述抗-CD28抗体配体通过所述免疫球蛋 白重链的密码子473处的半胱氨酸缀合至所述颗粒。14. 根据权利要求12或13所述的药物组合物，其中所述HLA配体通过所述免疫球蛋白重 链的密码子473处的半胱氨酸缀合至所述颗粒。15. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述HLA配体包含HLA的胞外结构域，并且 是通过肽或化学连接子连接至所述颗粒的HLA单体，所述肽或化学连接子连接至所述HLA胞 外结构域C-端，并且其中所述HLA任选地是HLA-A2。16. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述HLA配体包含HLA的胞外结构域，并且 是通过一种或多种肽或化学连接子连接至抗-CD28配体的scFv和所述颗粒的HLA单体，并且 其中所述HLA任选地是HLA-A2。17. 根据权利要求1至16中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物是经冻干的。18. -种抗-CD28抗体或其部分，其包含任选具有一种至十五种氨基酸修饰的人IGHV4 重链氨基酸序列，其中至少一个互补决定区(CDR)基于鼠科抗体氨基酸序列。19. 根据权利要求18所述的抗体，其中所述CDR基于小鼠9.3mAb。20. 根据权利要求18或19所述的抗体，其中所述重链是人IGHV4-59种系框架(FW)的变 体。21. 根据权利要求18至20中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含轻链并且所述轻链 包含人IGKV4-01FW的变体。22. 根据权利要求18至21中任一项所述的抗体，其中所述重链在选自1、3、6、37、48、67、 71、73、76、78、82、82a和82c的位置处包含一个或多个鼠科Fw残基。23. 根据权利要求22所述的抗体，其中所述轻链在选自3、4、49、70、85、87和80的位置处 包含一个或多个鼠科Fw残基。24. 根据权利要求18至23中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含恒定区或其部分，并 且所述恒定区任选地是人IgG4的变体。25. 根据权利要求24所述的抗体，其中所述恒定区包含一个或多个铰链稳定突变。26. 根据权利要求25所述的抗体，其中所述铰链稳定突变包括在所述CH链中引入的一 个或多个突变。27. 根据权利要求26所述的抗体，其中引入至所述CH链的所述一个或多个突变包括 S241P〇28. 根据权利要求18至27中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含恒定区并且所述恒 定区包含一个或多个适于化学偶联所述抗体至固体支撑物的突变。29. 根据权利要求28所述的抗体，其中所述一个或多个适于偶联的突变产生未配对的 半胱氨酸。30. 根据权利要求29所述的抗体，其中所述未配对的半胱氨酸是S473C。31. 根据权利要求29或30所述的抗体，其中所述未配对的半胱氨酸提供共价连接至固 体支撑物。32. 根据权利要求18至31中任一项所述的抗体，其中所述固体支撑物是任选地具有可 用于共价键合的官能团的珠粒或颗粒，所述官能团任选地为酯、羧酸、马来酰亚胺、醇。33. 