基-2, 3, 6-三甲基苯磺酰基或 2, 2, 5, 7, 8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基；R3为酰胺保护基，所述的酰胺基保护基可以 为本领域中对酰胺基进行保护的常规保护基，优选三苯甲基、2, 4, 6-三甲氧基苄基或4-甲 基三苯甲基；R4、R5、R6、R7和R8各自独立的为羧基保护基，所述的羧基保护基可以为本领域 中对羧基进行保护的常规保护基，优选叔丁基或金刚烷基；R9为酚羟基保护基，所述的酚羟 基保护基可以为本领域中对酚羟基进行保护的常规保护基，优选叔丁基或2-氯三苯甲基； + 1_即屮10为Trityl-Cl类型树脂或羟基类型树脂中的羧基与亮氨酸的羧基缩合后的基团， 所述的Trityl-Cl类型树脂优选2-氯三苯甲基树脂，所述的羟基类型树脂优选wang树脂。
[0036] 在比伐卢定中间体肽树脂的固相合成方法的步骤1或2中，所述的非质子极性溶 剂同制备肽数脂18的步骤1或步骤2中所述。
[0037] 在比伐卢定中间体肽树脂的固相合成方法的步骤1中，所述的非质子极性溶剂与 所述的肽树脂A的摩尔比优选100:1?200:1，进一步优选120:1?160:1。
[0038] 在比伐卢定中间体肽树脂的固相合成方法的步骤1中，所述的有机碱可以为该类 脱除芴甲氧羰酰基氨基保护基的反应的常规有机碱，优选哌啶。
[0039] 在比伐卢定中间体肽树脂的固相合成方法的步骤1中，所述的有机碱与所述的肽 树脂A的摩尔比优选10:1?50:1，进一步优选20:1?30:1。
[0040] 在比伐卢定中间体肽树脂的固相合成方法的步骤1中，所述的脱除芴甲氧羰酰基 氨基保护基的反应的温度可以为该类脱除芴甲氧羰酰基氨基保护基的反应的常规温度，优 选 22°C?28°C。
[0041] 在比伐卢定中间体肽树脂的固相合成方法的步骤2中，所述的非质子极性溶剂与 所述的肽树脂A'的摩尔比优选100:1?200:1，进一步优选120:1?140:1。
[0042] 在比伐卢定中间体肽树脂的固相合成方法的步骤2中，所述的缩合剂可以为本领 域中该类缩合反应的常规缩合剂，优选N，N-二异丙基碳二亚胺、二环己基碳二亚胺、六氟 磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷和苯并三氮唑-N，N，N'，N' -四甲基脲六氟磷酸盐 中的一种或多种。
[0043] 在比伐卢定中间体肽树脂的固相合成方法的步骤2中，所述的缩合剂与所述的B 的摩尔比优选1:1?1:3,进一步优选1:1?1: 2。
[0044] 在比伐卢定中间体肽树脂的固相合成方法的步骤2中，所述的催化剂可以为本领 域中该类缩合反应的常规催化剂，优选1-羟基苯并三氮唑和/或6-氯-1-羟基苯并三氮 唑。
[0045] 在比伐卢定中间体肽树脂的固相合成方法的步骤2中，所述的肽树脂A'与所述的 B的摩尔比优选1:1?1:5,进一步优选1:1?1: 2。
[0046] 在比伐卢定中间体肽树脂的固相合成方法的步骤2中，所述的催化剂与所述的B 的摩尔比优选1:1?1:4,进一步优选1:2?1:3。
[0047] 在比伐卢定中间体肽树脂的固相合成方法的步骤2中，所述的缩合反应的温度可 以为本领域中该类缩合反应的常规温度，优选22°C?28°C。
[0048] 在比伐卢定中间体肽树脂的固相合成方法的步骤2中，所述的缩合反应的进程可 以采用本领域中的常规测试方法(如茚三酮检测显阴性和/或四氯苯醌检测显阴性)进行监 控，反应时间优选Ih?30h，进一步优选2h?26h。
[0049] 在制备所述的比伐卢定中间体肽树脂C的方法中，所述的肽树脂1可以采用下述 方法制得：在非质子极性溶剂中，缩合剂和催化剂，存在的条件下，将Fmoc-Leu-OH与含羧 基保护基的树脂进行缩合反应，得到肽树脂1即可；
[0050] 其中，含羧基保护基的树脂的定义同上所述。
[0051] 所述的比伐卢定中间体肽树脂1的固相合成方法可以为本领域中该类缩合反应 的常规方法，本发明中特别优选以下反应方法和条件：
[0052] 在所述的比伐卢定中间体肽树脂1的固相合成方法中，所述的非质子极性溶剂同 制备肽数脂18的步骤1或步骤2中所述。
[0053] 在制备所述的肽树脂1的方法中，所述的非质子极性溶剂与所述的树脂Rltl的摩尔 比优选50:1?200:1，进一步优选50:1?100:1。
