1.一种基于数字pcr用于血源筛查的引物组合,其特征在于,包括hbv检测引物、hcv检测引物、hiv1检测引物、hiv2检测引物和内标检测引物:
所述hbv检测引物包括核苷酸序列如seqidno.1所示的上游引物和核苷酸序列如seqidno.2所示的下游引物;
所述hcv检测引物包括核苷酸序列如seqidno.4所示的上游引物和核苷酸序列如seqidno.5所示的下游引物;
所述hiv1检测引物包括核苷酸序列如seqidno.7所示的上游引物和核苷酸序列如seqidno.8所示的下游引物;
所述hiv2检测引物包括核苷酸序列如seqidno.10所示的上游引物和核苷酸序列如seqidno.11所示的下游引物;
所述内标检测引物包括核苷酸序列如seqidno.13所示的上游引物和核苷酸序列如seqidno.14所示的下游引物。
2.根据权利要求1所述的基于数字pcr用于血源筛查的引物组合,其特征在于,还包括tp检测引物,所述tp检测引物包括核苷酸序列如seqidno.16所示的上游引物和核苷酸序列如seqidno.17所示的下游引物。
3.一种基于数字pcr用于血源筛查的探针组合,其特征在于,包括hbv检测探针、hcv检测探针、hiv1检测探针、hiv2检测探针和内标检测探针;
所述hbv检测探针的核苷酸序列如seqidno.3所示;
所述hcv检测探针的核苷酸序列如seqidno.6所示;
所述hiv1检测探针的核苷酸序列如seqidno.9所示;
所述hiv2检测探针的核苷酸序列如seqidno.12所示;
所述内标检测探针的核苷酸序列如seqidno.15所示;
所述hbv检测探针、hcv检测探针、hiv1检测探针、hiv2检测探针和内标检测探针上标记有荧光报告基团和荧光猝灭基团。
4.根据权利要求3所述的基于数字pcr用于血源筛查的探针组合,其特征在于,还包括tp检测探针,所述tp检测探针的核苷酸序列如seqidno.18所示,所述tp检测探针上标记有荧光报告基团和荧光猝灭基团。
5.根据权利要求4所述的基于数字pcr用于血源筛查的探针组合,其特征在于,
所述hbv检测探针的5’端标记fam荧光基团,3’端标记bhq1荧光猝灭基团;所述hcv检测探针的5’端标记hex荧光基团,3’端标记bhq1荧光猝灭基团;所述hiv1检测探针的5’端标记rox荧光基团,3’端标记bhq2荧光猝灭基团;所述hiv2检测探针的5’端标记rox荧光基团,3’端标记bhq2荧光猝灭基团;所述内标检测探针的5’端标记cy5荧光基团,3’端标记bhq3荧光猝灭基团;所述tp检测探针的5’端标记alexafluor700荧光基团,3’端标记bbq650荧光猝灭基团。
6.一种基于数字pcr用于血源筛查的试剂盒,其特征在于,包括hbv检测引物及探针、hcv检测引物及探针、hiv1检测引物及探针、hiv2检测引物及探针和内标检测引物和探针;
所述hbv检测引物包括核苷酸序列如seqidno.1所示的上游引物和核苷酸序列如seqidno.2所示的下游引物,所述hbv检测探针的核苷酸序列如seqidno.3所示;
所述hcv检测引物包括核苷酸序列如seqidno.4所示的上游引物和核苷酸序列如seqidno.5所示的下游引物,所述hcv检测探针的核苷酸序列如seqidno.6所示;
所述hiv1检测引物包括核苷酸序列如seqidno.7所示的上游引物和核苷酸序列如seqidno.8所示的下游引物,所述hiv1检测探针的核苷酸序列如seqidno.9所示;
所述hiv2检测引物包括核苷酸序列如seqidno.10所示的上游引物和核苷酸序列如seqidno.11所示的下游引物,所述hiv2检测探针的核苷酸序列如seqidno.12所示;
所述内标检测引物包括核苷酸序列如seqidno.13所示的上游引物和核苷酸序列如seqidno.14所示的下游引物,所述内标检测探针的核苷酸序列如seqidno.15所示;
所述hbv检测探针、hcv检测探针、hiv1检测探针、hiv2检测探针和内标检测探针上标记有荧光报告基团和荧光猝灭基团。
7.根据权利要求6所述的基于数字pcr用于血源筛查的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括tp检测引物和探针,所述tp检测引物包括核苷酸序列如seqidno.16所示的上游引物和核苷酸序列如seqidno.17所示的下游引物,所述tp检测探针的核苷酸序列如seqidno.18所示,所述tp检测探针上标记有荧光报告基团和荧光猝灭基团。
8.根据权利要求6所述的基于数字pcr用于血源筛查的试剂盒,其特征在于:
所述hbv检测探针的5’端标记fam荧光基团,3’端标记bhq1荧光猝灭基团;所述hcv检测探针的5’端标记hex荧光基团,3’端标记bhq1荧光猝灭基团;所述hiv1检测探针的5’端标记rox荧光基团,3’端标记bhq2荧光猝灭基团;所述hiv2检测探针的5’端标记rox荧光基团,3’端标记bhq2荧光猝灭基团;所述内标检测探针的5’端标记cy5荧光基团,3’端标记bhq3荧光猝灭基团;所述tp检测探针的5’端标记alexafluor700荧光基团,3’端标记bbq650荧光猝灭基团。
9.根据权利要求8所述的基于数字pcr用于血源筛查的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还包括dpcrbuffer、酶、无核酶水、阴性对照、阳性对照和内标。
10.根据权利要求9所述的基于数字pcr用于血源筛查的试剂盒,其特征在于,所述阳性对照为含hbv、hcv、hiv特异性片段的假病毒;所述内标为含人工设计特异性序列的rna假病毒。