一种包含枯草芽孢杆菌的抗病促生健的育苗基质及其制备方法与流程

文档序号:13502178阅读:1231来源:国知局

本发明属于农业领域,具体涉及一种包含枯草芽孢杆菌的抗病促生健的育苗基质及其制备方法。



背景技术:

随着我国设施农业发展,设施土壤连作障碍日趋严重,这对土壤管理提出了更高的要求,对健康抗病种苗的需求量也不断增大。以土壤为基质的传统育苗用时长,劳动强度大,效率低,且易受天气影响,幼苗移栽成活率低,对土传病害抗性差,取而代之发展起来的工厂化育苗已成为种苗生产的主要方式。工厂化基质育苗材料质地较轻,具有良好的保水、保肥及通气性,虽然克服了传统育苗存在的部分缺陷,但仍未解决所育种苗对土传病害抗性较差的问题。



技术实现要素:

本发明的目的在于提供一种提高种苗抗病性且高效稳定的包含枯草芽孢杆菌的抗病促生健的育苗基质及其制备方法。

为了实现上述目的,本发明采用了如下技术方案:

一种包含枯草芽孢杆菌的抗病促生健的育苗基质,其特征在于,首先制备预聚脲醛溶液;然后发酵培养枯草芽孢杆菌;其次以明胶溶液和预聚脲醛溶液交联接枝为胶囊壁材,制备枯草芽孢杆菌微胶囊悬浮液;最后制备育苗基质,将枯草芽孢杆菌微胶囊悬浮液均匀地喷洒在育苗基质中,得到一种包含枯草芽孢杆菌的抗病促生健的育苗基质。

所述的包含枯草芽孢杆菌的抗病促生健的育苗基质,其特征在于,其由如下步骤制备而成:

(1)将尿素和37%的甲醛溶液按1:3-4的质量比加入到反应容器中,混合搅拌均匀,调节体系的ph为8-9,升高温度至70-75℃,恒温磁力搅拌80-100min,得到预聚脲醛溶液;

(2)将枯草芽孢杆菌菌株在ttc平板上活化后,转接至液体培养基中,30-35℃、180-200r/min震荡培养20-24h,培养液按1%接菌量接种到装有占发酵罐体积60-70%的发酵培养基的发酵罐中,控制发酵罐搅拌器转速为200-250r/min、在28-30℃下发酵40-48h,然后转入无菌容器中,0-4℃保存,得到枯草芽孢杆菌发酵液;

(3)将明胶加入到15-20倍重量份的去离子水中,在75-80℃恒温水浴中,恒温搅拌熔融得到明胶溶液;将枯草芽孢杆菌发酵液加入到5-10倍重量份的明胶溶液中,搅拌均匀,保持体系温度为38-40℃,滴加8-10%的醋酸溶液至体系ph为4,继续恒温搅拌2-3h,加入相当于明胶溶液重量份0.15-0.18倍的预聚脲醛溶液,升高温度至50-55℃,继续恒温磁力搅拌6-8h,将其转移至冰箱中,0-5℃静置1.5-2h,采用30%的naoh溶液调节体系ph为7,得到枯草芽孢杆菌微胶囊悬浮液;

(4)将园土、沼渣、腐殖酸钾、草木灰、磷肥、尿素、钾肥按1:0.5-0.6:0.08-0.1:0.12-0.15:0.06-0.07:0.07-0.08:0.03-0.04的质量比混合;研磨粉碎20-30min,得到育苗基质;边搅拌边喷洒相当于育苗基质0.2-0.25倍重量份的枯草芽孢杆菌微胶囊悬浮液,摊晾15-20d,得到包含枯草芽孢杆菌的抗病促生健的育苗基质。

所述的包含枯草芽孢杆菌的抗病促生健的育苗基质的制备方法,其特征在于,步骤(1)中采用浓度为0.01-0.02mol/l的naoh溶液调节体系的ph为8-9。

所述的包含枯草芽孢杆菌的抗病促生健的育苗基质的制备方法,其特征在于,步骤(2)中液体培养基配置方法为蔗糖20g,蛋白胨5g,磷酸二氢钾0.5g,磷酸一氢钠0.5g,硫酸镁0.025g,定容至1l,ph为7.0。

所述的包含枯草芽孢杆菌的抗病促生健的育苗基质的制备方法,其特征在于,步骤(4)中的枯草芽孢杆菌微胶囊悬浮液控制在2-3h内喷洒完毕。

采用上述的技术方案,本发明的有益效果为:

