本发明属药物
技术领域：
，涉及一类新型三环异恶唑类衍生物，以及所述化合物的药学可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药，它们的制备方法及其作为治疗由于真菌感染引起的各类疾病的药物中的用途。
背景技术：
：真菌感染是一种常见病，可引起皮肤，毛发和指(趾)甲等浅表处的真菌感染，也可引起皮下组织，内膜等深部组织的真菌感染，主要分为浅表真菌感染和系统性真菌感染。近年来随着器官移植手术的广泛开展，免疫抑制剂的使用大幅度增加，以及恶性肿瘤患者的放、化疗损害人体的正常的免疫功能，使得真菌感染在临床上成为越来越普遍的问题，严重威胁着人类的健康，所以寻找新的、更理想的抗真菌药物成为研究的热点。羊毛甾醇14α-去甲基化酶(cyp51)是抗真菌药物研究最活跃的的靶点，尤其是一些氮唑类药物的研究开发。氮唑类是20世70年代从农药中的植物抗真菌剂中开发出来的一类药物，唑类抗真菌药物由于其抗菌谱广，抗真菌活性较好，毒性低而成为目前临床上用的比较多的一类药物，尤其在治疗深部真菌感染方面。氮唑类化合物如三唑类、咪唑类、苯并咪唑类等具有广泛的生物活性，在临床发挥了重要作用，如咪唑类药物咪康唑(miconazole)、克霉唑(clotrimazole)、益康唑(econazole)、酮康唑(ketoconazole)等和三唑类药物如氟康唑(fluconazole)、伊曲康唑(itraconazole)、伏立康唑(voriconazole)以及泊沙康唑(posaconazole)等都是临床广泛使用的一类合成抗真菌药。尽管唑类药物在临床有着不可替代的作用，但该类药物暴露出越来越多的不足，如抗菌谱窄、耐药性、毒副作用、药物相互作用等，开发新型的广谱、高效、低毒、给药方式多样化的抗真菌药物一直是该领域研究的重要课题。本发明人在参考文献的基础上，设计并合成了一系列新型三环异恶唑类衍生物。此类化合物并经体外抗真菌活性测试，表明该类化合物具有较强的抗真菌活性，在治疗真菌感染疾病中具有较大的研究价值。技术实现要素：：本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种新型三环异恶唑类衍生物，以及所述衍生物的药学可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药。本发明的再一的目的是，提供如上所述衍生物的制备方法。本发明的另一的目的是，提供如上所述衍生物的用途。本发明的第四个目的是，提供一种药物组合物。为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：本发明提供一种通式(i)所示的新型三环异恶唑类衍生物，及其几何异构体或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药；其中，a环部分选自5-7元不饱和脂肪环、6-8元芳香环、5-6元芳香杂环，所述芳香杂环含有1-3个n、o或s的杂原子。x为c、n；y为o、nh；r1选自h、羟基、卤素、硝基、氨基、氰基、(c1-c6)烷基、(c2-c6)烯基、(c2-c6)炔基、(c1-c6)烷氧基、(c1-c6)烷基硫基、任选被羟基、氨基或卤素取代的(c1-c6)烷基或(c1-c6)烷氧基或(c1-c6)烷基硫基、被单或二(c1-c6烷基)取代的氨基、(c1-c6)烷基酰氨基、游离的、成盐的、酯化的和酰胺化的羧基、(c1-c6)烷基亚磺酰基、(c1-c6)烷基磺酰基、(c1-c6)烷基酰基、氨基甲酰基、被单或二(c1-c6烷基)取代的氨基甲酰基、(c1-c3)亚烷基二氧基；r2选自氢、(c1-c6)烷基、被卤素取代的c1-c6烷基、c3-c6环烷基、被卤素取代的c3-c6环烷基、6-10元芳基、5-10元杂芳基。本发明优选通式(i)所示的新型三环异恶唑类衍生物，及其几何异构体或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药；其中a环部分选自5-7元不饱和脂肪环、6-8元芳香环。x为c、n；y为o、nh；r1选自h、羟基、卤素、硝基、氨基、氰基、(c1-c6)烷基、(c2-c6)烯基、(c2-c6)炔基、(c1-c6)烷氧基、(c1-c6)烷基硫基、任选被羟基、氨基或卤素取代的(c1-c6)烷基或(c1-c6)烷氧基或(c1-c6)烷基硫基；r2选自氢、(c1-c6)烷基、被卤素取代的c1-c6烷基、c3-c6环烷基、被卤素取代的c3-c6环烷基、6-10元芳基。