哌啶衍生物及其用途的制作方法

专利名称：：哌啶衍生物及其用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及含有哌嗪衍生物或其盐作为活性成分的半胱氨酸蛋白酶抑制剂组合物。
背景技术：
：半胱氨酸蛋白酶是在酶分子的活性中心具有半胱氨酸残基的蛋白酶并且包括几种组织蛋白酶如B，H，和L及二肽基肽酶，所有这些均是溶酶体酶部分，并且包括存在于细胞质中的需钙蛋白酶等。尽管对这些酶的生理作用仍有许多问题有待研究，但是近年来已经集中在对其大量的体内作用的研究。例如，已知需钙蛋白酶是普遍存在于生命中的蛋白酶，它能被钙离子活化并且在中枢神经附近pH最佳。如目前所述，它参与了细胞骨架蛋白的降解，内细胞前体如蛋白激酶C的活化，和受体蛋白的降解。研究表明许多疾病与这种酶活性的异常有关。例如，其涉及难治的疾病如大脑出血(中风)，蛛网膜下出血，早老性痴呆，局部缺血，肌营养不良，白内障，血小板聚集失调，关节炎和骨质疏松症，及其它疾病。[药理学发展趋势(TrendsinPharmacologicalSciences)，15，412，1994]。作为这种半胱氨酸蛋白酶的抑制剂，已经报道了几种肽化合物包括环氧琥珀酸肽衍生物(JP-B154348，JP-A55-153778，等)，肽醛衍生物(JP-B45-17154，JP-B46-22012，等)，肽卤代甲烷衍生物(JP-B6-29229)，和肽卤代酰肼衍生物[欧洲药物化学杂志(Eur.J.Med.Chem.)，28，297-311，1993]。作为各种半胱氨酸蛋白酶中具有需钙蛋白酶抑制活性的酶，关于几种肽化合物如肽醛衍生物(JP-A6-287167)，肽二偶氮甲烷衍生物[生物化学杂志(Biochem，J.)，253，，751-758，1988，药物化学杂志(J.Med.Chem.)，35，216-220，1992]，肽硫醚衍生物[化学通讯(Chem.Lett.)，191-194，1990]等等，和几种非-肽化合物如异香豆素衍生物(WO92/11850)，KP-1241(JP-A6-41067)等也有报道。而且，作为组织蛋白酶L和B的抑制剂，已经报道了一种醛衍生物(JP-A7-101924)和环氧琥珀酸衍生物(JP-A8-104683，WO95/32954)。但是，许多已知的这些抑制剂在细胞转移能力和/或体内稳定性方面均不完全令人满意，而且其它抑制剂也不能达到需要的效果，结果，还没有临床使用的抑制剂。
发明内容本发明人经过许多研究开发了显示高效半胱氨酸蛋白酶抑制活性和高效膜可渗透性和体内环境比较稳定的药物化合物。结果发现下列通式(I)的哌嗪衍生物具有强力的半胱氨酸蛋白酶抑制活性，因而完成了本发明。因此，本发明涉及以下通式(I)化合物及其盐。本发明进一步涉及含有上述化合物的药物组合物，更具体地涉及含有所述化合物的半胱氨酸蛋白酶抑制剂组合物。对于上述通式(I)，R1代表的任意酯化的羧基包括但不限于羧基和烷氧基羧基。所述烷氧基羧基的烷氧基部分可以是例如C1-6烷氧基并且优选C1-4烷氧基，如甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基，丁氧基，异丁氧基，仲-丁氧基，和叔-丁氧基。特别优选的是乙氧基。任意取代的酰氨化羧基R1中的取代基包括羟基，烷氧基(甲氧基，乙氧基，丙氧基等)，和芳烷氧基(苄氧基等)。优选羟基和苄氧基。低级烷基R2包括C1-6直链或支链烷基或优选C1-4烷基，如甲基，乙基，正-丙基，异丙基，正-丁基，异丁基，仲-丁基，叔-丁基，正-戊基，异-戊基，新戊基，叔戊基，正-己基，异己基，4-甲基戊基，1，1-二甲基丁基，2，2-二甲基丁基，3，3-二甲基丁基，和2-乙基丁基。优选氢或甲基。通过R2和R3或R4结合形成的环包括但不限于氮丙啶，氮杂环丁烷，吡咯烷，和哌啶。特别优选吡咯烷。任意取代的低级烷基R3和R4包括C1-6直链或支链烷基如甲基，乙基，正-丙基，异丙基，正-丁基，异丁基，仲-丁基，叔-丁基，正-戊基，异戊基，新戊基，叔戊基，正-己基，4-甲基戊基，1，1-二甲基丁基，2，2-二甲基丁基，3，3-二甲基丁基，和2-乙基丁基。优选甲基，乙基，异丁基，和仲-丁基。任意存在于所述烷基上的取代基包括芳香环和氨基甲酰基。上述芳香环可包括芳香碳环如苯环和芳香杂环如吲哚环。特别优选苯环。所述任意取代的硫醚基R3和R4中的硫醚基包括烷基硫代烷基并且优选C1-4烷基-硫代-C1-4烷基，如二甲硫，二乙硫，二丙硫，二丁硫，二戊硫，二己硫，甲基乙基硫醚，甲基丙基硫醚，和乙基丁基硫醚等。优选二甲硫和甲基乙基硫醚。存在于所述硫醚基上的取代基包括酰氨基。酰氨基包括但不限于甲酰氨基，乙酰氨基，丙酰氨基，丁酰氨基，异丁酰氨基，戊酰氨基，异戊酰氨基，新戊酰氨基，和正己酰氨基。优选乙酰氨基。通过R3和R4结合任意形成的环包括环丙烷，环丁烷，环戊烷，环己烷和环庚烷等。特别优选环戊烷。作为所述式(II)取代的苯基的取代基R6，卤素包括但不限于氟，氯，溴和碘。优选氟和氯。卤素可以位于间，对，和邻位。作为所述式(II)取代的苯基的另一种取代基R6，烷氧基包括C1-6烷氧基并且优选C1-4烷氧基，如甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基，丁氧基，异丁氧基，仲丁氧基，和叔-丁氧基。特别优选甲氧基。作为式(III)取代的磺酰基的取代基R7，任意被低级烷基取代的芳基包括但不限于苯基和萘基。任意取代所述芳基的低级烷基包括甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基等，并且可位于芳基的任何位置。作为式(III)取代的磺酰基的取代基R7，氨基包括被C1-6直链，支链，或环烷基单或二取代的氨基，如甲氨基，二甲氨基，乙氨基，二乙氨基，丙氨基，二丙氨基，异丙氨基，二异丙氨基，丁氨基，二丁氨基，环己氨基等。特别优选二甲氨基。在本
发明内容中，通式(I)化合物的盐优选生理上可接受的盐，包括与无机碱形成的盐，与有机碱形成的盐，与无机酸形成的盐，与有机酸形成的盐，及与碱性和酸性氨基酸形成的盐。优选的无机碱盐包括碱金属盐如钠盐和钾盐，碱土金属盐如钙盐和镁盐，铝盐，和铵盐。优选的有机碱盐包括与三甲胺，吡啶，甲基吡啶，乙醇胺，二乙醇胺，三乙醇胺，二环己胺，和N，N-二苄基乙二胺等形成的盐。优选的无机酸盐包括与盐酸，氢溴酸，硝酸，硫酸，和磷酸等形成的盐。优选的有机酸盐包括与甲酸，乙酸，三氟乙酸，富马酸，草酸，酒石酸，马来酸，柠檬酸，琥珀酸，苹果酸，甲磺酸，苯磺酸，和对-甲苯磺酸等形成的盐。与碱性氨基酸形成的优选盐包括与精氨酸，赖氨酸，鸟氨酸等形成的盐，而与酸性氨基酸形成的优选盐包括与天冬氨酸和谷氨酸等形成的盐。本发明通式(I)化合物可根据以下反应流程制备。(其中每个符号具有上述含义)。在该方法中，通式(IV)化合物[此后有时称为化合物(IV)]或其羧基官能团的活性衍生物，或其盐与通式(V)化合物[此后有时称为化合物(V)]或其活性衍生物，或其盐反应得到化合物(I)。上述反应通过肽合成领域已知的常规液相或固相(固定相)技术进行。至于这种已知常规方法和类似方法，下列文献中的描述在此引作参考Izumiya，Nobuoetal.PeptideGoseinoKisotoJikken(FundamentalsandExperimentsinPeptideSynthesis)，Maruzen，1985；Yajima，Haruaki&amp;Sakakibara，ShumpeiSeikagakuJikkenKoza1(BiochemicalExperimentSeries1)，JapaneseBiochemicalSociety(ed.)，TokyoKagakuDojin，1977；Kimura，ToshiyaZokuSeikagakuJikkenKoza1(NewBiochemicalExperimentSeries1，JapaneseBiochemicalSociety(ed.)，TokyoKgakuDojin，1987；Suzuki，NobuoJikkenKagakuKoza(4thEdition)22，YukiGoseiIV(ExperimentalChemistrySeries(EditionIV)22，OrganicSynthesisIV)，TheChemicalSocietyofJapan(ed.)，Maruzen，1992.化合物(IV)的羧基官能团的优选的活性衍生物包括酰卤，酸酐，活性酰胺，和活性酯。酰卤包括但不限于酰氯。酸酐包括各种酸如取代的磷酸(二烷基磷酸，苯基磷酸，二苯基磷酸，二苄基磷酸，卤代磷酸等)，二烷基亚磷酸，亚硫酸，硫代硫酸，硫酸，磺酸(甲磺酸等)，脂肪羧酸(乙酸，丙酸，丁酸，异丁酸，新戊酸，戊酸，异戊酸，三氯乙酸等)，和芳香羧酸(苯甲酸等)的混合酸酐以及对称酸酐。优选的活性酰胺包括但不限于咪唑，4-取代咪唑，二甲基吡唑，三唑，和四唑。优选的活性酯包括但不限于氰基甲基酯，甲氧基甲基酯，二甲基亚氨基甲酯，乙烯基酯，炔丙基酯，对-硝基苯基酯，三氯苯基酯，五氯苯基酯，甲基苯基酯，苯基偶氮苯基酯，苯硫基酯，对-硝基苯硫基酯，对-羟甲苯硫基酯，羧基甲硫基酯，吡喃基酯，吡啶基酯，8-喹啉硫基酯等及与N-羟基化合物如N，N-二甲基羟基胺，1-羟基-2-(1H)-吡啶酮，N-羟基琥珀酰亚胺，N-羟基邻苯二甲酰亚胺，1-羟基-1H-苯并三唑等形成的酯。化合物(IV)或其活性衍生物的优选盐包括与无机碱形成的盐如碱金属盐，例如钠盐，钾盐等，碱土金属盐如钙盐，镁盐等，铝盐，及铵盐，以及与有机碱形成的盐如三甲胺盐，三乙胺盐，吡啶盐，甲基吡啶盐，乙醇胺盐，二乙醇胺盐，三乙醇胺盐，二环己胺盐，N，N-二苄基乙二胺盐等。活性衍生物的种类可根据化合物(IV)的类型选择。化合物(V)氨基官能团的优选活性衍生物包括席夫碱型亚氨基和化合物(V)与羰基化合物如醛和酮反应得到的烯胺互变异构体，化合物(V)与甲硅烷基化合物如双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺，一(三甲基甲硅烷基)乙酰胺，二(三甲基甲硅烷基)脲等反应得到的甲硅烷基衍生物，及化合物(V)与三氯化磷或光气反应得到的衍生物。化合物(V)的所述活性衍生物的优选盐包括与无机酸形成的盐如盐酸盐，氢溴酸盐，硝酸盐，硫酸盐，磷酸盐等，及与有机酸形成的盐如甲酸盐，乙酸盐，三氟乙酸盐，富马酸盐，草酸盐，酒石酸盐，马来酸盐，柠檬酸盐，琥珀酸盐，苹果酸盐，甲磺酸盐，苯磺酸盐，对-甲苯磺酸盐等。根据化合物(V)的类型可选择使用这些活性衍生物。尽管化合物(IV)和(V)间的反应可以在任何其它不干扰反应的有机溶剂中进行，但通常在普通溶剂中进行，例如水，醇(例如甲醇，乙醇等)，丙酮，二噁烷，乙腈，氯仿，二氯甲烷，二氯乙烷，四氢呋喃，乙酸乙酯，N，N-二甲基甲酰胺，和吡啶。上述普通有机溶剂可与水混合使用。当化合物(IV)以游离形式或盐形式用于上述反应时，该反应优选在普通缩合剂存在下进行，如N，N’-二环己基碳化二亚胺，N-环己基-N’-吗啉代乙基碳化二亚胺，N-环己基-N’-(4-二乙氨基环己基)碳化二亚胺，N，N’-二乙基碳化二亚胺，N，N’-二异丙基碳化二亚胺，N-乙基-N’-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺，N，N’-羰基-二(2-甲基咪唑)，五亚甲基乙烯酮-N-环己基亚胺，二苯基乙烯酮-N-环己基亚胺，乙氧基乙炔，1-烷氧基-1-氯乙烯，三甲基亚磷酸酯，乙基多磷酸酯，异丙基多磷酸酯，三氯氧磷，二苯基磷酰基叠氮化物，亚硫酰氯，草酰氯，卤代甲酸低级烷基酯(例如氯甲酸乙酯，氯甲酸异丙酯等)，三苯膦，N-羟基苯并三唑，1-(对-氯苯磺酰氧基)-6-氯-1H-苯并三唑，由N，N-二甲基甲酰胺与亚硫酰氯，光气，氯甲酸三氯甲基酯，三氯氧磷等反应制备的Vilsmeier试剂。