, 4 H).实施例 12(白色固体，2 毫克）：? NMR (400 MHz, MeOD)ppm 8.44 (br s, 1 H), 7.97-7.62 (m, 4 H), 7.48 (br s, 1 H), 7.23-7.13 (m, 2 H), 6.82 (br s, 1 H), 6.33 (br s, 2 H), 5.74 (br s, 1 H), 4.66-4.58 (m, 3 H), 3.63-3.60 (m, 2 H), 3.32-3.22 (m, 4 H), 2.38-2.32 (m, 4 H). LCMS (ESI) m/z: 591 (M +1) · 测试例1本发明化合物对不同EGFR激酶活性的测定 本实验采用如下方法测定了实施例化合物对不同C D K激酶：C D K 1 / C y c 1 i η B (invitrogen)、CDK4/Cyclin Dl(invitrogen)、CDK6/Cyclin D1 (invitrogen)的抑制活 性。
[0064]测试方法：将受试化合物溶解于二甲亚砜中，并根据试验需要用缓冲液（50 mM HEPES、10 mM MgC12、l mM EGTA、2 mM DTT and 0.01% Tween 20)稀释至各浓度梯度，二甲 亚砜浓度为4%;再用缓冲液稀释ATP和底物ULight-4E-BPl配制成浓度为800 μΜ ATP和200 nM底物溶液的混合物待用；在反应孔中加上2.5 yL底物和ATP混合液，再加入2.5 yL化合 物或者4%二甲亚砜的缓冲液（阴性对照孔），最后加入5 yL酶或者缓冲液（阴性对照孔），室 温避光孵育60分钟。每孔加入5 yL lxdetection buffer(LANCE Detection Buffer，10x， PerkinElmer)稀释的EDTA终止液（终浓度6 mM)，再加入lxdetection buffer稀释的抗体 (终浓度2 nM)室温避光孵育60分钟。用PerkinElmer EnVision? TRFRET mode(激发波长： 320 nm，发射波长：615 nm和665nm)测板。IC5Q值采用酶标仪随机附带软件以四参数法回归 求得。
[0065] 受试化合物对不同激酶活性的抑制率通过下列公式求得：
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用 作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对 本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
【主权项】
1. 一种如通式I所示的化合物，或其药学上可接受的盐、或其对映异构体、非对映异构 体、互变异构体、溶剂化物、多晶型物或前药，式中： Rl，R2各自独立地选自下组:氢、卤素，氰基、取代羰基、取代或未取代的C1-C6烷基，C3-C8环烷基； R3选自下组:氢、卤素、取代或未取代的C1-C6烷基和C3-C8环烷基； R4、R5、R6和R7分别独立地选自氢、卤素、氰基、羟基、氨基、取代或未取代的C1-C6烷基， 并且其中任意两个基团可以形成3-10元的环系； Ml、M2各自独立地选自：CRa或N，并且其中至少有一个为N; Ra为H、卤素、氰基、取代或未取代的C1-C6烷基和C3-C8环烷基； L选自下组:无或连接基团； W选自下组:取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C2-C6链烯基或链炔基、取代 或未取代的C3-C8环烷基、取代或未取代的4-8元杂环基、5-10元的芳香基或杂芳基、取代羰 基、取代磺酰基、取代或未取代的氨基，其中，所述的杂环包含1-3个选自下组的杂原子:N、 0、S、P或B; 上述的任一"取代"指基团上的一个或多个氢原子被选自下组的取代基取代：卤素、OH、 NH2、CN、未取代或卤代的C1-C8烷基、未取代或卤代的C3-C8环烷基、未取代或卤代的C1-C8 烷氧基、未取代或卤代的C2-C6烯基、未取代或卤代的C2-C6炔基、未取代或卤代的C2-C6酰 基、未取代或卤代的5~8元芳基、未取代或卤代的5~8元杂芳基、未取代或卤代的4~8元饱 和杂环或碳环;其中，所述的杂芳基包含1-3个选自下组的杂原子:N、0或S，所述的杂环包含 1-3个选自下组的杂原子:N、0或S。2. 如权利要求1所述的化合物，其特征在于，Rl优选为氢、氯、F，三氟甲基、氰基;和/或 R2优选为H、F、C1、氰基或CH 3;和/或 R3优选为H、F、Cl、氰基、烷基或取代烷基;和/或 Ml、M2分别独立地选自CH或N，并且其中至少有一个为N原子;和/或 L选自：-〇?'1?"-、-0-、-冊'-、和一〇?' =，其中1?'和矿各自独立地为!^、氘（0)、(：1-〇6烷 基或杂环烷基或者相邻的R'和R"形成环状基团；和/或 W选自：取代或未取代的C1-C6烷基和环烷基、取代或未取代的4-6元杂环、或者环烷基、 杂环烷基等形成的螺环、桥环等，更优选地W为环戊烷、环己烷、四氢吡咯环、四氢呋喃环、哌 啶环、哌嗪环、吗啡啉环，吡唑环、吲唑环、苯环、吡啶环等： W环上所述的取代基独立地选自：卤素、_〇!1、-^-顺2、烷基、单烷基氨基、二烷基氨基、 环烷基、杂环基、烷氧基、羟基烷基、烷氧基烷基、羟基烷氧基烷基、氣基烷基、-烷基氣基烧 基、烷氧基幾基氣基烷基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳烷基、烷基环烷基、环烷基幾基、烧氧 基幾基、烷氧基幾基杂环基、（烧氧幾基）（烷基)氣基、（烷氧基烷基）（烷基)氣基。3. 如权利要求1、2所述的化合物，其特征在于，所述含氮杂环化合物具有通式II、III所 示的结构：其中，各基团的定义如上文所述。4. 如权利要求1、2、3所述的化合物，其特征在于，所述化合物具有如下结构：5. -种制备式I化合物的方法，其特征在于，所述方法包括步骤： al)将式（1)化合物与式（2)化合物，在过渡金属催化剂或者酸/碱存在的反应条件下 进行偶联，从而形成中间体(3);和 a2)将中间体(3)与式(4)化合物在过渡金属催化剂或者酸/碱催化剂存在的反应条件 下进行偶联，得到式I化合物；各式中， X和LG各自独立地为离去基团，且选自下组:卤素、磺酸酯、硼酸、硼酸酯； FG选自下组:硼酸、硼酸酯、硼盐、有机锡、有机锌等； 其他各基团1?1、1?2、1?3、1?4、1?5、1?6、1?7、]\11、]\12、1^、1的定义如上所述； 在另一优选例中，所述步骤al)、a2)各自在溶剂中进行，且所述溶剂选自下组:水、甲 醇、乙醇、异丙醇、乙二醇、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜，四氢呋喃、甲苯、二氯甲烷、1，2_二 氯乙烷、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、二氧六环，或其组合物； 在另一优选例中，所述金属催化剂选自下组：三（二亚苄基丙酮）二钯(Pd2(Clba)3)、四 (三苯基膦)钯(Pd(PPh3)4)、醋酸钯、氯化钯、二氯二(三苯基膦)钯、三氟醋酸钯、三苯基膦醋 酸钯、[1，1'_双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯、双(三邻苯甲基膦)二氯化钯、1，2_二(二苯 基膦基）乙烷二氯化钯，或其组合物;所述催化剂配体选自下组:三叔丁基膦、四氟硼酸三叔 丁基膦、三正丁基膦、三苯基膦、三对苯甲基膦、三环己基膦、三邻苯甲基膦，或其组合物； 在另一优选例中，所述无机碱选自下组:氢化钠、氢氧化钾、醋酸钠、醋酸钾、叔丁醇钾、 叔丁醇钠、氟化钾、氟化铯、磷酸钾、碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸钠、碳酸氢钠，或其组合物;所述 有机碱选自下组:吡啶，三乙胺，Ν，Ν-二异丙基乙胺、1，8_二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯 (DBU)、六甲基二硅基锂、六甲基二硅基钠、二甲基吡啶，或其组合物； 在另一优选例中，所述酸选自下组:盐酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、甲苯磺酸、三氟乙酸、甲 酸、乙酸，或其组合物。6. 如权利要求1、2、3、4、5所述的式I化合物的用途，其特征在于，用于制备治疗与EGFR 及其突变激酶，ALK及其突变激酶活性或表达量相关的疾病的药物，特别是肿瘤治疗药物； 所述的肿瘤独立地选自非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌、乳腺癌、前列腺癌、肝 癌、皮肤癌、胃癌、肠癌、白血病、淋巴癌、鼻咽癌等。7. 包含如权利要求1、2、3、4、5、6所述的式I化合物组成的药物组合物，其特征在于，所 述的药物组合物包括： (i) 有效量的式I化合物，或其药学上可接受的盐、或其对映异构体、非对映异构体、互 变异构体、溶剂化物、多晶型物或前药;和 (ii) 药学上可接受的载体。
【专利摘要】一类具有激酶抑制活性的化合物、制备方法和用途，本发明公开了一种如通式I所示的化合物、或其药学上可接受的盐、或其对映异构体、非对映异构体、互变异构体、溶剂化物、多晶型物或前药、其制备方法及在药学上的应用，其中各基团的定义如说明书中所述。本发明的化合物具有较佳的激酶抑制活性，特别是EGFR和ALK激酶及其突变体，具有较好的药用前景。I。
【IPC分类】A61K31/506, A61P35/00, A61K31/4545, C07D405/14, A61P35/02, C07D405/12
【公开号】CN105481841
【申请号】CN201510769434
【发明人】姚力
【申请人】上海开迈生物科技有限公司
【公开日】2016年4月13日
【申请日】2015年11月12日