本发明优选通式(i)所示的新型三环异恶唑类衍生物，及其几何异构体或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药；其中a环部分选自5-7元不饱和脂肪环、6-8元芳香环。x为c、n；y为o；r1选自h、羟基、卤素、硝基、氨基、氰基、(c1-c6)烷基、(c2-c6)烯基、(c2-c6)炔基、(c1-c6)烷氧基、(c1-c6)烷基硫基、任选被羟基、氨基或卤素取代的(c1-c6)烷基或(c1-c6)烷氧基或(c1-c6)烷基硫基；r2选自氢、(c1-c6)烷基、c3-c6环烷基、6-10元芳基。本发明优选通式(i)所示的新型三环异恶唑类衍生物，及其几何异构体或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药；其中，a环部分选自5-7元不饱和脂肪环、6-8元芳香环。x为c；y为o；r1选自h、羟基、卤素、硝基、氨基、氰基、(c1-c6)烷基、(c2-c6)烯基、(c2-c6)炔基、(c1-c6)烷氧基、(c1-c6)烷基硫基；r2选自氢、(c1-c6)烷基、c3-c6环烷基。本发明优选通式(i)所示的新型三环异恶唑类衍生物，及其几何异构体或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药；其中，a环部分选自5-7元不饱和脂肪环、苯环。x为c；y为o；r1选自h、羟基、卤素、硝基、氨基、氰基、(c1-c4)烷基、(c2-c6)烯基、(c2-c6)炔基、(c1-c4)烷氧基、(c1-c4)烷基硫基；r2选自氢、(c1-c4)烷基、c3-c6环烷基。而且，按照本发明所属领域的一些通常方法，本发明中通式(i)的部分化合物具有碱性基团，可以与酸生成药学上可接受的盐。可药用加成盐包括无机酸和有机酸加成盐，与下列酸加成的盐是特别优选的：盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、苯磺酸、萘二磺酸、乙酸、丙酸、乳酸、三氟乙酸、马来酸、柠檬酸、富马酸、草酸、酒石酸、苯甲酸等。最优选为盐酸。此外，本发明还包括本发明衍生物的前药。本发明衍生物的前药是通式(i)的衍生物，它们自身可能具有较弱的活性甚至没有活性，但是在给药后，在生理条件下(例如通过代谢、溶剂分解或另外的方式)被转化成相应的生物活性形式。通式(i)所示的化合物可以以非溶剂化形式和含有药学上可接受的溶剂(如水、乙醇等)的溶剂化形式。通式(i)所示的化合物可以含有不对称或手性中心，因此可以以不同立体异构形式存在。本发明的所有立体异构形式，包括但不限于非对映异构体、对映异构体和阻转异构体以及它们的混合物(如外消旋混合物)，均包括在本发明的范围内。通式(i)所示的化合物可以以不同的互变异构体形式存在，所有这些形式均包括在本发明的范围内。术语“互变异构体”或“互变异构形式”是指经由低能垒互相转化的不同能量的结构异构体。本发明中“卤素”是指氟、氯、溴或碘代；“烷基”是指直链或支链的烷基；“芳香环”是指除去芳烃中的一个或不同位置的两个氢原子而得到的有机基团，如苯基、萘基；“芳香杂环”是指含有一个或多个选自n、o、s杂原子的单环或多环的环状体系，该环状体系是指具有芳香性的，并且除去环状体系中的一个或不同位置的两个氢原子而得到的有机基团，如噻唑基，咪唑基、吡啶基、吡唑基、(1,2,3)-和(1,2,4)-三唑基、呋喃基、噻吩基、吡咯基，吲哚基，苯并噻唑基，噁唑基，异噁唑基，萘基，喹啉基，异喹啉基，苯并咪唑基，苯并噁唑基等。本发明可以含有通式(i)的衍生物，及其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药作为活性成份，与药学上可接受的载体或赋型剂混合制备成组合物，并制备成临床上可接受的剂型，上述药学上可接受的赋型剂是指任何可用于药学领域的稀释剂、辅助剂和/或载体。本发明的衍生物可以与其他活性成份组合使用，只要它们不产生其他不利的作用，例如过敏反应。本发明的药用组合物可配制成若干种剂型，其中含有药物领域中一些常用的赋形剂。