专利名称：具有免疫抑制活性的取代的苯基化合物和药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及取代的苯基化合物、其制备方法、含有这类化合物的药物组合物及其制备方法和在治疗方面的应用。
P2X7受体(以前称为P2Z受体)是一种配体门离子通道，它存在于各种类型的细胞上。这些细胞大部分是已知在炎性/免疫过程中要涉及的那些细胞，具体说，是巨噬细胞、肥大细胞和淋巴细胞(T和B)。P2X7受体被细胞外的核苷酸，特别是腺苷三磷酸盐激活之后会导致白细胞介素-1β(IL-1β)的释放和巨细胞的形成(巨噬细胞/小神经胶质细胞)、脱粒(肥大细胞)和增殖(T细胞)、编程性细胞死亡和L-选择蛋白脱落(淋巴细胞)。P2X7受体也存在于有抗原的细胞(APC)、角蛋白细胞、唾液腺泡细胞(腮腺细胞)、肝细胞和肾小球膜细胞上。
从EP-A-382216知道，某些取代的乙酰胺化合物具有抗应变性活性。
人们希望制造出在治疗炎性、免疫或心血管疾病中能有效用作P2X7受体拮抗剂的化合物，所述P2X7受体在这些疾病的病原学中可以起一定的作用。
因此，本发明提供一种通式如下的化合物或其药物上可接受的盐或溶剂合物 其中各个R1独立地代表氢或卤素(例如氟、氯、溴或碘)原子，或者三氟甲基、氰基、硝基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基；T代表氧原子，或优选基团NH；U代表氧原子或硫原子或基团NH，优选氧原子或硫原子；Ar代表基团 X代表1个键、氧原子或基团CO、CH2、CH2O、O(CH2)m、CH2OCH2、NR5、CH2NR5、NR5CH2、CH2NR5CH2、CONR5、S(O)n或SO2NR5；m是1、2或3；n是0、1或2；R2和R3中之一代表卤素、氰基、硝基、氨基、羟基，或1个选自下列的基团任选地被至少1个C3-C6环烷基取代的C1-C6烷基、C3-C8环烷基、任选地被至少1个C3-C6环烷基取代的C1-C6烷氧基、C3-C8环烷氧基、S(O)pC1-C6烷基或S(O)qC3-C8环烷基，这些基团中每个都可任选地被1个或多个氟原子取代，而R2和R3中的另一个则代表氢原子或卤原子或甲基；p是0、1或2；q是0、1或2；R4代表二(C1-2烷基)N(CH2)t，其中t是0、1或2，或咪唑基，或者R4代表1个含1个或2个氮原子的3～9元的饱和杂环体系，该杂环体系可任选地被1个或多个独立地选自下列基团的取代基所取代氟原子、羟基、C1-C6烷基、乙酰基、羟基C1-C6烷基、-NR6R7、-(CH2)rNR6R7、-CONR6R7和嘧啶基，或者R4代表1个3～8元的饱和碳环体系，该环系被1个或多个独立地选自-NR6R7、-(CH2)rNR6R7和-CONR6R7的取代基取代，该环系还可任选地进一步被1个或多个独立地选自氟原子、羟基和C1-C6烷基的取代基所取代；r是1、2、3、4、5或6；
R5代表氢原子或C1-C6烷基或C3-C8环烷基；以及R6和R7各自独立地代表氢原子或C1-C6烷基或C3-C8环烷基，或者R6和R7与它们所连接的氮原子一起形成1个3～8元的饱和杂环，其条件是当R3代表氰基时X不是1个键。
在本发明的上下文中，除非另有说明，否则取代基基团中的烷基取代基或烷基部分可以是直链或支化的。当R2和R3中之一代表任选地至少1个C3-C6环烷基取代的C1-C6烷基/C1-C6烷氧基时，应当理解的是烷基和环烷基部分中之一或二者可任选地被氟原子取代。含有1个或2个氮原子的3～9元饱和杂环体系可以是1个单环或双环体系。类似地，3～8元饱和碳环体系可以是1个单环或双环体系。羟烷基取代基基团中的羟基部分可以位于烷基中的任何适当的位置。典型地，羟基部分位于直链烷基的末端碳原子上。二烷基氨基部分中的烷基基团可以相同或不同。
优选至少1个基团R1不是氢原子，尤其是卤原子如氟或氯原子。
优选X代表1个键、氧原子或基团CONH、CH2或O(CH2)m。
R2和R3中之一代表卤素(例如氟、氯、溴或碘)、氰基、硝基、氨基、羟基、或选自下列的基团任选地被至少1个(例如1、2或3个)C3-C6环烷基(即环丙基、环丁基、环戊基或环己基)取代的C1-C6烷基(例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基)、C3-C8环烷基(例如环丙基、环丁基、环戊基或环己基)、任选地被至少1个(例如1、2或3个)C3-C6环烷基(即环丙基、环丁基、环戊基或环己基)取代的C1-C6烷氧基(例如甲氧基、乙氧基、异丙氧基或叔丁氧基)、C3-C8环烷氧基(例如环丙基、环丁基、环戊基或环己基)、S(O)pC1-C6烷基(例如S(O)p甲基、-乙基、-丙基、-丁基、-戊基或-己基)或S(O)qC3-C8环烷基(例如S(O)q环丙基、-环丁基、-环戊基或-环己基)，这些基团中每个都可任选地被1个或多个(例如1、2、3或4个)氟原子取代，而R2和R3中的另一个则代表氢原子或卤素(例如氟、氯、溴或碘)原子或甲基。
优选R2和R3中之一代表卤素(尤其氯)原子或C1-C6烷基(尤其甲基)基团，而R2和R3中的另一个则代表氢原子。
一方面，R4可以代表1个含1个或2个氮原子的3～9元的饱和杂环体系，该杂环体系可任选地被1个或多个(例如1、2、3或4个)独立地选自下列基团的取代基所取代氟原子、羟基、C1-C6烷基(例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基)、乙酰基、羟基C1-C6烷基(例如羟甲基、羟乙基、羟丙基、羟丁基、羟戊基或羟己基)、-NR6R7、-(CH2)rNR6R7、-CONR6R7和嘧啶基。
基团R4中的3～9元饱和杂环体系可以是1个单环体系，例如吡咯烷基(例如1-吡咯烷基、2-吡咯烷基或3-吡咯烷基)、哌啶基(例如1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基或4-哌啶基)、哌嗪基(例如1-哌嗪基)或高哌嗪基的环，或是1个单环体系，例如 另一方面，R4可以代表1个3～8元的饱和碳环体系，该环系被1个或多个(例如1、2或3个)独立地选自-NR6R7、-(CH2)rNR6R7和-CONR6R7的取代基取代，该环系还可任选地进一步被1个或多个(例如1、2、3或4个)独立地选自氟原子、羟基和C1-C6烷基(例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基)取代。
基团R4中的3～8元饱和碳环优选是1个单环体系，例如环戊基或环己基的环。
基团R4的优选例子包括 当X代表1个键或基团CO、CH2或SO2时，R4优选代表下面的基团 当X代表氧或硫原子或基团CH2O、O(CH2)m、CH2OCH2、NR5、CH2NR5、NR5CH2、CH2NR5CH2、CONR5、SO或SO2NR5时，R4优选代表下面的基团 R5代表氢原子，或C1-C6，优选C1-C4，烷基(例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基)或C3-C8环烷基，优选C3-C6环烷基(例如环丙基、环丁基、环戊基或环己基)基团。
R6和R7各自独立地代表氢原子，或C1-C6，优选C1-C4，烷基(例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基)或C3-C8环烷基，优选C3-C6环烷基(例如环丙基、环丁基、环戊基或环己基)基团，或R6和R7与它们所连接的氮原子一起形成1个3～8元的饱和杂环，例如吡咯烷基或哌啶基的环。
本发明的优选化合物包括2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(2-甲基-5-哌嗪-1-基甲基-苯基)-乙酰胺，三盐酸盐，2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(2-甲基-5-哌嗪-1-基甲基-苯基)-硫代乙酰胺，2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(2-甲基-4-哌嗪-1-基甲基-苯基)-乙酰胺，三盐酸盐，N-(2-氯-5-哌嗪-1-基苯基)-2-(3，4-二氟苯基氨基)-乙酰胺，三盐酸盐，(S)-2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-〔2-甲基-4-(2-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基甲基)-苯基〕-乙酰胺，三盐酸盐，2-(3-氯-4-氟苯基氨基)-N-{2-甲基-5-〔3-(4-甲基哌嗪-1-基)-丙氧基〕苯基}乙酰胺，(+/-)2-(3-氯-4-氟苯基氨基)-N-〔2-甲基-5-(哌啶-4-基氧基)-苯基〕乙酰胺，二盐酸盐，2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-〔2-甲基-4-(哌啶-4-基氧基)-苯基〕乙酰胺，二盐酸盐，(±)N-〔5-(3-氨基-吡咯烷-1-基)-2-甲基-苯基〕-2-(3，4-二氟苯基氨基)-乙酰胺，三盐酸盐，2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(2-甲基-5-哌嗪-1-基-苯基)-乙酰胺，三盐酸盐，(S)-2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(2-甲基-5-(2-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基甲基)-苯基)-乙酰胺，(S)-2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-〔5-(2-羟甲基-吡咯烷-1-基甲基)-2-甲基-苯基〕-乙酰胺，2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-〔2-甲基-5-(4-嘧啶-2-基-哌嗪-1-基甲基)-苯基〕-乙酰胺，2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-〔2-甲基-3-(哌啶-4-基氧基)苯基〕乙酰胺，三氟乙酸盐，3-〔2-(3，4-二氟苯基氨基)乙酰胺基〕-N-(2-二甲氨基乙基)-2-甲基苯甲酰胺，N-〔3-(4-乙酰基-哌嗪-1-基甲基)-2-甲基苯基〕-2-(3，4-二氟苯基氨基)乙酰胺，2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(3-咪唑-1-基甲基-2-甲基苯基)乙酰胺，或2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(3-二甲氨基甲基-2-甲基苯基)乙酰胺。
