1-C6醇的乙酸酯或C2-C6酮，较好是用二乙醚，f)浓缩提取物在硅胶或氧化铝柱上进行色谱分离，用氯仿、二氯乙烷、乙醚或氯仿/甲醇混合液作洗脱剂和g)收集和浓缩在TLC上(硅胶板，CHCl3∶MeOH＝97∶3为洗脱剂)Rf值为0.53的流出液。
上述分离方法得到的粗产品，最好以醇如甲醇或乙醇重结晶。
上述化合物的衍生物可经还原，如对其自身用已知的催化氢化和/或酰化方法来合成。
本发明亦涉及含式(Ⅰ)化合物作为活性成分的药用组合物和药物，及这些组合物的制造。
本发明亦指向式(Ⅰ)化合物在治疗缺氧和遗忘、作为对抗化学毒物的肝保护剂和增进肝脏的解毒功能的应用。
按照本发明，化合物在动物试验中具有显著的大脑缺氧保护和抗遗忘的效用，它比在大脑治疗和促智能剂范围内结构最为相关的化合物吡咯烷醋胺(Piracetam)的效用明显地要强。
即使是在大剂量时动物的行为也无任何显著的改变。缺氧保护作用显然不是由非特异性镇静作用所致，因此，它将会是引起氧需要的减少。式(Ⅰ)化合物的急性毒性发现是非常低的。
按照本发明化合物在试验保肝作用时，能降低Ccl4中毒小鼠的升高的血清转氨酶(SGPT)。
按照本发明其药物组合物可以是下列形式例如，油膏、凝胶、糊剂、霜剂、喷雾剂(包括气雾剂)、洗剂、悬浮剂、活性成分在水或非水稀释剂中的溶液或乳剂、糖浆、颗粒或粉剂。
组合物最好是灭菌的等渗水溶液形式或片剂、胶囊、丸剂和栓剂形式，由本发明的一个化合物单独或与稀释剂混合物组成。
用于药用组合物的稀释剂(如颗粒)，适用于形成片剂、糖衣丸、胶囊和丸剂的包括下列(a)填充剂，如淀粉、糖和硅酸;
(b)粘合剂，如纤维素衍生物、藻酸盐、明胶和聚乙烯吡咯烷酮;
(c)湿润剂，如甘油;
(d)崩解剂，如琼脂、碳酸钙和碳酸氢钠;
(e)吸收促进剂，如季铵化合物;
(f)表面活性剂，如十六烷醇;
(g)吸附载体，如高岭土和皂粘土;
(h)润滑剂，如滑石粉、硬酯酸钙和镁和固体聚乙二醇。
由本发明药用组合物形成的药片、糖衣丸、胶囊和药丸，能持有通常的包衣、包膜和盛保护性基质，它可含有遮光剂。它们可以配成这样的组成，使它们在一定时期内将活性成分仅在或优先在肠道特殊部分释放。包衣，包裹和保护性基质可用例如，多聚物质或蜡制成。
活性成分亦可与一种或多种上述稀释剂一起制成微胶囊包形式。
上述药用组合物或药物的生产可用在该技术中的任何已知方法进行，例如将一种或几种活性成分与一种或几种稀释剂混合形成药用组合物(如颗粒)，再将组合物制成药物(如片子)。
按照本发明药用组合物较好的是含活性成分为总组合物重量的0.1到99.5%，更好为0.5到95%。
本发明药物服用的较好日剂量为活性成分0.001毫克至0.2毫克。
下列实例阐明了本发明。
实例1下式化合物的分离 80千克黄皮Clausena Lansium(Lour)Skeels的干叶与水沸腾。水提取液浓缩至18千克粗糖浆状物。16千克粗糖浆物用0.06N Hcl(80升)处理，上层清液通过一湿H+一型阳离子交换树脂(从48千克Na+型阳离子交换树脂得到)柱。此树脂然后用去离子水洗，用2%NH4OH水(32.2升)处理，最后用二乙醚(60升)提取。糖浆状的乙醚提取液的浓缩物，用装有为其重量20-100倍的硅胶柱反复进行色谱分离，用氯仿作洗脱剂。收集在TLC上Rf＝0.53的浓缩氯仿洗脱液并加以浓缩。所得结晶从甲醇重结晶，得1.15克白色片状结晶，m.p.201.5-202.5℃。
〔α〕18D＝0.000(0.45，甲醇)元素分析 计算值(C18H17NO2) 实测值C% 77，42 77，15H% 6，09 5，98N% 5，02 5，00高分辨质谱 M+＝279.1256IRYVKBrmaxcm-13250(OH)，1660(酰胺-羰基)，1640，(共轭双键)，3080，3040，3020，1590，1490，1465，750，700，690(苯环).