如上所述的若干种剂型可以采用注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、外用搽剂、软膏剂等剂型药物。用于本发明药物组合物的载体是药物领域中可得到的常见类型，包括：粘合剂、润滑剂、崩解剂、助溶剂、稀释剂、稳定剂、悬浮剂、无色素、矫味剂、防腐剂、加溶剂和基质等。药物制剂可以经口服或胃肠外方式(例如静脉内、皮下、腹膜内或局部)给药，如果某些药物在胃部条件下不稳定的，可将其配制成肠衣片剂。本发明可以含有通式(i)的衍生物可以通过包括化学领域众所周知的方法来合成，尤其根据本发明的说明来合成。原料一般可以从商业来源例如阿拉丁、达瑞等试剂公司获得或者使用本领域技术人员所熟知的方法来制备。本发明中室温指环境温度，为10摄氏度至30摄氏度。本发明的积极进步效果在于：本发明提供了一种二氢萘并异噁唑类衍生物，其制备方法、药物组合物和应用。本发明的二氢萘并异噁唑类衍生物对各种浅部和深部真菌具有良好的抗真菌活性，与现有临床应用的抗真菌药物相比，具有高效、低毒性、抗真菌谱广等优点，可用于制备抗真菌药物。下文中提供的实施例和制备例进一步阐明和举例说明本发明化合物及其制备方法。应当理解，下述实例和制备例的范围并不以任何方式限制本发明的范围。按照本发明的式i的化合物，可按照合成路线1的方法制备得来，这些路线中应用的全部可变因数如权利要求中的定义。合成路线：请说明反应中的各变量所代表的含义。如反应路线所示，部分化合物的合成主要有几个步骤：步骤a：原料1与草酸二乙酯在碱性条件下缩合得到中间体2。步骤b：中间体2与盐酸羟胺反应关环得到中间体3。步骤c：中间体3在碱性条件下水解得到中间体4。步骤d：中间体3在ddq条件下脱氢得到中间体5。步骤e：中间体5在碱性条件下水解得到中间体6。步骤f：原料7与醇试剂发生酯化反应得到中间体8。步骤g：中间体8与中间体4或6经酰化反应得到中间体9。步骤h：中间体9在cdi的作用下与咪唑反应得到目标化合物。优选条件如下：在步骤a中，将各种1-四氢萘酮和草酸二乙酯溶解于60ml四氢呋喃中，冰浴条件下缓慢滴加lihmds溶液(1minthf，)滴加完毕升至室温反应，tlc检测反应完毕，将反应液蒸干直接用于下一步反应。在步骤b中，将上步浓缩液溶于冰醋酸中，加入盐酸羟胺，升温至80℃反应8h。tlc监测反应完全。加入乙酸乙酯溶解，水洗，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，经硅胶色谱柱纯化的中间体3。步骤c将中间体3溶于乙醇中，室温搅拌下向溶液中加入1n氢氧化钠水溶液，继续反应1h，tlc监测反应完全。用2n盐酸调节ph＝4-6，析出白色固体得中间体4。步骤d中，中间体3溶于1,4-二氧六环中，加入二氯二氰基苯醌(ddq)，然后升温回流反应12h，加入少量碳酸氢钠淬灭反应，有机溶剂萃取，减压蒸除溶剂，残余物经硅胶柱层析纯化，得到中间体5。步骤e中，中间体5溶于乙醇中，室温搅拌下向溶液中加入1n氢氧化钠水溶液，继续反应1h，tlc监测反应完全。用2n盐酸调节ph＝4-6，析出白色固体得中间体6。步骤f将l-丝氨酸加入到相应的醇试剂中，缓慢滴加socl2，滴毕升温至回流，搅拌至反应液澄清。减压浓缩反应液得到白色固体中间体8。步骤g将中间体4或中间体6、edci和hobt溶于dmf中，搅拌1h后，加入中间体8和diea，室温下搅拌5h，tlc监测反应完全，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤有机层，无水硫酸钠干燥过夜。滤除干燥剂，减压浓缩得中间体9。步骤h将中间体9、cdi和咪唑溶解于乙腈中，在70℃下反应8h，tlc监测反应完全。加压浓缩反应液，将残留物溶于乙酸乙酯，水洗，饱和食盐水洗涤涤，na2so4干燥过夜。滤除干燥剂，减压浓缩得到目标化合物。具体实施方式：不需进一步详细说明，认为本领域熟练技术人员借助于前面的描述，可以最大程度地利用本发明。因此下面提供的实施例旨在阐述而不是限制本发明的范围。原料一般可以从商业来源获得或者使用本领域技术人员所熟知的方法来制备，或根据本发明所述的方法制备。未经特殊说明，所用试剂均为分析纯或化学纯。化合物结构确证所用质谱用agilent1100lc/msd测定。柱层析纯化产物使用的是青岛海洋化工厂生产的100-200目或者200-300目硅胶。