根据权利要求32所述的抗体，其中所述珠粒或颗粒包含选自以下的一者或多者的 聚合物：含环糊精的聚合物，含阳离子环糊精的聚合物，聚（D，L-乳酸-共-羟基乙酸） (PLGA)，聚（己内酯）（PCL)，乙烯-乙酸乙烯酯聚合物(EVA)，聚（乳酸）（PLA)，聚（L-乳酸） (PLLA)，聚(羟基乙酸）（PGA)，聚(L-乳酸-共-羟基乙酸）（PLLGA)，聚(D，L-丙交酯）（H)LA)， 聚（L-丙交酯）（PLLA)，PLGA-b-聚（乙二醇）-PLGA (PLGA-bPEG-PLGA)，PLLA-bPEG-PLLA， PLGA-PEG-马来酰亚胺(PLGA-PEG-mal)，聚(D，L-丙交酯-共-己内酯），聚(D，L-丙交酯_共_ 己内酯-共-乙交酯），聚(D，L-丙交酯-共-PEO-共-D，L-丙交酯），聚（D，L-丙交酯-共-PPO-共-D，L-丙交酯），聚烷基氰基丙烯酸酯，聚氨酯，聚-L-赖氨酸(PLL)，甲基丙烯酸羟丙基酯 (HPMA)，聚乙二醇，聚-L-谷氨酸，聚（羟基酸），聚酸酐，聚原酸酯、聚（酯酰胺），聚酰胺，聚 (酯醚），聚碳酸酯，聚烯烃诸如聚乙烯和聚丙烯，聚亚烷基二醇诸如聚（乙二醇）（PEG)，聚环 氧烷(PEO)，聚对苯二酸亚烷基酯诸如聚(对苯二甲酸乙二酯），聚乙烯醇(PVA)，聚乙烯醚， 聚乙烯酯诸如聚（乙酸乙烯酯），聚卤代乙烯诸如聚（氯乙烯）（PVC)，聚乙烯吡咯烷酮，聚硅 氧烷，聚苯乙烯(PS)，聚氨酯，衍生的纤维素诸如烷基纤维素、羟烷基纤维素、纤维素醚、纤 维素酯、硝基纤维素、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素，丙烯酸的聚合物诸如聚（（甲基)丙烯酸 甲酯）（PMMA)、聚（（甲基)丙烯酸乙酯）、聚（（甲基)丙烯酸丁酯）、聚（（甲基)丙烯酸异丁酯）、 聚（（甲基）丙烯酸己酯）、聚（（甲基）丙烯酸异癸酯）、聚（（甲基)丙烯酸月桂酯）、聚（（甲基） 丙烯酸苯酯）、聚（丙烯酸甲酯）、聚(丙烯酸异丙酯）、聚（丙烯酸异丁酯）、聚（丙烯酸十八烷 基酯）（聚丙烯酸），和其共聚物和混合物，聚二噁烷酮及其共聚物，聚羟基脂肪酸酯，聚富马 酸丙二酯），聚氧化亚甲基，泊洛沙姆，聚（原酸酯），聚（丁酸），聚（戊酸），聚（丙交酯-共-己 内酯），三亚甲基碳酸酯，聚乙烯吡咯烷酮，聚原酸酯，聚磷腈和聚磷酸酯，及两个或更多个 此类聚合物的掺混物和/或嵌段共聚物。34. 根据权利要求18至33中任一项所述的抗体，其包含恒定区，其中所述恒定区包含减 少Fc γ受体结合的一个或多个突变。35. 根据权利要求34所述的抗体，其中所述一个或多个减少Fey受体结合的突变包括 所述CH链中引入的一个或多个突变。36. 根据权利要求35所述的抗体，其中在所述CH链中引入的所述一个或多个突变包括 L248E〇37. 根据权利要求18至36中任一项所述的抗体，其中所述抗体缀合至具有由T细胞识别 的分子复合物呈递抗原的固体支撑物。38. -种抗原呈递复合物，其包含融合至HLA氨基酸序列的人源化免疫球蛋白重链序 列，其中所述复合物任选地不含有免疫球蛋白轻链序列。39. 根据权利要求36所述的抗原呈递复合物，其中所述HLA-Ig融合是二聚体。40. 根据权利要求38或39所述的抗原呈递复合物，其中所述免疫球蛋白序列包括IGV4 序列。41. 根据权利要求38至40中任一项所述的抗原呈递复合物，其中所述HLA氨基酸序列是 HLA-A*02:01 aMGT 登记号 HLA00005)或其衍生物。42. 根据权利要求38至41中任一项所述的抗原呈递复合物，其还包含HLA与免疫球蛋白 序列之间的连接子。