该反应可在无机碱或有机碱存在下进行，例如碱金属碳酸氢盐，三(低级)烷基胺，吡啶，N-(低级)烷基吗啉，N，N-二(低级)烷基苄基胺等。反应温度不用严格限制，该反应通常在冷却，室温，或中等加热下进行。在实施例中合成的化合物的结构式列在下表中。表1-1</tables>表1-2</tables>表2本发明化合物的生物活性描述如下。本发明通式(I)化合物或其盐具有巯基蛋白酶抑制活性。测定本发明化合物对需钙蛋白酶，组织蛋白酶L，木瓜蛋白酶，和胰蛋白酶(丝氨酸蛋白酶)的抑制活性。结果示于表3和4中。μ-需钙蛋白酶抑制活性的测定根据文献中所述方法[生物化学分析(Anal.Biochem.)，208，387-392(1993)]测定μ-需钙蛋白酶(NakaraiTesque)的活性。向含有0.5mg/ml酪蛋白，50mMTris-HCl(pH7.4)，20mM二硫苏糖醇，和4mM氯化钙的溶液中加入2.5μl含有不同浓度的试验药物和0.03单位的μ-需钙蛋白酶的二甲亚砜溶液以开始反应。最终液体的体积为250μl。在30℃反应60分钟后，将100μl的反应混合物转移到另一个容器中，向其中加入50μl纯净水和100μl50％Coumassie亮蓝溶液。将反应混合物在室温放置15分钟并且在595nm测定吸收。作为对照，加入不含试验药物的2.5μl二甲亚砜并将混合物以上述相同方式处理。这样得到的吸收值作为对照值。类似地，通过加入0.2mMEDTA代替4mM氯化钙水溶液得到的值为空白值。用以下公式计算抑制率并且对浓度在对数坐标纸上作图，然后测定50％抑制(IC50)所需要的量。用已知半胱氨酸蛋白酶抑制化合物E64作参考药物。抑制率(％)＝[1-(测定值-空白值)/(对照值-空白值)]×100组织蛋白酶L抑制活性的测定根据文献中所述方法[酶学方法(MethodsinEnzymology)，80，535-561，1981]测定组织蛋白酶L(CosmoBio)(一种半胱氨酸蛋白酶)的活性。向含有85mM乙酸盐缓冲液(pH5.5)，2mM二硫苏糖醇，1mMEDTA，2μg组织蛋白酶L，和不同浓度的试验化合物的溶液中加入20μM苄氧羰基-L-苯基丙氨酰-L-精氨酸-4-甲基-香豆素基-7-酰胺(Z-Phe-Arg-MCA)以最终液体体积为200μl开始反应。在30℃反应20分钟后，加入20μl1MTris-HCl(pH8.0)以终止反应。用荧光分光计在激发波长360nm和荧光放射波长450nm测定释放的4-甲基-7-氨基香豆素的量。用没有加入试验药物的测定值作为对照，没有加入酶的测定值作为空白，以上述相同的方式测定IC50。E64作为参考药物。木瓜蛋白酶和胰蛋白酶抑制活性的测定根据文献中所述方法[生物化学分析(Anal.Biochem.)，208，387-392(1993)]测定木瓜蛋白酶(半胱氨酸蛋白酶)和胰蛋白酶(Sigma)(丝氨酸蛋白酶)的活性。向含有0.5mg/ml酪蛋白，50mMTris-HCl(pH8.0)，20mM二硫苏糖醇，和0.2mMEDTA的溶液中加入2.5μl含有不同浓度的试验药物和0.03单位的木瓜蛋白酶或胰蛋白酶的二甲亚砜溶液以开始反应。最终液体的体积为250μl。在30℃反应60分钟后，将100μl的反应混合物转移到另一个容器中，加入50μl纯净水和100μl50％Coumassie亮蓝溶液后。将反应混合物在室温放置15分钟。在595nm测定混合物的吸收。类似地，用加入不含试验药物的2.5μl二甲亚砜的测定值作为对照值，不加入酶的测定值作为空白值，以上述相同方式测定IC50，E64和亮肽素作为参考药物。表3需钙蛋白酶50％抑制浓度(IC50)试验药物(μM)试验药物(μM)E-640.66实施例310.95实施例347.00实施例3217.50实施例212.90实施例335.10实施例230.81实施例340.84实施例240.78实施例3541.00实施例251.10实施例372400实施例260.64实施例383.90实施例270.35实施例390.60实施例280.63实施例406.00实施例290.49实施例41145实施例301.20实施例431.90表450％抑制浓度(IC50)试验药物组织蛋白酶L木瓜蛋白酶胰蛋白酶(μM)(μM)(μM)E-640.0150.032＞300亮肽素7.4实施例210.0120.110＞3000实施例230.0290.079＞3000实施例260.0820.210＞3000实施例270.0270.062＞3000实施例3237.604.00＞3000实施例340.0090.047＞3000本发明通式(I)化合物或其盐对半胱氨酸蛋白酶如需钙蛋白酶，组织蛋白酶L，和木瓜蛋白酶具有抑制活性而对丝氨酸蛋白酶(胰蛋白酶)没有活性，因此本发明化合物或其盐作为预防或治疗哺乳动物(例如小鼠，大鼠，兔，狗，猫，牛，猪，和人)的多种与半胱氨酸蛋白酶相关的疾病的药物是有价值的，这些疾病例如局部缺血局部，炎症，肌营养不良，免疫疾病，原发性高血压，早老痴呆症，蛛网膜下出血，和骨质疏松症。本发明通式(I)化合物及其盐可全身或局部给药。全身给药不仅包括口服而且包括静脉，皮下，肌内及其它途径给药。局部给药可通过表皮，透皮，鼻内或眼内进行。本发明通式(I)化合物或其盐可被制成药物组合物。给人口服的组合物包括粉剂，粒剂，片剂，胶囊，糖浆，和酏剂。对于制备粉末，颗粒或片状的组合物，可以使用适于固体剂型的药物载体，如赋形剂(淀粉，葡萄糖，果糖，蔗糖等)，润滑剂(硬脂酸镁等)，崩解剂(淀粉，结晶纤维素等)，粘结剂(淀粉，阿拉伯树胶等)等。这种剂型可用包衣剂(明胶，蔗糖等)包衣。为了以糖浆和酏剂形式制备所述组合物，可以有选择地使用添加剂如稳定剂(乙二胺四乙酸钠等)，悬浮剂(阿拉伯树胶，羧甲基纤维素等)，矫味剂(简单糖浆，葡萄糖等)，和香料。用于非肠道给药的组合物包括注射液和悬浮液。为了制备注射液，可以使用助剂如溶剂(注射蒸馏水)，稳定剂(乙二胺四乙酸钠等)，等渗剂(氯化钠，甘油，甘露糖等)，pH控制剂(盐酸，柠檬酸，氢氧化钠等)，悬浮剂(甲基纤维素等)。为了制备栓剂，可选择性使用栓剂基质(例如可可脂，聚乙烯二醇等)和其它物质。外用组合物包括软膏，乳膏，洗液，鼻内滴剂和眼内滴剂。这种外用组合物除了含有本发明化合物(I)外，还可含有已知的分配物质如乳膏基质(凡士林，羊毛脂等)，溶剂(盐水，纯净水)，稳定剂(乙二胺四乙酸钠，柠檬酸等)，湿润剂(甘油等)，乳化剂(聚乙烯吡咯烷酮等)，悬浮剂(羟基丙基甲基纤维素，甲基纤维素等)，表面活性剂(多乙氧基醚-80，聚氧乙烯-氢化蓖麻油等)，防腐剂(氯化苄烷铵，对-羟基苯甲酸盐，氯丁醇等)，缓冲剂(硼酸，硼砂，乙酸钠，柠檬酸盐缓冲剂，磷酸盐缓冲剂等)，等渗剂(氯化钠，甘油，甘露醇等)，pH控制剂(盐酸，氢氧化钠等)等等。本发明通式化合物(I)或其盐的剂量取决于所要治疗的疾病，症状，患者，给药方式。但是，治疗单位口服剂量通常为1-500mg并且优选10-200mg；治疗用量注射剂量通常为0.1-100mg，优选1-50mg。实施例下列参考实施例，制备实施例，和制剂实施例用于进一步描述本发明，它们不应构成对本发明范围的限制。参考实施例1在冰-水浴中，向N-叔-丁氧羰基苯基丙氨酸(53g，0.2mol)和对-硝基苯酚(27.8g，0.2mol)的乙酸乙酯(200ml)溶液中滴加N，N’-二环己基碳化二亚胺(41.2g，0.2mol)的乙酸乙酯(100ml)溶液并将该混合物在冷却下搅拌3小时然后在室温下搅拌20小时。滤出沉淀的副产物N，N’-二环己基-碳化双脲并减压浓缩滤液。将这样得到的残余物从乙酸乙酯-己烷中重结晶得到N-叔-丁氧羰基苯基丙氨酸对-硝基苯基酯(61.7g，80％)。参考实施例2在冰-水浴中，向N-叔-丁氧羰基亮氨酸(6.94g，30mmol)和N-羟基琥珀酰亚胺(3.45g，30mmol)的二噁烷(50ml)溶液中滴加N-乙基-N’-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(5.75g，30mmol)的二噁烷溶液并将该混合物在冷却下搅拌20分钟然后在室温下搅拌24小时。将反应混合物倒入冷水中并用乙酸乙酯萃取。依次用10％柠檬酸水溶液，10％碳酸氢钠水溶液，和饱和盐水溶液洗涤萃取液，用无水硫酸镁于燥有机相并减压浓缩。将残余物从二异丙基醚中重结晶得到N-叔-丁氧羰基亮氨酸N-羟基琥珀酰亚胺酯(7.77g，78.9％)。参考实施例3向1-(4-氟苯基)哌嗪二盐酸盐(2.53g，10mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(40ml)溶液中依次加入三乙胺(2.8ml，20mmol)和N-叔-丁氧羰基苯基丙氨酸对硝基苯基酯(2.65g，10mmol)并将该混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物倒入冷水中并用乙酸乙酯萃取。依次用1％氨水，饱和盐水，0.1N盐酸，饱和盐水，饱和碳酸氢钠水溶液，和饱和盐水洗涤萃取液，用无水硫酸镁干燥有机相并进一步减压浓缩。将残余物用硅胶柱色谱法纯化，用氯仿-甲醇(50∶1)洗脱得到2-(4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(苯基甲基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(2.7g，92.2％)为无色油状物。参考实施例4用1-(邻-氟苯基)哌嗪单盐酸盐代替1-(4-氟苯基)哌嗪二盐酸盐，重复参考实施例3的方法得到2-(4-(2-氟苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(苯基甲基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(1.89g，88.4％)。参考实施例5向1-(4-氟苯基)哌嗪二盐酸盐(0.91g，3mmol)和N-叔-丁氧羰基亮氨酸N-羟基琥珀酰亚胺酯(0.99g，3mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液中加入三乙胺(1.3ml，9mmol)并将该混合物在室温下搅拌20小时。将反应混合物依次用0.1N盐酸，饱和碳酸氢钠水溶液，水和饱和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥有机相并减压浓缩。将残余物用硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯-己烷(1∶1)洗脱得到2-(4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(2-甲基丙基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(1.05g，89.0％)。为无色油状物。参考实施例6用4-苯基哌嗪代替1-(4-氟苯基)哌嗪二盐酸盐，重复参考实施例5的方法得到2-(4-苯基-1-哌嗪基)-2-氧-1-(2-甲基丙基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(7.99g，99％)。参考实施例7用1-二甲基氨磺酰哌嗪代替1-(4-氟苯基)哌嗪二盐酸盐，重复参考实施例5的方法得到2-(4-二甲基氨磺酰-1-哌嗪基)-2-氧-1-(2-甲基丙基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(7.19g，88.4％)。