一种具有抗肿瘤活性的环丙二酰胺类化合物及其制备方法和应用
【专利摘要】本发明提供了一种具有抗肿瘤活性的环丙二酰胺类化合物及其制备方法和应用，该化合物的结构式为其中R1为卤素基团，R2为卤素基团或或者R1、R2共同形成该化合物对VEGFR?2激酶有很好的抑制活性，能够通过抑制VEGFR?2激酶的活性，阻断其诱导的信号通路，抑制肿瘤细胞的增生和迁移，从而可应用于抗肿瘤药物的制备。且该化合物的制备方法具有原料易得，反应条件温和，反应过程操作简单，所用试剂便宜的优点。
【专利说明】
-种具有抗肿瘤活性的环丙二醜胺类化合物及其制备方法和 应用
技术领域
[0001] 本发明属于生物医药技术领域，设及一种抗肿瘤的化合物，特别设及一种具有抗 肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002] 恶性肿瘤作为全球较大的公共卫生问题之一，极大地危害人类的健康，并将成为 新世纪人类的第一杀手。恶性肿瘤已不再只是发达工业国家的严重疾病，发展中国家面临 着更大的疾病负担。化学药物治疗作为治疗肿瘤的重要手段之一，在近=十年已经有了巨 大的发展和进步，得到了一大批具有不同作用机制的临床抗肿瘤药物。但是抗肿瘤药也存 在许多不良反应，比如脱发，呕吐，产生骨髓抑制，快速产生耐药性等等，运些都导致化学药 物无法达到预期的治疗效果。因此新的抗肿瘤药物的研究与开发是目前药学领域的热点和 难点问题之一。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于提供一种具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物及其制备方 法和应用，该化合物在体外体现出很好的抗肿瘤活性，能够应用于抗肿瘤药物的制备。
[0004] 为达到上述目的，本发明采用W下技术方案：
[0005] 一种具有抗肿瘤活性的环巧二醜胺类化合物，其化学结构式如下：
[0006；
[0007]其中，Ri为面素基团，化为面素基团或
或者Ri、R洪同形月
[000引所述的面素基团为氣原子、氯原子、漠原子、=氣甲基或=氣甲氧基。
[0009] 所述的具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物的制备方法，包括W下步骤：
[0010] 1)2-氣-5-漠苯甲醒与碳酸脈反应得到7-漠哇挫嘟-2-胺；
[0011] 2)7-漠哇挫嘟-2-胺与对氨基苯棚酸盐酸盐通过Suz址i偶联反应制备7-(4-氨基 苯基)哇挫嘟-2-胺；
[0012] 3)1,1-环丙烷二簇酸与含有双取代基的苯胺通过缩合反应制备苯胺基幾基环丙 烧簇酸；
[0013] 4)7-(4-氨基苯基)哇挫嘟-2-胺与苯胺基幾基环丙烷簇酸通过缩合反应制备具有 抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物。
[0014] 所述步骤I)的具体操作为:将2-氣-5-漠苯甲醒和碳酸脈溶于N，N-二甲基乙酷胺 溶液中，回流反应，反应结束后冷却至室溫，向反应液中加入水至固体析出，然后抽滤，滤饼 即为7-漠哇挫嘟-2-胺。
[0015] 所述步骤2)的具体操作为:将7-漠哇挫嘟-2-胺、对氨基苯棚酸盐酸盐、无水碳酸 钢和催化剂PcKP化3)4溶于1,4-二氧六环和水的混合溶液中，氮气保护下反应，反应结束后 冷却至室溫，对反应液进行抽滤，将滤液旋干得到粗品，用层析柱分离粗品，得到7-(4-氨基 苯基)哇挫嘟-2-胺。
[0016] 所述步骤3)的具体操作为:在氮气保护下，将无水=乙胺滴加到1,1-环丙二簇酸 的二氯甲烧溶液中，冰浴条件下揽拌均匀，再向其中滴加 S0C12的二氯甲烧溶液，滴加完毕 后揽拌反应，然后向其中继续滴加含有双取代基的苯胺的二氯甲烧溶液，滴加完毕后继续 揽拌反应，反应结束后，调节反应液的pH值，用乙酸乙醋萃取，再减压旋蒸除去有机溶剂，即 得到苯胺基幾基环丙烷簇酸。