本发明还提供一种制备如上定义的式(I)化合物的方法，该方法包括(i)当U代表氧原子，X代表CH2基团，以及R4代表1个含1个或2个氮原子的3～8元的饱和杂环体系，该杂环体系可任选地被1个或多个独立地选自下列基团的取代基所取代氟原子、羟基、C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、-NR6R7、-(CH2)rNR6R7、-CONR6R7和嘧啶基时，使通式(II)的化合物 其中R10和R11中之一代表氢原子，而R10和R11中的另一个则代表基团-CH2L1，其中L1代表离去基团(例如卤原子)，T、R1、R2和R3如式(I)中所定义，与通式(III)的化合物在碱(例如二异丙基乙基胺)的存在下进行反应R4′-H(III)其中R4′代表1个含1个或2个氮原子的3～8元的饱和杂环体系，该杂环体系可任选地被1个或多个独立地选自下列基团的取代基所取代氟原子、羟基、C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、-NR6R7、-(CH2)rNR6R7、-CONR6R7和嘧啶基，且其中R6和R7如式(I)中所定义；或(ii)当U代表氧原子，X代表氧原子或基团O(CH2)m时，使通式(IV)的化合物 其中R12和R13中之一代表氢原子，而R12和R13中的另一个则代表羟基T、R1、R2和R3如式(I)中所定义，与通式(V)的化合物在1，1-(偶氮二羰基)二哌啶和三丁基膦的存在下(在Mitsunobu反应条件下《四面体通讯》(1993)，34，1639)进行反应R4-Y-OH(V)其中Y代表1个键或基团(CH2)m，m和R4如式(I)中所定义；或(iii)当U代表氧原子，X代表1个键、氧原子或基团O(CH2)m、NR5、NR5CH2、CO、CONR5、SO2或SO2NR5《13》时，使通式(VI)的化合物 其中R14和R15中之一代表基团-X′-R4，而R14和R15中的另一个则代表氢原子，X′代表1个键、氧原子或基团O(CH2)m、NR5、NR5CH2、CO、CONR5、SO2或SO2NR5，m、R2、R3、R4和R5如式(I)中所定义，与通式(VII)的化合物在偶合剂如氯甲酸异丁酯或溴-三-吡咯烷基鏻六氟磷酸盐和碱(如二异丙基胺)的存在下进行反应 其中T和R1如式(I)中所定义；或(iv)当U代表氧原子，X代表1个键或基团NR5或NR5CH2时，使通式(VIII)的化合物 其中R16和R17中之一代表离去基团L2，如卤原子，而R16和R17中的另一个则代表氢原子，T、R1、R2和R3如式(I)中所定义，与通式(IX)的化合物任选地在钯催化剂(如乙酸钯)、膦配体(如BINAP)和碱(如碳酸铯)的存在下进行反应R4-Z(IX)其中Z代表氢原子或基团NHR5或CH2NHR5，R4和R5如式(I)中所定义；或(v)当U代表氧原子，X代表基团CH2O时，使上面(i)中定义的式(II)化合物与上面(ii)中定义的其中Y代表1个键的式(V)化合物在碱(如氢化钠)的存在下或在金属盐(如三氟甲磺酸银)的存在下进行反应；或(vi)当U代表氧原子，X代表基团CH2NR5时，使上面(i)中定义的式(II)化合物与上面(iv)中定义的其中Z代表基团NHR5的式(IX)化合物进行反应；或(vii)当U代表氧原子，X代表基团CH2OCH2时，使上面(i)中定义的式(II)化合物与上面(ii)中定义的其中Y代表基团CH2的式(V)化合物在碱(如氢化钠)的存在下或在金属盐(如三氟甲磺酸银)的存在下进行反应；或(viii)当U代表氧原子，X代表基团CH2NR5CH2时，使上面(i)中定义的式(II)化合物与上面(iv)中定义的其中Z代表基团CH2NHR5的式(IX)化合物进行反应；或(ix)当U代表氧原子，X代表基团CH2，R4代表含有1个氮原子的无取代的4～6元饱和杂环体系时，使上面(i)中定义的式(II)化合物与通式(X)的化合物进行反应 其中s和t独立地代表1或2；或(x)当U代表氧原子，X代表硫原子时，使上面(iv)中定义的式(VIII)化合物与正丁基锂(例如在-70℃)反应，然后再与通式(XI)的化合物进行反应R4-S-S-R4(XI)其中R4如式(I)中所定义，或(xi)当U代表氧原子，X代表CH2基团时，使上面(iv)中定义的式(VIII)化合物与正丁基锂(例如在-70℃)反应，然后再与通式(XII)的化合物进行反应R4-CHO(XII)其中R4如式(I)中所定义，接着进行还原反应，例如与三乙基硅烷和三氟乙酸反应，或用甲基草酰氯和三乙胺进行处理，然后在偶氮二异丁腈的存在下与氢化三丁基锡反应；或(xii)当U代表氧原子，X代表1个键时，使上面(iv)中定义的式(VIII)化合物与正丁基锂(例如在-70℃)反应，然后再与通式(XIII)的化合物进行反应R4＝O(XIII)其中R4如式(I)中所定义，接着进行还原反应，例如与三乙基硅烷和三氟乙酸反应，或用甲基草酰氯和三乙胺进行处理，然后在偶氮二异丁腈的存在下与氢化三丁基锡反应；或(xiii)当U代表硫原子时，使其中U代表氧原子的相应的式(I)化合物与硫代剂(如Lawesson试剂)在例如0-100℃的温度进行反应；或(xiv)当U代表基团NH时，使其中U代表硫原子的相应的式(I)化合物与适当的烷基化剂(如甲基碘)进行反应，接着再与氯化铵或氨反应；或(xv)当U代表氧原子，X代表CONR5时，使通式(XIIIA)的化合物 其中R′和R″中之一代表氢原子，而R′和R″中的另一个则代表羰基，T、R1、R2和R3如式(I)中所定义，与通式(XIIIB)，即R4-NHR5的化合物进行反应，其中R4和R5如式(I)中所定义；或(xvi)当U代表氧原子，X代表CH2，R4通过氮原子键合到X上时，使通式(XIIIC)的化合物 其中T、R1、R2和R3如式(I)所定义，与甲磺酰氯反应，接着再与通式(XIIID)，即R4″-H的化合物反应，其中R4″如式(I)中对R4给出的定义，但下列情况除外·二(C1-2烷基)N(CH2)t，其中t是1或2，和
·3～8元的饱和碳环体系，该体系被1个或多个独立地选自-NR6R7、-(CH2)rNR6R7和-CONR6R7的取代基取代，该体系还可任选地进一步被1个或多个独立地选自氟原子、羟基和C1-C6烷基的取代基所取代；并任选地在(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)、(vii)、(viii)、(ix)、(x)、(xi)、(xii)、(xiii)、(xiv)、(xv)或(xvi)之后，将式(I)化合物转化为式(I)的另一种化合物和/或形成式(I)化合物的药物上可接受的盐或溶剂合物。
本发明的方法可方便地在溶剂中，例如在有机溶剂如二氯甲烷、四氢呋喃、二噁烷、二甲苯或二甲基甲酰胺中，在-78～200℃，优选在0-150℃的温度范围内进行。
其中L1代表例如氯原子的式(II)化合物可按如下方法制备使通式(XIV)的化合物 其中R18和R19中之一代表氢原子，而R18和R19中的另一个则代表受保护的苄醇基团(所用的保护基例如可以是叔丁基二甲基甲硅烷基)，R2和R3如式(II)中所定义，与上面定义的式(VII)化合物在偶合剂如氯甲酸异丁酯或溴-三-吡咯烷基鏻六氟磷酸盐和碱(如二异丙基胺)的存在下进行反应。
式(IV)化合物可按如下方法制备使通式(XV)的化合物 其中R2、R3、R12和R13如式(IV)中所定义，与上面定义的式(VII)化合物在偶合剂如氯甲酸异丁酯或溴-三-吡咯烷基鏻六氟磷酸盐和碱(如二异丙基胺)的存在下进行反应。
式(VI)化合物可方便地按如下方法制备使通式(XVI)的化合物 其中L2代表离去基团(如羟基)，R2、R3、R14和R15如式(VI)中所定义，与二苯基磷酰叠氮在碱如三乙胺的存在下进行反应。
其中X代表1个键、氧原子或基团O(CH2)m、NR5或NR5CH2的式(XVI)化合物可按如下方法制备使通式(XVII)的化合物 其中R20代表氢原子或C1-C6烷基，R21和R22中之一代表离去基团L4，如卤原子(例如溴或碘)或三氟甲磺酸基，而R21和R22中的另一个则代表氢原子，R2和R3如式(XVI)中所定义，与通式(XVIII)的化合物H-X″-R4(XVIII)其中X″代表1个键、氧原子或基团O(CH2)m、NR5或NR5CH2，R4如式(I)中所定义，在钯催化剂(美国化学会志7215-6(1996)；和3395(1997))存在下进行反应，接着进行水解反应(例如用氢氧化钠)。
其中X代表CO、CONR5、SO2或SO2NR5的式(XVI)化合物可按如下方法制备使通式(XIX)的化合物 其中R23代表氢原子或C1-C6烷基，R24和R25中之一代表基团COL5或SO2L5，而R24和R25中的另一个则代表氢原子，L5代表离去基团(如卤原子)，R2和R3如式(XVI)中所定义，与其中Z代表氢原子或基团NHR5的式(IX)化合物在诸如二异丙基胺和催化性N，N-二甲氨基吡啶的存在下进行反应，然后进行水解(例如用氢氧化钠)。
式(VII)化合物可方便地按如下方法制备使通式(XX)的化合物 其中R26代表羟基或受保护的氮原子(例如用叔丁氧羰基保护)，R1如式(I)中所定义，与烷基化剂(如溴乙酸甲酯)进行反应，接着进行皂化反应。
式(VIII)化合物可按类似于制备式(IV)化合物的方法进行制备，所不同的是不用式(XV)的中间化合物，而用通式(XXI)的中间化合物 其中R2、R3、R16和R17如式(VIII)中所定义。
式(X)化合物可按《Syn.Lett.》(合成通讯)(1998)379-380中所述方法制备。
通式(XIIIA)和(XIIIC)的化合物可用类似于已经叙述过的方法制备。
通式(III)、(V)、(IX)、(XI)、(XII)、(XIII)、(XIIIB)、(XIIID)、(XIV)、(XV)、(XVII)、(XVIII)、(XIX)、(XX)和(XXI)的化合物要么是市售的，在文献中众所周知的，要么可容易地用已知技术制备。
用标准方法可将式(I)化合物转化成其它式(I)化合物。例如，其中R2和R3中之一代表硝基的式(I)化合物可通过用铁粉和氯化铵在乙醇/水中在回流条件下进行还原转化成其中R2和R3中之一代表氨基的式(I)化合物。而后一种化合物又可通过重氮化(例如用亚硝酸钠)并与氯化铜反应转化成其中R2和R3中之一代表卤原子，如氯的式(I)化合物。用标准化学方法可将其中R6或R7代表氯原子的式(I)化合物可转化成其中R6或R7代表C1-C6烷基、C3-C8环烷基或3-8元饱和杂环的式(I)化合物。
精通本技术的人员将会知道，在本发明的方法中原料或中间化合物中的某些官能基如羟基或氨基可能需要用保护基加以保护。因此，式(I)化合物的制备方法可能包括除去1个或多个保护基的某些步骤。
有关官能基的保护和脱保护可参阅J.W.F.McOmie主编和PlenumPress出版(1973)的《有机化学中的保护基》和T.W.Greene与P.G.M.Wnts主编和Wiley-Interscience出版(1991)的《有机合成中的保护基》，第二版。
上面的式(I)化合物可以转变为药物上可接受的盐或其溶剂合物，优选转变为酸加成盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、乙酸盐、富马酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、草酸盐、甲磺酸盐或对甲苯磺酸盐，或碱金属盐，例如钠盐或钾盐。
某些式(I)化合物能以立体异构体形式存在。应当理解的是，本发明涵盖式(I)化合物的所有几何异构体和光学异构体及其混合物，包括外消旋体。互变异构体及其混合物也构成本发明的一个方面。
本发明化合物的优点在于此类化合物具有药理学活性。因此表明它们可作为药物，用于治疗类风湿性关节炎、骨关节炎、牛皮癣、变应性皮炎、气喘、慢性梗阻性肺病(COPD)、导气管反应过强、脓毒性休克、肾小球性肾炎、应激性肠病、克劳恩氏病、溃疡性结肠炎、粥样硬化、恶性细胞的生长和转移、成肌细胞白血病、糖尿病、阿尔茨海默尔病、脑膜炎、骨质疏松、烧伤、局部缺血心脏病、中风和静脉曲张。
