本发明属于医药技术领域，具体地说，涉及一种新的炎琥宁化合物及其药物组合物。
背景技术：
炎琉宁，化学名称为:14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯-3，19-二琥珀酸半酯钾钠盐-水合物，分子式为：C28H34KNaO10·H2O。炎琥宁是从中药穿心莲中提取的二萜化合物穿心莲内酯经酯化、脱水、成盐而制成的脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯钾钠盐，具有抗菌消炎、清热解毒、促进肾上腺皮质功能及镇静作用，是目前中医急症中常用药物之一。
炎琥宁能够抑制早期毛细血管透性增高与炎性渗出水肿，能特异性地兴奋垂体-肾上腺皮质功能，促进ACTH释放，增加垂体前叶中ACTH的生物合成；体外具有灭活腺病毒、流感病毒、呼吸道病毒等多种病毒的作用。实践中，炎琥宁不仅对某些病毒和细菌有直接的杀灭作用，而且能够提高人体对疾病的防御和抵抗能力，全面治疗各种细菌和病毒对人体造成的损伤。
由于炎琥宁分子结构中存在桥形共轭结构，以及α、β不饱和内酯键，因此，其稳定性较差。在将其制备成药物制剂时，在制备、储存和使用各个阶段中，炎琥宁易氧化，从而导致药品变质，进而影响药物疗效，而且还会在临床使用过程中导致一些不良反应的发生，从而严重影响了用药的安全性。
现有技术方案多通过向制剂中加入辅料来提高制剂稳定性，如加入赋形剂、稳定剂等。但实际应用过程中发现，虽然所得冻干制剂的稳定性在一定程度上得到了改善，但由于其处方中辅料的用量过大，导致粉针剂的药用效果一般，且保存时间长后稳定性依然会显著下降。此外辅料的加入增大了不良反应出现的几率，辅料的种类及用量同样也会影响制剂的质量，从而限制了其应用。
有鉴于此，特提出本发明。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种新的炎琥宁化合物。
为实现上述目的，本发明包括如下步骤：
一种如式(Ⅰ)所示的新的炎琥宁化合物
所述炎琥宁化合物为晶体，使用Cu-Kα射线测量得到的X-射线粉末衍射图中特征峰在2θ为7.3°、9.6°、12.0°、13.4°、15.9°、17.5°、18.0°、19.8°、23.4°、23.8°、24.6°、27.1°显示。
本发明所得的炎琥宁化合物的生物利用度高，以本发明所得的炎琥宁化合物为主药制得的药物组合物药效更优越。
所述炎琥宁化合物的熔点为200～205℃。
所述炎琥宁化合物的制备方法包括如下步骤：
(1)将穿琥宁溶于体积比为7:1的水和无水乙醇的混合溶液中，穿琥宁与水和无水乙醇的混合溶液的用量比为1g:4ml，得溶液1；
(2)20℃下向溶液1中以20～30mL/min的速度搅拌加入0.5mol/L的碳酸氢纳水溶液，调节pH至6.5～7.0，然后以0.2～0.3℃/min的速度升温到25～30℃后加入活性炭，继续搅拌反应1～2小时，抽滤，收集滤液，得溶液2；
(3)以0.2～0.3℃/min的速度将溶液2的温度下降至3～5℃，停止搅拌，静置养晶5～6小时，抽滤，滤饼用无水乙醇洗涤，在70～80℃下干燥4小时，得炎琥宁化合物。
本发明的另一目的在于提供一种包括上述炎琥宁化合物的炎琥宁药物组合物，所述炎琥宁药物组合物的剂型为炎琥宁冻干粉针剂，包括：
谷氨酰胺具有提高免疫力的效用，有助于患者的恢复，同时，谷氨酰胺转化成的谷胱甘肽具有抗氧化的作用，其通过消灭自由基达到消炎的效果，从而使药物组合物的药效更为优越。
山梨酸钾具有抗氧化的作用，有利于提高药物的稳定性，控制有效成分含量的下降及其他杂质物质含量的增加，从而提高有效成分的利用率，进而增强药物组合物的药效。
本发明人经试验发现，谷氨酰胺和山梨酸钾的协同作用极大地提高了药物组合物的稳定性和药效。
本发明还提供了上述炎琥宁药物组合物的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：
(1)对注射剂瓶和胶塞分别进行清洗、灭菌；
(2)向配料罐中加入处方量的炎琥宁化合物、山梨酸钾以及处方量60％的注射用水，将pH调节至6.5～7.0；
