Mo〇4.2H：0 0.00039 g GuS〇4-5H：0 0.00008 g CoCI2.6H：0 0.00004 g
[0042] Vbi 0.000001 g Vbi2 0.00000001 g VH 0.0000001 g，
[0043]该雨生红球藻的诱导培养基的制备方法和实施例1相同，只是Na2S〇4和梓檬酸亚铁 所需的量不同。
[0044] 实施例6
[0045] -种雨生红球藻的诱导培养基，每升培养基中含有： Na2:SQ4 1,6〇g 柠檬酸亚铁 0.023971g NaCl 1.5g K2HP04 0.04g MgS04.7H，0 0.075g CaCl2.2H20 0.0.36g 抒檬酸 0.006 g EDTA-2Na 0.001 g Na：CO;; 0.02 g
[0046] H3BO3 0.00286 g Mnd：.4H：0 0.00186 g ZnS04.7H20 0.00022. g Na：Mo〇4.2H20 0.00039 g CuSO_(.5H2〇 0 00008 g 0〇α2.6Η2〇 O.0OOQ4 g Vbi 0.000001 g ￥Bi2 〇.〇〇〇〇〇〇01 g Vh 0..0:000.001 g。
[0047] 该雨生红球藻的诱导培养基的制备方法和实施例1相同，只是Na2S〇4和柠檬酸亚铁 所需的量不同。
[0048] 实施例7
[0049] -种雨生红球藻的诱导培养基，每升培养基中含有： Na2S04 1.85g 柠檬酸亚铁 0.01328 lg Nad l,5g K2HP〇4 0.04g MgS04.7H?0 0.075g CaC'l?.2H：0 0.036g 抒檬酸 0.006 g EDTA-2Na 0.001 g Na2CQ3 0.02 g
[0050] 0.00286 g MnCl：.4H?0 0.00186 g ZnS04.7H20 0.00022 g Na：Mo〇4.2H：.0 0.00039 g CuS04.5H20 0.00008 g C0CI2.6H2D 0.00004 g Vm 0.000001 g VB：? 0.00000001 g ￥h 〇.〇〇〇〇〇〇 1 go
[0051 ]该雨生红球藻的诱导培养基的制备方法和实施例1相同，只是Na2S〇4和柠檬酸亚铁 所需的量不同。
[0052] 实施例8
[0053] -种雨生红球藻的诱导培养基，每升培养基中含有： Na：SO+ 1.85g 柠檬酸亚铁 0,02212%
[0054] NaCl \.5g Κ2ΗΡ04 0 04g MgS04.7H20 0.075g 0α01·：.2Η? 0.036g 梓樣酸 0.006 g EDTA-2Na 0.001 g Na::CO) 0.02 g H3BO3 0.00286 g MnCI2.4H：0 0.00186 g
[0055] ZnS04.7H20 0.00022 g Na；，Mo04.2H；0 0.00039 g CuS04.5H：0 0.00008 g CoCi2.6H：0 0.00004 g Vm 0.000001 g Vbi2 0,00000001 g V,I 0,0000001 g；
[0056] 该雨生红球藻的诱导培养基的制备方法和实施例1相同，只是Na2S04和柠檬酸亚铁 所需的量不同。
[0057] 实施例9
[0058] -种雨生红球藻的诱导培养基，每升培养基中含有： Na2S〇4 1.95g 柠檬酸亚铁 0. 01770% NaCl .1,5g K2HPO4 0.04g MgS0.4.7H20 0.075g CaCh.2H20 0.036g
[0059] 抒檬酸 0.006: g: EDTA-2Na 0.QQ1 g Na；CO, 0 02 g H3B03 0.00286 g MnCI2.4H:0 0.00186 g ZnS04.7H?0 0.00022 g Ν??：ΜοΟ^ 2H2O 0,00039 g CuS04.5H^0 0.00008 g CoC12.6H20 0.00004 g