参考实施例8用对甲苯磺酰基哌嗪代替1-4-氟苯基)哌嗪二盐酸盐，重复参考实施例5的方法得到2-(4-(4-甲基苯基磺酰基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(2-甲基丙基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(6.95g，79.4％)。参考实施例9用1-(2-氯苯基)哌嗪代替1-(4-氟苯基)哌嗪二盐酸盐，重复参考实施例5的方法得到2-(4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(2-甲基丙基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(5.70g，95.5％)。参考实施例10用1-(间-氯苯基)哌嗪单盐酸盐代替1-(4-氟苯基)哌嗪二盐酸盐，重复参考实施例5的方法得到2-(4-(3-氯苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(2-甲基丙基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(2.63g，88.4％)。参考实施例11用1-(4-氯苯基)哌嗪单盐酸盐代替1-(4-氟苯基)哌嗪二盐酸盐，重复参考实施例5的方法得到2-(4-(4-氯苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(2-甲基丙基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(2.83g，94.8％)。参考实施例12用N-(对-甲氧基苯基)哌嗪琥珀酸盐盐酸盐代替1-(4-氟苯基)哌嗪二盐酸盐，重复参考实施例5的方法得到2-(4-(4-甲氧基苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(2-甲基丙基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(2.73g，92.3％)。参考实施例13在冰浴中，向2-(4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(苯基甲基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(2.7g，6.3mmol)的乙酸乙酯(20mmol)的溶液中滴加4N-HCl/乙酸乙酯(20ml)并将该混合物在室温搅拌过夜。过滤回收所得结晶并从乙醇-乙醚中重结晶得到1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐(2.2g，96.1％)，为淡黄色结晶。参考实施例14用2-(4-(2-氟苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(苯基甲基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替2-(4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(苯基甲基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯，重复参考实施例13的方法得到1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(2-氟苯基)哌嗪盐酸盐(1.3g，99.1％)，为白色结晶。参考实施例15用2-(4-(2-氟苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(2-甲基丙基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替2-(4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(苯基甲基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯，重复参考实施例13的方法得到1-(2-氨基-4-甲基-1-氧戊基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐(0.56g，70.4％)，为白色结晶。参考实施例16用2-(4-苯基-1-哌嗪基)-2-氧-1-(2-甲基丙基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替2-(4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(苯基甲基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯，重复参考实施例13的方法得到1-(2-氨基-4-甲基-1-氧戊基)-4-苯基哌嗪盐酸盐(6.5g，99.2％)，为白色结晶。参考实施例17用2-(4-二甲基氨磺酰-1-哌嗪基)-2-氧-1-(2-甲基丙基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替2-(4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(苯基甲基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯，重复参考实施例13的方法得到1-(2-氨基-4-甲基-1-氧戊基)-4-二甲基氨磺酰哌嗪盐酸盐(5.0g，83.3％)，为白色结晶。参考实施例18用2-(4-(4-甲基苯基磺酰基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(2-甲基丙基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替2-(4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(苯基甲基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯，重复参考实施例13的方法得到1-(2-氨基-4-甲基-1-氧戊基)-4-(4-甲基苯基磺酰基)哌嗪盐酸盐(4.83g，78.4％)，为白色结晶。参考实施例19用2-(4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(2-甲基丙基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替2-(4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(苯基甲基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯，重复参考实施例13的方法得到1-(2-氨基-4-甲基-1-氧戊基)-4-(2-氯苯基)哌嗪盐酸盐(1.54g，62.6％)，为白色结晶。参考实施例20用2-(4-(3-氯苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(2-甲基丙基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替2-(4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(苯基甲基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯，重复参考实施例13的方法得到1-(2-氨基-4-甲基-1-氧戊基)-4-(3-氯苯基)哌嗪盐酸盐(1.40g，65.7％)，为白色结晶。参考实施例21用2-(4-(4-氯苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(2-甲基丙基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替2-(4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(苯基甲基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯，重复参考实施例13的方法得到1-(2-氨基-4-甲基-1-氧戊基)-4-(4-氯苯基)哌嗪盐酸盐(1.50g，65.3％)，为白色结晶。参考实施例22用2-(4-(4-甲氧基苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(2-甲基丙基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯代替2-(4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基)-2-氧-1-(苯基甲基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯，重复参考实施例13的方法得到1-(2-氨基-4-甲基-1-氧戊基)-4-(4-甲氧基苯基)哌嗪盐酸盐(2.21g，87.4％)，为白色结晶。参考实施例23在冰浴中，向N-叔-丁氧羰基-L-缬氨酸(2.27g，10mmol)和1-(2-氯苯基)哌嗪(2.00g，10mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(50ml)溶液中滴加1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(2.2g，11mmol)和1-羟基苯并三唑(1.5g，11mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液并将该混合物在室温搅拌15小时。然后减压蒸除二氯甲烷并用乙酸乙酯(200ml)萃取残余物。依次用10％柠檬酸水溶液，饱和碳酸氢钠水溶液，和饱和盐水洗涤乙酸乙酯相并用无水硫酸钠干燥。然后蒸除溶剂并用硅胶柱色谱法纯化残余物。用乙酸乙酯-正己烷(1∶2，v/v)洗脱得到2-(4-(2-氯苯基)-哌嗪基)-2-氧-(s)-1-(2-丙基)乙基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。将该无色油状物溶解在乙酸乙酯(50ml)中后，在冰冷却下滴加4NHCl/乙酸乙酯(50ml)。将该混合物在室温搅拌3小时。过滤反应产物并用乙酸乙酯-正-己烷(1∶1，v/v)洗涤得到1-((s)-2-氨基-3-甲基-1-氧丁基)-4-(2-氯苯基)哌嗪盐酸盐(3.32g，95.8％)，为无色晶体。参考实施例24用N-叔-丁氧羰基甘氨酸作起始原料，重复参考实施例23的方法得到1-(2-氨基-1-氧乙基)-4-(2-氯苯基)哌嗪盐酸盐(2.4g，90.4％)，为无色晶体。参考实施例25用N-叔-丁氧羰基-L-丙氨酸作起始原料，重复参考实施例23的方法得到1-((s)-2-氨基-1-氧丙基)-4-(2-氯苯基)哌嗪盐酸盐(1.7g，58.8％)，为无色晶体。