[0017] 所述步骤4)的具体操作为:将7-(4-氨基苯基)哇挫嘟-2-胺和苯胺基幾基环丙烷 簇酸加入到冰浴中的无水二氯甲烧溶液中，然后加入缩合剂HATU，揽拌均匀，再向其中滴加 无水=乙胺的二氯甲烧溶液，撤去冰浴，室溫下反应，反应结束后，反应液经洗涂、干燥后减 压蒸去溶剂，得粗品，用层析柱分离粗品，得到具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物。
[0018] 所述的具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物在制备抑制VEGFR-2激酶活性的药 物中的应用。
[0019] 所述的具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物在制备WVEGFR-2激酶为祀点的抗 肿瘤药物中的应用。
[0020] 与现有技术相比，本发明具有W下有益效果：
[0021] 本发明提供的具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物，是一种新型的具有抗肿瘤 活性的化合物，其对VEGFR-2激酶有很好的抑制活性，可用于抗肿瘤药物的制备。具体的，本 发明提供的具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物，能够抑制VEGFR-2激酶的活性。而血管 生成与肿瘤的发生、发展和迁移都有密切关系，抑制新生血管的形成可W有效的抑制肿瘤 的生长和迁移，许多生长因子调控新生血管生成，其中VEGFR-2是已知的最强的正调控因 子。因此本发明提供的具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物通过抑制VEGFR-2激酶的活 性，阻断其诱导的信号通路，抑制肿瘤细胞的增生和迁移，从而可应用于抗肿瘤药物的制 备，尤其是WVEGFR-2激酶为祀点的抗肿瘤药物W及抑制VEGFR-2激酶活性的药物。
[0022] 本发明提供的具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物的制备方法，通过2-氣-5- 漠苯甲醒与碳酸脈反应得到7-漠哇挫嘟-2-胺，再与对氨基苯棚酸盐酸盐Suz址i偶联反应 得到7-(4-氨基苯基)哇挫嘟-2-胺，并通过1,1-环丙烷二簇酸与含有双取代基的苯胺缩合 反应得到苯胺基幾基环丙烷簇酸，将苯胺中的取代基引入到苯胺基幾基环丙烷簇酸的苯环 上，然后苯胺基幾基环丙烷簇酸再与7-(4-氨基苯基)哇挫嘟-2-胺缩合反应，即得到具有抗 肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物，该方法具有原料易得，反应条件溫和，反应过程操作简 单，所用试剂便宜的优点。
【附图说明】
[0023] 图1为本发明提供的具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物的合成路线图；
[0024] 其中，化合物I为2-氣-5-漠苯甲醒，化合物2为7-漠哇挫嘟-2-胺，化合物3为对氨 基苯棚酸盐酸盐，化合物4为7-(4-氨基苯基)哇挫嘟-2-胺，化合物为5为1,1-环丙烷二簇 酸，化合物6为含有双取代基的苯胺，化合物7为苯胺基幾基环丙烷簇酸，化合物Al-All为具 有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物。
[0025] 图中的标注具体为：
[00%] a:guanidine carbonate,DMA,140°C ;b:Pd(PPh3)4,Na2C03,H20,dioxane;C: S0C12，^3N，DCM;d:HATU，E^N，DCM，0°Ctort.