因此，本发明提供用于治疗的按上面定义的式(I)化合物、或其药物上可接受的盐或溶剂合物。
另一方面，本发明提供按上面定义的式(I)化合物、或其药物上可接受的盐或溶剂合物在制造治疗用药品的用途。
在本发明的上下文中，术语“治疗”也包括“预防”，但另有具体指明时除外。术语“治疗的”和“在治疗上”也应这样解释。
本发明进一步提供一种实现免疫抑制(例如在治疗类风湿性关节炎、应激性肠病、粥样硬化或牛皮癣中)的方法，该方法包括对患者给药治疗有效量的按上面定义的式(I)化合物、或其药物上可接受的盐或溶剂合物。
本发明还提供一种治疗梗阻性导气管疾病(如气喘或COPD)的方法，该方法包括对患者给药治疗有效量的按上面定义的式(I)化合物、或其药物上可接受的盐或溶剂合物。
对于上述治疗用途而言，给药剂量当然随所用化合物、给药方式、所需的治疗以及疾病的种类而异。式(I)化合物/盐/溶剂合物(活性成分)的日剂量可以在0.001mg/kg～30mg/kg的范围内。
式(I)化合物及其药物上可接受的盐和溶剂合物可按其原样使用，但通常以药物组合物的形式给药，其中式(I)化合物/盐/溶剂合物(活性成分)与药物上可接受的佐药、稀释剂或载体结合。依给药方式而异该药物组合物优选包含0.05-99％重量、更优选0.1-70％重量的活性成分，1-99.95％重量、更优选30-99.90％重量的药物上可接受的佐药、稀释剂或载体，所有百分数均按组合物总重量计。
因此，本发明也提供一种药物组合物，其中包含按上面定义的式(I)化合物、或其药物上可接受的盐或溶剂合物，并结合药物上可接受的佐药、稀释剂或载体。
本发明还提供一种制备本发明的药物组合物的方法，该方法包括将如上定义的式(I)化合物、或其药物上可接受的盐或溶剂合物与药物上可接受的佐药、稀释剂或载体混合。
本发明的药物组合物可以以溶液、悬浮液七氟烷烃气溶胶和干粉制剂形式局部给药(例如施加到肺和/或导气管或皮肤上)，或者全身性给药，例如以片剂、胶囊、糖浆、粉末或粒剂形式通过口服给药，或以溶液或悬浮液形式通过非经肠给药，或通过皮下给药，或以栓剂形式通过直肠给药，或经皮给药。
现在通过参考下列说明性实施例对本发明作进一步的解释。
实施例12-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(2-甲基-5-哌嗪-1-基甲基-苯基)-乙酰胺，三盐酸盐， a)〔叔丁氧碳基-(3，4-二氟苯基)-氨基〕-乙酸甲酯在0℃往(3，4-二氟苯基)-氨基甲酸叔丁酯(Tetrahedron，(1992)，48(35)，7373)(1 5.1g)的四氢呋喃(120ml)溶液中滴加叔丁醇钾(94ml1.0M四氢呋喃中的溶液)。搅拌2小时后滴加溴乙酸甲酯(9.1ml)，撤除冰浴后在室温下将反应混合物搅拌过夜。将反应混合物减压浓缩、用乙酸乙酯稀释并用水和食盐水洗涤，经干燥(Na2SO4)和浓缩后得到棕色油状次标题化合物(18.0g)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.43-7.12(3H，m)，4.33(2H，s)，3.67(3H，s)，1.37(9H，s)。
b)〔叔丁氧羰基-(3，4-二氟苯基)-氨基〕-乙酸往〔叔丁氧羰基-(3，4-二氟苯基)-氨基〕-乙酸甲酯(14.7g)的四氢呋喃(100ml)溶液中加入水(100ml)和氢氧化锂一水合物(6.2g)反应混合物在室温下搅拌过夜，然后减压脱除四氢呋喃。加入KHSO4(10％水溶液)将残留物酸化至pH4，然后用乙酸乙酯萃取。将有机萃取物合并，经干燥(Na2SO4)和浓缩后得到胶状次标题化合物(12.3g)。1H NMR(DMSO-d6)δ12.82(1H，s)，7.37(2H，m)，7.14(1H，m)，4.22(2H，s)，1.38(9H，s).
c)4-(4-甲基-3-硝基-苄基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯往4-氯甲基-1-甲基-2-硝基-苯(2g)和三乙胺(3ml)的DMF(10ml)溶液中加入哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.01g)反应混合物在搅拌下在78℃加热15小时。冷却至室温后将反应混合物倒入到乙酸乙酯/水中，分离出有机层。水层用乙酸乙酯萃取。合并的有机萃取物依次用水、KHSO4水溶液、K2CO3水溶液和食盐水洗涤，经干燥(Na2SO4)和浓缩后得到棕色油状次标题化合物(3.5g)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.89(1H，d)，736(1H，dd)，7.46(1H，d)，3.55(2H，s)，3.30(7H，m)，2.33(4H，m)，1.39(9H，s).
d)4-(3-氨基-4-甲基-苄基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯往粗制的4-(4-甲基-3-硝基-苄基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.5g)和EtOH/水(60ml，1∶1)的混合物中加入铁粉(4g)和固体NH4Cl(4g)，混合物加热至回流温度保持1.5小时。冷却至室温后反应混合物通过硅藻土过滤，滤饼进一步用EtOH洗涤。真空脱除大部分溶剂，然后加入乙酸乙酯和K2CO3水溶液。分离出有机层，用食盐水洗涤，经干燥(Na2SO4)和浓缩后得到一种油状物，用异己烷研制后得到浅棕色固体(3g)。1H NMR(DMSO-d6)δ6.83(1H，d)，6.55(1H，d)，6.38(1H，dd)，4.75(2H，s)，3.28(4H，m)，2.26(4H，t)，2.01(3H，s)，1.38(9H，s).
e)4-(3-{2-〔叔丁氧羰基-(3，4-二氟苯基)-氨基〕乙酰氨基}-4-甲基-苄基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯在0℃往〔叔丁氧羰基-(3，4-二氟苯基)-氨基〕-乙酸(0.200g)的四氢呋喃(2ml)溶液中加入三乙胺(110μl)，然后滴加氯甲酸异丁酯(100μl)。搅拌1小时后，加入三乙胺(150μl)，接着加入4-(3-氨基-4-甲基-苄基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.234g)的四氢呋喃(2ml)溶液，将反应混合物温热至室温，然后在58℃加热过夜。冷却至室温后反应混合物通过硅藻土过滤。收集滤液，真空脱除溶剂。用NPHPLC精制(0-5％甲醇在CH2Cl2中)后得到浅黄色固体次标题化合物(0.300g)。
1H NMR(DMSO-d6)δ9.43(1H，brs)，7.42(2H，m)，7.35(1H，s)，7.21(1H，m)，7.15(1H，d，J＝7.6 Hz)，7.01(1H，d，J＝7.6 Hz)，4.38(2H，s)，3.42(2H，s)，3.29(4H，m)，2.29(4H，m)，2.15(3H，s)，139(9H，s)，1.38(9H，s).
f)2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(2-甲基-5-哌嗪-1-基甲基-苯基)-乙酰胺，三盐酸盐，往4-(3-{2-(叔丁氧羰基-(3，4-二氟苯基)-氨基〕乙酰氨基}-4-甲基-苄基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.100g)的MeOH(3ml)溶液中加入HCl(2ml 4M在二噁烷中的溶液)。静置若干小时后滤出固体物，用丙酮洗涤，然后真空干燥。将该固体物重新悬浮于丙酮中，用超声波处理5分钟，经过滤和干燥后得到标题化合物(0.043g，51％) 。熔点232-248℃(分解)MS(ESI)375(M+H)+，游离碱。1H NMR(DMSO-d6)δ9.54(3H，brs)，7.68(1H，m)，7.37(1H，d)，7.29(1H，d)，7.16(1H，dd)，6.61(1H，ddd)，6.41(1H，m)，4.33(2H，brs)，3.92(2H，s)，3A3-3.11(10 H，m)，2.17(3H，s).
实施例22-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(2-甲基-5-哌嗪-1-基甲基-苯基)-硫代乙酰胺 往4-(3-{2-〔叔丁氧羰基-(3，4-二氟苯基)-氨基〕乙酰氨基}-4-甲基-苄基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(160mg)的甲苯(4ml)溶液中加入Lawesson′s试剂(100mg)，反应混合物在100℃加热2.5小时。冷却至室温后真空脱除溶剂，得到黄色粉末。用NPHPLC精制(0-5％甲醇在CH2Cl2中)后得到4-(3-{2-〔叔丁氧羰基-(3，4-二氟苯基)-氨基〕-硫代乙酰氨基}-4-甲基-苄基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(120mg)。将其溶于CH2Cl2(1ml)中，加入三氟乙酸(0.63ml)。搅拌2小时后将反应混合物倒入K2CO3水溶液中，分离出有机层，用K2CO3水溶液和食盐水洗涤，经干燥(Na2SO4)和浓缩后得到黄色结晶。用逆相HPLC将其进一步精制后得到标题化合物(14mg)。熔点72-82℃(分解)MS(ESI)391(M+H)+，游离碱。1H NMR(DMSO-d6)δ7.25(2H，m)，7.18(2H，m)，6.63(2H，m)，6.45(1H，d)，4.26(2H，d)，3.57(4H，m)，2.75(4H，t)，2.35(4H，brs)，2.06(3H，s)，(未观测到硫代酰胺质子)。
实施例32-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(2-甲基-4-哌嗪-1-基甲基-苯基)-乙酰胺，三盐酸盐， a)4-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基甲基)-2-甲基-苯胺往(3-甲基-4-硝基-苯基)-甲醇(1.22g)和咪唑(0.99g)的N，N-二甲基甲酰胺(5ml)溶液中加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯(0.99g)，将此溶液搅拌5小时，然后倒入到乙酸乙酯/水中，分离出有机层，用水和食盐水洗涤，然后进行干燥(Na2SO4)和浓缩。残留物用硅胶色谱精制(用含10％乙酸乙酯的异己烷洗脱)，得到1.5g浅棕色油状物。将其溶解于乙醇(8ml)中，冷却至0℃，加入CuSO4水溶液(0.5ml 2M溶液)。分小份加入氢溴酸钠(1.32g)，将该反应混合物温热至室温。每小时加入一份CuSO4水溶液(0.5ml)，直到完全还原为止。加入乙酸乙酯，分离出有机层，用水和食盐水洗涤，经干燥(Na2SO4)和浓缩后得到油状次标题化合物(1.3g)。1H NMR(DMSO-d6)δ 6.81(2H，m)，6.54(1H，d)，4.73(2H，brs)，4.48(2H，s)，2.03(3H，s)，0.97(9H，s)，0.04(6H，s).