[0060] Vbi 0,000001 g Vbi2 〇.〇〇〇〇〇〇01 g Vh 0.0000001 g〇
[0061 ]该雨生红球藻的诱导培养基的制备方法和实施例1相同，只是Na2S〇4和梓檬酸亚铁 所需的量不同。
[0062] 对比例1
[0063] -种雨生红球藻的诱导培养基，每升培养基中含有： NaCl l,5g Κ,ΗΡΟ^ 0.04g MgS〇4.7H：〇 0.075g CaCl：.2H，0 0.036g 柠檬酸 0.006 g EDTA-2Na 0.001 g Na：C〇3 0.02 g H3BO；; 0.00286 g
[0064] MnCl?,4H；0 0.00186 g ZnS04.7H20 0.00022 g Na：Mo0.4.2H20 0.00039 g CuS04.5H，0 0.00008 g C0CI2.6H2O 0.00004 g VBi 0.000001 g Vbi2 〇.〇〇〇〇〇〇01 g ￥h 0.0000001 g,
[0065] 该雨生红球藻的诱导培养基的制备方法和实施例1相同，只是没有Na2S04和柠檬酸 亚铁两种组分。
[0066] 对比例2
[0067] -种雨生红球藻的诱导培养基，每升培养基中含有： Na2S04 1,60g NaCI 1,5g K：HP〇4 0.04g MgS〇4.7H?.0 0.075g Cad：.2H，0 0.036g 柠檬酸 0.006 g EDTA-2Na 0.001 g Na：CO；； 0.02 g
[0068] H3BO3 0,00286 g MnCh.4H20 0.00186 g ZnS04.7H：0 0.00022 g Ma2MoQ4.2H20 0,00039 g CuS04.5H20 0.00008 g CoCl：.6H：0 0.00004 g Vbi 0.000001 g V,)l： 0.00000001 g V,, 0.0000001 g：：
[0069]该雨生红球藻的诱导培养基的制备方法和实施例1相同，只是没有梓檬酸亚铁一 种组分和Na2S〇4所需的量不同。
[0070] 对比例3
[0071] -种雨生红球藻的诱导培养基，每升培养基中含有： 柠檬酸亚铁 0, 017709g NaCI i 5g K2HPO4 0.04g
[0072] MgS(34.7H：〇 0.075g CaCl：.2H：0 0.036g :抒檬酸 0.006 :g EDTA-2Na 0 001 g Na：CO；; 0.02 g H3B〇! 0.00286 g MnCI2.4H20 0.00186 g ZnS04.7H20 0.00022 g Na2Mo〇4.2H20 0.00039 g
[0073] CuSQ4,5H20 0,00008 g CoCl：.6H；0 0.00004 g VB： 0.000001 g Vbis 〇.〇〇〇〇〇〇01 g Vh 0.0000001 g,
[0074] 该雨生红球藻的诱导培养基的制备方法和实施例1相同，只是没有Na2S〇4柠檬酸亚 铁一种组分和柠檬酸亚铁所需的量不同。
[0075] 试验一、本发明的雨生红球藻的诱导培养基诱导培养雨生红球藻试验
[0076] 以实施例1-9和对比例1-3制备的雨生红球藻的诱导培养基为例进行诱导培养雨 生红球藻。