43. 根据权利要求38至42中任一项所述的抗原呈递复合物，其还包含用于呈递至T细胞 的结合至所述HLA的抗原肽。44. 根据权利要求43所述的抗原呈递复合物，其中所述抗原肽是酪氨酸酶、MAGE-A1、 MAGE-A3、gp100 、Melan A/Mart-l、gp75/褐色、BAGE、NY-ES0-1 和S-100中的一个或多个。45. 根据权利要求38至44中任一项所述的抗原呈递复合物，其中所述多肽连接至固体 支撑物，其任选地为珠粒或颗粒。46. 根据权利要求45所述的抗原呈递复合物，其中所述珠粒或颗粒包含选自以下的一 者或多者的聚合物:含环糊精的聚合物，含阳离子环糊精的聚合物，聚(D，L-乳酸-共-羟基 乙酸）（PLGA)，聚（己内酯）（PCL)，乙烯-乙酸乙烯酯聚合物(EVA)，聚（乳酸）（PLA)，聚(L-乳 酸）（PLLA)，PLGA-b-聚（乙二醇）-PLGA(PLGA-bPEG-PLGA)，PLLA-bPEG-PLLA，PLGA-PEG-马来 酰亚胺(PLGA-PEG-ma 1)，聚(羟基乙酸）（PGA)，聚(L-乳酸-共-羟基乙酸）（PLLGA)，聚(D，L-丙交酯）（H)LA)，聚(L-丙交酯）（PLLA)，聚(D，L-丙交酯-共-己内酯），聚(D，L-丙交酯-共-己 内酯-共-乙交酯），聚(D，L-丙交酯-共-PEO-共-D，L-丙交酯），聚(D，L-丙交酯-共-PPO-共-D，L-丙交酯），聚烷基氰基丙烯酸酯，聚氨酯，聚-L-赖氨酸（PLL)，甲基丙烯酸羟丙基酯 (HPMA)，聚乙二醇，聚-L-谷氨酸，聚（羟基酸），聚酸酐，聚原酸酯，聚（酯酰胺），聚酰胺，聚 (酯醚），聚碳酸酯，聚烯烃诸如聚乙烯和聚丙烯，聚亚烷基二醇诸如聚（乙二醇）（PEG)，聚环 氧烷(PEO)，聚对苯二酸亚烷基酯诸如聚(对苯二甲酸乙二酯），聚乙烯醇(PVA)，聚乙烯醚， 聚乙烯酯诸如聚（乙酸乙烯酯），聚卤代乙烯诸如聚（氯乙烯）（PVC)，聚乙烯吡咯烷酮，聚硅 氧烷，聚苯乙烯(PS)，聚氨酯，衍生的纤维素诸如烷基纤维素、羟烷基纤维素、纤维素醚、纤 维素酯、硝基纤维素、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素，丙烯酸的聚合物诸如聚（（甲基)丙烯酸 甲酯）（PMMA)、聚（（甲基)丙烯酸乙酯）、聚（（甲基)丙烯酸丁酯）、聚（（甲基)丙烯酸异丁酯）、 聚（（甲基）丙烯酸己酯）、聚（（甲基）丙烯酸异癸酯）、聚（（甲基)丙烯酸月桂酯）、聚（（甲基） 丙烯酸苯酯）、聚（丙烯酸甲酯）、聚(丙烯酸异丙酯）、聚（丙烯酸异丁酯）、聚（丙烯酸十八烷 基酯）（聚丙烯酸)及其共聚物和混合物，聚二噁烷酮及其共聚物、聚羟基脂肪酸酯、聚富马 酸丙二酯），聚氧化亚甲基，泊洛沙姆，聚（原酸酯），聚（丁酸），聚（戊酸），聚（丙交酯-共-己 内酯），三亚甲基碳酸酯，聚乙烯吡咯烷酮，聚原酸酯，聚磷腈和聚磷酸酯，及两种或更多种 此类聚合物的掺混物和/或嵌段共聚物。47. -种药物组合物，其包含聚合物珠粒或颗粒、根据权利要求18至37中任一项所述的 抗体和/或根据权利要求38至46中任一项所述的抗原呈递复合物。48. 根据权利要求47所述的药物组合物，其包含聚合物PLGA-PEG颗粒，所述颗粒任选地 为尺寸在约100至200nm范围内的PLGA-PEG-马来酰亚胺颗粒。49. 根据权利要求47或48所述的药物组合物，其中所述颗粒具有约-0至-15mV的表面电 荷，并任选地具有约-5至约_15mV的表面电荷。