b)(3，4-二氟苯基)-〔(4-羟甲基-2-甲基-苯基氨基甲酰基)-甲基〕-氨基甲酸叔丁酯在0℃往〔叔丁氧羰基-(3，4-二氟苯基)-氨基〕-乙酸(5.74g)的四氢呋喃(40ml)溶液中加入三乙胺(3.2ml)，接着滴加氯甲酸异丁酯(2.9ml)。搅拌1小时后，加入三乙胺(3.2ml)，接着加入4-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基甲基)-2-甲基-苯胺(5.0g)的四氢呋喃(3ml)溶液，将反应混合物温热至室温，然后在58℃加热过夜。冷却至0℃后，滴加氟化四丁铵(7.6ml 1M四氢呋喃溶液)，再将反应混合物温热至室温。3小时后，将该溶液倒入到乙酸乙酯/水中，分离出有机层，用KHSO4(10％水溶液)、水和食盐水洗涤，然后进行干燥(Na2SO4)和浓缩。残留物用硅胶色谱精制(用含3％甲醇的二氯甲烷洗脱)，得到橙色固体。从2-丙醇/异己烷中重结晶后得到白色结晶的次标题化合物(2.8g)。熔点134-136℃MS(ESI)307(M+H)+1H NMR(DMSO-d6)δ9.41(1H，s)，7.49-7.39(3H，m)，7.23(1H，m)，7.12(2H，m)，5.11(1H，t)，4.43(2H，d)，4.37(2H，s)，2.16(3H，s)，1.39(9H，s).
c)2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(2-甲基-4-哌嗪-1-基甲基-苯基)-乙酰胺，三盐酸盐，往(3，4-二氟苯基)-〔(4-羟甲基-2-甲基-苯基氨基甲酰基)-甲基〕-氨基甲酸叔丁酯(0.100g)的无水四氢呋喃(1ml)溶液中一次性加入N，N-二异丙基乙胺(0.17ml)，接着加入甲磺酰氯(0.04ml)。2小时后加入哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.137g)，将反应混合物在70℃加热10小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入到乙酸乙酯/水中。分离出有机层，用水、KHSO4水溶液和NaHCO3水溶液洗涤。将有机层进行干燥(Na2SO4)和浓缩。用NPHPLC精制(用含0-25％甲醇的二氯甲烷洗脱)，得到棕色固体物(0.120g)。将其溶解在甲醇(3ml)中，加入HCl(1ml 4M二噁烷溶液)。24小时后，滤出所形成的结晶，用丙酮洗涤，经真空干燥后得到白色粉末状标题化合物(0.060g)。熔点278℃(分解)MS(ESI)375(M+H)+，游离碱。1H NMR(DMSO-d6)δ 9.50(3H，s)，7.58(1H，d)，7.46(1H，s)，7.42(1H，d)，7.16(1H，q)，6.61(1H，ddd)，6.40(1H，d)，4.44(3H，s)，4.31(2H，s)，3.57(6H，s)，3.19(2H，s)，2.16(3H，s).
实施例4N-(2-氯-5-哌嗪-1-基苯基)-2-(3，4-二氟苯基氨基)-乙酰胺，三盐酸盐 a)4-(4-氯-3-乙氧羰基-苯基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯将哌嗪-1-羧酸叔丁酯(106mg)、3-溴-6-氯苯甲酸乙酯(125mg)、碳酸铯(220mg)、乙酸钯(5mg)和R-BINAP(22mg)合并于甲苯(2ml)中，然后在密封的容器中在100℃加热48小时。将该冷的反应混合物装入到硅胶柱中，用异己烷/乙酸乙酯(4∶1)洗脱，得到次标题化合物(170mg)。MS(APCI+ve)269/271(M+H-(叔丁氧羰基))+1H NMR(CDCl3)δ7.28-7.31(2H，m)，6.94(1H，dd)，4.39(2H，q)，3.58(4H，t)，3.13(4H，t)，1.48(9H，s)，1.40(3H，t).
b)5-(4-叔丁氧羰基-哌嗪-1-基)-2-氯苯甲酸锂盐往4-(4-氯-3-乙氧羰基-苯基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.2g)在四氢呋喃(10ml)和水(5ml)中的溶液中加入氢氧化锂一水合物(370mg)。
反应混合物在室温下搅拌48小时，然后减压浓缩，得到次标题产物(2.1g)。MS(APCI+ve)340/342(M+H)+，游离酸1H NMR(D2O)δ 7.40(1H，d)，7.06-7.11(2H，m)，3.65(4H，t)，3.17(4H，t)，1.50(1H，s)。
c)4-(3-氨基-4-氯苯基)-F＝哌嗪-1-羧酸叔丁酯往5-(4-叔丁氧羰基-哌嗪-1-基)-2-氯苯甲酸锂盐(2.1g)的N，N-二甲基甲酰胺(50ml)溶液中加入二苯基磷酰叠氮(1.4ml)，反应混合物在室温下搅拌1小时。加入水(30ml)，将反应混合物加热至60℃，保持2小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入到乙酸乙酯/水中，分离出有机层，用水、NaHCO3水溶液和食盐水洗涤。将有机层进行干燥(Na2SO4)和浓缩。残留物用硅胶色谱精制(用乙酸乙酯/异己烷(1∶3至1∶1)洗脱)，得到次标题产物(1.5g)。MS(APCI+ve)312/314(M+H)+1H NMR(DMSO-d6)δ 6.98(1H，d)，6.35(1H，d)，6.19(1H，dd)，5.12(2H，s)，3.44(4H，t)，2.98(4H.t)，1.41(9H，s).
d)4-〔4-氯-3-(2-氯乙酰氨基)-苯基〕-哌嗪-1-羧酸叔丁酯往冷却至0℃的4-(3-氨基-4-氯苯基)-F＝哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500mg)和N，N-二异丙基乙胺(0.8ml)的四氢呋喃(20ml)溶液中加入2-氯乙酰氯(0.2ml)。2小时后，将反应混合物倒入到乙酸乙酯/水中。分离出有机层，用水、NaHCO3水溶液和食盐水洗涤，然后进行干燥(Na2SO4)和浓缩。残留物用硅胶色谱精制(用乙酸乙酯/异己烷(1∶3至1∶2)洗脱)，得到次标题产物(0.5g)。MS(APCI+ve)388/390/392(M+H)+1H NMR(CDCl3)δ8.81(1H，brs)，8.05(1H，d)，7.24(1H，d)，6.63(1H，dd)，4.22(2H，s)，3.56(4H，t)，3.14(4H，t)，1.48(9H，s).
e)4-{4-氯-3-〔2-(3，4-二氟苯基氨基)-乙酰氨基〕-苯基}-哌嗪-1-羧酸叔丁酯将碘化钾(10mg)、3，4-二氟苯胺(0.4ml)、N，N-二异丙基乙胺(0.9ml)和4-〔4-氯-3-(2-氯乙酰氨基)-苯基〕-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500mg)合并于N，N-二甲基甲酰胺(10ml)中，然后在90℃加热24小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入到乙酸乙酯/水中，分离出有机层，用水(3次)和食盐水洗涤，然后进行干燥(Na2SO4)和浓缩。残留物用硅胶色谱精制(用乙酸乙酯/异己烷(1∶2至1∶1)洗脱)，得到次标题产物(360mg)。MS(APCI+ve)481/483(M+H)+1H NMR(CDCl3)δ9.01(1H，s)，8.13(1H，d)，7.18(1H，d)，7.00(1H，q)，6.59(1H，dd)，6.54(1H，ddd)，6.38(1H，brd)，4.38(1H，t)，3.91(2H，d)，3.57(4H，t)，3.15(4H，t)，1.48(9H，s).
f)4N-(2-氯-5-哌嗪-1-基苯基)-2-(3，4-二氟苯基氨基)-乙酰胺将4M盐酸二噁烷溶液(3ml)加入到4-{4-氯-3-〔2-(3，4-二氟苯基氨基)-乙酰氨基〕-苯基}-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(340mg)的乙醚(20ml)溶液中。24小时后过滤收集沉淀出的固体，依次用二氯甲烷、乙腈、乙酸乙酯洗涤，然后用乙醇重结晶，得到标题产物的二盐酸盐(60mg)。熔点240℃(分解)。MS(APCI+ve)381/383(M+H)+1H NMR(DMSO-d6)δ9.44(1H，s)，9.21(2H，brs)，7.59(1H，d)，7.33(1H，d)，7.15(1H，q)，6.82(1H，dd)，6.63(1H，ddd)，6.60(2H，brs)，6.40(1H，t)，3.91(2H，s)，3.34(4H，t)，3.20(4H，t).
实施例5(S)-2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-〔2-甲基-4-(2-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基甲基)-苯基〕-乙酰胺，三盐酸盐 往得自实施例3b)的(3，4-二氟苯基)-〔(4-羟甲基-2-甲基-苯基氨基甲酰基)-甲基〕-氨基甲酸叔丁酯(0.200g)的1-甲基-2-吡咯烷酮(2ml)溶液中一次性加入N，N-二异丙基乙胺(O.52ml)，接着加入甲磺酰氯(0.16ml)。3小时后将反应混合物倒入到乙酸乙酯/水中。分离出有机层，用KHSO4水溶液、NaHCO3水溶液和食盐水洗涤。有机层经干燥(Na2SO4)和浓缩后得到一种浅红色油状物，将其溶于1-甲基-2-吡咯烷酮(8ml)中，加入N，N-二异丙基乙胺(0.52ml)和(S)-(+)-1-(2-吡咯烷基甲基)-吡咯烷(0.41ml)，反应混合物在95℃加热过夜。冷却至室温后，将反应混合物倒入到乙酸乙酯/水中。分离出有机层，用KHSO4水溶液、K2CO3水溶液和食盐水洗涤，经干燥(Na2SO4)和浓缩后得到浅红色油状物。用NPHPLC精制(用含0-25％甲醇的二氯甲烷洗脱)，得到白色固体物，将其溶于甲醇(2ml)中，加入HCl(1ml 4M二噁烷溶液)。2小时后脱除溶剂，残留物从异丙醇/乙腈中重结晶，得到白色粉末状标题化合物(0.071g)。熔点178℃(分解)。MS(ESI+ve)443(M+H)+，游离碱。1H NMR(DMSO-d6)δ9.49(1H，s)，7.55(2H，m)，7,47(1H，d)，7.16(1H，q)，6.10(1H，ddd)，6.40(1H，d)，4.68(1H，d)，4.13(1H，dd)，3.92(4H，m)，3.58(3H，m)，3.20(1H，m)，3.13(1H，m)，2.98(2H，m)，2.17(3H，s)，2.00(8H，m)，NH’s未观察到。
实施例62-(3-氯-4-氟苯基氨基)-N-{2-甲基-5-〔3-(4-甲基哌嗪-1-基)-丙氧基〕苯基}乙酰胺 a)2-氯-N-(5-甲氧基-2-甲基苯基)-乙酰胺在氮气保护下往2-甲基-5-甲氧基苯胺(4.7g)的四氢呋喃(50ml)溶液中加入二异丙基乙胺(12.6ml)，接着滴加氯乙酰氯(2.7ml)，混合物在氮气保护下搅拌27小时。将该溶液倒入到2M盐酸水溶液(150ml)中，用乙醚(3×150ml)萃取，用食盐水洗涤，经干燥(Na2SO4)和浓缩后得到棕色油状的次标题化合物(5.15g)。
1H NMR(CDCl3)δ8.24(1H，s)，7.64-7.63(1H，d)，7.11-7.08(1H，d)，6.70-6.66(1H，dd)，4.23(2H，s)，3.80(3H，s)，2.24(3H，s).