参考实施例26用N-叔-丁氧羰基-L-异亮氨酸作起始原料，重复参考实施例23的方法得到1-((s)-2-氨基-3-甲基-1-氧戊基)-4-(2-氯苯基)哌嗪盐酸盐(3.4g，90.2％)，为无色晶体。参考实施例27用N-叔-丁氧羰基-β-丙氨酸作起始原料，重复参考实施例23的方法得到1-(3-氨基-1-氧丙基)-4-(2-氯苯基)哌嗪盐酸盐(2.9g，90.0％)，为无色晶体。参考实施例28用N-叔-丁氧羰基肌氨酸作起始原料，重复参考实施例23的方法得到1-(2-甲氨基-1-氧乙基)-4-(2-氯苯基)哌嗪盐酸盐(3.0g，93.3％)，为无色晶体。参考实施例29用N-叔-丁氧羰基-L-脯氨酸作起始原料，重复参考实施例23的方法得到1-(1-(2-吡咯烷基)-1-氧甲基)-4-(2-氯苯基)哌嗪盐酸盐(4.3g，98.0％)，为无色晶体。参考实施例30用N-叔-丁氧羰基-(s-乙酰氨基甲基)-L-半胱氨酸作起始原料，重复参考实施例23的方法得到1-((s)-2-氨基-3-(乙酰氨基甲硫基)-1-氧丙基)-4-(2-氯苯基)哌嗪盐酸盐(4.0g，95.9％)，为无色晶体。参考实施例31用N-叔-丁氧羰基-L-甲硫氨酸作起始原料，重复参考实施例23的方法得到1-((s)-2-氨基-4-甲硫基-1-氧丁基)-4-(2-氯苯基)哌嗪盐酸盐(3.7g，97.1％)，为无色晶体。参考实施例32用N-叔-丁氧羰基-L-谷氨酰胺作起始原料，重复参考实施例23的方法得到1-((s)-2-氨基-4-氨基甲酰基-1-氧丁基)-4-(2-氯苯基)哌嗪盐酸盐(2.7g，60.7％)，为无色晶体。实施例1向1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐(1.82g，5mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(20ml)溶液中加入三乙胺(0.697ml，5mmol)并将该混合物在室温搅拌10分钟。向该反应混合物中加入对-硝基苯基-L-反-环氧琥珀酸乙酯(根据Tamai等人[药物化学通讯(Chem.Pharm.Bull.)，35，1098(1987)]方法合成)(1.41g，5mmol)，并将该混合物在室温搅拌20小时。将该反应混合物到入冷水中，用乙酸乙酯萃取。依次用1％氨水，饱和盐水，0.1N盐酸，饱和盐水，饱和碳酸氢钠水溶液，和饱和盐水洗涤萃取液，有机相用无水硫酸镁干燥开减压浓缩。将残余物经过硅胶色谱法分离，用乙酸乙酯-己烷(1∶1)洗脱。该方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1哌啶基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯(1.2g，51.1％)。1HNMR(CDCl3)δ1.31(t，3H，J＝7.0Hz)，-C-CH3)，2.42-2.50(m，1H，哌嗪环)，2.83-2.94(m，2H，哌嗪环)，3.00(d，2H，J＝7.6Hz，ph-CH2-C-)，2.97-3.07(m，1H，哌嗪环)，3.14-3.22(m，1H，哌嗪环)，3.35(d，1H，J＝1.9Hz，环氧环)，3.43-3.52(m，1H，哌嗪环)，3.64(d，1H，J＝1.9Hz，环氧环)，3.71(t，2H，J＝5.4Hz，哌嗪环)，4.25(dq，2H，J＝7.3，2.6Hz，-O-CH2-C)，5.18(q，1H，J＝5.3Hz，-N-CH-CO)，6.75-6.83(m，2H，芳香环)，6.91-7.04(m，2H，芳香环，1H，NH)，7.17-7.34(m，5H，芳香环).实施例2用1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(2-氟苯基)哌嗪盐酸盐代替1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐，重复实施例1的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(2-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯(0.83g，58.6％)。1HNMR(CDCl3)δ1.31(t，3H，J＝7.1Hz，-C-CH3)，2.42-2.49(m，1H，哌嗪环)，2.72-2.90(m.2H，哌嗪环)，3.02(d，2H，J＝8.3Hz，ph-CH2-C-)，2.94-3.10(m，1H，哌嗪环)，3.17-3.29(m，1H，哌嗪环)，3.36(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，3.44-3.57(m，1H，哌嗪环)，3.65(d，1H，J＝1.3Hz，环氧环)，3.66-3.80(m，2H，哌嗪环)，4.25(dq，2H，J＝7.1，2.3Hz，-O-CH2-C)，5.19(q，1H，J＝7.6Hz，-N-CH-CO)，6.8(t，1H，J＝8.3Hz，-NH-)，6.93-7.11(m，4H，芳香环)，7.18-7.34(m，5H，芳香环).实施例3用1-(2-氨基-4-甲基-1-氧戊基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐代替1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐，重复实施例1的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯(0.30g，45.6％)。1HNMR(CDCl3)δ0.93(d，3H，J＝6.3Hz，-C-CH3)，1.00(d，3H，J＝6.3Hz，-C-CH3)，1.32(t，3H，J＝7.3Hz，-C-CH3)，1.40-1.63(m，3H，-C-CH2-CH-C2)，3.06--3.15(m，4H，哌嗪环)，3.49(d，1H，J＝1-7Hz，环氧环)，3.60-3.89(m，4H，哌嗪环)，3.68(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，4.26(dq，2H，J＝7.3，3.3Hz，-O-CH2-C)，5-03(dt，1H，J＝8.91，4.3Hz，-N-CH-CO)，6.85-7-03(m，5H，芳香环and-NH).实施例4用1-(2-氨基-4-甲基-1-氧戊基)-4-苯基哌嗪盐酸盐代替1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐，重复实施例1的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[(4-苯基-1-哌嗪基)羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯(3.96g，63.3％)。1HNMR(CDCl3)δ0.93(d，3H，J＝6.3Hz，-C-CH3)，1.00(d，3H，J＝6.3Hz，-C-CH3)，1.32(t，3H，J＝7.3Hz，-C-CH3)，1.40-1.63(m，3H，-C-CH2-CH-C2)，3.16-3.24(m，4H，哌嗪环)，3.49(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，3.60-3.89(m，4H，哌嗪环)，3.68(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，4.26(dq，2H，J＝7.3，3.3Hz，-O-CH2-C)，5.03(dt，1H，J＝8.9，4.3H2，-N-CH-CO)，6.90-6.95(m，4H，芳香环和-NH)，7.25-7.33(m，2H，芳香环).实施例5用1-(2-氨基-4-甲基-1-氧戊基)-4-二甲基氨磺酰哌嗪盐酸盐代替1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐，重复实施例1的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[(4-二甲基氨磺酰-1-哌嗪基)羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯(3.7g，82.6％)。1HNMR(CDCl3)δ0.92(d，3H，J＝6.3Hz，-C-CH3)，0.89(d，3H，J＝6.3Hz，-C-CH3)，1.32(t，3H，J＝7.3Hz，-C-CH3)，1.38-1.60(m，3H，-C-CH2-CH-C2)，2.85(s，6H，-N-CH3)，3.15-3.38(m，4H，哌嗪环)，3.48(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，3.52-3.68(m，3H，哌嗪环)，3.67(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，3.79-3.87(m，1H，哌嗪环)，4.27(dq，2H，J＝7.3，4.0Hz，-O-CH2-C)，4.96(dt，1H，J＝8.9，4.3Hz，-N-CH-CO)，6.90(d，1H，J＝8.6Hz，-NH-).实施例6用1-(2-氨基-4-甲基-1-氧戊基)-4-(4-甲基苯基磺酰基)哌嗪盐酸盐代替1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐，重复实施例1的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(2s)-1-[[4-(4-甲基苯基-磺酰基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯(4.31g，95.1％)。1HNMR(CDCl3)δ0.87(d，3H，J＝6.3Hz，-C-CH3)，0.94(d，3H，J＝6.3Hz，-C-CH3)，1.30(t，3H，J＝7.3Hz，-C-CH3)，1.31-1.55(m，3H，-C-CH2-CH-C2)，2.45(s，6H，-ph-CH3)，2.70-2.84(m，2H，哌嗪环)，3.22-3.54(m，4H，哌嗪环)，3.43(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，3.61(d，1H，J＝2.0Hz，环氧环)，3.68-3.78(m，1H，哌嗪环)，3.96-4.06(m，1H，哌嗪环)，4.25(dq，2H，J＝7.3，4.0Hz，-O-CH2-C)，4.87(dt，1H，J＝9.2，4.0Hz，-N-CH-CO)，6.81(d，1H，J＝8.6H2，-NH-)，7.35(d，2H，J-7.9Hz，芳香环)，7.63(d，2H，J＝8.3Hz，芳香环).实施例7用1-(2-氨基-4-甲基-1-氧戊基)-4-(2-氯苯基)哌嗪盐酸盐代替1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐，重复实施例1的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯(0.65g，35.9％)。