h，得到一级种子液；
[0079] ③二级种子液的制备
[0080] 种子罐中的培养基仍为LB液体培养基，121°C下，灭菌20min，将一级种子液接入 种子罐中，接种量为0. 5-1% (V/V);培养条件为：通气比1 :1，搅拌转速为250-400r/min， 培养温度32°C，罐压0. 05MPa，培养时间为12小时，培养结束时得到二级种子液，其活菌含 量为1-3X 10scfu/mL，0D值在0· 85左右，此时菌种活力强；
[0081] ④解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3菌液发酵
[0082] 发酵培养基配方（重量百分比）：玉米淀粉3%，豆柏粉3%，酵母膏0. 9%，氯化钠 0· 25 %，碳酸钙 0· 25 %，硫酸镁 0· 4 %，磷酸氢二钾 0· 3 %，ρΗ7· 2-7. 5，121°C 灭菌 30min ;
[0083] 将解淀粉芽抱杆菌植物亚种（Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum) ZFH-3的二级种子液，按照接种量为1% (V/V)接入发酵罐中，培养条件为：通气比为1 : 〇. 7,搅拌转速为180r/min、罐压0. 05MPa、培养温度32°C、培养时间为48h左右，发酵过程中 根据泡沫情况流加消泡剂；下罐时间以取样镜检芽孢90%以上释放为准，成熟发酵液中解 淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3活芽孢含量为30~40X 10scfu/mL，得到发酵成熟菌剂；
[0084] ⑤解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3菌粉
[0085] 步骤④所得的发酵成熟菌剂（活芽孢含量为30~40 X 10scfU/mL)经碟片离心机 或微滤设备浓缩后，加入轻质碳酸钙，浓缩成熟发酵菌剂与轻质碳酸钙的重量比为100:3， 得到液固混合物，将该液固混合物搅拌30min后，利用输料栗将液固混合物送入离心式喷 雾塔中干燥，得到解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3原粉；
[0086] 其中，LB培养基配方（g/L):蛋白胨10g，酵母膏5g，NaCl 10g，溶剂为水， pH7. 0-7. 2,固体培养基在液体培养基中加2%琼脂；
[0087] 其中，离心式喷雾塔的干燥条件为：进风口温度为180-200 °C，出风口温度为 80-85°C，菌原粉中含水量小于5 % (W/W)，活芽孢含量2000 X 10scfu/g ;
[0088] 最后往得到解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3原粉中加入豆柏粉3%、轻质碳酸钙 混合，使最终为每克含1X K^cfu解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3活芽孢粉即解淀粉芽胞 杆菌ΖΠ 1-3菌剂；
[0089] (3)混合：在步骤⑴所得预处理蚕沙中加入在珠海市威利冠肥料有限公司买到 的烟梗，经粉碎机粉碎，混合均匀，然后调节混合物料的含水量至55 % -60 %，再加入步骤 (2)所得解淀粉芽胞杆菌ZFH-3菌剂，得混合物料；
[0090] (4)堆肥发酵：将步骤（3)所得混合物料堆肥发酵，三至五天后将温度升至60°C~ 70°C，发酵20至30天，每二至三天翻堆通气一次，当混合物料水分降至20%以下时，停止发 酵，得发酵混合物料；
[0091] (5)多功能生物肥的制备：将上述步骤（4)所得发酵混合物料通过翻堆混合均匀 后，经粉碎机粉碎成100目的细粉，通过圆盘造粒机，造粒烘干，加工成颗粒状蚕沙解淀粉 芽胞杆菌ZFH-3多功能生物肥2。
[0092] 实施例3
[0093] -种蚕沙解淀粉芽胞杆菌ZFH-3多功能生物肥，由以下重量份的原料制备而成： 蚕沙：849公斤；烟梗：150公斤；解淀粉芽胞杆菌ZFH-3菌剂：1公斤。
[0094] 上述蚕沙解淀粉芽胞杆菌ZFH-3多功能生物肥的步骤如下：
[0095] (1)蚕沙预处理：将在广东省清远市阳山县收集来的蚕沙，去除掉粗的桑枝和杂 质后，称重，得预处理蚕沙；
[0096] (2)解淀粉芽胞杆菌ZFH-3菌剂的制备：
[0097] ①活化菌种
[0098] 活化解淀粉芽抱杆菌植物亚种（Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum)ZFH_3菌株，待解淀粉芽抱杆菌植物亚种（Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum) ZFH-3在LB固体培养基上菌落乳白色，圆形，明显突起，表面光滑，不透 明，边缘整齐；
[0099] ②一级种子液的制备
[0100] 选取LB固体培养基上的单菌落，接种于一级种子摇瓶中，摇瓶体积为250mL，一级 种子LB液态培养基（121°C下，灭菌20min)的装液量50ml，将一级种子摇瓶在32°C、180r/ min下培养14h，得到一级种子液；
[0101] ③二级种子液的制备