b)2-(3-氯-4-氟苯基氨基)-N-(5-甲氧基-2-甲基苯基)-乙酰胺2-氯-N-(5-甲氧基-2-甲基苯基)-乙酰胺(3g)、3-氯-4-氟苯胺(7.56g)、二异丙基乙胺(13.8ml)、碘化钾(0.005g)和无水四氢呋喃(20ml)一起在密封管中在105℃加热19小时。然后将该混合物冷却和浓缩。残留物用硅胶色谱精制(用1∶1的异己烷/乙酸乙酯洗脱)，得到次标题化合物(3.93g)。
MS(APCI+ve)323(M+H)+1H NMR(CDCl3)δ8.42(1H，s)，7.71-7.70(1H，d)，7.04-6.89(2H，m)，6.76-6.47(3H，m)，4.38(1H，t)，3.92-3.90(2H，d)，3.80(3H，s)，2.00(3H，s).
c)2-(3-氯-4-氟苯基氨基)-N-(5-羟基-2-甲基苯基)-乙酰胺在氮气保护下在搅拌下在-78℃的2-(3-氯-4-氟苯基氨基)-N-(5-甲氧基-2-甲基苯基)-乙酰胺(3.93g)的无水二氯甲烷(450ml)溶液中滴加三溴化硼溶液(在二氯甲烷中，1M，95ml)。让混合物温热至室温，在氮气保护下搅拌20小时，然后倒入到冰/水(1∶1)中，剧烈搅拌1小时，萃取到乙酸乙酯(3×500ml)中，然后＝进行干燥(Na2SO4)和浓缩。残留物用硅胶色谱精制(用含3％甲醇的二氯甲烷洗脱)，得到次标题化合物(2.65g)。
MS(APCI+ve)309(M+H)+1H NMR(DMSO-d6)δ9.18(1H，s)，9.14(1H，s)，7.18-7.12(1H，t)，7.01(1H，s)，6.96-6.94(1H，d)，6.73-6.70(1H，m)，6.61-6.57(1H，m)，6.49-6.46(1H，d)，6.35-6.31(1H，t)，3.88-3.86(2H，d)，2.00(3H，s).
d)2-(3-氯-4-氟苯基氨基)-N-{2-甲基-5-〔3-(4-甲基哌嗪-1-基)-丙氧基〕苯基}乙酰胺在氯气氛围中往2-(3-氯-4-氟苯基氨基)-N-(5-羟基-2-甲基苯基)-乙酰胺(0.400g)和4-甲基-1-哌嗪丙醇(0.270g)的四氢呋喃(20ml)溶液中加入三丁基膦(0.64ml)和1，1′-(偶氮二羰基)二哌啶(0.656g)，然后在室温下将该混合物搅拌20小时。将反应混合物倒入到乙醚中，并通过硅藻土过滤。浓缩后，残留物用NPHPLC精制(用75％乙醇/25％二氯甲烷洗脱)，得到标题化合物(0.334g)。MS(APCI+ve)449(M+H)+1H NMR(DMSO-d6)δ9.24(1H，s)，7.18-7.05(3H，m)，6.74-6.56(3H，m)，6.35-6.31(1H，t)，3.94-3.87(4H，q)，2.49-2.26(10H，m)，2.18(3H，s)，2.05(3H，s)，1.87-1.78(2H，五重峰)。
实施例7(+/-)2-(3-氯-4-氟苯基氨基)-N-〔2-甲基-5-(哌啶-4-基氧基)-苯基〕乙酰胺，二盐酸盐，
往2-(3-氯-4-氟苯基氨基)-N-(5-羟基-2-甲基苯基)-乙酰胺(0.10g)和4-羟基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(Synlett.1998，4，379)(0.163g)的四氢呋喃(3ml)溶液中加入三丁基膦(0.20ml)和1，1′-(偶氮二羰基)二哌啶(0.204g)，该混合物在60℃加热3小时。然后再加入4-羟基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.163g)、三丁基膦(0.20ml)和1，1′-(偶氮二羰基)二哌啶(0.204g)并继续加热。3小时后将反应混合物冷却，倒入到乙醚中，再通过硅藻土过滤。浓缩后，残留物用NPHPLC精制(用含0-5％乙醇的二氯甲烷洗脱)，得到白色固体物，将其溶于甲醇(3ml)中，加入HCl(2ml 4M二噁烷溶液)。24小时后，滤出结晶，用二氯甲烷洗涤，经真空干燥后得到白色粉末状标题化合物(0.080g)。熔点179℃(分解)。MS(APCI+ve)392/394(M+H)+，游离碱1H NMR(DMSO46)δ9.33(1H，s)，8.90(1H，brs)，8.85(1H，brs)，7.18-7.09(3H，m)，6.74(2H，m)，6.60(1H，m)，5.53(2H，brs)，4.55(1H，m)，3.90(2H，s)，3.17(2H，m)，3.05(2H，m)，2.06(3H，s)，2.06(2H，m)，1.80(2H，m).
实施例82-(3，4-二氟苯基氨基)-N-〔2-甲基-4-(哌啶-4-基氧基)-苯基〕乙酰胺，二盐酸盐， a)4-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-3-甲基-苯胺往4-氨基-2-甲基-苯酚(1g)和咪唑(1.66g)的四氢呋喃(10ml)溶液中加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯(1.1g)，将该溶液搅拌15小时，然后倒入到乙酸乙酯/水中，分离出有机层，用水、K2CO3水溶液和食盐水洗涤，经干燥(Na2SO4)和浓缩后得到一种红色油状物。残留物用硅胶色谱精制(用1∶1的乙酸乙酯/异己烷洗脱)，得到浅红色油状物(1.5g)，无需进一步精制可直接使用。1H NMR(DMSO-d6)δ6.39-6.28(3H，m)，4.27(2H，s)，1.89(3H，s)，0.82(9H，s)，0.00(6H，s).
b)(3，4-二氟苯基)-〔(4-羟基-2-甲基-苯基氨基甲酰基)-甲基〕-氨基甲酸叔丁酯按照实施例3b)的方法用〔叔丁氧羰基-(3，4-二氟苯基)-氨基〕-乙酸(1.82g)(得自实施例1b)和4-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-3-甲基-苯胺(1.5g)进行制备。用硅胶色谱法精制(用含30％乙酸乙酯的异己烷洗脱)，随后用乙醚研制，得到白色粉末状次标题化合物(1.47g)。1H NMR(DMSO-d6)δ 9.25(1H，s)，9.22(1H，s)，7.44(2H，m)，7.21(1H，m)，7.03(1H，d)，6.56(2H，m)，4.32(2H，s)，2.08(3H，s)，1.39(9H，s).
c)2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-〔2-甲基-4-(哌啶-4-基氧基)-苯基〕乙酰胺，二盐酸盐，按照实施例7的方法用(3，4-二氟苯基)-〔(4-羟基-2-甲基-苯基氨基甲酰基)-甲基〕-氨基甲酸叔丁酯(100mg)进行制备，得到白色粉末状标题化合物(0.033g)。熔点210℃(分解)。MS(APCI+ve)376(M+H)+，游离碱1H NMR(DMSO-d6)δ9.33(1H，s)，8.68(2H，brs)，7.23(1H，m)，7.15(1H，q)，6.81(2H，m)，6.59(1H，ddd)，6.41(1H，m)，6.10(2H，brs)，4.58(1H，m)，3.85(2H，s)，3.20(2H，m)，3.05(2H，m)，2.08(3H，s)，2.06(2H，m)，1.82(2H，m).
实施例9(±)N-〔5-(3-氨基-吡咯烷-1-基)-2-甲基-苯基〕-2-(3，4-二氟苯基氨基)-乙酰胺，三盐酸盐 a)(±)-〔1-(3-甲基-4-硝基苯基)-吡咯烷-3-基〕-氨基甲酸叔丁酯在氮气保护下，将4-氟-2-甲基-1-硝基苯(1g)、吡咯烷-3-基氨基甲酸叔丁酯(1.2g)、碳酸钾(1.79g)和二甲基亚矾(10ml)在80℃一起加热15小时。将混合物冷却，用乙酸乙酯(200ml)稀释，用2M盐酸水溶液(200ml)洗涤，然后进行干燥(MgSO4)和浓缩。残留物用硅胶色谱精制(用含20％乙酸乙酯的异己烷洗脱)，得到黄色固体的次标题化合物(1.744g)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.03-8.00(1H，d)，7.28-7.21(1H，br d)，6.51-6.47(2H，m)，4.20-4.12(1H，br m)，3.61-3.16(4H，m)，2.56(3H，s)，2.20-2.08(1H，m)，1.98-1.85(1H，m)，1.39(9H，s).
b)(±)-〔1-(4-氨基-3-甲基苯基)-吡咯烷-3-基〕-氨基甲酸叔丁酯在氮气保护下将〔1-(3-甲基-4-硝基苯基)-吡咯烷-3-基〕-氨基甲酸叔丁酯(1.744g)、铁粉(1.52g)、氯化铵(1.45g)、乙醇(50ml)和水(50ml)加热至回流温度，保持2小时。将混合物冷却，滤除铁粉。往残留物中加水(200ml)，将产物萃取到乙酸乙酯(3×200ml)中，经干燥(MgSO4)和浓缩后得到次标题化合物(1.56g)。1H NMR(CDCl3)δ6.65(1H，br s)，6.38(2H，br m)，4.80(1H，m)，4.33(2H，br m)，3.60-2.80(5H，m)，2.31-2.17(4H，m)，1.92-1.82(1H，m)，1.45(9H，br s).
c)(±)N-〔5-(3-氨基-吡咯烷-1-基)-2-甲基-苯基〕-2-(3，4-二氟苯基氨基)-乙酰胺，三盐酸盐按照实施例4d)、4e)和4f)的制备程序，无需鉴定中间体，用〔1-(3-氨基-4-甲基-苯基)-吡咯烷-3-基〕-氨基甲酸叔丁酯(750mg)进行制备，得到标题化合物的三盐酸盐(200mg)。MS(APCI+ve)361(M+H)+，游离碱1H NMR(DMSO-d6)δ9.22(1H，s)，8.33(2H，brs)，7.10-7.20(2H，m)，6.60(1H，ddd)，6.37-6.40(3H，m)，5.70(2H，brs)，3.91(1H，brs)，3.82(2H，s)，3.40-3.51(2H，m)，3.20-3.30(2H，m)，2.24-2.36(2H，m)，2.07(3H，s).
实施例102-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(2-甲基-5-哌嗪-1-基-苯基)-乙酰胺，三盐酸盐 a)4-(3-甲基-4-硝基苯基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯在氮气保护下，将4-氟-2-甲基-1-硝基苯(2g)、哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.8g)、碳酸钾(3.57g)和二甲基亚砜(20ml)在80℃一起加热15小时。将混合物冷却，用乙酸乙酯(200ml)稀释，用2M盐酸水溶液(200ml)洗涤，然后进行干燥(MgSO4)和浓缩，得到次标题化合物(4.05g)。MS(APCI+ve)321(M)+1H NMR(DMSO-d6)δ8.02-7.98(1H，d)，6.89-6.86(2H，m)，3.45(8H，s)，2.55(3H，s)，1.42(9H，s).
b)4-(4-氨基-3-甲基苯基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯在氮气保护下将4-(3-甲基-4-硝基苯基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2g)、铁粉(1.74g)、氯化铵(1.67g)、乙醇(50ml)和水(50ml)加热至回流温度，保持2小时。将混合物冷却，滤除铁粉。往残留物中加水(200ml)，将产物萃取到乙酸乙酯(3×200ml)中，经干燥(MgSO4)和浓缩后得到次标题化合物(1.20g)。1H NMR(DMSO-d6)δ6.62-6.52(3H，m)，4.38(2H，s)，3.41(4H，br s)，2.83(4H，br s)，2.02(3H，s)，1.41(9H，s).
c)2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(2-甲基-5-哌嗪-1-基-苯基)-乙酰胺，三盐酸盐按照实施例4d)、4e)和4f)的制备程序，无需鉴定中间体，用4-(3-氨基-4-甲基-苯基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(490mg)进行制备，得到标题化合物的三盐酸盐(200mg)。熔点＞230℃MS(APCI+ve)361(M+H)+，游离碱1H NMR(DMSO-d6)δ9.32(1H，s)，9.22(2H，brs)，7.22(1H，d)，7.14(1H，q)，6.85(1H，d)，6.80(1H，dd)，6.62(1H，ddd)，6.41(1H，brd)，6.03(2H，brs)，3.91(2H，brs)，3.35(4H，brs)，3.20(4H，brs)，2.08(3H，s).
实施例11(S)-2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(2-甲基-5-(2-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基甲基)-苯基)-乙酰胺
a)5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基甲基)-2-甲基-苯胺按照实施例3a)的程序，用(3-氨基-4-甲基-苯基)-甲醇(1.61g)进行制备，得到浅棕色油状次标题化合物(2.13g)。1H NMR(DMSO-d6)δ6.85(1H，d)，6.55(1H，s)，6.39(1H，d)，4.77(2H，s)，4.52(2H，s)，2.01(3H，s)，0.89(9H，s)，0.06(6H，s).
b)(3，4-二氟-苯基)-〔(5-羟甲基-2-甲基-苯基氨基甲酰基)-甲基〕-氨基甲酸叔丁酯按照实施例3b)的方法，从5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基甲基)-2-甲基-苯胺(2.0g)和〔叔丁氧羰基-(3，4-二氟苯基)-氨基〕-乙酸(2.30g)制得了白色固体的次标题化合物(1.9g)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.42(1H，s)，7.49-7.32(3H，m)，7.24(1H，m)，7.15(1H，d)，7.03(1H，d)，5.13(1H，t)，4.43(1H，d)，4.38(1H，s)，2.15(3H，s)，1.39(9H，s).
c)(S)-2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(2-甲基-5-(2-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基甲基)-苯基)-乙酰胺往(3，4-二氟-苯基)-〔(5-羟甲基-2-甲基-苯基氨基甲酰基)-甲基〕-氨基甲酸叔丁酯(0.203g)的无水1-甲基-2-吡咯烷酮(2ml)溶液中一次性加入N，N-二异丙基乙胺(0.52ml)，接着加入甲磺酰氯(0.14ml)。3小时后，将反应混合物倒入到乙酸乙酯/水中。分离出有机层，依次用水、KHSO4水溶液和NaHCO3水溶液洗涤。然后将有机层进行干燥(Na2SO4)和浓缩。将所得残留物溶于1-甲基-2-吡咯烷酮(5ml)中，加入N，N-二异丙基乙胺(0.17ml)。取出一等份部分(50ml)，加入到(S)-(+)-1-(2-吡咯烷基甲基)-吡咯烷(125ml在0.4M N，N-二异丙基乙胺的1-甲基-2-吡咯烷酮溶液中的0.2M溶液)中，反应混合物在95℃加热24小时。冷却至室温后，在真空下脱除挥发物。加入甲醇(100ml)，混合物溶解后加入HCl(150ml 4M二噁烷溶液)，再将反应混合物搅拌16小时。脱除挥发物，加入二甲基亚砜(500ml)，得到10mM溶液形式的标题化合物。取一部分溶液(30ml)用二甲基亚砜/水(220ml 1∶1混合物)稀释，然后在20mm×3.9mm Waters Symmetry C8柱上进行HPLC分析，用30％-95％乙腈/乙酸铵洗脱。MS(APCI+ve)443(M+H)+实施例12(S)-2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-〔5-(2-羟甲基-吡咯烷-1-基甲基)-2-甲基-苯基〕-乙酰胺 按照实施例11c)的方法，用(3，4-二氟-苯基)-〔(5-羟甲基-2-甲基-苯基氨基甲酰基)-甲基〕-氨基甲酸叔丁酯和(S)-(+)-2-吡咯烷甲醇制得了标题化合物在二甲基亚砜中的10mM溶液。取一部分溶液(30ml)用二甲基亚砜/水(220ml 1∶1混合物)稀释，然后在20mm×3.9mm Waters Symmetry C8柱上进行HPLC分析，用30％-95％乙腈/乙酸铵洗脱。MS(APCI+ve)390(M+H)+实施例132-(3，4-二氟苯基氨基)-N-〔2-甲基-5-(4-嘧啶-2-基-哌嗪-1-基甲基)-苯基〕-乙酰胺 按照实施例11c)的方法，用(3，4-二氟-苯基)-〔(5-羟甲基-2-甲基-苯基氨基甲酰基)-甲基〕-氨基甲酸叔丁酯和1-(2-嘧啶基)哌嗪二盐酸盐制得了标题化合物在二甲基亚矾中的10mM溶液。取一部分溶液(30ml)用二甲基亚矾/水(220ml 1∶1混合物)稀释，然后在20mm×3.9mm Waters Symmetry C8柱上进行HPLC分析，用30％-95％乙腈/乙酸铵洗脱。MS(APCI+ve)453(M+H)+实施例142-(3，4-二氟苯基氨基)-N-〔2-甲基-3-(哌啶-4-基氧基)苯基〕乙酰胺，三氟乙酸盐 a)3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-2-甲基-苯胺按照实施例8步骤(a)的方法，从3-氨基-邻甲酚(1.83g)制得了该次标题化合物。MS(APCI)238(M+H)1H NMR(CDCl3)δ6.86(1H，t)，6.33(1H，d)，6.28(1H，d)，3.59(2H，brs)，2.04(1H，s)，1.01(9H，s)，0.20(6H，s).
b)N-〔3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-2-甲基-苯基〕-2-氯乙酰胺按照实施例4步骤(d)的方法，从步骤(a)的产物(3.25g)制得了该次标题化合物。产量4.2g。MS(APCI)405(M-H)1H NMR(CDCl3)δ 8.22(1H，brs)，7.49(1H，d)，7.09(1H，t)，6.69(1H，d)，4.23(2H，s)，2.16(3H，s)，1.02(9H，s)，0.22(6H，s).
c)N-〔3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-2-甲基-苯基〕-2-(3，4-二氟苯基氨基)-乙酰胺按照实施例4步骤(e)的方法从步骤(b)的产物(4.2g)制得了该次标题化合物。产量1.71g。MS(APCI)405(M-H)1H NMR(CDCl3)δ8.38(1H，s)，7.55(1H，d)，7.10-6.99(2H，m)，6.63(1H，d)，6.54(1H，m)，6.40(1H，br d)，4.39(1H，br t)，3.91(2H，d)，1.94(3H，s)，0.99(9H，s)，0.19(6H，s).
d)2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(3-羟基-2-甲基苯基)乙酰胺氟化四丁铵的THF溶液(1M，4.6ml)加入到步骤(c)的产物(1.71g)的THF(20ml)溶液中。混合物在室温下搅拌1小时，然后蒸发至干。残留物用闪色谱精制，用含30％乙醇(EtOH)的二氯甲烷(CH2Cl2)洗脱，得到白色固体的产物。产量0.82g。熔点216℃(分解)MS(APCI)291(M-H)1H NMR(DMSO-d6)δ .34(1H，s)，9.27(1H，s)，7.15(1H，q)，6.94(1H，m)，6.87(1H，d)，6.64(1H，d)，6.58(1H，m)，6.39(1H，brd)，6.30(1H，t)，3.85(2H，d)，1.92(1H，s).
e)2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-〔2-甲基-3-(哌啶-4-基氧基)苯基〕乙酰胺，三氟乙酸盐三丁基膦(0.55ml)加入到4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.44g)和得自步骤(d)的产物(0.25g)以及1，1′-(偶氮二羰基)二哌啶(0.55g)在四氢呋喃(10ml)中的混合物中。该混合物在60℃在氮气(N2)中加热2.5小时。再加入0.55ml三丁基膦、0.44g 4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯和0.55g 1，1′-(偶氮二羰基)二哌啶，继续加热3小时。混合物冷却至室温后用乙醚稀释并过滤。滤液在真空下浓缩，残留物用闪色谱法精制，用含1％EtOH的CH2Cl2洗脱。将产物溶于CH2Cl2(10ml)中，用三氟乙酸(10ml)处理。2小时后将反应混合物进行真空浓缩，残留物用乙醚研制，得到产物的三氟乙酸盐白色固体。产量130mg。MS(APCI)376(M+H)1H NMR(DMSO-d6)δ9.40(1H，s)，8.55(1H，br s)，8.44(1H，br s)，7.20-7.09(2H，m)，7.03(1H，d)，6.88(1H，d)，6.63-6.55(1H，m)，6.40(1H，d)，4.63(1H，m)，3.87(2H，s)，3.21(2H，d)，3.11(2H，br s)，2.05(2H，m)，1.98(3H，s)，1.83(2H，m).