1HNMR(CDCl3)δ0.93(d，3H，J＝6.3Hz，-C-CH3)，1.01(d，3H，J＝6.3Hz，-C-CH3)，1.32(t，3H，J＝7.3Hz，-C-CH3)，1.41-1.61(m，3H，-C-CH2-CH-C2)，2.96-3.10(m，4H，哌嗪环)，3.49(d，1H，J＝2.0Hz，环氧环)，3.61-3.81(m，3H，哌嗪环ring)，3.68(d，1H，J＝2.0Hz，环氧环)，3.90-3.98(m，1H，哌嗪环)，4.27(dq，2H，J＝7.3，4.0Hz，-O-CH2-C)，5.03(dt，1H，J＝8.9，4.3Hz，-N-CH-CO)，6.91(d，1H，J＝8.6Hz，-NH-)，7.00-7.06(m，2H，芳香环)，7.21-7.27(m，1H，芳香环)，7.37-7.41(m，1H，芳香环).实施例8用1-(2-氨基-4-甲基-1-氧戊基)-4-(3-氯苯基)哌嗪盐酸盐代替1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐，重复实施例1的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(3-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯(1.24g，68.4％)。1HNMR(CDCl3)δ0.93(d，3H，J＝6.3Hz，-C-CH3)，1.00(d，3H，J＝6.3Hz，-C-CH3)，1.32(t，3H，J＝7.3Hz，-C-CH3)，1.42-1.63(m，3H，-C-CH2-CH-C2)，3.17-3.25(m，4H，哌嗪环)，3.48(d，1H，J＝2.0Hz，环氧环)，3.60-3.90(m，4H，哌嗪环)，3.67(d，1H，J＝2.0Hz，环氧环)，4.27(dq，2H，J＝7.3，4.0Hz，-O-CH2-C)，5.02(dt，1H，J＝8.9，4.3Hz，-N-CH-CO)，6.77-6.81(m，1H，芳香环)，6.86-6.89(m，3H，芳香环和-NH)，7.16-7.22(m，1H，芳香环).实施例9用1-(2-氨基-4-甲基-1-氧戊基)-4-(4-氯苯基)哌嗪盐酸盐代替1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐，重复实施例1的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯(0.55g，27.1％)。1HNMR(CDCl3)δ0.93(d，3H，J＝6.3Hz，-C-CH3)，1.0(d，3H，J＝6.3Mz，-C-CH3)，1.32(t，3H，J＝7.3Hz，-C-CH3)，1.42-1.63(m，3H，-C-CH2-CH-C2)，3.12-3.20(m，4H，哌嗪环)，3.48(d，1H，J＝2.0Hz，环氧环)，3.60-3.90(m，4H，哌嗪环)，3.67(d，1H，J＝2.0Hz，环氧环)，4.27(dq，2H，J＝7.3，4.0Hz，-O-CH2-C)，5.02(dt，1H，J＝8.9，4.3Hz，-N-CH-CO)，6.83-6.87(m，2H，芳香环)，6.90(d，1H，J＝9.9Hz，-NH)，7.21-7.3(m，2H，芳香环).实施例10用1-(2-氨基-4-甲基-1-氧戊基)-4-(4-甲氧基苯基)哌嗪盐酸盐代替1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐，重复实施例1的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯(0.94g，65.2％)。1HNMR(CDCl3)δ0.92(d，3H，J＝6.6Hz，-C-CH3)，1.00(d，3H，J＝6.3Hz，-C-CH3)，1.32(t，3H，J＝7.3Hz，-C-CH3)，1.40-1.60(m，3H，-C-CH2-CH-C2)，3.03-3.11(m，4H，哌嗪环)，3.49(d，1H，J＝2.0Hz，环氧环)，3.60-3.88(m，4H，哌嗪环ring)，3.67(d，1H，J＝2.0Hz，环氧环)，3.78(s，3H，-O-CH3)，4.27(dq，2H，J＝7.3，4.0Hz，-O-CH2-C)，5.03(dt，1H，J＝8.9，4.3Hz，-N-CH-CO)，6.83-6.96(m，5H，芳香环和-NH).实施例11用1-((s)-2-氨基-3-甲基-1-氧丁基)-4-(2-氯苯基)哌嗪盐酸盐代替1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐，重复实施例1的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-甲基]丙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯(1.3g，57.4％)，为无色油状物。实施例12用1-(2-氨基-1-氧乙基)-4-(2-氯苯基)-哌嗪盐酸盐代替1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐，重复实施例1的方法得到(2s，3s)-3-[[[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]甲基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯(1.75g，53.5％)，为无色油状物。实施例13用1-((s)-2-氨基-1-氧丙基)-4-(2-氯苯基)-哌嗪盐酸盐代替1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐，重复实施例1的方法得到(2s，3s)-3-[[[(1s)-1-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯(1.23g，55.0％)，为无色油状物。实施例14用1-((s)-2-氨基-3-甲基-1-氧戊基)-4-(2-氯苯基)哌嗪盐酸盐代替1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐，重复实施例1的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯(1.48g，56.6％)，为无色油状物。实施例15用1-(3-氨基-1-氧丙基)-4-(2-氯苯基)-哌嗪盐酸盐代替1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐，重复实施例1的方法得到(2s，3s)-3-[[[2-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯(1.16g，52.9％)，为无色油状物。实施例16用1-(2-甲氨基-1-氧乙基)-4-(2-氯苯基)-哌嗪盐酸盐代替1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐，重复实施例1的方法得到(2s，3s)-3-[[[[N-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]甲基]N-甲基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯(1.55g，76.7％)，为无色油状物。实施例17用1-(1-(2-吡咯烷基)-1-氧甲基)-4-(2-氯苯基)-哌嗪盐酸盐代替1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐，重复实施例1的方法得到(2s，3s)-3-[[(2s)-2-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-1-吡咯烷基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯(1.42g，49.9％)，为无色油状物。实施例18用1-((s)-2-氨基-3-(乙酰氨基甲硫基)-1-氧丙基)-4-(2-氯苯基)哌嗪盐酸盐代替1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐，重复实施例1的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-乙酰氨基]甲硫基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯(1.19g，43.7％)，为无色油状物。实施例19用1-((s)-2-氨基-4-甲硫基-1-氧丁基)-4-(2-氯苯基)哌嗪盐酸盐代替1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐，重复实施例1的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-4-甲硫基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯(1.54g，61.5％)，为无色油状物。实施例20用1-((s)-2-氨基-4-氨基甲酰基-1-氧丁基)-4-(2-氯苯基)哌嗪盐酸盐代替1-(2-氨基-1-氧-3-苯基丙基)-4-(4-氟苯基)哌嗪盐酸盐，重复实施例1的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-3-氨基甲酰基]丙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯(0.2g，5.8％)，为无色油状物。实施例21在冰浴中，向(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯(0.5g，1.06mmol)的乙醇(20ml)溶液中加入0.1N-氢氧化钠/乙醇(16ml)并将该混合物在室温搅拌20小时。将该混合物倒入冷水中并用1N-盐酸酸化，过滤回收所得白色沉淀并干燥。将该沉淀从乙酸乙酯-己烷中重结晶得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸(0.36g，77.8％)1HNMR(CDCl3)2.34-2.41(m，1H，哌嗪环)，2.82-2.96(m，2H，哌嗪环)，2.99-3.08(m，1H，哌嗪环)，3.06(d，2H，J＝7.3Hz，ph-CH2-C-)，3.16-3.24(m，1H，哌嗪环)，3.49-3.58(m，1H，哌嗪环)，3.55(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，3.57(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，3.71(t，2H，J＝5.1Hz，哌嗪环)，4.5-6.0(brd，1H，-COOH)，5.23(q，1H，J＝7.9Hz，-N-CH-CO)，6.74-6.82(m，2H，芳香环)，6.91-7.00(m，2H，芳香环)，7.20-7.35(m，5H，芳香环)，8.23(d，1H，J＝3.6Hz，-NH-).