一种利用茶树花的酶合成1‑苯基乙醇的方法与流程

文档序号:12644606阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种利用茶树花的酶合成1-苯基乙醇的方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)1-苯基乙醇合成酶粗酶的制备:

将聚乙烯吡咯烷酮和3-[3-(胆酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸内盐加入茶树花中;

用pH值为7的磷酸钾缓冲液在冰上充分匀浆,缓冲液中同时含有1%的甘油,1 mM EDTA;匀浆产物在4℃下离心15-20分钟;

离心之后的上清液通过PD-10脱盐柱将目的蛋白用含有0.1%甘油、0.1 mM EDTA的磷酸钾缓冲液洗脱,缓冲液的浓度为10 mM, pH值为7,得到1-苯基乙醇合成酶粗酶;

(2)1-苯基乙醇的合成:

底物苯乙酮在1-苯基乙醇合成酶粗酶的催化下生成1-苯基乙醇;反应所使用的缓冲液为100 mM磷酸钾缓冲液;反应液中包含1.25mM的苯乙酮,3.75 mM的辅酶NADPH和0.1 μg/μl的酶。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(2)的反应温度为55℃,合成pH为4.5-5.3,反应时间为100分钟。

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