(3)加入处方量的谷氨酰胺，搅拌溶解后，加入的注射用水至处方量全量，将pH调节至6.5～7.5；
(4)加入针用活性炭，吸附后过滤脱碳，中间体检查合格后，用微孔滤膜过滤除菌；
(5)灌装于注射剂瓶中并压好胶塞，冷冻干燥后即得炎琥宁药物组合物。
在加入谷氨酰胺前，本发明先对混合溶液进行了pH调节，以使混合溶液的pH在加入谷氨酰胺后仍处于较佳范围，最终得到质量佳的炎琥宁药物组合物。
所用pH调节剂为碳酸氢纳。
所述中间体检合格标准为pH＝7.0～7.5。
所述的冷冻干燥具体包括如下步骤：
(1)将装有药液的注射剂瓶的温度降至-40℃并保持2～3h；
(2)进行抽真空操作，将温度以小于19℃/小时的速度升温至-10℃，然后以1～27℃/小时的速度升温至40℃，保持2～11小时后停止抽真空操作。
优选的，所述的冷冻干燥具体包括如下步骤：
(1)将装有药液的注射剂瓶的温度降至-40℃并保持3h；
(2)进行抽真空操作，将温度以10～19℃/小时的速度升温至-10℃，然后以18～27℃/小时的速度升温至40℃，保持5～10小时后停止抽真空操作。
更优选的，所述的冷冻干燥具体包括如下步骤：
(1)将装有药液的注射剂瓶的温度降至-40℃并保持3h；
(2)进行抽真空操作，将温度以15℃/小时的速度升温至-10℃，然后以22℃/小时的速度升温至40℃，保持8小时后停止抽真空操作。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
1、本发明采用所得的炎琥宁化合物作为原料药，并通过谷氨酰胺和山梨酸钾的协同作用，使最终制得的炎琥宁冻干粉针剂具有更好的稳定性和更优越的药效。
2、采用本发明所述的工艺方法制得的炎琥宁冻干粉针剂具有理想的稳定性，从而切实确保了患者的用药安全，同时还具有更加优越的药效。
附图说明
图1为本发明的炎琥宁化合物的X射线粉末衍射图谱。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面对实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1新的炎琥宁化合物的制备
(1)将5g穿琥宁溶于17.5ml水和2.5ml无水乙醇的混合溶液中，得溶液1；
(2)20℃下向溶液1中以20mL/min的速度搅拌加入0.5mol/L的碳酸氢纳水溶液，调节pH至6.5，然后以0.2℃/min的速度升温到25℃后加入活性炭，继续搅拌反应1小时，抽滤，收集滤液，得溶液2；
(3)以0.2℃/min的速度将溶液2的温度下降至3℃，停止搅拌，静置养晶5小时，抽滤，滤饼用无水乙醇洗涤，在70℃下干燥4小时，得炎琥宁化合物。
所述炎琥宁化合物使用Cu-Kα射线测量得到的X-射线粉末衍射图中特征峰在2θ为7.3°、9.6°、12.0°、13.4°、15.9°、17.5°、18.0°、19.8°、23.4°、23.8°、24.6°、27.1°显示，熔点为200℃。
实施例2新的炎琥宁化合物的制备
(1)将5g穿琥宁溶于17.5ml水和2.5ml无水乙醇的混合溶液中，得溶液1；
(2)20℃下向溶液1中以30mL/min的速度搅拌加入0.5mol/L的碳酸氢纳水溶液，调节pH至7.0，然后以0.3℃/min的速度升温到30℃后加入活性炭，继续搅拌反应2小时，抽滤，收集滤液，得溶液2；
(3)以0.3℃/min的速度将溶液2的温度下降至5℃，停止搅拌，静置养晶6小时，抽滤，滤饼用无水乙醇洗涤，在80℃下干燥4小时，得炎琥宁化合物。
所述炎琥宁化合物使用Cu-Kα射线测量得到的X-射线粉末衍射图与实施例1一致，熔点为202℃。
实施例3新的炎琥宁化合物的制备
(1)将5g穿琥宁溶于17.5ml水和2.5ml无水乙醇的混合溶液中，得溶液1；
(2)20℃下向溶液1中以20mL/min的速度搅拌加入0.5mol/L的碳酸氢纳水溶液，调节pH至7.0，然后以0.3℃/min的速度升温到25℃后加入活性炭，继续搅拌反应2小时，抽滤，收集滤液，得溶液2；