实施例1：(s)-2-(4，5-二氢萘并异恶唑-2-甲酰胺基)-3-(1h-咪唑-1-基)丙酸甲酯的制备合成路线如下：试剂与条件：a)草酸二乙酯，lihmds，四氢呋喃；b)盐酸羟胺，冰醋酸；c)1n氢氧化钠，乙醇；d)二氯亚砜，甲醇；e)edci，hobt，dmf；f)cdi，咪唑，乙腈。将1-四氢萘酮3.0g(20.5mmol)和草酸二乙酯3.6g(24.6mmol)溶解于60ml四氢呋喃中，冰浴条件下缓慢滴加lihmds溶液(1minthf，)滴加完毕升至室温反应4h，tlc检测反应完毕，将反应液蒸干直接用于下一步反应。将上步浓缩液溶于60ml冰醋酸中，加入盐酸羟胺1.70g(24.6mmol)，升温至80℃反应8h。tlc监测反应完全。加入100ml乙酸乙酯溶解，水(20ml×3)洗，饱和食盐水(20ml×3)洗，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，经硅胶色谱柱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝50:1)，得类白色粉末状固体i-33.60g，两步收率71.9％。将中间体i-33g(12.3mmol)溶于乙醇中，室温搅拌下向溶液中加入20ml1n氢氧化钠水溶液，继续反应1h，tlc监测反应完全。用2n盐酸调节ph＝4-6，析出白色固体，抽滤，水(10ml×3)洗，滤饼干燥至恒重，得类白色粉末状固体i-42.61g，收率98.5％。将l-丝氨酸4.00g(38.10mmol)加入到40ml无水甲醇中，缓慢滴加socl210ml(137.71mmol)，滴毕升温至回流，搅拌至反应液澄清。减压浓缩反应液得到白色固体5.42g，收率91.86％。ms[m+h]+(m/z)：120.1。将中间体i-41.0g(5mmol)、edc·hcl0.96g(5.5mmol)和hobt0.74g(5.5mmol)溶于30mldmf中，搅拌1h后，加入l-丝氨酸甲酯盐酸盐0.83g(5.5mmol)和diea1.58ml(11mmol)，室温下搅拌5h，tlc监测反应完全，加入30ml水，40ml乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤有机层，无水硫酸钠干燥过夜。滤除干燥剂，减压浓缩得到棕色油状物1.20g，收率76.2％。将中间体i-71.14g(3.61mmol)、cdi1.17g(7.22mmol)和咪唑0.74g(10.83mmol)溶解于30ml乙腈中，在70℃下反应8h，tlc监测反应完全。加压浓缩反应液，将残留物溶于乙酸乙酯，水洗，饱和食盐水洗涤涤，na2so4干燥过夜。滤除干燥剂，减压浓缩得到黄棕色油状物，柱层析得到类白色固体0.87g，收率66.3％。1hnmr(600mhz,dmso-d6)δ9.27(d,j＝8.3hz,1h),7.67(d,j＝7.3hz,1h),7.39(m,3h),7.19(s,1h),6.85(s,1h),4.92(ddd,j＝9.9,8.4,4.6hz,1h),4.54(dd,j＝14.1,4.6hz,1h),4.41(dd,j＝14.1,9.9hz,1h),3.71(s,3h),3.01(t,j＝7.9hz,2h),2.89–2.78(m,2h).按照实施例1的方法，分别使用取代的二氢萘酮为原料，经缩合、关环、水解、酯化等过程制备得到实施例2-10。实施例2：(s)-2-(4，5-二氢萘并异恶唑-2-甲酰胺基)-3-(1h-咪唑-1-基)丙酸异丙酯的制备1hnmr(600mhz,dmso-d6)δ9.23(d,j＝8.1hz,1h),7.67(t,j＝8.4hz,1h),7.62(s,1h),7.39(ddd,j＝10.3,7.3,2.1hz,3h),7.20(s,1h),6.85(s,1h),4.96(m,1h),4.82(m,1h),4.51(dd,j＝14.1,5.0hz,1h),4.41(dd,j＝14.1,9.7hz,1h),3.01(t,j＝7.9hz,2h),2.89–2.79(m,2h),1.20(t,j＝6.5hz,6h).13cnmr(100mhz,dmso-d6)δ168.43,166.47,159.34,154.86,137.78,136.86,130.52,128.79,128.00,127.24,123.80,121.47,119.99,113.12,68.97,53.26,45.68,27.82,21.44(2c),17.75.