实施例153-〔2-(3，4-二氟苯基氨基)乙酰胺基〕-N-(2-二甲氨基乙基)-2-甲基苯甲酰胺 a)3-氨基-2-甲基苯甲酸甲酯三甲基甲硅烷基氯(5ml)加入到3-氨基-2-甲基苯甲酸(3g)的甲醇(100ml)溶液中。将混合物加热回流2小时，经真空浓缩后得到盐酸盐。产量4.0g。1H NMR(DMSO-d6)δ7.60(1H，d)，7.54(1H，d)，7.35(1H，t)，3.84(3H，s)，2.42(2H，s)。
b)3-(2-氯-乙酰氨基)-2-甲基苯甲酸甲酯按照实施例4步骤d)的方法，从步骤(a)的产物(4.0g)制得了次标题化合物。产量4.8g。MS(APCI)240(M-1)1H NMR(CDCl3)δ8.31(1H，br s)，7.99(1H，d)，7.71(1H，d)，7.30(1H，t)，4.26(2H，s)，3.91(3H，s)，2.51(3H，s).
c)3-〔2-(3，4-二氟苯基氨基)-乙酰氨基〕-2-甲基苯甲酸甲酯按照实施例4步骤(e)的方法，从步骤(b)的产物(6.68g)制得了标题化合物(1.42g)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.59(1H，s)，7.56(1H，d)，7.53(1H，d)，7.16(1H，q)，6.60(1H，m)，6.40(1H，br d)，6.32(1H，t)，3.90(2H，d)，3.82(3H，s)，2.26(3H，s).
d)3-〔2-(3，4-二氟苯基氨基)-乙酰氨基〕-2-甲基苯甲酸将步骤(c)的产物(1.33g)和氢氧化锂一水合物(0.84g)在甲醇(120ml)和水(25ml)中的混合物加热回流2小时，冷却后进行真空浓缩。残留的水溶液用冰醋酸酸化，用乙酸乙酯萃取。合并的萃取物用水和食盐水洗涤，经干燥(MgSO4)和蒸发后得到一种乳油状固体。产量1.27g。熔点198℃(分解)。MS(APCI)319(M-H)1H NMR(DMSO-d6)δ12.92(1H，br s)，9.55(1H，s)，7.57(1H，d)，7.49(1H，d)，7.28(1H，m)，7.16(1H，q)，6.60(1H，m)，6.40(1H，br d)，6.32(1H，t)，3.90(2H，d)，2.28(3H，s).
e)3-〔2-(3，4-二氟苯基氨基)乙酰胺基〕-N-(2-二甲氨基乙基)-2-甲基苯甲酰胺3-〔2-(3，4-二氟苯基氨基)-乙酰氨基〕-2-甲基苯甲酸(0.2g)、N，N-二甲基亚乙基二胺(0.08ml)、六氟磷酸溴三吡咯烷基磷鎓(PyBrop)(0.34g)、二甲氨基吡啶(0.07g)和N，N-二异丙基乙胺(0.31ml)在N，N-二甲基甲酰胺(5ml)中的混合物在室温下在N2下搅拌18小时。让反应混合物在乙酸乙酯和水之间进行分配，有机相用水和食盐水洗涤，然后进行干燥(MgSO4)和蒸发。粗产物用乙醚研制。所得固体物用乙酸乙酯研制并过滤。产量70mg。MS(APCI)391(M+H)1H NMR(DMSO-d6)δ9.44(1H，s)，8.15(1H，t)，7.42(1H，d)，7.22-7.07(3H，m)，6.63-6.56(1H，m)，6.40(1H，d)，6.31(1H，t)，3.89(2H，d)，3.28(2H，m)，2.37(2H，t)，2.17(6H，s)，2.10(3H，s).
实施例16N-〔3-(4-乙酰基-哌嗪-1-基甲基)-2-甲基苯基〕-2-(3，4-二氟苯基氨基)乙酰胺 a)3-(叔丁基-二甲基硅烷氧基甲基)-2-甲基苯胺按照实施例8步骤(a)的方法，从3-氨基-2-甲基苄醇(2.0g)制得了该次标题化合物。1H NMR(CDCl3)δ7.01(1H，t)，6.85(1H，d)，6.64(1H，d)，4.69(2H，s)，3.59(2H，brs)，2.08(3H，s)，0.93(9H，s)，0.10(6H，s).
b)N-〔3-(叔丁基-二甲基硅烷氧基甲基)-2-甲基苯基〕-2-氯乙酰胺按照实施例4步骤d)的方法，从步骤(a)的产物制得了该次标题化合物。产量1.3g。MS(APCI)292(M-Cl)1H NMR(CDCl3)δ8.22(1H，brs)，7.66(1H，d)，7.32-7.21(2H，m)，4.71(2H，s)，2.20(3H，s)，0.94(9H，s)，0.01(6H，s).
c)N-〔3-(叔丁基-二甲基硅烷氧基甲基)-2-甲基苯基〕-2-(3，4-二氟苯基氨基)乙酰胺按照实施例4步骤(e)的方法，从步骤(b)的产物制得了该次标题化合物。产量1.03g。MS(APCI)419(M-H)1H NMR(CDCl3)δ 8.37(1H，s)，7.71(1H，d)，7.26-7.19(2H，m)，7.01(1H，q)，6.56-6.51(1H，m)，6.40(1H，m)，4.66(2H，s)，3.92(2H，d)，1.99(3H，s)，0.91(9H，s)，0.07(6H，s).
d)2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(3-羟甲基-2-甲基苯基)乙酰胺按照实施例14步骤(d)的方法，从步骤(c)的产物制得了该次标题化合物。熔点155℃(分解)MS(APCI)307(M+H)1H NMR(DMSO-d6)δ9.40(1H，s)，7.24-7.12(4H，m)，6.63-6.56(1H，m)，6.42-6.39(1H，m)，6.31(1H，t)，5.08(1H，t)，4.48(2H，d)，3.87(2H，d)，2.02(3H，s).
e)N-〔3-(4-乙酰基-哌嗪-1-基甲基)-2-甲基苯基〕-2-(3，4-二氟苯基氨基)乙酰胺甲磺酰氯(0.06ml)加入到步骤(d)的产物(0.12g)和N，N-二异丙基乙胺(0.28ml)的四氢呋喃(3ml)溶液中。反应混合物在室温搅拌1.5小时。加入1-乙酰基哌嗪(0.15g)的四氢呋喃(1ml)溶液，将该混合物加热回流2小时。让反应混合物在乙酸乙酯和水之间进行分配，有机相用水和食盐水洗涤，然后进行干燥(MgSO4)和蒸发。粗产物用乙酸乙酯/异己烷研制，得到一种浅黄色固体产物。产量0.1g。MS(APCI)417(M+H)1H NMR(DMSO-d6)δ9.39(1H，s)，7.28(1H，d)，7.20-7.06(3H，m)，6.60(1H，m)，6.40(1H，br d)，6.32(1H，t)，3.88(2H，d)，3.43(2H，s)，3.37(4H，m)，2.34(2H，m)，2.29(2H，m)，2.12(3H，s)，1.97(3H，s).
实施例172-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(3-咪唑-1-基甲基-2-甲基苯基)乙酰胺 按照实施例16的方法，从咪唑制得了标题化合物。熔点160℃(分解)MS(APCI)357(M+H)1H NMR(DMSO-d6)δ9.47(1H，s)，7.66(1H，s)，7.30(1H，d)，7.19-7.12(2H，m)，7.07(1H，s)，6.91(1H，s)，6.78(1H，d)，6.62-6.56(1H，m)，6.35(1H，d)，6.29(1H，t)，5.23(2H，s)，3.87(2H，d)，2.05(3H，s).
实施例182-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(3-二甲氨基甲基-2-甲基苯基)乙酰胺 按照实施例16的方法，用二甲胺的四氢呋喃溶液(2M)制得了标题化合物。熔点144℃(分解)MS(APCI)334(M+H)1H NMR(DMSO-d6)δ10.07(1H，br s)，9.60(1H，s)，7.45(1H，d)，7.39(1H，d)，7.27(1H，m)，7.16(1H，q)，6.64-6.59(1H，m)6.42(1H，d)，4.33(2H，d)，3.91(2H，s)，2,73(3H，s)，2.72(3H，s)，2.18(3H，s).
药理学分析已知某些化合物如苯甲酰基苯甲酰基腺苷三磷酸盐(bbATP)是P2X7受体的激动剂，会引起血清膜中孔的形成(Drug DevelopmentResearch(1996)，37(3)，p.126)。因此，当这种受体在溴化3，8-二氨基-5-乙基-6-苯基菲啶鎓(一种荧光DNA探测剂)的存在下用bbATP活化时观察到细胞内DNA结合的溴化3，8-二氨基-5-乙基-6-苯基菲啶鎓中荧光的增加。这种荧光的增加可用作P2X7受体活化的一种度量，因此可用来定量测定某一化合物对P2X7受体的影响。
用这种方法测试了实施例1～18中各个标题化合物对P2X7受体的拮抗活性。为此，在96孔平底微量滴定板中进行了试验，各个孔中填充了250μl试验溶液，其中包含200μl含有10-4M的溴化3，8-二氨基-5-乙基-6-苯基菲啶鎓的THP-1细胞的悬浮液(2.5×106个细胞/ml)、25μl含有10-5M bbATP的高钾缓冲溶液和25μl含有3×10-5M试验化合物的高钾缓冲溶液。该试验板用塑料片覆盖，然后在37℃培育1小时。然后将该试验板置于Perkin-Elmer荧光板读数器中进行读数，读数器的激发光波长为520nm，发射光波长为595nm，缝宽Ex(激发)15nm，Em(发射)20nm。为对比起见，试验中分别用bbATP(P2X7受体激动剂)和吡哆醛5-磷酸盐(P2X7受体拮抗剂)作为对照样。从所得到的读数可计算出各试验化合物的pIC50指数，该指数是为使bbATP激动剂活性减少50％所需的试验化合物浓度的负对数。实施例1～18中各化合物表明拮抗活性pIC50指数＞4.50。
权利要求
1.一种通式(I)的化合物或其药物上可接受的盐或溶剂合物 其中各个R1独立地代表氢或卤素原子，或者三氟甲基、氰基、硝基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基；T代表氧原子，或基团NH；U代表氧原子或硫原子或基团NH；Ar代表基团 X代表1个键、氧原子或基团CO、CH2、CH2O、O(CH2)m、CH2OCH2、NR5、CH2NR5、NR5CH2、CH2NR5CH2、CONR5、S(O)n或SO2NR5；m是1、2或3；n是0、1或2；R2和R3中之一代表卤素、氰基、硝基、氨基、羟基，或1个选自下列的基团任选地被至少1个C3-C6环烷基取代的C1-C6烷基、C3-C8环烷基、任选地被至少1个C3-C6环烷基取代的C1-C6烷氧基、C3-C8环烷氧基、S(O)pC1-C6烷基或S(O)qC3-C8环烷基，这些基团中每个都可任选地被1个或多个氟原子取代，而R2和R3中的另一个则代表氢原子或卤原子或甲基；p是0、1或2；q是0、1或2；R4代表二(C1-2烷基)N(CH2)t，其中t是0、1或2，或咪唑基，或者R4代表1个含1个或2个氮原子的3～9元的饱和杂环体系，该杂环体系可任选地被1个或多个独立地选自下列基团的取代基所取代氟原子、羟基、C1-C6烷基、乙酰基、羟基C1-C6烷基、-NR6R7、-(CH2)rNR6R7、-CONR6R7和嘧啶基，或者R4代表1个3～8元的饱和碳环体系，该环系被1个或多个独立地选自-NR6R7、-(CH2)rNR6R7和-CONR6R7的取代基取代，该环系还可任选地进一步被1个或多个独立地选自氟原子、羟基和C1-C6烷基的取代基所取代；r是1、2、3、4、5或6；R5代表氢原子或C1-C6烷基或C3-C8环烷基；以及R6和R7各自独立地代表氢原子或C1-C6烷基或C3-C8环烷基，或者R6和R7与它们所连接的氮原子一起形成1个3～8元的饱和杂环，其条件是当R3代表氰基时X不是1个键。
2.按照权利要求1的化合物，其中T代表基团NH。
3.按照权利要求1或2的化合物，其中U代表氧原子。
4.按照权利要求1～3中任何一项的化合物，其中各个R1独立地代表氢或卤原子。
5.按照前述权利要求中任何一项的化合物其中Ar代表下式所示的基团