[0054] 在所述的比伐卢定中间体肽树脂1的固相合成方法中，所述的缩合剂优选N，N-二 异丙基碳二亚胺、二环己基碳二亚胺和六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷、苯并 三氮唑-N,N,N'，N' -四甲基脲六氟磷酸盐中的一种或多种。
[0055] 在所述的比伐卢定中间体肽树脂1的固相合成方法中，所述的缩合剂与所述的树 脂Riq的摩尔比优选1:1?1:3,进一步优选1:1?1:2。
[0056] 在所述的比伐卢定中间体肽树脂1的固相合成方法中，所述的催化剂优选1-羟基 苯并三氮唑、6-氯-1-羟基苯并三氮唑和4-二甲氨基吡啶中的一种或多种。
[0057] 在所述的比伐卢定中间体肽树脂1的固相合成方法中，所述的催化剂与所述的树 脂Riq的摩尔比优选1:1?1:4,进一步优选1:2?1:3。
[0058] 在所述的比伐卢定中间体肽树脂1的固相合成方法中，所述的Fmoc-Leu-OH与所 述的树脂Riq的摩尔比优选1:1?3:1，进一步优选1:1?2:1。
[0059] 在所述的比伐卢定中间体肽树脂1的固相合成方法中，所述的缩合反应的温度优 选22°C?28°C。
[0060] 在所述的比伐卢定中间体肽树脂1的固相合成方法中，所述的缩合反应的进程可 以采用本领域中的常规测试方法(如茚三酮检测显阴性和/或四氯苯醌检测显阴性)进行监 控，反应时间优选Ih?IOh,进一步优选3h?6h。
[0061] 本发明还提供了一种肽树脂19的固相合成方法，其包括以下步骤：
[0062] 步骤1，按照上述方法制得肽树脂18 ;
[0063] 步骤2,在非质子极性溶剂中，将有机碱与步骤1中制得的肽树脂18进行脱除精氨 酸芴甲氧羰酰基氨基保护基的反应，得到肽树脂18';所述的肽树脂18为Fmoc-Arg(R2)-Pr O-Gly-Gly-Gly-Gly-Asn (R3) -Gly-Asp (R4) -Phe-Glu (R5) -Glu (R6) -Ile-Pro-Glu (R7) -Glu (R8 )-Tyr (R9)-Leu-Rltl ;所述的肽树脂 18' 为H-Arg(R2)-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Asn(R3)-Gly-A sp (R4) -Phe-Glu (R5) -Glu (R6) -Ile-Pro-Glu (R7) -Glu (R8) -Tyr (R9) -Leu-R10 ;
[0064] 步骤3,在非质子极性溶剂中，缩合剂和催化剂存在的条件下，将步骤2中制得的 肽树脂18'与Fmoc-Pro-OH进行缩合反应，得到肽树脂19 ;所述的肽树脂19SFmoc-Pro-Arg(R2) -Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Asn(R3) -Gly-Asp(R4) -Phe-Glu(R5)-Glu(R6) -Ile-Pro-Glu(R7)-Glu(R8)-Tyr(R9)-Leu-Rltl ;其中，R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9 和Rltl 的定义均同上所述。 [0065] 在所述的肽树脂19的固相合成方法中步骤1的反应条件如前制备肽树脂18的反 应条件所述。
[0066] 在所述的肽树脂19的固相合成方法步骤2或步骤3中，所述的非质子极性溶剂同 制备所述的肽树脂18的步骤1或2中所述。
[0067] 在所述的肽树脂19的固相合成方法步骤2中，所述的非质子极性溶剂与所述的肽 树脂18的摩尔比优选100:1?200:1，进一步优选120:1?160:1。
[0068] 在所述的肽树脂19的固相合成方法步骤2中，所述的有机碱可以为本领域中该类 脱除精氨酸芴甲氧羰酰基保护基的反应的常规有机碱，优选哌啶。
[0069] 在所述的肽树脂19的固相合成方法步骤2中，所述的有机碱与所述的肽树脂18 的摩尔比优选10:1?50:1，进一步优选20:1?30:1。
[0070] 在所述的肽树脂19的固相合成方法步骤2中，所述的脱除精氨酸芴甲氧羰酰基保 护基的反应的温度可以为本领域中该类脱除精氨酸芴甲氧羰酰基保护基的反应的常规温 度，优选22°C?28°C。