[0077] 试验方法：先分别取实施例1 - 9和对比例1 - 3制备的雨生红球藻的诱导培养基 100mL，然后分别加入12个250mL的三角瓶中，高压蒸汽灭菌，再将处于对数生长期的雨生红 球藻藻种在超净工作台上分别接种于12个装有不同诱导培养基的三角瓶中，最后将12个三 角瓶置于光照培养箱中静置培养，控制初始接种浓度为〇. 35g/L，培养温度为23.5-24.5°C， 光照强度为10500LUX，培养期间每天摇动3-5次，培养过程中每个三角瓶中每隔2天取藻液 5mL用于测定雨生红球藻的生物量，另外再取藻液5mL用于测定虾青素的浓度，通过虾青素 浓度与对应雨生红球藻的生物量的比，得到对应的虾青素的含量。试验重复三次，虾青素的 浓度、雨生红球藻的生物量和虾青素的含量取三次试验的平均值。以实施例1的雨生红球藻 的诱导培养基为例观察雨生红球藻诱导培养过程中藻细胞的形态变化，其形态变化图如图 1所示。
[0078]试验结果：
[0079] 根据测定结果和形态发现，诱导培养至10天左右雨声红球藻中虾青素的积累达到 最大值，实施例1_9和对比例1-3的雨生红球藻的诱导培养基诱导培养雨声红球藻10天时， 虾青素的浓度、生物量和虾青素的含量如下表所示：
[0080]
[0081 ]~由上表可知，对比例2-3与对比例1的雨生红球藻的培养基相比，诱导培养10天时_ 虾青素的浓度、生物量、虾青素的含量均有所提高。而与对比例1-3的雨生红球藻的培养基 相比，实施例1-9制备的雨生红球藻的诱导培养基诱导培养雨生红球藻10天时，虾青素的浓 度、生物量、虾青素的含量均有所提高。由此可见，本发明的雨生红球藻的诱导培养基诱导 培养雨生红球藻，可有效地提高虾青素的含量，从而有效地提高虾青素的产量。
[0082] 根据上述试验结果用Design-Expert (CCD)进行响应面分析，对该诱导培养基中最 适的Na2S〇4、柠檬酸亚铁的浓度进行预测，预测结果为当Na2S〇4浓度为1.69g/L，柠檬酸亚铁 浓度为〇. 〇19135g/L时，虾青素的浓度最大为17.995g/L，此时的生物量为0.787g/L，虾青素 的含量为2.229%。
[0083] 为了验证此预测结果的准确性，进行验证试验，验证试验结果为：雨生红球藻细胞 中生物量为0.7628/1，虾青素的浓度为17.32711^/1，虾青素含量为2.274%。与理论预测值 相比较，生物量、虾青素的浓度、虾青素含量的相对误差分别为3.18%、3.71 %、0.64%;而 与对比例1相比，雨生红球藻细胞中生物量、虾青素浓度、虾青素含量分别提高了 12.89%、 49.54%、32.48%。由此可见，(XD响应面试验所得的Na2S〇4、柠檬酸亚铁的最适浓度准确可 靠，具较大的实用价值。
【主权项】
1. 一种雨生红球藻的诱导培养基，其特征在于每升培养基中含有：2. 根据权利要求1所述的雨生红球藻的诱导培养基，其特征在于每升培养基中含有：
【专利摘要】本发明公开了一种雨生红球藻的诱导培养基，每升培养基中含有：Na2SO41.25-1.85g、柠檬酸亚铁0.011447-0.023971g、NaCl1.5g、K2HPO40.04g、MgSO4.7H2O0.075g、CaCl2.2H2O0.036g、柠檬酸0.006g、EDTA-2Na0.001g、Na2CO30.02g、H3BO30.00286g、MnCl2.4H2O0.00186g、ZnSO4.7H2O0.00022g、Na2MoO4.2H2O0.00039g、CuSO4.5H2O0.00008g、CoCl2.6H2O0.00004g、VB10.000001g、VB120.00000001g和VH0.0000001g。该培养基用于诱导培养基诱导培养雨生红球藻，可有效地提高虾青素的含量，从而有效地提高虾青素的产量。
【IPC分类】C12N1/38, C12R1/89, C12N1/12
【公开号】CN105567625
【申请号】CN201610108113
【发明人】陈宏 , 周运涛, 何力, 喻亚丽, 文平, 唐雨甜
【申请人】中国水产科学研究院长江水产研究所
【公开日】2016年5月11日
【申请日】2016年2月26日