(3)以0.2℃/min的速度将溶液2的温度下降至5℃，停止搅拌，静置养晶5小时，抽滤，滤饼用无水乙醇洗涤，在80℃下干燥4小时，得炎琥宁化合物。
所述炎琥宁化合物使用Cu-Kα射线测量得到的X-射线粉末衍射图与实施例1一致，熔点为202℃。
制剂实施例1炎琥宁冻干粉针剂的制备
处方：规格：40mg
制备方法：
(1)对注射剂瓶和胶塞分别进行清洗、灭菌；
(2)向配料罐中加入处方量的炎琥宁化合物、山梨酸钾以及处方量60％的注射用水，用碳酸氢钠将pH调节至7.0；
(3)加入处方量的谷氨酰胺，搅拌溶解后，加入的注射用水至处方量全量，用碳酸氢钠将pH调节至6.8；
(4)加入针用活性炭，吸附后过滤脱碳，中间体检查合格的pH＝7.0，用微孔滤膜过滤除菌；
(5)灌装于注射剂瓶中并压好胶塞，将装有药液的注射剂瓶的温度降至-40℃并保持3h；
(6)进行抽真空操作，将温度以15℃/小时的速度升温至-10℃，然后以22℃/小时的速度升温至40℃，保持8小时后停止抽真空操作，即得炎琥宁药物组合物。
制剂实施例2炎琥宁冻干粉针剂的制备
处方：规格：80mg
制备方法：
(1)对注射剂瓶和胶塞分别进行清洗、灭菌；
(2)向配料罐中加入处方量的炎琥宁化合物、山梨酸钾以及处方量60％的注射用水，用碳酸氢钠将pH调节至6.5；
(3)加入处方量的谷氨酰胺，搅拌溶解后，加入的注射用水至处方量全量，用碳酸氢钠将pH调节至7.0；
(4)加入针用活性炭，吸附后过滤脱碳，中间体检查合格的pH＝7.2，用微孔滤膜过滤除菌；
(5)灌装于注射剂瓶中并压好胶塞，将装有药液的注射剂瓶的温度降至-40℃并保持2h；
(6)进行抽真空操作，将温度以19℃/小时的速度升温至-10℃，然后以27℃/小时的速度升温至40℃，保持10小时后停止抽真空操作，即得炎琥宁药物组合物。
制剂实施例3炎琥宁冻干粉针剂的制备
处方：规格：0.2g
制备方法：
(1)对注射剂瓶和胶塞分别进行清洗、灭菌；
(2)向配料罐中加入处方量的炎琥宁化合物、山梨酸钾以及处方量60％的注射用水，用碳酸氢钠将pH调节至6.5；
(3)加入处方量的谷氨酰胺，搅拌溶解后，加入的注射用水至处方量全量，用碳酸氢钠将pH调节至6.5；
(4)加入针用活性炭，吸附后过滤脱碳，中间体检查合格的pH＝7.0，用微孔滤膜过滤除菌；
(5)灌装于注射剂瓶中并压好胶塞，将装有药液的注射剂瓶的温度降至-40℃并保持3h；
(6)进行抽真空操作，将温度以10℃/小时的速度升温至-10℃，然后以18℃/小时的速度升温至40℃，保持5小时后停止抽真空操作，即得炎琥宁药物组合物。
对比例1
其他条件与制剂实施例1相同，区别仅在于炎琥宁化合物换成市售炎琥宁原料药。
对比例2
其他条件与制剂实施例1相同，区别仅在于步骤(2)中不加入山梨酸钾。
对比例3
其他条件与制剂实施例1相同，区别仅在于步骤(3)中不加入谷氨酰胺。
对比例4
根据专利申请号为201110264481.3的中国专利中实施例1所提供的工艺方法制备炎琥宁化合物和炎琥宁药物组合物。
对比例5
根据专利申请号为201410057789.4的中国专利中实施例1所提供的工艺方法制备炎琥宁化合物和炎琥宁药物组合物。
试验例1稳定性试验
1、化合物稳定性试验
本试验例考察了实施例1、2、3、市售炎琥宁原料药和对比例4、5所得的炎琥
宁化合物的稳定性，结果见表1。
表1
由表1可知，与市售炎琥宁原料药和对比例4、5制得的化合物相比，本发明所得的炎琥宁化合物的稳定性更好。
2、药物组合物稳定性试验
本试验例考察了制剂实施例1、2、3和对比例1、2、3、4、5所得的炎琥宁药物组合物的稳定性，结果见表2。
表2
由表2可知，本发明所得的炎琥宁合物的稳定性优于对比例1制得的药物组合物，可知，本发明所得的炎琥宁化合物在药物组合物的稳定性方面发挥重要作用；本发明所得的炎琥宁合物的稳定性优于对比例2、3制得的药物组合物，可知，谷氨酰胺和山梨酸钾在药物组合物的稳定性方面发挥重要作用；同时，本发明所得的炎琥宁药物组合物的稳定性优于对比例4、5制得的药物组合物。
试验例2动物试验
1、实验材料