实施例22用(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(2-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯代替(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯，重复实施例21的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(2-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸(0.1g，29.6％)。1HNMR(CDCl3)δ2.38-2.43(m，1H，哌嗪环)，2.83-2.93(m，2H，哌嗪环)，2.95-3.08(m，1H，哌嗪环)，3.06(d，2H，J＝7.6Hz，ph-CH2-C-)，3.20-3.28(m，1H，哌嗪环)，3.49-3.66(m，1H，哌嗪环)，3.55(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，3.58(d，1H，J＝1.3Hz，环氧环)，3.67-3.80(m，2H，哌嗪环)，4.0-6.0(brd，1H，-COOH)，5.23(q，1H，J＝7.9Hz，-N-CH-CO)，6.77-6.87(m，1H，芳香环)，6.93-7.09(m，3H，芳香环)，7.20-7.36(m，5H，芳香环)，8.23(d，1H，J＝8.6Hz，-NH-).实施例23用(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯代替(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯，重复实施例21的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸(0.13g，69.5％)。1HNMR(CDCl3)δ0.96(d，3H，J＝6.6Hz，-C-CH3)，0.99(d，3H，J＝6.59Hz，-C-CH3)，1.42(ddd，1H，J＝14.1，10.5，3.6Hz，-C-CH2-C)，1.6-1.82(m，1H，-C-CH-C3)，1.69(ddd，1H，J＝14.5，10.7，4.23Hz，-C-CH2-C)，3.08-3.26(m，4H，哌嗪环)，3.55(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，3.60-3.92(m，4H，哌嗪环)，3.62(d，1H，J＝1.8Hz，环氧环)，5.08(ddd，1H，J＝10.6，8.6，3.6Hz，-N-CH-CO)，5.2-6.4(brd，1H，-COOH)，6.84-7.03(m，4H，芳香环)，8.18(d，1H，J＝8.6Hz，-NH-).实施例24用(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[(4-苯基-1-哌嗪基)羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯代替(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯，重复实施例21的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[(4-苯基-1-哌嗪基)羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸(1.06g，29.1％)。1HNMR(CDCl3)δ0.96(d，3H，J＝6.6Hz，-C-CH3)，0.99(d，3H，J＝6.26Hz，-C-CH3)，1.37-1.47(m，1H，-C-CH-C2)，1.64-1.80(m，2H，-C-CH2-C-)，3.17-3.36(m，4H，哌嗪环)，3.55(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，3.62(d，1H，J＝1.3Hz，环氧环)，3.70-3.90(m，4H，哌嗪环)，5.10(m，1H，-N-CH-CO)，6.5-7.5(brd，1H，-COOH)，6.87-6.96(m，3H，芳香环)，7.27-7.33(m，2H，芳香环)，8.20(d，1H，J＝8.6Hz，-NH-).实施例25用(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[(4-二甲基氨磺酰-1-哌嗪基)羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯代替(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯，重复实施例21的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[(4-二甲基氨磺酰-1-哌嗪基)羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸(1.28g，39.0％)。1HNMR(CDCl3)δ0.94(d，3H，J＝6.3Hz，-C-CH3)，0.96(d，3H，J＝5.6Hz，-C-CH3)，1.36-1.44(m，1H，-C-CH-C2)，1.61-1.68(m，2H，-C-CH2-C-)，2.85(s，6H，-N-CH3)，3.17-3.35(m，4H，哌嗪环)，3.48-3.60(m，2H，哌嗪环)，3.58(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，3.62(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，3.70-3.80(m，1H，哌嗪环)，3.83-3.95(m，1H，哌嗪环)，4.95-5.05(m，1H，-N-CH-CO)，7.7-8.1(brd，1H，-COOH)，7.94(d，1H，J＝8.6Hz，-NH-).实施例26用(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-甲基苯基磺酰基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯代替(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯，重复实施例21的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-甲基苯基磺酰基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸(2.8g，70.0％)。1HNMR(CDCl3)δ0.90(d，3H，J＝6.6Hz，-C-CH3)，0.93(d，3H，J＝6.6Hz，-C-CH3)，1.23-1.33(m，1H，-C-CH-C2)，1.53-1.67(m，2H，-C-CH2-C-)，2.45(s，3H，-ph-CH3)，2.73-2.91(m，2H，哌嗪环)，3.28-3.59(m，4H，哌嗪环)，3.45(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，3.48(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，3.70-3.83(m，1H，哌嗪环)，3.98-4.08(m，1H，哌嗪环)，4.85-4.97(m，1H，-N-CH-CO)，7.35(d，2H，J＝7.9Hz，芳香环)，7.63(d，2H，J＝8.3Hz，芳香环)，7.97(d，1H，J＝8.6H，-NH-).实施例27用(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯代替(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯，重复实施例21的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸(0.41g，67.2％)。1HNMR(CDCl3)δ0.97(d，3H，J＝6.9Hz，-C-CH3)，0.98(d，3H，J＝7.3Hz，-C-CH3)，1.38-1.47(m，1H，-C-CH-C2)，1.65-1.77(m，2H，-C-CH2-C-)，2.98-3.19(m，4H，哌嗪环)，3.55(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，3.61-3.77(m，2H，哌嗪环)，3.64(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，3.77-3.89(m，1H，哌嗪环)，3.89-4.15(m，1H，哌嗪环)，5.04-5.18(m，1H，-N-CH-CO)，7.00-7.06(m，2H，芳香环)，7.21-7.28(m，1H，芳香环)，7.37-7.41(m，1H，芳香环)，8.25(d，1H，J＝8.9Hz，-NH-).实施例28用(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(3-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯代替(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯，重复实施例21的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(3-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸(0.39g，67.2％)。1HNMR(CDCl3)δ0.96(d，3H，J＝6.6Hz，-C-CH3)，0.99(d，3H，J＝6.6Hz，-C-CH3)，1.36-1.47(m，1H，-C-CH-C2)，1.64-1.80(m，2H，-C-CH2-C-)，3.18-3.36(m，4H，哌嗪环)，3.53(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，3.60-3.92(m，4H，哌嗪环)，3.62(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，5.04-5.12(m，1H，-N-CH-CO)，5.5-6.5(brd，1H，-COOH)，6.77-6.82(m，1H，芳香环)，6.88-6.90(m，2H，芳香环)，7.17-7.23(m，1H，芳香环)，8.21(d，1H，J＝8.6Hz，-NH-).实施例29用(2s，3s)-3[[[[(1s)-1-[[4-(4-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯代替(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯，重复实施例21的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸(0.33g，63.4％)。