本发明涉及一种培养基，具体涉及一种提高蓝莓脱毒苗快速繁殖成活率用培养基及其制备方法。
背景技术：
：蓝莓是一种小浆果，果实呈蓝色、果肉细腻、种子极小，具有“浆果之王”和“水果皇后”的美誉。蓝莓果实平均重0.5～2.5g，最大重5g，可食率为100％，甜酸适口，且具有香爽宜人的香气，为鲜食佳品。蓝莓不仅富含常规营养成分，如蛋白质、维生素、矿物质及微量元素等，而且还含有极为丰富的花青素、黄酮类和多糖类化合物，具有缓解视力疲劳，促进视网膜细胞中的视紫质再生，预防近视，改善和增进视力等功效。除缓解视力疲劳外，蓝莓还具有诸多保健功能，如预防心脑血管疾病、防癌、提高免疫力、缓解咽喉疼痛及腹泻等等，所以，对蓝莓的利用和衍生品开发越来越受到重视。鉴于蓝莓的广阔市场前景，对蓝莓苗木的研发也越来越受到重视。在蓝莓苗木培育中，可以通过扦插和组织培养脱毒方式。扦插苗由于可能含有病毒病菌等而造成一定时间后蓝莓品质退化，从而影响蓝莓的产量、质量和经济效益。因此，为防止蓝莓品质退化现象出现，保证蓝莓的质量和产量及蓝莓生产企业的经济效益，通过制作蓝莓脱毒苗进行繁育就成为优秀科技企业或者科技工作人员的首选品种繁育方式。脱毒苗制作，一般选取蓝莓茎尖或者叶芽等具有较强分生能力的分生组织，在实验室中经过灭菌除病毒处理，然后接种于无菌无病毒的培养基中，通过逐步培养，然后观察蓝莓苗的染毒染菌情况，筛选出没有病毒和细菌侵染的蓝莓幼苗，通过现代生物技术手段进一步切段快繁，从而实现获得大量蓝莓脱毒苗的目的。蓝莓脱毒苗制作过程中，如何保证已经获得的脱毒苗能够快速生长繁殖是蓝莓脱毒苗制作成功与否的关键因素。技术实现要素：针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种提高蓝莓脱毒苗快速繁殖成活率用培养基，能够使蓝莓脱毒苗在组培快繁过程中的保持良好生长状态及极高的成活率，为蓝莓组织培养制作脱毒苗奠定基础；本发明同时提供其制备方法。本发明所述的提高蓝莓脱毒苗快速繁殖成活率用培养基，基本培养基为WPM，并添加有0.2-1.0g/L水解乳蛋白、0.4-1.2g/L维生素E、0.002-0.006g/L玉米素、0.002-0.008g/L6-苄基腺嘌呤、0.003-0.01g/L萘乙酸、0.004-0.02g/L2,4-二氯苯氧乙酸和10-40g/L蔗糖。所述的培养基优选为：基本培养基为WPM，并添加有0.5g/L水解乳蛋白、0.6g/L维生素E、0.003g/L玉米素、0.004g/L6-苄基腺嘌呤、0.004g/L萘乙酸、0.008g/L2,4-二氯苯氧乙酸和20g/L蔗糖。所述的提高蓝莓脱毒苗快速繁殖成活率用培养基的制备方法，将水解乳蛋白、维生素E、玉米素、6-苄基腺嘌呤、萘乙酸、2,4-二氯苯氧乙酸和蔗糖加入到基本培养基中，混合均匀后分装，灭菌后备用。所述的分装规格为20-30mL/瓶。与现有技术相比，本发明的有益效果如下：(1)本发明中，WPM基本培养基提供了蓝莓组培苗的生长所需营养成分，而维生素E，水解乳蛋白具有抑制酚氧化酶活性的功能，其组合可以减轻组培苗代谢产物对蓝莓苗的毒害作用，水解乳蛋白作为营养元素还可以供给幼苗所需养分；玉米素、6-苄基腺嘌呤、萘乙酸和2,4-二氯苯氧乙酸等作为植物激素成分，具有促进细胞分裂，促进根系形成，促进叶芽分化等功能，四者协同增效保证了蓝莓组培苗的快速分裂增殖；蔗糖不仅提供了蓝莓组培幼苗生长所需的碳元素供应，同时可以调节细胞渗透压力，保证了蓝莓瓶苗的正常生长。(2)本发明所述的提高蓝莓脱毒苗快速繁殖成活率用培养基，能够保证蓝莓脱毒苗在组培快繁中的良好生长状态及极高的成活率，为蓝莓组织培养制作脱毒苗奠定了基础。(3)本发明所述的制备方法，简单易行、便于操作。具体实施方式下面结合实施例对本发明做进一步说明。实施例中采用的基本培养基WPM采用本领域人员公知配方进行配制。实施例1所述的提高蓝莓脱毒苗快速繁殖成活率用培养基，基本培养基为WPM，并添加有0.5g/L水解乳蛋白、0.6g/L维生素E、0.003g/L玉米素、0.004g/L6-苄基腺嘌呤、0.004g/L萘乙酸、0.008g/L2,4-二氯苯氧乙酸和20g/L蔗糖。其制备方法为：将水解乳蛋白、维生素E、玉米素、6-苄基腺嘌呤、萘乙酸、2,4-二氯苯氧乙酸和蔗糖加入到基本培养基中，混合均匀后分装，灭菌后备用。分装规格为25mL/瓶。实施例2所述的提高蓝莓脱毒苗快速繁殖成活率用培养基，基本培养基为WPM，并添加有0.2g/L水解乳蛋白、0.4g/L维生素E、0.002g/L玉米素、0.002g/L6-苄基腺嘌呤、0.003g/L萘乙酸、0.004g/L2,4-二氯苯氧乙酸和10g/L蔗糖。其制备方法为：将水解乳蛋白、维生素E、玉米素、6-苄基腺嘌呤、萘乙酸、2,4-二氯苯氧乙酸和蔗糖加入到基本培养基中，混合均匀后分装，灭菌后备用。分装规格为20mL/瓶。实施例3基本培养基为WPM，并添加有1.0g/L水解乳蛋白、1.2g/L维生素E、0.006g/L玉米素、0.008g/L6-苄基腺嘌呤、0.01g/L萘乙酸、0.02g/L2,4-二氯苯氧乙酸和40g/L蔗糖。其制备方法为：将水解乳蛋白、维生素E、玉米素、6-苄基腺嘌呤、萘乙酸、2,4-二氯苯氧乙酸和蔗糖加入到基本培养基中，混合均匀后分装，灭菌后备用。分装规格为30mL/瓶。将蓝莓苗分别接种到WPM基本培养基以及实施例1-3制备的培养基上，5周后观察蓝莓苗在不同培养基上的生长情况，具体见表1。成活情况用成活率表示。成活率计算公式为：成活率＝每个培养瓶中成活的蓝莓苗棵数/每个培养瓶中所接种的总蓝莓苗棵数。表1不同培养基上蓝莓苗的生长情况每瓶接种总数成活棵数成活率(％)WPM基本培养基30826.7实施例1培养基3030100实施例2培养基302686.7实施例3培养基302480观察发现：实施例1-3制备的培养基能够显著提高蓝莓脱毒快速繁殖组培苗的成活率，改善瓶苗的生长状态。实施例1-3培养基上的蓝莓苗的生长情况远远优于基本培养基上的，其中实施例1培养基上的蓝莓苗生长情况最优。当前第1页1 2 3