UVλMeOHmaxnm(logε)215(3.68)，295(3.76)H1-NMR(DMSO中);化学位移和归属δppm(J，Hz) 氢3.22(s;3H) NCH33.40-3.80(宽;1H，加D2O后消失) OH4.18(d;1H;J＝10) C4-H4.32(d;1H，J＝10) C3-H6.35(s;1H) C6-H6.90-7.24(m;10H) 芳香-H
13C-NMR在CDCl3中;化学位移和归属碳 ppm2 167.43 74.24 49.56 125.07 34.05 117.01 138.21″ 138.2其余十个芳香碳 125.8-129.4在pd/c为催化剂存在下，化合物2至3大气压下氢处理，它吸收-摩尔氢。
乙酰化上述化合物用乙酸酐酰化得白色结晶性固体，m.p.179-180℃。
元素分析和光谱数据表明产物为上述化合物的乙酸酯。
元素分析计算值 C20H19NO3实测值C% 74.77 74.58H% 5.92 5.90N% 4.36 4.30IR，ν薄膜maxcm-11740(酯 C＝O)，1670(酰胺 C＝O)，1635(双键)，1200(C-O).
MS，m/z(%)321(M+，10)，261(M+-60，100)，233(261-CO，20).
1H-NMR CDCl3中，化学位移和归属δppm(J，Hz) H2.06(s，3H) CH3COO3.24(s，3H) CH3N-4.30(d，J＝5，1H) C4-H5.44(d，J＝5，1H) C3-H6.72(s，1H) C6-H7.10-7.50(m，10H) 芳香氢实例2下式化合物 实例1化合物在甲醇中在3大气压下以10%pd/c为催化剂氢化3.5小时。产物从甲醇重结晶得白色结晶性固体熔点109.5-110.5℃。
IR，νKBrmaxcm-13250(OH)，1630(酰胺 C＝O).
UV，λMeOHmaxnm(logc)255(2.75).
MS m/z(%)281(M+，1)，252(100)，178(8)，165(5)，105(20)，91(40)，77(18)，65(10)，44(80).
1H-NMR CDCl3中化学位移和归属δppm(J，Hz) H2.36(宽峰1H加D2O后消失)OH3.19(s，3H) CH3N-3.51(dd，J＝4，9，1H) C4-H3.68(dd，J＝3，11，1H) C6-H3.91(dd，J＝4，11，1H) C6-H3.50(m，1H) C5-H4.44(d，J＝9，1H) C3-H 乙酰化上述化合物用乙酸酐在吡啶中乙酰化得相应的乙酸酯呈无定形。
IR，ν薄膜maxcm-11750(酯 C＝O)，1665(酰胺 C＝O)，1230(C-O).
高分辨质谱 m/z 324.1632(C20H22NO3，M+1)，263.1273(C18H17NO+)，220.0878(C16H12O+).