1HNMR(CDCl3)0.96(d，3H，J＝6.6Hz，-C-CH3)，0.99(d，3H，J＝6.59Hz，-C-CH3)，1.36-1.47(m，1H，-C-CH-C2)，1.64-1.80(m，2H，-C-CH2-C-)，3.10-3.31(m，4H，哌嗪环)，3.54(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，3.58-3.93(m，4H，哌嗪环)，3.62(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，5.04-5.12(m.1H，-N-CH-CO)，4.8-6.5(brd，1H，-COOH)，6.82-6.88(m，2H，芳香环)，7.21-7.26(m，1H，芳香环)，8.18(d，1H，J＝8.9Hz，-NH-).实施例30用(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯代替(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯，重复实施例21的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸(0.49g，56.7％)。1HNMR(CDCl3)δ0.95(d，3H，J＝6.3Hz，-C-CH3)，0.99(d，3H，J＝6.6Hz，-C-CH3)，1.38-1.46(m，1H，-C-CH-C2)，1.63-1.80(m，2H，-C-CH2-C-)，3.05-3.19(m，4H，哌嗪环)，3.55(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，3.60-3.90(m，4H，哌嗪环)，3.62(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，5.06-5.13(m，1H，-N-CH-CO)，4.8-5.8(brd，1H，-COOH)，6.84-7.00(m，4H，芳香环)，8.14(d，1H，J＝8.6Hz，-NH-).实施例31用(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-甲基]丙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯代替(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯，重复实施例21的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-甲基]丙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸(1.09g，89.5％)，为无色晶体。1HNMR(CDCl3)δ0.98(d，3H，J＝6.6Hz，-C-CH3)，1.01(d，3H，J＝6.6Hz，-C-CH3)，2.10(m，1H，-CH-C2)，2.98-3.14(m，4H，哌嗪环)，3.64(d，J＝1.6Hz，1H，环氧环)，3.66(d，1H，J＝1.6Hz，环氧环)，3.68-4.01(m，4H，哌嗪环)，4.98(dd，1H，J＝8.9，5.9Hz，-N-CH-CO)，7.00-7.06(m，2H，芳香环)，7.24(m，1H，芳香环)，7.39(m，1H，芳香环)，和8.29(d，1H，J＝8.9Hz，-NH).实施例32用(2s，3s)-3-[[[[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]甲基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯代替(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯，重复实施例21的方法得到(2s，3s)-3-[[[[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]甲基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸(1.08g，66.5％)，为无色晶体。1HNMR(CDCl3)δ3.02-3.09(m，4H，哌嗪环)，3.63(m，2H，哌嗪环)，3.66(d，1H，J＝1.6Hz，环氧环)，3.78(d，1H，J＝1.6Hz，环氧环)，3.80(m，2H，哌嗪环)，4.11(dd，1H，J＝17.0，5.4Hz，-N-CH-CO)，4.33(dd，1H，J＝17.0，5.4Hz，-N-CH-CO)，6.99-7.05(m，2H，芳香环)，7.23(m，1H，芳香环)，7.38(m，1H，芳香环)，和8.67(brd，1H，-NH).实施例33用(2s，3s)-3-[[[(1s)-1-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯代替(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯，重复实施例21的方法得到(2s，3s)-3-[[[(1s)-1-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸(0.87g，77.5％)，为无色晶体。1HNMR(CDCl3)δ1.41(d，3H，J＝6.8Hz，-C-CH3)，2.98-3.13(m，4H，哌嗪环)，3.61(d，1H，J＝1.6Hz，环氧环)，3.63(d，1H，J＝1.6Hz，环氧环)，3.67-3.84(m，3H，哌嗪环)3.95(m，1H，哌嗪环)，5.06(dq，1H，J＝8.4，6.8Hz，-N-CH-CO)，7.00-7.06(m，2H，芳香环)，7.24(m，1H，芳香环)，7.39(m，1H，芳香环)，和8.13(d，1H，J＝8.4，-NH).实施例34用(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯代替(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯，重复实施例21的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸(1.07g，77.4％)，为无色晶体。1HNMR(CDCl3)δ0.92(t，3H，J＝7.3Hz，-C-CH3)，1.00(d，3H，J＝6.8Hz，-C-CH3)，1.22(m，1H，-CH-C2-)，1.54(m，1H，-CH-C)，1.84(m，1H，-CH-C)，2.97-3.17(m，4H，哌嗪环)，3.60(d，1H，J＝1.6Hz，环氧环)，3.64(d，1H，J＝1.6Hz，环氧环)，3.65-3.79(m，2H，哌嗪环)，3.85-4.05(m，2H，哌嗪环)，4.98(dd，1H，J＝9.2，6.3Hz，-N-CH-CO)，7.00-7.06(m，2H，芳香环)，7.24(m，1H，芳香环)，7.39(m，1H，芳香环)，和8.29(d，1H，J＝9.2Hz，-NH).实施例35用(2s，3s)-3-[[[2-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯代替(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯，重复实施例21的方法得到(2s，3s)-3-[[[2-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸(0.85g，78.9％)，为无色晶体。1HNMR(DMSO-d6)δ2.56(t，2H，J＝6.9Hz，-C-CH2-CO)，2.91-2.98(m，4H，哌嗪环)，3.35(td，2H，J＝6.9，5.6Hz，N-CH2-C)，3.49(d，1H，J＝2.0Hz，环氧环)，3.59(d，1H，J＝1.6Hz，环氧环)，3.56-3.64(m，2H，哌嗪环)，3.80(m，2H，哌嗪环)，7.07(td，1H，J＝7.9，1.7Hz，芳香环)，7.15(dd，1H，J＝7.9，1.7Hz，芳香环)，7.43(dd，1H，J＝7.9，1.7Hz，芳香环)，7.31(m，1H，芳香环)，8.40(t，1H，J＝5.6Hz，-NH)，和13.50(brd，1H，-COOH).实施例36用(2s，3s)-3-[[[[N-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]甲基]-N-甲基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯代替(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯，重复实施例21的方法得到(2s，3s)-3-[[[[N-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]甲基]-N-甲基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸(1.08g，74.8％)，为无色晶体。1HNMR(CDCl3)δ3.01-3.10(m，6H，哌嗪环)，3.27(s，3H，-NCH3)，3.63-3.71(m，2H，-N-CH2-CO)，3.75(d，1H，J＝1.9Hz，环氧环)，3.78-3.90(m，2H，哌嗪环)，4.02(d，1H，J＝1.9Hz，环氧环)，6.98-7.05(m，2H，芳香环)，7.24(m，1H，芳香环)，和7.36(m，1H，芳香环).实施例37用(2s，3s)-3-[[(2s)-2-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-1-吡咯烷基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯代替(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯，重复实施例21的方法得到(2s，3s)-3-[[(2s)-2-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-1-吡咯烷基]羰基]环氧乙烷羧酸(0.94g，7.07％)，为无色晶体。1HNMR(CDCl3)δ1.94-2.11(m，2H，吡咯烷环)，2.17-2.30(m，2H，吡咯烷环)，3.06-3.20(m，4H，哌嗪环)，3.63-3.76(m，2H，哌嗪环)，3.81-3.85(m，5H)，4.00(dt，1H，J＝13.7，4.4Hz，吡咯烷环)，4.96(dd，1H，J＝7.8，4.3Hz，吡咯烷环)，6.97-7.04(m，2H，芳香环)，7.24(m，1H，芳香环)，和7.37(m，1H，芳香环).实施例38用(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-乙酰氨基甲硫基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯代替(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯，重复实施例21的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-乙酰氨基甲硫基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸(0.88g，77.9％)，为无色晶体。