【具体实施方式】
[0027] 下面结合附图和具体的实施例对本发明做进一步的详细说明，所述是对本发明的 解释而不是限定。
[0028] 本发明提供了一种具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物，该环丙二酷胺类化合 物在体外具有抗肿瘤活性，可应用于抗肿瘤药物的制备。
[0029] 太发巧摇化的旦有坑肿瘤巧忡的巧巧^酣胺类化合物的化学结构式具体如下；
[0030]
[0031] 其中，扣为^氣甲基、S氣甲氧基或面素，R2为S氣甲基、S氣甲氧基、面素或烧氧 基，通过0原子连接于酷胺基团的间位和对位。
[0032] 下面结合图1中所示的合成路线和具体的合成实施例来详细说明本发明提供的具 有抗肿瘤活性的候选药物环丙二酷胺类化合物的制备和活性筛选方法。
[0033] 实施例1
[0034] 该具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物的结构式中，扣为CF3，R2为化，通过W下 步骤制备(参见图1):
[0035] 1)由2-氣-5-漠苯甲醒(化合物1)制备7-漠哇挫嘟-2-胺(化合物2)
[0036] 将10g(49.2mmol)2-氣-5-漠苯甲醒和13.3g(74mmol)碳酸脈溶于N,N-二甲基乙酷 胺溶液中，140°C回流反应化，反应结束后，待反应液冷却至室溫，加入120mL水，有大量固体 析出，抽滤，所得的滤饼即为7-漠哇挫嘟-2-胺，约5g，产率60%;
[0037] 2)由7-漠哇挫嘟-2-胺(化合物2)和对氨基苯棚酸盐酸盐(化合物3)通过Suzuki偶 联反应制备7-( 4-氨基苯基)哇挫嘟-2-胺(化合物4)
[003引将2旨（8.911111101)7-漠哇挫嘟-2-胺、1.54旨（8.911111101)对氨基苯棚酸盐酸盐、2.8邑 (26.7mmol)无水碳酸钢和1.03g(0.89mmol)催化剂Pd(PF*h3)4溶于120mL 1,4-二氧六环和 40mL水的混合溶液中，氮气保护下，于100°C反应过夜，反应结束后冷却至室溫，抽滤，用1， 4-二氧六环洗涂滤饼，收集滤液，旋干得残留物，残留物经过层析柱分离(洗脱溶剂为石油 酸:乙酸乙醋=3:1，体积比），得到7-(4-氨基苯基)哇挫嘟-2-胺0. Sg，产率约28% ;
[0039] 3)1,1-环丙烷二簇酸(化合物5)和5-漠-3-S氣甲基苯胺(化合物6)通过缩合反应 制备l-{[(3,5-二甲基苯基)氨基]幾基}环丙烷簇酸(化合物7)
[0040] 在氮气保护条件下，将2.2mL无水S乙胺滴加到2g(15.4mmol)l，l-环丙二簇酸的 二氯甲烧溶液中，冰浴条件下揽拌30min，再缓慢滴加1.2mL SOCb的二氯甲烧溶液，滴加完 毕揽拌化，然后向反应液中继续滴加3.6g (15.4mmo 1) 5-漠-3-=氣甲基苯胺的二氯甲烧溶 液，滴加完毕后继续揽拌化。然后将反应液用2mol/L的化OH溶液调节抑至10,减压蒸干，加 入适量水进行超声，用乙酸乙醋萃取一次，保留水层，再用2mol/L的HCl将水层调节抑至2， 再用乙酸乙醋萃取=次，减压旋除有机溶剂即得到1-{[(3,5-二甲基苯基)氨基]幾基}环丙 烧簇酸，约0. Sg，产率37 %;
[0041] 4)由7-(4-氨基苯基）哇挫嘟-2-胺（化合物4)和1-{ [(3,5-二甲基苯基）氨基]幾 基}环丙烷簇酸(化合物7)通过缩合反应得到具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物(化合 物8)
[0042] 将0.38g(0.7mmol )7-(4-氨基苯基）哇挫嘟-2-胺和0.24g(0.7mmol) 1-{ [ (3，5-二 甲基苯基）氨基]幾基}环丙烷簇酸加入到冰浴中的无水二氯甲烧溶液中，再加入〇.48g (1.26mmol)缩合剂HATU，继续揽拌30min，再慢慢滴加0.1 mL无水S乙胺的二氯甲烧溶液，撤 去冰浴，室溫反应化。然后将反应液依次用饱和碳酸氨钢溶液和饱和食盐水洗涂，无水硫酸 钢干燥，再旋干得到残留物，用层析柱分离残留物，得到具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化 合物0.12g，产率20 %。
[0043] 实施例1制得的具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物的结构式如下：
[0044]
[0045] 理化性质:mp:2：M ~236°C
[0046] 氨谱核磁共振数据为:1h NMR(400MHz，DMS0)Sll.49(s，lH)，9.74(s，lH)，9.16(s, lH)，8.44(s，lH)，8.12(d，J = 2.0Hz，lH)，8.05(m，lH)，7.76(d，J = 8.細z，2H)，7.72(d，J = 8.8Hz，2H)，7.50(d，J = 8.細z，lH)，7.43(s，2H)，6.90(s，2H)，1.76(m，2H)，1.63(m，2H).