家兔，体质量2.5～3.5kg，在温度(22±2)℃、相对湿度50％～75％实验环境中喂养。对家兔施行适应性测温操作，1次/d。实验前10h禁食不禁水。测温仪探头上涂凡士林，插入家兔直肠6cm(可在6cm用胶布固定，确保每次插入深度一致)，稳定1h以后记录体温值。
2、实验步骤
2.1对脂多糖发热模型家兔体温的影响
实验当日9:00，在造模给药前每次间隔30min测家兔体温3次，取其平均值作为基础体温，其中若有体温超出38.0℃或相邻两次体温差值大于0.4℃的动物淘汰。筛选出合格家兔48只，随机分为8组，每组6只，分别为：
对照组(0.9％氯化钠注射液10mL/kg)；
模型组(脂多糖10EU/kg)；
试验Ⅰ组(脂多糖10EU/kg+本发明制剂实施例1制得的炎琥宁冻干粉针剂80mg/kg)；
试验Ⅱ组(脂多糖10EU/kg+本发明对比例1制得的炎琥宁冻干粉针剂80mg/kg)；
试验Ⅲ组(脂多糖10EU/kg+本发明对比例2制得的炎琥宁冻干粉针剂80mg/kg)；
试验Ⅳ组(脂多糖10EU/kg+本发明对比例3制得的炎琥宁冻干粉针剂80mg/kg)；
试验Ⅴ组(脂多糖10EU/kg+本发明对比例4制得的炎琥宁冻干粉针剂80mg/kg)；
试验Ⅵ组(脂多糖10EU/kg+本发明对比例5制得的炎琥宁冻干粉针剂80mg/kg)；
于给药后1、2、3、4h监测记录各组家兔体温，计算各组家兔在各监测点的升温值(实测体温－基础体温)，绘制平均升温曲线。
2.2对脂多糖发热家兔血清细胞因子和中枢升温递质的影响
给药4h检测家兔体温后，立即心脏采血，3000r/min离心10min，分离出血清置于-20℃冰箱保存待测。迅速取出全脑，预冷PBS溶液漂洗2～3次洗去血迹，冰浴上操作于视交叉与灰结节之间取下丘脑，下丘脑组织加入生理盐水制备成10％脑匀浆，3000r/min离心10min，取上清置于-20℃冰箱保存待测。按试剂盒说明，测定血清中IL-1β、TNF-α、IL-6、cAMP、PGE2及下丘脑中cAMP、PGE2。
3、统计方法
采用SPSS 17.0软件进行统计，数据以表示，各组间进行单因素方差分析。
4、实验结果
4.1给药后各组家兔体温变化趋势
各组家兔体温变化趋势见表3。
表3
与对照组比较：aP＜0.01；与模型组比较：bP＜0.05，cP＜0.01
模型组家兔体温较对照组显著升高，最高时(3h)升温值达到1.0℃，提示模型成功。各给药组在给药后1h即有降温作用。与模型组比较，试验Ⅰ～Ⅵ组在给药2～4h能显著抑制脂多糖发热模型家兔体温升高。
4.2给药后发热家兔血清中细胞因子的变化
各组家兔血清中细胞因子的变化见表4。
表4
与对照组比较：aP＜0.01；与模型组比较：bP＜0.05，cP＜0.01
造模给药4h后，模型组家兔血清中细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6、cAMP、PGE2)水平较对照组显著升高。与模型组比较，试验Ⅰ～Ⅵ组对家兔血清中细胞因子(TNF-α、IL-1β)水平无明显影响；试验Ⅰ～Ⅵ组能够明显降低家兔血清中细胞因子(IL-6、cAMP、PGE2)水平。
4.3给药后发热家兔下丘脑中升温递质的变化
各组家兔下丘脑中升温递质的变化见表5。
表5
与对照组比较：aP＜0.01；与模型组比较：cP＜0.01
造模给药4h后，模型组家兔下丘脑中升温递质(cAMP、PGE2)水平较对照组显著升高。与模型组比较，试验Ⅰ～Ⅵ组能够明显降低发热家兔下丘脑中cAMP和PGE2水平。
通过对表3～5中的数据进行对比，可知，本发明所得的炎琥宁化合物、谷氨酰胺和山梨酸钾在药物组合物的药效方面发挥重要作用；同时，本发明的炎琥宁药物组合物的药效优于对比例4、5所得的药物组合物。
以上所述仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，虽然本发明已以较佳实施例揭露如上，然而并非用以限定本发明，任何熟悉本发明的技术人员在不脱离本发明技术方案范围内，当可利用上述提示的技术内容作出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明方案的范围内。