实施例3：(s)-2-(4，5-二氢萘并异恶唑-2-甲酰胺基)-3-(1h-咪唑-1-基)丙酸异丁酯1hnmr(600mhz,dmso-d6)δ9.29(d,j＝8.2hz,1h),7.66(d,j＝7.3hz,1h),7.63(s,1h),7.40(ddd,j＝13.3,6.9,3.1hz,3h),7.21(s,1h),6.86(s,1h),4.90(ddd,j＝10.0,8.3,4.8hz,1h),4.55(dd,j＝14.1,4.7hz,1h),4.44(dd,j＝14.1,10.0hz,1h),3.91(m,2h),3.01(t,j＝7.9hz,2h),2.83(dd,j＝16.7,8.1hz,2h),1.88(m,1h),0.88(dd,j＝6.7,1.6hz,6h).13cnmr(100mhz,dmso-d6)δ169.39,166.94,159.84,155.28,138.28,137.30,130.98,129.24,128.81,127.69,124.25,121.93,120.31,113.56,71.27,53.63,45.95,28.28,27.70,19.18(2c),18.21.实施例4：(s)-2-(5,6-二氢-4h-苯并[3,4]环庚并[1,2-d]异噁唑-3-甲酰胺基)-3-(1h-咪唑-1基)丙酸异丙酯1hnmr(600mhz,dmso-d6)δ9.23(d,j＝8.1hz,1h),7.94–7.87(m,1h),7.61(s,1h),7.41–7.38(m,2h),7.32(dd,j＝5.6,3.3hz,1h),7.20(s,1h),6.86(s,1h),5.00–4.93(m,1h),4.81(ddd,j＝9.6,8.2,5.0hz,1h),4.51(dd,j＝14.1,4.9hz,1h),4.39(dd,j＝14.1,9.7hz,1h),2.93–2.87(m,2h),2.86–2.73(m,2h),1.90(m,2h),1.21(t,j＝6.5hz,6h).13cnmr(100mhz,dmso-d6)δ168.42,164.51,159.72,157.15,141.23,137.82,130.09,130.04,128.32,126.73,126.20,125.70,119.83,115.43,68.90,53.24,45.59,34.53,24.18,23.76,21.44,21.42.实施例5：(s)-2-(8-溴-4,5-二氢萘并[2,1-d]异噁唑-5-甲酰胺基)-3-(1h-咪唑-1基)丙酸异丙酯1hnmr(600mhz,dmso-d6)δ9.27(d,j＝8.1hz,1h),7.80(d,j＝2.0hz,1h),7.62(s,1h),7.60(dd,j＝8.1,2.1hz,1h),7.37(d,j＝8.1hz,1h),7.20(s,1h),6.85(s,1h),4.96(m,1h),4.86–4.79(m,1h),4.51(dd,j＝14.1,5.0hz,1h),4.40(dd,j＝14.1,9.7hz,1h),2.99(t,j＝7.9hz,2h),2.87–2.78(m,2h),1.20(t,j＝6.3hz,6h).13cnmr(100mhz,dmso-d6)δ168.38,165.04,159.11,154.90,137.81,136.07,133.03,132.94,130.92,128.28,125.72,123.84,119.86,114.14,68.94,53.28,45.58,27.29,21.44,21.41,17.52,21.42.