[0047] 实施例2
[004引该具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物的结构式中，虹、化为氯。
[0049] 步骤1)~步骤2)与实施例1的步骤1)~2)相同，即由2-氣-5-漠苯甲醒(化合物1) 制备7-漠哇挫嘟-2-胺(化合物2 )，再由7-漠哇挫嘟-2-胺(化合物2)和对氨基苯棚酸盐酸盐 (化合物3)通过Suzuki偶联反应制备7-(4-氨基苯基)哇挫嘟-2-胺(化合物4)。
[0050] 3)1,1-环丙烷二簇酸(化合物5)和3,4-二氯苯胺(化合物6)通过缩合反应制备1- ({3，4-二氯苯胺氨基}幾基)环丙烷簇酸(化合物7)
[0051 ] 在氮气保护条件下，将12.9mL无水S乙胺滴加到4g( 30. Smmol) 1，1-环丙二簇酸的 二氯甲烧溶液中，冰浴条件下揽拌30min，再缓慢滴加2.3mL SOCb的二氯甲烧溶液，滴加完 毕揽拌化，然后向反应液中继续滴加4.5g(27.7mmo 1) 3，4-二氯苯胺的二氯甲烧溶液，滴加 完毕后继续揽拌化。然后将反应液用2mol/L的NaO田容液调节抑至10,减压蒸干，加入适量水 进行超声，用乙酸乙醋萃取一次，保留水层，再用2mol/L的肥1将水层调节抑至2,再用乙酸 乙醋萃取S次，减压旋除有机溶剂即得到1-( {3,4-二氯苯胺氨基}幾基)环丙烷簇酸，约2g， 产率40 %;
[0052] 4)由7-(4-氨基苯基）哇挫嘟-2-胺(化合物4)和1-( {3，4-二氯苯胺氨基}幾基)环 丙烷簇酸(化合物7)通过缩合反应得到具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物(化合物8)
[0053] 将0.5g(0.92mmol )7-(4-氨基苯基）哇挫嘟-2-胺和0.23g(0.92mmol) 1-( {3,4-二 氯苯胺氨基}幾基）环丙烷簇酸加入到冰浴中的无水二氯甲烧溶液中，再加入〇.63g (1.66mmol)缩合剂HATU，继续揽拌30min，再慢慢滴加0.13mL无水S乙胺的二氯甲烧溶液， 撤去冰浴，室溫反应化。然后将反应液依次用饱和碳酸氨钢溶液和饱和食盐水洗涂，无水硫 酸钢干燥，再旋干得到残留物，用层析柱分离残留物，得到具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类 化合物0.1 g,产率20 %。
[0054] 实施例2制得的具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物的结构式如下：
[0化5
[0056」 埋…生脚：mp:z0j~Z04 L
[0057]氨谱核磁共振数据为：Ih NMR(400MHz，DMSO)S10.32(S，1H)，10.11 (S，1H)，9.17 (s，lH)，8.09(d，J = 2.0Hz，lH)，8.06(d J = 2.1Hz，lH)，8.03(m，lH)，7.77(d，J = 8.細Z, 2H)，7.71(d J = 8.8Hz，2H)，7.60(m，lH)，7.56(d J = 8.細z，lH)，7.49(dJ = 8.Wz，lH), 6.90(s，2H)，1.52(d J = 10.2Hz，2H)，1.48(d J = 10.1Hz，2H).
