多重PCR引物、试剂盒及用途的制作方法

文档序号:12545131阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种多重PCR引物,其特征在于,所述多重PCR引物由以下引物对组成:

SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示引物对,SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示引物对,SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12所示引物对,SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18所示引物对,SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:24所示引物对,以及SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:28所示引物对。

2.权利要求1所述的多重PCR引物,其特征在于,所述多重PCR引物还包括以下引物对中的至少一对:SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示引物对、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示引物对、SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10所示引物对、SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14所示引物对、SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16所示引物对、SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:20所示引物对以及SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:22所示引物对以及SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:26所示引物对。

3.权利要求1或2任一所述的多重PCR引物在获得和/或检测EGFR、KRAS和/或BRAF基因序列中的用途。

4.一种试剂盒,其包括权利要求1或2任一所述的多重PCR引物。

5.权利要求4所述的试剂盒在获得和/或检测EGFR、KRAS和/或BRAF基因序列中的用途。

6.一种扩增基因序列目标区域的方法,其特征在于,所述方法包括利用权利要求1或2任一所述的多重PCR引物进行所述扩增。

7.一种EGFR、KRAS和/或BRAF基因检测的方法,其特征在于,包括:

(1)利用权利要求6所述的方法对待测样品中的至少一部分核酸进行扩增,获得扩增产物;

(2)分析所述扩增产物,以获得EGFR、KRAS和/或BRAF基因检测结果。

8.权利要求7所述的方法,其特征在于,所述核酸为DNA和/或RNA。

9.权利要求7所述的方法,其特征在于,所述核酸为RNA,步骤(1)包括:

(1-1)利用所述多重PCR引物中的上游或下游引物将所述RNA反转录为cDNA;以及

(1-2)利用所述多重PCR引物中对应的下游或上游引物对所述cDNA进行扩增,获得扩增产物。

10.权利要求7所述的方法,其特征在于,步骤(2)包括:

(2-1)对所述扩增产物进行测序;以及

(2-2)将测序结果分别与EFGR、KRAS和/或BRAF基因野生型序列比对,以确定EFGR、KRAS和/或BRAF基因的突变位点。

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