实施例6：(s)-2-(8-甲氧基-4,5-二氢萘并[2,1-d]异噁唑-5-甲酰胺基)-3-(1h-咪唑-1基)丙酸异丙酯1hnmr(600mhz,dmso-d6)δ9.22(d,j＝8.1hz,1h),7.61(s,1h),7.32(d,j＝8.4hz,1h),7.19(d,j＝2.7hz,2h),6.98(dd,j＝8.4,2.7hz,1h),6.85(s,1h),4.96(m,1h),4.81(ddd,j＝9.6,8.2,5.0hz,1h),4.51(dd,j＝14.1,5.0hz,1h),4.40(dd,j＝14.1,9.7hz,1h),3.82(s,3h),2.93(t,j＝7.9hz,2h),2.86–2.76(m,2h),1.20(t,j＝6.4hz,6h).13cnmr(150mhz,dmso-d6)δ168.36,161.68,159.03,152.16,137.83,133.59,129.11,128.74,128.29,128.05,126.43,121.14,119.88,118.55,118.11,115.39,69.00,53.45,45.61,21.44(2c),21.42.实施例7：(s)-2-(8-甲氧基-4,5-二氢萘并[2,1-d]异噁唑-5-甲酰胺基)-3-(1h-咪唑-1基)丙酸异丁酯1hnmr(600mhz,dmso-d6)δ9.29(d,j＝8.2hz,1h),7.62(s,1h),7.32(d,j＝8.4hz,1h),7.21(s,1h),7.19(d,j＝2.7hz,1h),6.98(dd,j＝8.4,2.7hz,1h),6.85(s,1h),4.90(ddd,j＝9.9,8.4,4.8hz,1h),4.55(dd,j＝14.1,4.8hz,1h),4.44(dd,j＝14.1,10.0hz,1h),3.91(m,2h),3.82(s,3h),2.93(t,j＝7.9hz,2h),2.85–2.75(m,2h),1.88(m,1h),0.88(dd,j＝6.7,1.6hz,6h).13cnmr(100mhz,dmso-d6)δ168.89,166.45,159.34,158.29,154.87,137.78,129.86,128.66,128.29,124.54,119.81,116.29,113.44,106.56,70.79,55.40,53.15,45.48,27.21,26.98,18.70,18.00.实施例8：(s)-2-(7-甲氧基-4,5-二氢萘并[2,1-d]异噁唑-5-甲酰胺基)-3-(1h-咪唑-1基)丙酸异丙酯1hnmr(600mhz,dmso-d6)δ9.17(d,j＝8.1hz,1h),7.60(d,j＝8.7hz,2h),7.20(s,1h),7.01(d,j＝2.2hz,1h),6.93(dd,j＝8.4,2.5hz,1h),6.85(s,1h),5.00–4.92(m,1h),4.84–4.77(m,1h),4.50(dd,j＝14.1,5.0hz,1h),4.40(dd,j＝14.1,9.7hz,1h),3.81(s,3h),2.98(t,j＝7.9hz,2h),2.87–2.75(m,2h),1.20(t,j＝6.4hz,6h).13cnmr(100mhz,dmso-d6)δ168.44,166.66,160.94,159.43,154.67,139.18,137.78,128.30,123.07,119.82,116.83,114.54,112.45,111.04,68.90,55.36,53.24,45.57,28.24,21.43(2c),17.75.实施例9：(s)-2-(7-甲氧基-4,5-二氢萘并[2,1-d]异噁唑-5-甲酰胺基)-3-(1h-咪唑-1基)丙酸异丁酯1hnmr(600mhz,dmso)δ9.23(d,j＝8.3hz,1h),7.64–7.57(m,2h),7.20(s,1h),7.01(d,j＝2.4hz,1h),6.92(dd,j＝8.5,2.5hz,1h),6.85(s,1h),4.89(ddd,j＝9.9,8.4,4.8hz,1h),4.54(dd,j＝14.1,4.7hz,1h),4.43(dd,j＝14.1,10.0hz,1h),3.91(m,2h),3.81(s,3h),2.98(t,j＝7.9hz,2h),2.86–2.74(m,2h),1.88(dp,j＝13.3,6.6hz,1h),0.88(dd,j＝6.7,1.6hz,6h).13cnmr(100mhz,dmso-d6)δ168.91,166.69,160.95,159.49,154.63,139.18,137.77,128.32,123.08,119.80,116.82,114.55,112.46,111.03,70.78,55.36,53.12,45.48,28.25,27.21,18.70(2c),17.76.