[0化引实施例3
[0059] 该具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物的结构式中，Ri、化为氯。
[0060] 步骤1)~步骤2)与实施例1的步骤1)~2)相同，即由2-氣-5-漠苯甲醒(化合物1) 制备7-漠哇挫嘟-2-胺(化合物2 )，再由7-漠哇挫嘟-2-胺(化合物2)和对氨基苯棚酸盐酸盐 (化合物3)通过Suzuki偶联反应制备7-(4-氨基苯基)哇挫嘟-2-胺(化合物4)。
[0061] 3)1,1-环丙烷二簇酸(化合物5)和2,4-二氯苯胺(化合物6)通过缩合反应制备1- ({2，4-二氯苯胺氨基}幾基)环丙烷簇酸(化合物7)
[0062] 在氮气保护条件下，将12.9mL无水S乙胺滴加到4g( 30. Smmol) 1，1-环丙二簇酸的 二氯甲烧溶液中，冰浴条件下揽拌30min，再缓慢滴加 2.3mL SOCb的二氯甲烧溶液，滴加完 毕揽拌化，然后向反应液中继续滴加 4.5g(27.7mmo 1) 2，4-二氯苯胺的二氯甲烧溶液，滴加 完毕后继续揽拌化。然后将反应液用2mol/L的NaO田容液调节抑至10,减压蒸干，加入适量水 进行超声，用乙酸乙醋萃取一次，保留水层，再用2mol/L的肥1将水层调节抑至2,再用乙酸 乙醋萃取S次，减压旋除有机溶剂即得到1-( {2,4-二氯苯胺氨基}幾基)环丙烷簇酸，约2g， 产率40 %;
[0063] 4)由7-(4-氨基苯基）哇挫嘟-2-胺(化合物4)和1-( {2,4-二氯苯胺氨基}幾基)环 丙烷簇酸(化合物7)通过缩合反应得到具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物(化合物8)
[0064] 将0.5g(0.92mmol )7-(4-氨基苯基）哇挫嘟-2-胺和0.23g(0.92mmol) 1-( {2,4-二 氯苯胺氨基}幾基）环丙烷簇酸加入到冰浴中的无水二氯甲烧溶液中，再加入〇.63g (1.66mmo 1)缩合剂HATU，继续揽拌30min，再慢慢滴加0.13mL无水S乙胺的二氯甲烧溶液， 撤去冰浴，室溫反应化。然后将反应液依次用饱和碳酸氨钢溶液和饱和食盐水洗涂，无水硫 酸钢干燥，再旋干得到残留物，用层析柱分离残留物，得到具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类 化合物0.1 g,产率20 %。
[0065] 实施例3制得的具有抗肿瘤活性的环巧二醜胺类化合物的结构式如下：
[0066]
[0067] 埋'HVi生脚：mp:ZD丄~ZDJ U
[006引氨谱核磁共振数据为:1h NMR(400MHz，DMS0)Sl0.99(s，lH)，9.93(s，lH)，9.17(s, lH)，8.09(d J = 8.7Hz，2H)，8.04(d J = 8.細z，lH)，7.74(tJ = 7.1Hz，4H)，7.70-7.68(m， lH)，7.50(d，J=8.7Hz，lH)，7.44(m，lH)，6.90(s，2H)，1.71(s，2H)，1.64(s，2H).
[0069] 实施例4
[0070] 该具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物的结构式中，Ri、R2分别为=氣甲氧基和 漠。
[0071] 步骤1)~步骤2)与实施例1的步骤1)~2)相同，即由2-氣-5-漠苯甲醒(化合物1) 制备7-漠哇挫嘟-2-胺(化合物2 )，再由7-漠哇挫嘟-2-胺(化合物2)和对氨基苯棚酸盐酸盐 (化合物3)通过Suzuki偶联反应制备7-(4-氨基苯基)哇挫嘟-2-胺(化合物4)。
[0072] 3)1,1-环丙烷二簇酸(化合物5)和5-漠-2-S氣甲氧基苯胺(化合物6)通过缩合反 应制备1-({ [5-漠-2-(=氣甲氧基)苯基]氨基}幾基)环丙烷簇酸(化合物7)
[0073] 在氮气保护条件下，将2.2mL无水S乙胺滴加到2g(15.4mmol)l，l-环丙二簇酸的 二氯甲烧溶液中，冰浴条件下揽拌30min，再缓慢滴加1.2mL SOCb的二氯甲烧溶液，滴加完 毕揽拌化，然后向反应液中继续滴加3.5g (13.9mmo 1) 5-漠-2-=氣甲氧基苯胺的二氯甲烧 溶液，滴加完毕后继续揽拌化。然后将反应液用2mol/L的化OH溶液调节pH至10,减压蒸干， 加入适量水进行超声，用乙酸乙醋萃取一次，保留水层，再用2mol/L的HCl将水层调节pH至 2,再用乙酸乙醋萃取=次，减压旋除有机溶剂即得到1-({ [5-漠-2-(=氣甲氧基)苯基]氨 基}幾基)环丙烷簇酸，约0. Sg，产率35 % ;