本发明的育苗基质中包含枯草芽孢杆菌,枯草芽孢杆菌生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质,这些活性物质对土壤中致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用;尤其是分泌大量的蛋白酶和几丁质酶,可分解土壤中害虫如根结线虫等的细胞壁,尤其是其卵壳有较强降解作用,从而达到抑制和灭杀效果。本发明以明胶溶液和预聚脲醛溶液交联接枝为胶囊壁材,制备枯草芽孢杆菌微胶囊悬浮液;此种方式可以保证在很长一段时间内枯草芽孢杆菌的生理活性,避免其受环境影响,提高存活率和延长保质期;胶囊壁材可以生物降解,降解后产物能被植物吸收,补充作物对元素c、n的需求。本发明育苗基质中添加了沼渣,沼渣不仅含有氮、磷、钾和矿物盐等成分外,还含有有机质、腐殖酸和一些未腐熟的营养成分,使得基质养分更全面均衡,能够有效的增加基质中的有机质和养分含量,疏松基质,有效降低基质容重,能促进种苗生长。本发明的育苗基质,包含枯草芽孢杆菌,可以提高种苗的抗病性,富含丰富的氮、磷、钾等营养成分,配方合理,保水保肥性能优异,有利于培育壮苗健苗。

具体实施方式

本实施例的包含枯草芽孢杆菌的抗病促生健的育苗基质,其由如下步骤制备而成:

(1)将尿素和37%的甲醛溶液按1:4的质量比加入到反应容器中,混合搅拌均匀,调节体系的ph为9,升高温度至75℃,恒温磁力搅拌100min,得到预聚脲醛溶液;

(2)将枯草芽孢杆菌菌株在ttc平板上活化后,转接至液体培养基中,35℃、180r/min震荡培养24h,培养液按1%接菌量接种到装有占发酵罐体积60%的发酵培养基的发酵罐中,控制发酵罐搅拌器转速为200r/min、在30℃下发酵48h,然后转入无菌容器中,3℃保存,得到枯草芽孢杆菌发酵液;

(3)将明胶加入到20倍重量份的去离子水中,在80℃恒温水浴中,恒温搅拌熔融得到明胶溶液;将枯草芽孢杆菌发酵液加入到10倍重量份的明胶溶液中,搅拌均匀,保持体系温度为40℃,滴加10%的醋酸溶液至体系ph为4,继续恒温搅拌3h,加入相当于明胶溶液重量份0.18倍的预聚脲醛溶液,升高温度至55℃,继续恒温磁力搅拌8h,将其转移至冰箱中,5℃静置2h,采用30%的naoh溶液调节体系ph为7,得到枯草芽孢杆菌微胶囊悬浮液;

(4)将园土、沼渣、腐殖酸钾、草木灰、磷肥、尿素、钾肥按1:0.6:0.1:0.15:0.07:0.08:0.04的质量比混合;研磨粉碎30min,得到育苗基质;边搅拌边喷洒相当于育苗基质0.25倍重量份的枯草芽孢杆菌微胶囊悬浮液,摊晾20d,得到包含枯草芽孢杆菌的抗病促生健的育苗基质。

本实施例的步骤(1)中采用浓度为0.02mol/l的naoh溶液调节体系的ph为9。

本实施例的步骤(2)中液体培养基配置方法为蔗糖20g,蛋白胨5g,磷酸二氢钾0.5g,磷酸一氢钠0.5g,硫酸镁0.025g,定容至1l,ph为7.0。

本实施例的步骤(4)中的枯草芽孢杆菌微胶囊悬浮液控制在3h内喷洒完毕。



技术特征:

技术总结
一种包含枯草芽孢杆菌的抗病促生健的育苗基质,其特征在于,首先制备预聚脲醛溶液;然后发酵培养枯草芽孢杆菌;其次以明胶溶液和预聚脲醛溶液交联接枝为胶囊壁材,制备枯草芽孢杆菌微胶囊悬浮液;最后制备育苗基质,将枯草芽孢杆菌微胶囊悬浮液均匀地喷洒在育苗基质中,得到一种包含枯草芽孢杆菌的抗病促生健的育苗基质。本发明的育苗基质,包含枯草芽孢杆菌,可以提高种苗的抗病性,富含丰富的氮、磷、钾等营养成分,配方合理,保水保肥性能优异,有利于培育壮苗健苗。

技术研发人员:刘国备
受保护的技术使用者:刘国备
技术研发日:2017.08.03
技术公布日:2018.01.19
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