实施例10：(s)-2-(萘并[2,1-d]异噁唑-5-甲酰胺基)-3-(1h-咪唑-1基)丙酸异丙酯合成路线：中间体i-3的合成路线按照实施例1的方法。将中间体i-32.20g(9.1mmol)溶于60ml1,4-二氧六环中，加入二氯二氰基苯醌(ddq)6.1g(27.3mmol)，然后升温至回流反应12h。tlc检测反应完成，加入少量碳酸氢钠淬灭反应，先经过滤除去固体，再用乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤有机层，na2so4干燥过夜。滤除干燥剂，减压蒸除溶剂，残余物经硅胶柱层析纯化，得1.64g白色固体。再以i-8为起始原料，合成路线按照实施例1的方法得到实施例11，12的化合物。1hnmr(600mhz,dmso-d6)δ9.60(d,j＝8.0hz,1h),8.45(dd,j＝6.0,3.4hz,1h),8.24–8.16(m,1h),7.94(dd,j＝21.7,8.7hz,2h),7.85–7.80(m,2h),7.66(s,1h),7.25(s,1h),6.85(s,1h),5.00(m,1h),4.97–4.90(m,1h),4.58(dd,j＝14.1,5.0hz,1h),4.47(dd,j＝14.1,9.7hz,1h),1.22(t,j＝6.5hz,6h).13cnmr(150mhz,dmso-d6)δ168.36,161.68,159.03,152.16,137.83,133.59,129.11,128.74,128.29,128.05,126.43,121.14,119.88,118.55,118.11,115.39,69.00,53.45,45.61,21.44,21.42.实施例11：(s)-2-(萘并[2,1-d]异噁唑-5-甲酰胺基)-3-(1h-咪唑-1基)丙酸异丁酯1hnmr(600mhz,dmso-d6)δ9.65(d,j＝8.2hz,1h),8.45(dd,j＝6.0,3.5hz,1h),8.25–8.17(m,1h),7.94(dd,j＝21.7,8.7hz,2h),7.83(dd,j＝6.2,3.2hz,2h),7.67(s,1h),7.26(s,1h),6.86(s,1h),5.02(ddd,j＝10.0,8.3,4.8hz,1h),4.61(dd,j＝14.1,4.8hz,1h),4.50(dd,j＝14.1,10.0hz,1h),3.95(tt,j＝10.5,5.3hz,2h),1.91–1.87(m,1h),0.88(dd,j＝6.7,1.2hz,6h).13cnmr(100mhz,dmso-d6)δ168.83,161.70,159.09,152.13,137.82,133.58,129.12,128.74,128.30,128.05,126.44,121.14,119.85,118.55,118.10,115.37,70.85,53.32,45.53,27.21,18.69,18.66.本发明部分产物的药理研究实验方法：采用常规的体外抑菌试验方法(antimicrobialagentsandchemotherapy,1995,39(5):1169)。实验材料和方法：(1)实验菌株本实验选用了以下6种常见的人体致病标准真菌菌株作为筛选对象，真菌菌株由沈阳药科大学提供。表1实验所用菌种及其编号菌种名称species菌株选择白色念珠菌candidaalbicanssc5314白色念珠菌candidaalbicanscpcc400523新型隐球菌cryptococcusneoformanscgmcc2.3161热带假丝酵母菌candidatropicaliscgmcc2.3739烟曲霉aspergillusfumigatuscgmcc3.7795(2)实验方法：rpmi-1640培养基的配制：rpmi164010g，nahco32.0g，三氮吗啡啉丙磺酸(sigma)34.5g，加800ml无菌蒸馏水溶解，1mol/lnaoh调整ph至7.0后，定容至1000ml，0.22μm微孔滤膜过滤除菌后放置4℃保存备用。丝状真菌菌悬液的制备：丝状真菌(红色毛癣菌、疣状毛癣菌、石膏样小孢子菌)等连续两次传代接种于沙氏培养基平板，在35℃培养箱中培养48h，菌落上加入0.85％生理盐水5ml，制备菌液。