6.按照前述权利要求中任何一项的化合物，其中R2和R3中之一代表卤素、氰基、硝基、氨基、羟基，或1个选自下列的基团任选地被至少1个C5-C6环烷基取代的C1-C4烷基、C5-C6环烷基、任选地被至少1个C5-C6环烷基取代的C1-C4烷氧基、C5-C6环烷氧基、S(O)pC1-C4烷基或S(O)qC5-C6环烷基，这些基团中每个都可任选地被1至4个氟原子取代，而R2和R3中的另一个则代表氢原子或卤原子。
7.按照前述权利要求中任何一项的化合物，其中R4代表1个含1个或2个氮原子的3～9元的饱和杂环体系，该杂环体系可任选地被1至4个独立地选自下列基团的取代基所取代氟原子、羟基、C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、-NR6R7、-(CH2)rNR6R7、-CONR6R7和嘧啶基。
8.按照权利要求1的式(I)化合物、或其药物上可接受的盐或溶剂合物，它们是2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(2-甲基-5-哌嗪-1-基甲基-苯基)-乙酰胺，三盐酸盐，2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(2-甲基-5-哌嗪-1-基甲基-苯基)-硫代乙酰胺，2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(2-甲基-4-哌嗪-1-基甲基-苯基)-乙酰胺，三盐酸盐，N-(2-氯-5-哌嗪-1-基苯基)-2-(3，4-二氟苯基氨基)-乙酰胺，三盐酸盐，(S)-2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-〔2-甲基-4-(2-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基甲基)-苯基〕-乙酰胺，三盐酸盐，2-(3-氯-4-氟苯基氨基)-N-{2-甲基-5-〔3-(4-甲基哌嗪-1-基)-丙氧基〕苯基}乙酰胺，(+/-)2-(3-氯-4-氟苯基氨基)-N-〔2-甲基-5-(哌啶-4-基氧基)-苯基〕乙酰胺，二盐酸盐，2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-〔2-甲基-4-(哌啶-4-基氧基)-苯基〕乙酰胺，二盐酸盐，(±)N-〔5-(3-氨基-吡咯烷-1-基)-2-甲基-苯基〕-2-(3，4-二氟苯基氨基)-乙酰胺，三盐酸盐，2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(2-甲基-5-哌嗪-1-基-苯基)-乙酰胺，三盐酸盐，(S)-2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(2-甲基-5-(2-吡咯烷-1-基甲基-吡咯烷-1-基甲基)-苯基)-乙酰胺，(S)-2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-〔5-(2-羟甲基-吡咯烷-1-基甲基)-2-甲基-苯基〕-乙酰胺，2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-〔2-甲基-5-(4-嘧啶-2-基-哌嗪-1-基甲基)-苯基〕-乙酰胺，2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-〔2-甲基-3-(哌啶-4-基氧基)苯基〕乙酰胺，三氟乙酸盐，3-〔2-(3，4-二氟苯基氨基)乙酰胺基〕-N-(2-二甲氨基乙基)-2-甲基苯甲酰胺，N-〔3-(4-乙酰基-哌嗪-1-基甲基)-2-甲基苯基〕-2-(3，4-二氟苯基氨基)乙酰胺，2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(3-咪唑-1-基甲基-2-甲基苯基)乙酰胺，或2-(3，4-二氟苯基氨基)-N-(3-二甲氨基甲基-2-甲基苯基)乙酰胺。
9.如权利要求1定义的式(I)化合物的制备方法，该方法包括(i)当U代表氧原子，X代表CH2基团，以及R4代表1个含1个或2个氮原子的3～8元的饱和杂环体系，该杂环体系可任选地被1个或多个独立地选自下列基团的取代基所取代氟原子、羟基、C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、-NR6R7、-(CH2)rNR6R7、-CONR6R7和嘧啶基时，使通式(II)的化合物 其中R10和R11中之一代表氢原子，而R10和R11中的另一个则代表基团-CH2L1，其中L1代表离去基团，T、R1、R2和R3如式(I)中所定义，与通式(III)的化合物在碱的存在下进行反应R4′-H(III)其中R4′代表1个含1个或2个氮原子的3～8元的饱和杂环体系，该杂环体系可任选地被1个或多个独立地选自下列基团的取代基所取代氟原子、羟基、C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、-NR6R7、-(CH2)rNR6R7、-CONR6R7和嘧啶基，且其中R6和R7如式(I)中所定义；或(ii)当U代表氧原子，X代表氧原子或基团O(CH2)m时，使通式(IV)的化合物 其中R12和R13中之一代表氢原子，而R12和R13中的另一个则代表羟基，T、R1、R2和R3如式(I)中所定义，与通式(V)的化合物在1，1-(偶氮二羰基)二哌啶和三丁基膦的存在下进行反应R4-Y-OH(V)其中Y代表1个键或基团(CH2)m，m和R4如式(I)中所定义；或(iii)当U代表氧原子，X代表1个键、氧原子或基团O(CH2)m、NR5、NR5CH2、CO、CONR5、SO2或SO2NR5时，使通式(VI)的化合物 其中R14和R15中之一代表基团-X′-R4，而R14和R15中的另一个则代表氢原子，X′代表1个键、氧原子或基团O(CH2)m、NR5、NR5CH2、CO、CONR5、SO2或SO2NR5，m、R2、R3、R4和R5如式(I)中所定义，与通式(VII)的化合物在偶合剂和碱的存在下进行反应 其中T和R1如式(I)中所定义；或(iv)当U代表氧原子，X代表1个键或基团NR5或NR5CH2时，使通式(VIII)的化合物 其中R16和R17中之一代表离去基团L2，而R16和R17中的另一个则代表氢原子，T、R1、R2和R3如式(I)中所定义，与通式(IX)的化合物任选地在钯催化剂、膦配体和碱的存在下进行反应R4-Z(IX)其中Z代表氢原子或基团NHR5或CH2NHR5，R4和R5如式(I)中所定义；或(v)当U代表氧原子，X代表基团CH2O时，使上面(i)中定义的式(II)化合物与上面(ii)中定义的其中Y代表1个键的式(V)化合物在碱的存在下或在金属盐的存在下进行反应；或(vi)当U代表氧原子，X代表基团CH2NR5时，使上面(i)中定义的式(II)化合物与上面(iv)中定义的其中Z代表基团NHR5的式(IX)化合物进行反应；或(vii)当U代表氧原子，X代表基团CH2OCH2时，使上面(i)中定义的式(II)化合物与上面(ii)中定义的其中Y代表基团CH2的式(V)化合物在碱的存在下或在金属盐的存在下进行反应；或(viii)当U代表氧原子，X代表基团CH2NR5CH2时，使上面(i)中定义的式(II)化合物与上面(iv)中定义的其中Z代表基团CH2NHR5的式(IX)化合物进行反应；或(ix)当U代表氧原子，X代表基团CH2，R4代表含有1个氮原子的无取代的4～6元饱和杂环体系时，使上面(i)中定义的式(II)化合物与通式(X)的化合物进行反应 其中s和t独立地代表1或2；或(x)当U代表氧原子，X代表硫原子时，使上面(iv)中定义的式(VIII)化合物与正丁基锂反应，然后再与通式(XI)的化合物进行反应R4-S-S-R4(XI)其中R4如式(I)中所定义，或(xi)当U代表氧原子，X代表CH2基团时，使上面(iv)中定义的式(VIII)化合物与正丁基锂反应，然后再与通式(XII)的化合物进行反应R4-CHO(XII)其中R4如式(I)中所定义，接着进行还原反应；或(xii)当U代表氧原子，X代表1个键时，使上面(iv)中定义的式(VIII)化合物与正丁基锂反应，然后再与通式(XIII)的化合物进行反应R4＝O(XIII)其中R4如式(I)中所定义，然后进行还原反应；或(xiii)当U代表硫原子时，使其中U代表氧原子的相应的式(I)化合物与硫代剂进行反应；或(xiv)当U代表基团NH时，使其中U代表硫原子的相应的式(I)化合物与适当的烷基化剂进行反应，接着再与氯化铵或氨反应；或(xv)当U代表氧原子，X代表CONR5时，使通式(XIIIA)的化合物 其中R′和R″中之一代表氢原子，而R′和R″中的另一个则代表羰基，T、R1、R2和R3如式(I)中所定义，与通式(XIIIB)，即R4-NHR5的化合物进行反应，其中R4和R5如式(I)中所定义；或(xvi)当U代表氧原子，X代表CH2，R4通过氮原子键合到X上时，使通式(XIIIC)的化合物 其中T、R1、R2和R3如式(I)所定义，与甲磺酰氯反应，接着再与通式(XIIID)，即R4″-H的化合物反应，其中R4″如式(I)中对R4给出的定义，但下列情况除外·二(C1-2烷基)N(CH2)t，其中t是1或2，和·3～8元的饱和碳环体系，该体系被1个或多个独立地选自-NR6R7、-(CH2)rNR6R7和-CONR6R7的取代基取代，该体系还可任选地进一步被1个或多个独立地选自氟原子、羟基和C1-C6烷基的取代基所取代；并任选地在(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)、(vii)、(viii)、(ix)、(x)、(xi)、(xii)、(xiii)、(xiv)、(xv)或(xvi)之后，将式(I)化合物转化为式(I)的另一种化合物和/或形成式(I)化合物的药物上可接受的盐或溶剂合物。
10.一种药物组合物，其中包含如权利要求1～8中任何一项所要求的式(I)化合物、或其药物上可接受的盐或溶剂合物并结合一种药物上可接受的佐药、稀释剂或载体。
11.一种制备如权利要求10所要求的药物组合物的方法，该方法包括将如权利要求1～8中任何一项所定义的式(I)化合物、或其药物上可接受的盐或溶剂合物与一种药物上可接受的佐药、稀释剂或载体混合。
12.用于治疗的如权利要求1～8中任何一项所要求的式(I)化合物、或其药物上可接受的盐或溶剂合物。
13.用于治疗类风湿性关节炎的如权利要求1～8中任何一项所要求的式(I)化合物、或其药物上可接受的盐或溶剂合物。
14.用于治疗慢性梗阻性肺病的如权利要求1～8中任何一项所要求的式(I)化合物、或其药物上可接受的盐或溶剂合物。
15.如权利要求1～8中任何一项所要求的式(I)化合物、或其药物上可接受的盐或溶剂合物在制造用于治疗的药物中的用途。
16.如权利要求1～8中任何一项所要求的式(I)化合物、或其药物上可接受的盐或溶剂合物在制造用于治疗类风湿性关节炎的药物中的用途。
17.如权利要求1～8中任何一项所要求的式(I)化合物、或其药物上可接受的盐或溶剂合物在制造用于治疗梗阻性导气管疾病的药物中的用途。
18.按照权利要求17的用途，其中所述梗阻性疾病是气喘或慢性梗阻性肺病。
19.一种实现免疫抑制的方法，该方法包括对患者给药治疗有效量的如权利要求1～8中任何一项所要求的式(I)化合物、或其药物上可接受的盐或溶剂合物。
20.一种在患有梗阻性导气管疾病或处于这种疾病的危险中的患者中治疗所述疾病或减少所述疾病的危险的方法，该方法包括对患者给药治疗有效量的如权利要求1～8中任何一项所要求的式(I)化合物、或其药物上可接受的盐或溶剂合物。
全文摘要
本发明提供通式(I)的取代的苯基化合物,其中R
文档编号C07D239/42GK1351598SQ0080803
公开日2002年5月29日 申请日期2000年5月22日 优先权日1999年5月25日
发明者M·福伯, T·J·卢凯尔, M·P·莫蒂默雷, P·托尔尼, P·梅哈尼 申请人:阿斯特拉曾尼卡有限公司