1HNMR(CDCl3)δ2.05(s，3H，-COCH3)，2.85(dd，1H，J＝13.9，8.3Hz，-C-CH-S)，2.96-3.16(m，5H)，3.69(d，1H，J＝1.6Hz，环氧环)，3.78(d，1H，J＝1.6Hz，环氧环)，3.71-3.89(m，4H，哌嗪环)，4.39(d，2H，J＝8.3Hz，-S-CH2-N)，5.21(m，1H，-N-CH-CO)，6.97-7.02(m，2H，芳香环)，7.22(m，1H，芳香环)，7.36(m，1H，芳香环)，7.80(d，1H，J＝8.3，-NH)，和9.00(brd，1H，-NH).实施例39用(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲硫基]丙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯代替(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯，重复实施例21的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲硫基]丙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸(1.17g，80.7％)，为无色晶体。1HNMR(CDCl3)δ1.98(dd，2H，J＝6.9，6.6Hz，-CH-C-C)，2.12(s，3H，-SCH3)，2.57(dt，2H，J＝6.9，2.3Hz，-C-CH2-C-S)，3.05-3.19(m，4H，哌嗪环)，3.63(d，1H，J＝1.9Hz，环氧环)，3.65(d，1H，J＝1.9Hz，环氧环)，3.71-3.94(m，4H，哌嗪环)，5.26(m，1H，-N-CH-CO)，7.00-7.06(m，2H，芳香环)，7.24(m，1H，芳香环)，7.38(m，1H，芳香环)，和8.18(d，1H，J＝8.6，-NH).实施例40用(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-3-氨基甲酰基]丙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯代替(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯，重复实施例21的方法得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(2-氯苯基)-1-哌嗪基]羰基]-3-氨基甲酰基]丙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸(0.14g，74.5％)，为无色晶体。1HNMR(CDCl3)δ1.85(brd，2H，-NH2)，2.14(m，1H.-C-CH-C-CO-)，2.36-2.53(m，3H，-CH-CH2-C-CO-)，2.89-3.06(m，4H，哌嗪环)，3.57-3.79(m，6H，哌嗪环和环氧环)，5.02(m，1H，-N-CH-CO)，6.96-7.02(m，2H，芳香环)，7.21(m，1H，芳香环)，7.37(m，1H，芳香环)，和7.88(brd，1H，-NH).实施例41用(2s，3s)-3-[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-1-环戊基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯代替(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-2-苯基]乙基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸乙酯，重复实施例21的方法得到(2s，3s)-3-[[[(1s)-1-[[4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基]羰基]-1-环戊基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸(0.52g，55.6％)，为无色晶体。1HNMR(DMSO-d6)δ1.61(m，4H，环戊基)，1.87(m，2H，环戊基)，2.22(m，2H，环戊基)，2.97(m，4H，哌嗪)，3.45(d，1H，J＝1.6Hz，环氧环)，3.58(d，1H，J＝2.1Hz，环氧环)，3.60(m，4H，哌嗪环)，6.95-7.20(m，4H，芳香环)，8.89(s，1H，-NH)和13.4(brd，1H，-COOH).实施例42向在实施例26中得到的(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-甲基苯基磺酰基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羧酸(0.935g，2mmol)的二氯甲烷(15ml)溶液中加入邻-苄基羟胺(0.638g，4.0mmol)和N-甲基-吗啉(0.405g，4.0mmol)。然后在冰冷却下滴加二环己基碳化二亚胺(0.619g，3.0mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液。将该混合物在室温搅拌24小时，然后过滤。用二氯甲烷(20ml)洗涤该沉淀，将洗液和滤液合并并用水洗涤。将有机相用无水硫酸镁干燥，减压浓缩并将残余物在硅胶上进行色谱分离。用乙酸乙酯-己烷(2∶1)洗脱得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-甲基苯基磺酰基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷苄氧羰基酰胺(carbobenzyloxamide)(0.86g，75.1％)。1HNMR(CDCl3)δ0.84(d，3H，J＝6.2Hz，-C-CH3)，0.91(d，3H，J＝6.5Hz，-C-CH3)，1.23-1.31(m，1H，-C-CH2-C)，1.36-1.58(m，2H，-C-CH-C，-C-CH-C2)，2.43(s，3H，-ph-CH3)，2.72-2.86(m，2H，哌嗪环)，3.14-3.27(m，2H，哌嗪环)，3.31-3.51(m，2H，哌嗪环)，3.40(d，1H，J＝1.4Hz，环氧环)，3.43(d，1H，J＝1.7Hz，环氧环)，3.63-3.74(m，1H，哌嗪环)，3.84-3.98(m，1H，哌嗪环)，4.80-4.90(m，1H，-N-CH-CO)，4.87(s，3H，-O-CH2-ph)，7.30-7.40(m，8H，芳香环，-NH-)，7.56-7.66(m，2H，芳香环)，9.05(s，1H，-NH-).实施例43向实施例42中得到的(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-甲基苯基磺酰基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷苄氧羰基酰胺(0.57g，1mmol)的甲醇(25ml)溶液中加入催化量的钯-炭并进行催化还原。反应完成后，滤除钯-炭，浓缩滤液并在硅胶上进行色谱分离。用乙酸乙酯洗脱得到(2s，3s)-3-[[[[(1s)-1-[[4-(4-甲基苯基磺酰基)-1-哌嗪基]羰基]-3-甲基]丁基]氨基]羰基]环氧乙烷羰基羟基酰氨酸(carbohydroxamicacid)(0.18g，37.3％)。1HNMR(CDCl3)δ0.84(d，3H，J＝5.9Hz，-C-CH3)，0.90(d，3H，J＝5.9Hz，-C-CH3)，1.24-1.33(m，1H，-C-CH2-C)，1.50-1.64(m，2H，-C-CH-C，-C-CH-C2)，2.42(s，3H，-ph-CH3)，2.90-3.20(m，4H，哌嗪环)，3.44-3.80(m，3H，哌嗪环)，3.51(s，1H，环氧环)，3.68(s，1H，环氧环)，4.56-4.66(m，1H，哌嗪环)，4.76-4.90(m，1H，-N-CH-CO)，7.33(d，2H，J＝7.8Hz，芳香环)，7.62(dd，2H，J＝7.8，1.7Hz，芳香环)，7.84-7.94(brd，1H，-NH-)，9.80-10.40(brd，1H，-OH).制剂实施例1片剂实施例30的化合物80mg淀粉17mg硬脂酸镁3mg将上述每片的组分用常规方法压成片剂。如果需要，可将该片剂糖包衣。制剂实施例2胶囊实施例25的化合物50mg乳糖100mg淀粉30mg硬脂酸镁10mg将上述每片组分混合并装入明胶胶囊壳中。制剂实施例3注射液实施例28的化合物2.5mg氯化钠900mg1N-氢氧化钠适量注射用蒸馏水加至100ml将上述组分按常规方式混合得到注射液。制剂实施例4眼用溶液实施例25的化合物50mg硼酸700mg硼砂适量氯化钠500mg乙二胺四乙酸钠0.05mg氯化苄烷铵0.005mg灭菌纯净水加至100ml将上述组分按常规方式混合得到眼用溶液。发明效果本发明通式(I)化合物具有半胱氨酸蛋白酶抑制活性，因此可用作治疗肌营养不良，肌萎缩，脑梗塞，中风(大脑出血)，早老性痴呆症，与脑损伤有关的意识紊乱或运动障碍，多发性硬化症，末梢神经病，白内障，炎症，过敏，爆发性肝炎，骨质疏松症，高钙血，乳腺癌，前列腺癌，前列腺肥大等的药物，或作为癌症抑制剂或抗转移剂，或血小板聚集抑制剂。权利要求1.通式(I)化合物及其盐[其中R1代表可被酯化的羧基或可被取代的酰氨化的羧基；R2代表氢或低级烷基并且可与R3或R4连接形成环；R3和R4可以相同或不同并且分别代表氢，可被取代的低级烷基或可被取代的硫化物基；R3和R4可以结合形成环；R5代表式(II)取代的苯基(其中R6代表卤素或烷氧基)或式(III)取代的磺酰基-SO2-R7(III)(其中R7代表可被低级烷基取代的芳基或可被取代的氨基)；n是0或1]。2.根据权利要求1的化合物或其盐，其中R1是可被酯化的羧基或可被羟基或芳烷氧基取代的酰氨化的羧基。3.根据权利要求1的化合物或其盐，其中R2是氢或甲基。4.根据权利要求1的化合物或其盐，其中由R2和R3或R4形成的环是吡咯烷。5.根据权利要求1的化合物或其盐，其中R3和R4可以相同或不同并且各自是氢，可被芳香环或氨基甲酰基取代的低级烷基，可被酰氨基取代的硫化物基。6.根据权利要求1的化合物或其盐，其中有R3和R4连接形成的环是环戊烷。7.根据权利要求1的化合物或其盐，其中代表取代的苯基的式(II)中的R6代表氯或氟。8.根据权利要求1的化合物或其盐，其中代表取代的磺酰基的式(III)中的R7是被低级烷基取代的苯基或二甲氨基。9.一种药物组合物，包括作为活性成分的权利要求1的化合物或其盐。10.一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂组合物，包括作为活性成分的权利要求1的化合物或其盐。11.一种需钙蛋白酶抑制剂组合物，包括作为活性成分的权利要求1的化合物或其盐。全文摘要通式(Ⅰ)化合物及其盐,[其中R文档编号C07D303/48GK1195343SQ96196780公开日1998年10月7日申请日期1996年7月4日优先权日1995年7月13日发明者井上淳,吉田裕佳,崔応涉,东光佳申请人:千寿制药株式会社