50. 根据权利要求47至49中任一项所述的药物组合物，其包含每个颗粒约100至1500个 蛋白质配体，所述蛋白质配体通过硫氢基-马来酰亚胺化学各自偶联。51. 根据权利要求47至50中任一项所述的药物组合物，其还包含药学上可接受的载体 以用于静脉内、动脉内、皮下、真皮内、淋巴管内或肿瘤内施用。52. 根据权利要求47至51中任一项所述的药物组合物，其中所述颗粒基本上是球形或 近似球形。 5 3.根据权利要求4 7至5 2中任一项所述的药物组合物，其中所述P L G A是约5 0 %乳酸 (LA)和50%羟基乙酸(GA)的聚合物。54. 根据权利要求47至53中任一项所述的药物组合物，其中所述PLGA聚合物的分子量 为约25K至约35K，并且所述PEG的分子量为约3K至约10K。55. 根据权利要求47至54中任一项所述的药物组合物，其每个颗粒具有400至1000个配 体。56. 根据权利要求47至55中任一项所述的药物组合物，其中所述抗-CD28配体是抗原-结合抗体片段。57. 根据权利要求47至56中任一项所述的药物组合物，其中所述抗-CD28配体包含 scFv〇58. 根据权利要求47至57中任一项所述的药物组合物，其中所述HLA配体是二聚体。59. 根据权利要求58所述的药物组合物，其中所述HLA是HLA-A*02:01。60. 根据权利要求58或59所述的药物组合物，其中所述HLA包含免疫球蛋白重链融合 物，并且任选地不包含免疫球蛋白轻链。61. 根据权利要求47至60中任一项所述的药物组合物，其还包含用于呈递至T细胞的抗 原妝。62. 根据权利要求61所述的药物组合物，其中所述药物组合物与用于呈递至T细胞的抗 原肽共同配制。63. 根据权利要求61或62所述的药物组合物，其中所述抗原肽是酪氨酸酶、MAGE-A1、 MAGE-A3、gp100 、Melan A/Mart-l、gp75/褐色、BAGE、NY-ES0-1 和S-100中的一个或多个。64. 根据权利要求47至63中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物是货架稳 定的。65. 根据权利要求64所述的药物组合物，其中所述药物组合物是经冻干的。66. 根据权利要求47至65中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物被配制用于胃 肠外递送。67. -种用于诱导抗原特异性细胞毒性T细胞形成的方法，其包括向患者施用根据权利 要求47至66中任一项所述的组合物。68. 根据权利要求67所述的方法，其中所述患者是癌症患者。69. 根据权利要求67或68所述的方法，其中所述患者正在经历或已经经历施用一种或 多种检查点抑制剂的疗法。
【专利摘要】本发明提供用于免疫疗法的组合物和方法，其包括用于诱导抗原特异性T细胞的货架稳定的药物组合物。此类组合物用作人工抗原呈递细胞(aAPC)的组分，以向患者提供复合物用于呈递抗原(如，肿瘤抗原)和/或T细胞共刺激分子。
【IPC分类】A61K39/00
【公开号】CN105555302
【申请号】CN201480046380
【发明人】布鲁斯·麦克里迪, 蒂莫西·戴维·琼斯, 弗朗西斯·约瑟夫·卡尔
【申请人】耐克西缪恩公司
【公开日】2016年5月4日
【申请日】2014年6月23日
【公告号】CA2916465A1, EP3013361A1, US20160129133, WO2014209868A1