[0074] 4)由7-(4-氨基苯基)哇挫嘟-2-胺(化合物4)和1-({ [5-漠-2-(S氣甲氧基)苯基] 氨基}幾基)环丙烷簇酸(化合物7)通过缩合反应得到具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合 物(化合物8)
[007引 将 0.45g(1.91mmol)7-(4-氨基苯基）哇挫嘟-2-胺和0.7ga.91mmol)l-({[5-漠- 2-(=氣甲氧基)苯基]氨基}幾基)环丙烷簇酸加入到冰浴中的无水二氯甲烧溶液中，再加 入1.31g(3.44mmol)缩合剂HATU，继续揽拌30min，再慢慢滴加0. SmL无水S乙胺的二氯甲烧 溶液，撤去冰浴，室溫反应化。然后将反应液依次用饱和碳酸氨钢溶液和饱和食盐水洗涂， 无水硫酸钢干燥，再旋干得到残留物，用层析柱分离残留物，得到具有抗肿瘤活性的环丙二 酷胺类化合物0.12g，产率20%。
[0076]实施例4制得的具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物的结构式如下：
[0077]
[007引 理化性质:mp :239~240 °C
[0079] 氨谱核磁共振数据为:1h NMR(400MHz，DMS0)Sll.48(s，lH)，9.74(s，lH)，9.16(s, lH)，8.44(d J = O.細z，lH)，8.12(dJ = 2.0Hz，lH)，8.05(m，lH)，7.76(dJ = 8.9Hz，2H), 7.72(d，J = 8.9Hz，2H)，7.50(d，J = 8.細z，lH)，7.44(s，2H)，6.90(s，2H)，1.76(m，2H)，1.63 (m,2H).
[0080] 实施例5
[0081] 该具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物的结构式中，Ri、R2分别为通过0原子连 接于酷胺基团的间位和对位的烷氧基。
[0082] 步骤1)~步骤2)与实施例1的步骤1)~2)相同，即由2-氣-5-漠苯甲醒(化合物1) 制备7-漠哇挫嘟-2-胺(化合物2 )，再由7-漠哇挫嘟-2-胺(化合物2)和对氨基苯棚酸盐酸盐 (化合物3)通过Suzuki偶联反应制备7-(4-氨基苯基)哇挫嘟-2-胺(化合物4)。
[0083] 3)1,1-环丙烷二簇酸(化合物5)和胡椒胺(化合物6)通过缩合反应制备Nl-I，3苯 并二氧杂环戊-5-环丙基-1,1-二甲酯胺(化合物7)
[0084] 在氮气保护条件下，将2.2mL无水S乙胺滴加到2g(15.4mmol)l，l-环丙二簇酸的 二氯甲烧溶液中，冰浴条件下揽拌30min，再缓慢滴加1.2mL SOCb的二氯甲烧溶液，滴加完 毕揽拌化，然后向反应液中继续滴加1.9g(15.4mmol)胡椒胺的二氯甲烧溶液，滴加完毕后 继续揽拌化。然后将反应液用2mol/L的化0田容液调节pH至10,减压蒸干，加入适量水进行超 声，用乙酸乙醋萃取一次，保留水层，再用2mol/L的HCl将水层调节pH至2,再用乙酸乙醋萃 取=次，减压旋除有机溶剂即得到Nl-I，3苯并二氧杂环戊-5-环丙基-1,1-二甲酯胺，约Ig, 产率35%;
[0085] 4)由7-(4-氨基苯基）哇挫嘟-2-胺（化合物4)和Nl-I，3苯并二氧杂环戊-5-环丙 基-1，1-二甲酯胺(化合物7)通过缩合反应得到具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物(化 合物8)
[0086] 将0.3g( 1.27mmol )7-(4-氨基苯基)哇挫嘟-2-胺和 0.35g( 1.4mmol )N1-1，3 苯并二 氧杂环戊-5-环丙基-I，I-二甲酯胺加入到冰浴中的无水二氯甲烧溶液中，再加入0.87g (2.29mmol)缩合剂HATU，继续揽拌30min，再慢慢滴加0.53mL无水S乙胺的二氯甲烧溶液， 撤去冰浴，室溫反应化。然后将反应液依次用饱和碳酸氨钢溶液和饱和食盐水洗涂，无水硫 酸钢干燥，再旋干得到残留物，用层析柱分离残留物，得到具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类 化合物0.12g，产率20 %。
[0089]理化性质:mp:283 ~285°C
[0087] 帝渝佑化出Il妈於T目右肚化脑、注?化於T巧:巿^而出肪米从今物的结构式女日下.