[0071] 在所述的肽树脂19的固相合成方法步骤3中，所述的非质子极性溶剂与所述的肽 树脂18'的摩尔比优选100:1?200:1，进一步优选120:1?140:1。
[0072] 在所述的肽树脂19的固相合成方法步骤3中，所述的缩合剂可以为本领域中该类 缩合的反应的常规缩合剂，优选N，N-二异丙基碳二亚胺、二环己基碳二亚胺、六氟磷酸苯 并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷和苯并三氮唑-N，N，N'，N' -四甲基脲六氟磷酸盐中的一 种或多种。
[0073] 在所述的肽树脂19的固相合成方法步骤3中，所述的缩合剂与所述的 Fmoc-Pro-OH的摩尔比优选1:1?1:3,进一步优选1:1?1: 2。
[0074] 在所述的肽树脂19的固相合成方法步骤3中，所述的催化剂可以为本领域中该类 缩合的反应的常规催化剂，优选1-羟基苯并三氮唑和/或6-氯-1-羟基苯并三氮唑。
[0075] 在所述的肽树脂19的固相合成方法步骤3中，所述的肽树脂18'与所述的 Fmoc-Pro-OH的摩尔比优选1:1?1:5,进一步优选1:1?1: 2。
[0076] 在所述的肽树脂19的固相合成方法步骤3中，所述的催化剂与所述的Fmoc-Pro-OH的摩尔比优选1:1?1:4,进一步优选1:2?1:3。
[0077] 在所述的肽树脂19的固相合成方法步骤3中，所述的缩合反应的温度可以为本领 域中该类缩合反应的常规温度，优选22°C?28°C。
[0078] 在所述的肽树脂19的固相合成方法步骤3中，所述的缩合反应的进程可以采用本 领域中的常规测试方法(如茚三酮检测显阴性和/或四氯苯醌检测显阴性）进行监控，反应 时间优选Ih?IOh,进一步优选3h?6h。
[0079] 本发明提供了一种保护比伐卢定20的固相合成方法，其包括以下步骤：
[0080] 步骤1，按照所述的制备肽树脂19的方法制得所述的肽树脂19 ;
[0081] 步骤2,在非质子极性溶剂中，将步骤1中制得的肽树脂19与有机碱进行脱除脯氨 酸芴甲氧羰酰基氨基保护基的反应，得到肽树脂19'；所述的肽树脂19为Fm〇C-Pr〇-Arg(R 2) -Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Asn (R3) -Gly-Asp (R4) -Phe-Glu (R5) -Glu (R6) -Ile-Pro-Glu (R7) -G Iu(R8)-Tyr(R9)-Leu-Rltl ;所述的肽树脂19'为H-Pro-Arg (R2)-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Asn( R3) -Gly-Asp (R4) -Phe-Glu (R5) -Glu (R6) -Ile-Pro-Glu (R7) -Glu (R8) -Tyr (R9) -Leu-R10 ;
[0082] 步骤3,在非质子极性溶剂中，缩合剂和催化剂存在的条件下，将步骤2中制得的 肽树脂19'与R1-D-Phe-OH进行缩合反应，得到保护比伐卢定20 ;所述的保护比伐卢定20 为R1-D-Phe-Pro-Arg (R2) -Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Asn (R3) -Gly-Asp (R4) -Phe-Glu (R5) -Glu( R6)-Ile-Pro-Glu(R7)-Glu(R8)-Tyr (R9)-Leu-R10 ;
[0083] 其中，R1为氨基保护基，优选叔丁氧羰基、9-芴甲氧羰基或苄氧羰基；R2、R3、R4、R5、 R6、R7、R8、R9和Rltl的定义均同上所述。
[0084] 在制备所述的保护比伐卢定20的固相合成方法中步骤1的反应条件如前制备肽 树脂19的反应条件所述。
[0085] 在制备所述的保护比伐卢定20的固相合成方法步骤2或步骤3中，所述的非质子 极性溶剂同制备所述的肽树脂18的步骤1或2中所述。
[0086] 所述的保护比伐卢定20的固相合成方法的步骤2可以为本领域中该类脱除脯氨 酸芴甲氧羰酰基氨基保护基的反应的常规方法，本发明中特别优选以下反应方法和条件： [0087] 在制备所述的保护比伐卢定20的固相合成方法步骤2中，所述的非质子极性溶剂 与所述的肽树脂19的摩尔比优选100: