工并进行测试。
[0299] 实施例3:将喜树碱包封在辄合叶酸的C16-JI-聚合物A中：
[0300] 上文合成的叶酸31-聚合物A辄合物溶于DMS0中，加入溶于DMS0的喜树碱的溶液。在 这一制备方法中使用了喜树碱与聚合物的1:10的比率。将所得的混合物如上文实施例1中 加工，并产生了喜树碱包封的阳性测定。
[0301 ] 实施例4:将喜树碱包封在辄合EGF的C16-JI-聚合物A中：
[0302]以如上文实施例1和3中所描述的同样的方式将辄合EGF的C16-JI-聚合物A用于包 封喜树碱。
[0303] 实施例4:将喜树碱包封在辄合抗EGFR的C16-JI-聚合物A中：
[0304]以如上文实施例1和3中所描述的同样的方式将与鼠科抗EGFR抗体辄合的Cl 6-JI-聚合物A用于包封喜树碱。
[0305] 5.细胞增殖测定
[0306] 在肿瘤细胞增殖测定中进行评估之前，将上文制备的实例稀释至具有下文列出的 组合物的初始浓度：
[0307] CPT+JiP 组合物： 与7C-聚合物络合的喜树碱 重复单元mw: 2278 配体： - 配体mvn - 包封的药物： 喜树碱 药物_11前： 348
[0308] 聚合物浓度： 035 15.4 |iM的重复单元 配体浓度： - 药物浓度: 3.48 mg/rnl lO-OpM
[0309] CPT 组合物： 喜树碱（对照) 重复单元mw:-配体： - 配体mw: - 包封的药物： 喜树碱 药物mw: 348
[0310] 聚合物浓度： - 配体浓度： - 药物浓度： 3.48 }ig/ml 10 0 uM
[0311] DOX+jtP 组合物： 与沉-聚合物络合的多柔比星 重复单元mw: 2278 配体： - 配体mw: -
[0312] 包封的药物： 多柔比星 薦:物 nrw: 544 聚合物浓度： .054 m.g/ml. 23.7 pm的重复单元 配体浓度： -
[0313] 药物浓度： 5.44 (ig/ml 10 0 }i,M
[0314] DOX 组合物： 多柔比星（对照） 重复单元mw_:-配体: - 配体mw: - 包封的药物： 多柔比星 药物mw: 544
[0315] 聚合物浓度： - 配体浓度： - 药物浓度： 5.44 _/ml 10 0
[0316] jtP 组合物： 71-聚合物（对照) 重复单元mw: 227S
[0317] 配体： - 配体.111W: - 包封的药物： - 药物mw;. - 聚合物浓度： .03 5 mg/m i
[0318] 15.4 jlM的重复单患 配体浓度： - 药物浓度： -
[0319] CPT+FA-jtP 组合物： 与扼合叶酸的7t-聚合物络合的喜树碱 重复单元.mw: 5338 _配体： 叶酸 配体mw: 441 包封的药物： 喜树碱 r n 药物 mw: 348
[0320] 聚合物浓度： 031 mg/mi 5.J1. |iM的重复单元 配体浓度： 2.56_ jig/ml 5.81 |iM 药翁浓度：3.48 _1 10.0 pM
[0321] FA-JtP
[0322] 组合物： 扼合叶酸的JE-聚合物（对照） 重复单元mw: 5338 配体叶酸 配体 441 包封的药物： - 「 1 药物mw: -
[0323] 聚合物浓度： .031 mg/ml 5.81 jiM的重复单元 配体浓度： 2,56 jig/ml 5.81 hM 药物浓處 -
[0324] FA 组合物： 叶酸（对麗:） 重复单元mw:-配体： 叶酸 配体mw: 441 包封的药物:， -
[0325] 药物 m.w.: - 聚合物浓度:：- 配体浓度： 4.41 jig/ml _ _ 葯物浓度 -
[0326] CPT+EGF-jtP
[0327] 组合物： 与扼合EGF的71-聚合物络合的喜树碱 重复单元mw: 5338 配体： F.GF 配体 mw.:. 6052 包封的药_物： 喜树碱 药物mw: 348
[0328] 聚合物浓度； .0868 mg/m丨 16.3 pM的重复单元 配体浓度： 91 〇 pg/ml 15 Q \M 药物浓度. nnc ,, 9.05 jig/ml 26.0 uM
[0329] EGFR_Ab-JiP 组合物： 扼合抗EGFR抗体的7i-聚合物（对照) 重复单元raw: 5338 配体: 抗EGFR抗体 配体 m\v: 150,000 包封的药物： -
[0330]药物 mw: - 聚合物浓度： .106 ing/ml 丨9.9 jim的重复单元 配体浓度： 3,000 pg/ml 20.0 fiM 药物浓度
[0331 ] CPT+EGFR_Ab-JiP 组合物： 与轭合抗EG.FR抗休的71-聚合物络合的喜树碱 重复单元mw: 5338 配体： 抗EGFR抗体 配体 mw: 150,000 包封的药物： 喜树碱 药物mw: 348
[0332] 聚合物浓度： .106 mg/m.l 19.9 的重复单元 配体浓度： 3,000 pg/ml 20.0 _ 药物浓度 ，1A ,, 11.0 [ig/ml 31. 6 j,i M
[0333] EGF 组合物： EOF肽（对照)： 重复单元mw:-配体： EGF 配体.mw: 6052 包封的药物:： -
[0334] 药物m\v: - 聚合物浓度: - 配体浓度： 200 pg/ml 33.0 u.M r
[0335] 药物浓度 -
[0336] 使用了下列细胞系，以及指定的生长培养基：A549(F12培养基）、MDAMB231 (Lebovitz培养基）、H441、BT474和SKBR3(RPMI培养基）。将肿瘤细胞于含有10%胎牛血清的 完全培养基中以3000细胞/孔接种在96孔板上，并于37°C孵育24小时。接种二十四小时后， 以上文描述的母液的10倍稀释液开始，将测试化合物以三倍的系列稀释液加入。因此测试 的母液的稀释液为10:1、30:1和90:1，并且相对浓度分别为1.00、0.33和0.11。六种测试材 料量不足;将它们直接稀释至30:1并且不以10:1进行测试。加入测试化合物之后，将细胞在 完全生长培养基中于37°C孵育72小时。在第4天，使用Promega Cell Titer Glo I^mineseent?测定试剂盒，将细胞溶解并向每孔加入l〇〇毫升底物/缓冲液混合物，混合并 于室温孵育15分钟。将样本在光度计上读数以测量来自每孔的细胞溶解液中存在的ATP的 量，其与那一孔中存活的细胞的数目一致。
[0337] 每种细胞系的结果示于图1-5。1.00的相对浓度表示上文所描述的母液的10倍稀 释。
【主权项】
1. 药物组合物，所述药物组合物包括包封在梳型聚合物内的抗癌药物，所述梳型聚合 物主要由下列结构组成：其含有由交替的支化点部分B和亲水的、水溶性的聚合物嵌段A形成的主链；W及具有 与所述支化点部分相连的疏水侧链C和祀向部分Z，其中： A选自聚乙二醇、聚丙二醇及其共聚物； B选自二硫苏糖醇、二硫赤薛糖醇或2,3-二氨基下烧-1,4-二硫醇与两马来酸分子的辆 合物； 每个疏水侧链C独立地选自任选地被一个或多个亲水取代基取代的C6-C30直链或支链 的控，任选地被一个或多个亲水取代基取代的C6-C30环控或多环控，W及疏水的氨基酸、肤 和聚合物； 每个祀向部分Z独立地为对癌细胞的表面具有特异性结合亲和力的配体； S是键或者间隔基部分； η的值在1至100的范围内； Ρ的平均值在大于一至四的范围内；并且 r的平均值在0至8的范围内。2. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中η在2至100的范围内。3. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中至少一个祀向部分选自由受体特异性配体、 抗体、抗体片段和生长因子所组成的组。4. 根据权利要求2所述的药物组合物，其中至少一个祀向部分选自由受体特异性配体、 抗体、抗体片段和生长因子所组成的组。5. 根据权利要求3所述的药物组合物，其中所述配体选自由表皮生长因子、血管内皮生 长因子、成纤维细胞生长因子、叶酸、甲氨蝶岭、蝶酸、雌二醇、雌Ξ醇、睾酬、甘露糖-6-憐 酸、W及抗 NCA90、NCA95、CEA、CD15、CD20、CD22、CD33、CD52、VGEF或EGFR的抗体和抗体片段 组成的组。6. 根据权利要求4所述的药物组合物，其中所述配体选自由表皮生长因子、血管内皮生 长因子、成纤维细胞生长因子、叶酸、甲氨蝶岭、蝶酸、雌二醇、雌Ξ醇、睾酬、甘露糖-6-憐 酸、W及抗 NCA90、NCA95、CEA、CD15、CD20、CD22、CD33、CD52、VGEF或EGFR的抗体和抗体片段 组成的组。7. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述抗癌药物选自由多柔比星、喜树碱、多 西紫杉醇、紫杉醇、托泊替康、伊立替康、伊马替尼、舒尼替尼、索拉非尼、阿昔替尼、帕挫帕 尼、依托泊巧、甲氨蝶岭、甲基叶酸、二氯甲氨蝶岭、5-氣尿喀晚、6-琉基嚷岭、星形抱菌素、 阿糖胞巧、美法仑、长春罗新、放线菌素、道诺霉素、表柔比星、伊达比星、丝裂霉素 D、丝裂霉 素 A、洋红霉素、氨噪岭、他利霉素、鬼白毒素、顺销、碳销、长春碱、长春新碱、长春地辛、视黄 酸和他莫昔芬组成的组。8. 根据权利要求2所述的药物组合物，其中所述抗癌药物选自由多柔比星、喜树碱、多 西紫杉醇、紫杉醇、托泊替康、伊立替康、伊马替尼、舒尼替尼、索拉非尼、阿昔替尼、帕挫帕 尼、依托泊巧、甲氨蝶岭、甲基叶酸、二氯甲氨蝶岭、5-氣尿喀晚、6-琉基嚷岭、星形抱菌素、 阿糖胞巧、美法仑、长春罗新、放线菌素、道诺霉素、表柔比星、伊达比星、丝裂霉素 D、丝裂霉 素 A、洋红霉素、氨噪岭、他利霉素、鬼白毒素、顺销、碳销、长春碱、长春新碱、长春地辛、视黄 酸和他莫昔芬组成的组。9. 根据权利要求1-8中任一项所述的药物组合物，其中所述聚合物嵌段A具有4与700个 单体单元之间的平均长度。10. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述聚合物具有结构：其中m为4-700，并且Y和Y ' 独立地选自由R、OR、COOR、SR、畑R、NRR '、ONHR、NHOR、NRNH2、 NHNHR、NRNHR '和NHNRR '组成的组，其中R和R '独立地选自由任选地被一个或多个亲水取代 基取代的C6-C30支链或直链的控、任选地被一个或多个亲水取代基取代的C6-C30环控或多环 控、W及疏水的氨基酸、肤和聚合物组成的组。11. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述聚合物具有结构：其中m为4-700，W是0或NH，并且Y和Y'独立地选自由R、C0R、C00R、C0NHR、C0NRR'、 C0NH0R、CONRNH2、C0NHNHR、C0NRNHR '和C0NHNRR '组成的组，其中R和R '独立地选自由任选地 被一个或多个亲水取代基取代的C6-C30支链或直链的控、任选地被一个或多个亲水取代基 取代的C6-C30环控或多环控、W及疏水的氨基酸、肤和聚合物组成的组。12. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述聚合物具有结构：其中部分D衍生自1,4-二氨基下烧、1,3-二氨基-2-丙醇、六亚乙基四胺、精胺、亚精胺、 五亚乙基六胺、脈基下胺、赖氨酸、1,6-二氨基己烧、1,4-苯二胺、1,3-苯二胺和1,4-二氨基 下烧-2，3-二醇，p为0-4，并且m为4-700;并且其中R和R '独立地选自由任选地被一个或多个 亲水取代基取代的C6-C30支链或直链的控、任选地被一个或多个亲水取代基取代的C6-C30环 控或多环控、W及疏水的氨基酸、肤和聚合物组成的组。13. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述聚合物具有结构：其中m为4-700，W是0或NH，并且R和R '独立地选自由任选地被一个或多个亲水取代基取 代的C6-C30支链或直链的控、任选地被一个或多个亲水取代基取代的C6-C30环控或多环控、 W及疏水的氨基酸、肤和聚合物组成的组。14. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述聚合物具有结构：其中m为4-700，L是亚苯基、C2-C6亚控基或苯二亚甲基，W是0或NH，并且R和R'独立地选 自由任选地被一个或多个亲水取代基取代的C6-C30支链或直链的控、任选地被一个或多个 亲水取代基取代的C6-C30环控或多环控、W及疏水的氨基酸、肤和聚合物组成的组。15. -种药物组合物，其含有一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂W及包封在梳 型聚合物内的抗癌药物，所述梳型聚合物主要由W下结构组成：其含有由交替的支化点部分B和亲水的、水溶性的聚合物嵌段A形成的主链；W及具有 与所述支化点部分相连的疏水侧链C和祀向部分Z，其中： A选自聚乙二醇、聚丙二醇及其共聚物； B选自二硫苏糖醇、二硫赤薛糖醇或2，3-二氨基下烧-1，4-二硫醇与两马来酸分子的辆 合物； 每个疏水侧链C独立地选自由任选地被一个或多个亲水取代基取代的C6-C30直链或支 链的控，任选地被一个或多个亲水取代基取代的C6-C30环控或多环控，W及疏水的氨基酸、 肤和聚合物组成的组； 每个祀向部分Z独立地为对癌细胞的表面具有特异性结合亲和力的配体； S是键或者间隔基部分； η的值在1至100的范围内； Ρ的平均值在大于一至四的范围内；并且 r的平均值在0至8的范围内。16.权利要求1-15中任一项的组合物在制备用于治疗癌症的药物中的用途。
【专利摘要】本发明提供了两亲性的生物相容性共聚物，其具有亲水主链和悬垂的疏水基团。聚合物在水性环境中形成纳米级的分子聚集体，所述分子聚集体具有疏水的内部，抗癌药物可在其中被增溶。聚合物任选地以连接有介导携带药物的聚集体附着于所靶向的癌细胞的抗体、受体配体和其他靶向部分为特征。
【IPC分类】A61K31/4375, A61K47/48, A61P35/00
【公开号】CN105561324
【申请号】CN201510875997
【发明人】A.R.迪万, A.L.安顿, J.G.塔塔克
【申请人】阿列克斯塞尔公司
【公开日】2016年5月11日
【申请日】2007年7月19日