[008引
[0090] 氨谱核磁共振数据为:1h NMR(400MHz，DMS0)Sl0.21(s，lH)，9.91(s，lH)，9.17(s, lH)，8.09(d J=1.8Hz，lH)，8.03(m，lH)，7.76(d J = 8.細z，2H)，7.72(dJ = 8.Wz，2H), 7.49(d，J = 8.細z，lH)，7.32(d，J=1.5Hz，lH)，7.02(m，lH)，6.90(s，2H)，6.86(d，J = 8.4Hz，lH)，6.00(s，2H)，1.49(s，4H).
[0091] 下面对本发明制得的具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物进行VEGFR-2激酶的 抑制活性筛选。
[0092] 激酶VEGFR-2和底物Abltide购自Signal-畑em公司，选用Promega公司的ADP- GlobTM Kinase Assays检测试剂盒检测本发明提供的具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化 合物的抑酶活性，操作方法按照试剂盒说明进行。将ATP (1 OmM)用buffer (2 X )(Tri S SOmM， MgCb 20mM，BSA 0.2mg/mL，DTT 2mM)稀释40倍配制成ATP(250yM)的buffer(2X)溶液；将 250咖的ATP溶液和Abltide溶液体积1:1混合配制成ATP(125iiM)-Abltide(0. SiigAU)的混 合溶液备用；VEGFR-2激酶溶液用buffer(l X KlYis 40mM，MgCl2 10mM，BSA0.1mg/mL，DTT lmM)稀释66倍配制成VEGFR-2( I. SngAil)的buffer( I X )溶液备用;将目标化合物和阳性对 照药（Sorafinib)用bufferU X )分别配制成6 X l〇-5mol/L，6X l〇-6mol/L，6X l〇-7mol/L，6 X l〇-Vol/L，6X l〇-9mol/L，6X l〇-iVol/L浓度梯度的样品溶液，于384孔板上每孔依次加 入化L ATP-Abltide的混合溶液，1化样品溶液，2化酶溶液;空白孔加化L缓冲液和化LATP- Abltide的混合溶液;对照孔加化L ATP-Abltide的混合溶液，1化缓冲液，2化酶溶液，加毕， 30°C下解育60min;加入ADP-Glo试剂扣L，在25°C下解育40min;加入Kinase detection试剂 1化L，在25°C下解育30min。采用化rki址Imer多功能酶标仪的化学发光模块测定每孔的发 光值，计算本发明提供的具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物对VEGFR-2的抑制率和 IC日 Oo
[0093] 本发明的具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物对VEGFR-2激酶的抑制活性结果 如表1所示：
[0094] 表1环丙二酷胺类化合物对VEGFR激酶的ICso
[0095]
[00961
[0097] 由表1可W看出，本发明制备的具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物对VEGFR-2 激酶具有抑制活性，可用于制备抑制VEGFR-2激酶活性的药物W及制备WVEGFR-2激酶为祀 点的抗肿瘤药物。
[0098] 上述化合物的结构具体如表2所示：
[0099] 表2本发明提供的具有抗肿瘤活性的环丙二酷胺类化合物的结构式 [〇innl
【主权项】
1. 一种具有抗肿瘤活性的环丙二酰胺类化合物，其特征在于，其化学结构式如下：其中，Ri为卤素基团，R2为卤素基团或或者Ri、R2共同形成2. 如权利要求1所述的具有抗肿瘤活性的环丙二酰胺类化合物，其特征在于，所述的卤 素基团为氟原子、氯原子、溴原子、三氟甲基或三氟甲氧基。3. 权利要求1或2所述的具有抗肿瘤活性的环丙二酰胺类化合物的制备方法，其特征在 于，包括以下步骤： 1) 2-氟-5-溴苯甲醛与碳酸胍反应得到7-溴喹唑啉-2-胺； 2) 7-溴喹唑啉-2-胺与对氨基苯硼酸盐酸盐通过Suzuki偶联反应制备7-(4-氨基苯基） 喹唑啉-2-胺； 3) 1，1-环丙烷二羧酸与含有双取代基的苯胺通过缩合反应制备苯胺基羰基环丙烷羧 酸； 4) 7-(4-氨基苯基)喹唑啉-2-胺与苯胺基羰基环丙烷羧酸通过缩合反应制备具有抗肿 瘤活性的环丙二酰胺类化合物。4. 根据权利要求3所述的具有抗肿瘤活性的环丙二酰胺类化合物的制备方法，其特征 在于:所述步骤1)的具体操作为:将2-氟-5-溴苯甲醛和碳酸胍溶于N，N-二甲基乙酰胺溶液 中，回流反应，反应结束后冷却至室温，向反应液中加入水至固体析出，然后抽滤，滤饼即为 7-溴喹唑啉-2-胺。5. 根据权利要求3所述的具有抗肿瘤活性的环丙二酰胺类化合物的制备方法，其特征 在于:所述步骤2)的具体操作为:将7-溴喹唑啉-2-胺、对氨基苯硼酸盐酸盐、无水碳酸钠和 催化剂Pd(PPh 3)4溶于1，4_二氧六环和水的混合溶液中，氮气保护下反应，反应结束后冷却 至室温，对反应液进行抽滤，将滤液旋干得到粗品，用层析柱分离粗品，得到7-(4-氨基苯 基)喹唑啉-2-胺。6. 根据权利要求3所述的具有抗肿瘤活性的环丙二酰胺类化合物的制备方法，其特征 在于:所述步骤3)的具体操作为:在氮气保护下，将无水三乙胺滴加到1，1_环丙二羧酸的二 氯甲烷溶液中，冰浴条件下搅拌均匀，再向其中滴加 S0C12的二氯甲烷溶液，滴加完毕后搅 拌反应，然后向其中继续滴加含有双取代基的苯胺的二氯甲烷溶液，滴加完毕后继续搅拌 反应，反应结束后，调节反应液的pH值，用乙酸乙酯萃取，再减压旋蒸除去有机溶剂，即得到 苯胺基羰基环丙烷羧酸。7. 根据权利要求3所述的具有抗肿瘤活性的环丙二酰胺类化合物的制备方法，其特征 在于:所述步骤4)的具体操作为:将7-(4-氨基苯基)喹唑啉-2-胺和苯胺基羰基环丙烷羧酸 加入到冰浴中的无水二氯甲烷溶液中，然后加入缩合剂HATU，搅拌均匀，再向其中滴加无水 三乙胺的二氯甲烷溶液，撤去冰浴，室温下反应，反应结束后，反应液经洗涤、干燥后减压蒸 去溶剂，得粗品，用层析柱分离粗品，得到具有抗肿瘤活性的环丙二酰胺类化合物。8. 权利要求1或2所述的具有抗肿瘤活性的环丙二酰胺类化合物在制备抑制VEGFR-2激 酶活性的药物中的应用。9. 权利要求1或2所述的具有抗肿瘤活性的环丙二酰胺类化合物在制备以VEGFR-2激酶 为靶点的抗肿瘤药物中的应用。
【文档编号】C07D413/12GK105924403SQ201610280871
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年4月28日
【发明人】张 杰, 卢闻, 苏萍, 王金凤, 潘晓艳, 贺浪冲, 王嗣岑, 贺怀贞
【申请人】西安交通大学