用分光光度计调整菌液浓度，a值调整至0.3～0.5；再用培养基稀释50倍作为接种菌悬液。球状真菌菌悬液的制备：球状菌(白色念珠菌、光滑假丝酵母菌)。将活化后的菌株用分区划线法接种于沙氏固体培养基平板上，于32℃恒温培养2～3天，取适量单菌落接入含10ml0.85％无菌生理盐水的三角瓶中，震荡15分钟，用灭菌枪头取少量菌液于血细胞计数板上，显微镜下计数。加rpmi-1640培养基稀释，使最终菌悬液的浓度为1×106个/ml。药液制备：称取上述化学合成药各6.40mg，依次加入1.0ml二甲基亚砜(dmso)、1.0ml吐温20和8.0ml灭菌蒸馏水，混匀。配成药液浓度为0.64mg/ml。以相同方法配制阳性对照药氟康唑、伏立康唑。接种：第一步，加rpmi-1640培养基：每行的第1孔加入180μlrpmi1640培养基，2-11孔加入100μlrpmi1640培养基，12孔加入200μlrpmi1640培养基。第二步，加药样：向第1孔中加入20μl待测药液，用移液枪混匀后吸取100μl至2孔，依次进行2倍稀释至第10孔后混匀弃去100μl。第三步，加菌悬液：向1～11孔中各加100μl接种菌悬液。第11孔为生长对照，第12孔为空白培养基对照。阳性对照药物不设空白药物对照，即从第1孔开始做倍比梯度稀释直至第10孔，测试浓度(μg/ml)范围16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125。培养和检测：以空白对照无菌生长，阳性对照生长良好作为判断试验操作是否合格的标准。每板测试8个样品，每个菌均设置阳性药物对照。待测药物稀释法同上。表3实例化合物最低抑菌浓度(mic，μg/ml)备注：fcz：氟康唑；vcz：伏立康唑。从上述试验结果可以清楚地看出，本发明所要保护的通式i的化合物及其盐类具有良好的抗真菌活性，多个化合物的抗真菌活性要强于对照药，与现有的抗真菌药物相比，具有结构新颖、高效、广谱等优点，因此本类化合物具有很好的应用前景。本发明中通式i的化合物可单独施用，但通常是和药用载体混合物给予，所述药用载体的选择要根据所需用药途径和标准药物实践，下面分别用该类化合物的各种药物剂型，例如片剂、胶囊剂、注射剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、外用搽剂和软膏剂的制备方法，说明其在制药领域中的新应用。实施例13：片剂用含有权利要求1中化合物的化合物(以实施例1化合物为例)10g，按照药剂学一般压片法加辅料20g混匀后，压制成100片，每片重300mg。实施例14：胶囊剂用含有权利要求1中化合物的化合物(以实施例107化合物为例)10g，按照药剂学胶囊剂的要求将辅料20g混匀后，装入空心胶囊，每个胶囊重300mg。实施例15：注射剂用含有权利要求1中化合物的化合物(以实施例206化合物为例)10g，按照药剂学常规方法，进行活性炭吸附，经0.65μm微孔滤膜过滤后，填入氮气罐制成水针制剂，每只装2ml，共灌装100瓶。实施例16：气雾剂用含有权利要求1中化合物的化合物(以实施例37化合物为例)10g，用适量丙二醇溶解后，加入蒸馏水及其他辐料后，制成500ml的澄清溶液即得。实施例17：栓剂用含有权利要求1中化合物的化合物(以实施例113化合物为例)10g，将之研细加入甘油适量，研匀后加入已熔化的甘油明胶，研磨均匀，倾入已涂润滑剂的模型中，制得栓剂50颗实施例18：膜剂用含有权利要求1中化合物的化合物(以实施例117化合物为例)10g，将聚乙烯醇、药用甘油、水等搅拌膨胀后加热溶解，80目筛网过滤，再将实施例18化合物加入到滤液中搅拌溶解，涂膜机制膜100片。实施例19：滴丸剂用含有权利要求1中化合物的化合物(以实施例147化合物为例)10g，与明胶等基质50g加热熔化混匀后，滴入低温液体石蜡中，共制得滴丸1000丸。实施例21：外用搽剂用含有权利要求1中化合物的化合物(以实施例86化合物为例)10g，按照常规药剂学方法与乳化剂等辅料2.5g混合研磨，再加蒸馏水至200ml制得。实施例22：软膏剂用含有权利要求1中化合物的化合物(以实施例39化合物为例)10g，研细后与凡士林等油性基质500g研匀制得。尽管已经通过特定实施方案描述了本发明，但修改和等价变化对于精通此领域的技术人员而言是显见的，且它们都包含在本发明范围。当前第1页12