[0102] 种子罐中的培养基仍为LB液体培养基，121°C下，灭菌20min，将一级种子液接入 种子罐中，接种量为0. 5-1% (V/V);培养条件为：通气比1 :1，搅拌转速为250-400r/min， 培养温度32°C，罐压0. 05MPa，培养时间为12小时，培养结束时得到二级种子液，其活菌含 量为1-3X 10scfu/mL，0D值在0· 85左右，此时菌种活力强；
[0103] ④解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3菌液发酵
[0104] 发酵培养基配方（重量百分比）：玉米淀粉3%，豆柏粉3%，酵母膏0.9%，氯化钠 0· 25 %，碳酸钙 0· 25 %，硫酸镁 0· 4 %，磷酸氢二钾 0· 3 %，ρΗ7· 2-7. 5，121°C 灭菌 30min ;
[0105] 将解淀粉芽抱杆菌植物亚种（Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum) ZFH-3的二级种子液，按照接种量为1% (V/V)接入发酵罐中，培养条件为：通气比为1 : 〇. 7,搅拌转速为180r/min、罐压0. 05MPa、培养温度32°C、培养时间为48h左右，发酵过程中 根据泡沫情况流加消泡剂；下罐时间以取样镜检芽孢90%以上释放为准，成熟发酵液中解 淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3活芽孢含量为30~40X 10scfu/mL，得到发酵成熟菌剂；
[0106] ⑤解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3菌粉
[0107] 步骤④所得的发酵成熟菌剂（活芽孢含量为30~40X 10scfU/mL)经碟片离心机 或微滤设备浓缩后，加入轻质碳酸钙，浓缩成熟发酵菌剂与轻质碳酸钙的重量比为100:3， 得到液固混合物，将该液固混合物搅拌30min后，利用输料栗将液固混合物送入离心式喷 雾塔中干燥，得到解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3原粉；
[0108] 其中，LB培养基配方（g/L):蛋白胨10g，酵母膏5g，NaCl 10g，溶剂为水， pH7. 0-7. 2,固体培养基在液体培养基中加2%琼脂；
[0109] 其中，离心式喷雾塔的干燥条件为：进风口温度为180-200°C，出风口温度为 80-85°C，菌原粉中含水量小于5 % (W/W)，活芽孢含量2000 X 10scfu/g ;
[0110] 最后往得到解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3原粉中加入豆柏粉3%、轻质碳酸钙 混合，使最终为每克含1X K^cfu解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3活芽孢粉即解淀粉芽胞 杆菌ΖΠ 1-3菌剂；
[0111] ⑶混合：在步骤⑴所得预处理蚕沙中加入在珠海市威利冠肥料有限公司买到 的烟梗，经粉碎机粉碎，混合均匀，然后调节混合物料的含水量至55 % -60 %，再加入步骤 (2)所得解淀粉芽胞杆菌ZFH-3菌剂，得混合物料；
[0112] (4)堆肥发酵：将步骤（3)所得混合物料堆肥发酵，三至五天后将温度升至60°C~ 70°C，发酵20至30天，每二至三天翻堆通气一次，当混合物料水分降至20%以下时，停止发 酵，得发酵混合物料；
[0113] (5)多功能生物肥的制备：将上述发酵混合物料通过翻堆混合均匀后，经粉碎机 粉碎成100目的细粉，装袋，得蚕沙解淀粉芽胞杆菌ZFH-3多功能生物肥3。
[0114] 应用实施例1 :
[0115] 本发明实施例1所得蚕沙解淀粉芽胞杆菌ZFH-3多功能生物肥1对菜心生长发育 的影响。
[0116] 1、试验时间：2015年8月4日~9月1日，施肥25天。4-25日，以晴天为主，间有 多云，温度27~35°C;8月25日-9月1日，以雨天为主，有阵雨、中雨转大雨，温度25-31°C。
[0117] 2、试验地点：中国广东省中山市坦洲镇十四村。
[0118] 3、试验作物：菜心。
[0119] 4、试验处理：⑴蚕沙解淀粉芽胞杆菌ZFH-3多功能生物肥1 :用量40kg/亩，试验 面积1亩地；⑵空白对照，试验面积1亩地；⑶对照菌肥（对照菌肥由以下重量份的原料制 备而成：蚕沙55公斤，烟梗25公斤，群林发酵菌剂20公斤。制备方法：①蚕沙预处理：将在 广东省清远市阳山县收集来的蚕沙，去除掉粗的桑枝和杂质后，称重，得预处理蚕沙；②在 步骤①所得预处理蚕沙中加入在珠海市威利冠肥料有限公司买到的烟梗，经粉碎机粉碎， 混合均匀，然后调节混合物料的含水量至55% -60% ;③堆肥发酵：加入广西北海群林生物 工程有限公司提供的群林发酵剂；④将步骤③所得混合物料堆肥发酵，三至五天后将温度 升至60°C~70°C，发酵20至30天，每二至三天翻堆通气一次，当混合物料水分降至20%以 下时，停止发酵，得发酵混合物料；⑤生物肥制备：将上述发酵混合物料通过翻堆混合均匀 后，经粉碎机粉碎成100目的细粉，通过圆盘造粒机，造粒烘干，加工成颗粒状对照菌肥。）： 用量50kg/亩，试验面积1亩地。
[0120] 注：前期施用国产15