一种抗F2卵黄抗体的制备方法与流程

文档序号:11124328阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种抗F2卵黄抗体的制备方法,其特征在于包括:

将含有F2毒素和甲醛的溶液加入到含有牛血清白蛋白BSA、pH为7.5~8.0的溶液中,在室温反应,使F2与BSA偶联,制备免疫抗原F2-BSA;

将制备的F2-BSA对蛋鸡免疫接种,然后收集鸡蛋;

从鸡蛋中提取纯化抗F2卵黄抗体。

2.根据权利要求1所述的抗F2卵黄抗体的制备方法,其特征在于将含有F2毒素和甲醛的甲醇溶液滴加到含有BSA的醋酸钾溶液中,室温反应。

3.根据权利要求2所述的抗F2卵黄抗体的制备方法,其特征在于含有F2毒素和甲醛的甲醇溶液采用F2、甲醇和甲醛水溶液配成,甲醇与甲醛水溶液体积比0.8~1.2:1,配成后F2浓度为0.4~0.6mg/mL;醋酸钾溶液浓度0.8~1.2mol/L,BSA浓度为2~3mg/mL。

4.根据权利要求1~3之一所述的抗F2卵黄抗体的制备方法,其特征在于所述室温反应是15~35℃反应20~30h。

5.根据权利要求1~3之一所述的抗F2卵黄抗体的制备方法,其特征在于偶联产物用PBS进行透析。

6.根据权利要求1~3之一所述的抗F2卵黄抗体的制备方法,其特征在于将F2-BSA与佐剂乳化,制备成油乳剂疫苗,用于免疫接种。

7.根据权利要求1~3之一所述的抗F2卵黄抗体的制备方法,其特征在于将F2-BSA免疫接种蛋鸡三次,收集第三次免疫一周后所产的鸡蛋。

8.根据权利要求1~3之一所述的抗F2卵黄抗体的制备方法,其特征在于采用浓盐水法提纯卵黄抗体。

9.根据权利要求8所述的抗F2卵黄抗体的制备方法,其特征在于所述浓盐水法是蛋黄与水搅拌均匀后,调整pH至5.0~5.5,-15℃以下预冻,融化后抽滤,在抽滤液体中加入1.2~1.8mol/L氯化钠,使之终浓度为8.5~9.0%,调整pH至4.0~4.5,室温沉淀,离心弃上清,PBS悬浮沉淀。

10.根据权利要求1~3之一所述的抗F2卵黄抗体的制备方法,其特征在于采用与制备F2-BSA同样的方法将F2毒素与卵清白蛋白OVA进行偶联,制备检测抗原F2-OVA,用于后续抗体滴度检测。

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