，使有机溶剂充分挥发后，冰浴条件下搅拌得纳米微球溶液，1000rpm离心处理，即得总蟾毒内脂PLGA纳米微球。
[0058]由此方法制备的总蟾毒内脂PLGA纳米微球在电镜下观察结果为大小均匀，外形圆整，表面光滑。测得微球的粒径为185.4nm，包封率为53.6%。
[0059]实施例11总蟾毒内酯PLGA纳米微球的制备
[0060]将2mg总蟾毒内酯、20mgPLGA(高分子聚合物PLGA分子量40000，其乳酸:轻基乙酸单体的摩尔比70:25)溶于2mL 二氯甲烷和乙酸乙酯(体积比1:1)混合溶液中，作为分散相(油相)，F68水溶液为连续相(水相)，在800rpm室温搅拌下将分散相缓慢注入1ml连续相中，形成0/W乳剂，随即转移至磁力搅拌器上100rpm搅拌，继续搅拌4h，使有机溶剂充分挥发后，冰浴条件下搅拌得纳米微球溶液，1000rpm离心处理，即得总蟾毒内脂PLGA纳米微球。
[0061]由此方法制备的总蟾毒内脂PLGA纳米微球在电镜下观察结果为大小均匀，外形圆整，表面光滑。测得微球的粒径为177.4nm，包封率为72.6%。
[0062]实施例12总蟾毒内酯PLGA纳米微球的制备
[0063]将2mg总蟾毒内酯、20mgPLGA(高分子聚合物PLGA分子量50000，其乳酸:轻基乙酸单体的摩尔比75:25)溶于2mL 二氯甲烷和乙酸乙酯(体积比1:1)混合溶液中，作为分散相(油相)，F68水溶液为连续相(水相)，在800rpm室温搅拌下将分散相缓慢注入1ml连续相中，形成0/W乳剂，随即转移至磁力搅拌器上100rpm搅拌，继续搅拌4h，使有机溶剂充分挥发后，冰浴条件下搅拌得纳米微球溶液，1000rpm离心处理，即得总蟾毒内脂PLGA纳米微球。
[0064]由此方法制备的总蟾毒内脂PLGA纳米微球在电镜下观察结果为大小均匀，外形圆整，表面光滑。测得微球的粒径为201.4nm，包封率为70.7%。
[0065]实施例13总蟾毒内酯PLGA纳米微球的制备
[0066]将2mg总蟾毒内酯、20mgPLGA(高分子聚合物PLGA分子量40000，其乳酸:轻基乙酸单体的摩尔比70:25)溶于2mL 二氯甲烷和乙酸乙酯(体积比1:1)混合溶液中，作为分散相(油相)，F68水溶液为连续相(水相)，在400rpm室温搅拌下将分散相缓慢注入1ml连续相中，形成0/W乳剂，随即转移至磁力搅拌器上100rpm搅拌，继续搅拌4h，使有机溶剂充分挥发后，冰浴条件下搅拌得纳米微球溶液，1000rpm离心处理，即得总蟾毒内脂PLGA纳米微球。
[0067]由此方法制备的总蟾毒内脂PLGA纳米微球在电镜下观察结果为大小均匀，外形圆整，表面光滑。测得微球的粒径为185.6nm，包封率为85.5%。
[0068]实施例14总蟾毒内酯PLGA纳米微球冻干制剂的制备
[0069]向实施例1取制备的总蟾毒内酯PLGA纳米微球llg，加入1LF68水中，加入冻干保护剂葡萄糖0.5g，冷冻干燥，即得总蟾毒内酯PLGA纳米微球冻干制剂。
[0070]对所制得的总蟾毒内酯PLGA纳米微球冻干制剂用注射用水溶解，以纳米微球大小和包封率做质量评价，复溶后所测得的总蟾毒内酯PLGA纳米微球平均粒径为170.1nm,包封率为88.8%。
[0071]实施例15总蟾毒内酯PLGA纳米微球冻干制剂的制备
[0072]向实施例3取制备的总蟾毒内酯PLGA纳米微球llg，加入1LF68水中，加入冻干保护剂甘露糖0.5g，冷冻干燥，即得总蟾毒内酯PLGA纳米微球冻干制剂。
[0073]对所制得的总蟾毒内酯PLGA纳米微球冻干制剂用注射用水溶解，以纳米微球大小和包封率做质量评价，复溶后所测得的总蟾毒内酯PLGA纳米微球平均粒径为188.1nm,包封率为82.5%。
[0074]实施例16总蟾毒内酯PLGA纳米微球冻干制剂的制备
[0075]向实施例13取制备的总蟾毒内酯PLGA纳米微球llg，加入1LF68水中，加入冻干保护剂聚乙烯吡咯烷酮0.5g，冷冻干燥，即得总蟾毒内酯PLGA纳米微球冻干制剂。
[0076]对所制得的总蟾毒内酯PLGA纳米微球冻干制剂用注射用水溶解，以纳米微球大小和包封率做质量评价，复溶后所测得的总蟾毒内酯PLGA纳米微球平均粒径为186.1nm,包封率为80.8%。
【主权项】
1.一种总蟾毒内酯PLGA纳米微球冻干制剂，其特征在于，包括以下各组分:总蟾毒内酯、PLGA、冻干保护剂。2.按照权利要求1所述的总蟾毒内酯PLGA纳米微球冻干制剂，其特征在于，各组分的重量为:总蟾毒内酯I?5份，PLGA 5?50份，冻干保护剂0.5-5份。3.按照权利要求2所述的总蟾毒内酯PLGA纳米微球冻干制剂，其特征在于，各组分的重量为:总蟾毒内酯I份，PLGA 10份，冻干保护剂0.5份。4.根据权利要求1-3所述总蟾毒内酯PLGA纳米微球冻干制剂，其特征在于，所述的高分子聚合物PLGA的分子量为0.5-50000，其乳酸:羟基乙酸单体的摩尔比例为75:25、50:50、25:75中的一种或者几种材料混合。5.一种权利要求1至4任何一项所述总蟾毒内酯PLGA纳米微球冻干制剂制备方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)按照所述配比称取各组分，将总蟾毒内酯、PLGA溶于有机溶剂中，作为分散相； (2)F68水溶液为连续相； (3)超声环境下将分散相缓慢注入连续相中，形成0/W乳剂， (4)随即转移至磁力搅拌器上搅拌，使有机溶剂充分挥发后，冰浴条件下搅拌得纳米微球溶液，离心处理，即得总蟾毒内脂PLGA纳米微球。 (5)将总蟾毒内脂PLGA纳米微球加入F68水中，加入冻干保护剂，冷冻干燥得到总蟾毒内酯PLGA纳米微球冻干制剂。6.按照权利要求5所述制备方法，其特征在于:步骤(I)所述有机溶剂选自二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮或无水乙醇中任意一种或两种以上按照任意比例组成的混合物；优选为二氯甲烷和乙酸乙酯按照任意比例组成的混合物；最优选为，二氯甲烷和乙酸乙酯按照体积比1:1组成的混合物。7.按照权利要求5所述制备方法，其特征在于所述:步骤(4)的溶剂挥发过程中的搅拌速率为300?15000rpm，温度控制在4°C?40°C;溶剂挥发采用室温蒸发，冰浴条件下搅拌得到纳米微球溶液后，离心，离心速度为3000?12000rpm。8.按照权利要求5所述的总蟾毒内酯PLGA纳米微球冻干制剂，其特征在于:所述冻干保护剂选自葡萄糖、蔗糖、海藻糖、甘露醇、氯化钠、乳糖、山梨醇、木糖醇、葡聚糖、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、右旋糖酐、甘油或甘氨酸的任意一种或两种以上按照任意比例组成的混合物。
【专利摘要】本发明公开了一种总蟾毒内酯PLGA纳米微球冻干制剂及其制备方法，属于PLGA纳米微球冻干制剂及其制备领域。本发明首先公开了一种总蟾毒内酯PLGA纳米微球，包括以下各组分：总蟾毒内酯、PLGA、冻干保护剂。其制备方法：总蟾毒内脂和PLGA溶于有机溶剂作为分散相，F68水溶液为连续相，超声环境下将分散相缓慢注入连续相中，形成O/W乳剂，随即转移至磁力搅拌器上搅拌，使有机溶剂充分挥发后，冰浴条件下搅拌得纳米微球溶液，离心处理，即得总蟾毒内脂PLGA纳米微球。本发明总蟾毒内酯PLGA纳米微球冻干制剂所测得微球的粒径为150～210nm，包封率为50﹪～90％。能够有效提高总蟾毒内酯的肿瘤细胞靶向性、提高药物生物利用度、发挥缓释疗效，降低毒副作用。
【IPC分类】A61K35/65, A61K47/34, A61K9/51, A61P35/00
【公开号】CN105147640
【申请号】CN201510478232
【发明人】杨贤龙, 吴宗好, 何勇
【申请人】合肥华方医药科技有限公司
【公开日】2015年12月16日
【申请日】2015年8月6日