1H-NMR CDCl3中，化学位移和归属δppm(J，Hz) H2.02(s，3H) CH3COO-3.12(s，3H) CH3N-3.45-3.85(m，4H) C4-H，C5-H，C6-2H5.65(d，1H，J＝8) C3-H 实例3按照本发明实例1化合物对肝功能的影响。
整个实验都用雄性昆明种小鼠重18-22克。试验化合物悬浮于5%吐温80，并用管灌经口给药。对照组小鼠经同样途径给5%吐温80赋形剂。在体外试验中，化合物溶于二甲基甲酰胺并直接加至温孵混合液中。
肝保护作用小鼠分成几组，对照组给以赋形剂，其它组分别给化合物两次剂量(250毫克/千克)，间隔8小时，在第二次给化合物24小时后，注射10毫克/千克含0.1%Ccl4的植物油，小鼠禁食16小时并断头处死，测定SGPT和肝脂质。一块肝加工切片作病理观察。
如在下面表1中所示，化合物显著地降低用Ccl4中毒的小鼠升高的SGPT。
表1从黄皮Clausenia(Lour)Skeels叶分离的例1化合物(250毫克/4克×2)对Ccl4中毒小鼠(每组9只)SGPT水准的影响。
组别 SGPT单位% P×±SE对照组 1678+261实例1化合物 739+196 ＜0.01实例4实例1化合物在缺氧条件下对大鼠退化性遗忘的影响仪器(39厘米长，21厘米高，和21厘米宽)由两隔室组成，一间(29厘米长)由半透明塑料制成，另一间(10厘米长)涂成黑色，它有一用隔开的金属格栅底部，格栅与一能释放1.6毫安20秒钟的刺激器相连接。
两隔室经过一能关闭的门相连。
雄性大鼠(体重100-120克)分别地置于大隔室内，并让其窥视两隔室3分钟。
然后动物置于小的(黑暗的)隔室，关闭相连接的门，并给以足电刺激，以后动物置于一密封的笼子里，笼内灌以含3.8%氧和96.2%氮的混合气体，使动物暴露于这种缺氧的大气下直至呈现喘息，表示不断发展中的呼吸衰竭(最多15分钟)。
24小时后，大鼠再度置于明亮的隔室。观察时间为3分钟。
一次实验用三组动物进行，每组15只。
A组对照组，不暴露于缺氧下。
B组对照组，第一次训练后接受缺氧。
C组给药组，第一次训练后接受缺氧。
评价动物进入黑暗隔室所需时间以秒计算。两对照组之间的时间差异定为100%(A-B＝100%)。
对照组B和给药组C之间的时间差异以百分率计算(C-B＝X%)。X定为用于衡量受试物质抗遗忘作用的能力。
表2实例1化合物(毫克/千克，口服给药) X(%)100 11%
权利要求
1.通式(Ⅰ)的化合物 其中R代表氢或有1至18碳原子的酰基。
2.按照权利要求
1中的通式(Ⅰ)的化合物，其中R代表氢或有1-4碳原子的酰基。
3.下式化合物
4.下式化合物的分离方法， 此方法由下列步骤组成a)黄皮Clausenia lausium的叶与沸水加热，b)浓缩水提取液中加入稀酸，c)上层清液通过一阳离子交换树脂柱，d)树脂用碱处理，最好用氨水，e)树脂用有机溶剂提取，f)浓缩的提取物在硅胶或氧化铝柱行色谱分离，以氯仿、二氯甲烷或氯仿/甲醇混合液作为洗脱剂，g)收集并浓缩在TLC(硅胶板，CHCl3∶MeOH＝97∶3为洗脱剂)上Rf值为0 53的洗出液。
5.一种药用组合物，含按权利要求
1到3中任一项的化合物为活性成分。
6.一种按权利要求
5的药用组合物的制备方法，其特微在于将按权利要求
1到3中任一项的化合物与稀释剂和/或其它添加剂或辅助剂相混合。
7.按权利要求
1至的任一项的化合物在治疗疾病中的应用。
8.按权利要求
1至3的任一项的化合物在治疗急性和慢性病毒性肝炎、肝中毒、缺氧或遗忘中的应用。
专利摘要
通式(I)的化合物，其中R代表氢或有1至18个碳原子的酰基，从黄皮Clausena lansium的叶中小量分离此新化合物，可用来生产治疗急性和慢性病毒性肝炎、肝中毒、缺氧和健忘症的有用的组合物。
文档编号A61K31/451GK87100377SQ87100377
公开日1987年9月2日 申请日期1987年1月20日
发明者杨明河, 陈延镛, 刘耕陶, 黄量 申请人:拜尔公司, 中国医学科学院导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan