本发明的预防和治疗细菌感染 疾病的组合物，以此抑制或延迟细菌感染疾病发病的所有行为。
[0081] 在本发明中，术语一一"治疗"是指向疑似患上细菌感染疾病的个体使用根据本发 明的所述组合物，使症状得到好转或缓解的所有行为。
[0082] 在本发明中，术语一一"改善"是指至少减轻与治疗有关的参数，例如症状程度的 所有行为。
[0083] 在本发明中，术语一一"个体"是指细菌感染疾病已发病或有可能发病的包括人类 在内的所有动物。
[0084] 此时，细菌感染疾病是细菌感染引起的疾病，优选地，细菌感染疾病是由于感染真 菌类或引起食物中毒的细菌而引起的疾病。
[0085] 作为一个例子，所述真菌类可以选自由炭疽病菌、番茄枯萎病JCM12575、白色念珠 菌及拜耳接合酵母组成的组。
[0086] 作为另一个例子，所述引起食物中毒的细菌可以是蜡样芽胞杆菌或单核细胞增多 性李斯特氏菌。
[0087] 作为另一个例子，所述细菌感染疾病可以是食物中毒、皮肤真菌病、念珠菌性阴道 炎、腹泻、呕吐、肠炎、胃肠炎、便秘、腹痛、腹胀、霍乱、李氏杆菌病、蜂窝组织炎、尿路感染、 脑膜炎、腹膜炎、膀胱炎、淋巴盐、指头脓炎、中耳炎、呼吸系统疾病、肺炎、化脓性炎症或败 血症。
[0088] 蜂窝组织炎（cellulitis)是指皮肤和皮下组织出现的急性化脓性炎症，皮肤组 织出现化脓性炎症，大量中性粒细胞浸润于组织间，呈现弥漫性、广泛性，伴随充血或水肿。
[0089] 指头胺炎（felon)是指手指或脚趾出现急性化胺炎症。
[0090] 本发明人已确认本发明的菌株对于白色念珠菌（其存在于包括人类在内的动物 的口腔、肠道、阴道中，感染时引起皮肤真菌病、念珠菌性阴道炎、肠炎、口腔炎等疾病）、拜 耳接合酵母（其作为腐败性酵母，感染时引起食物中毒、呕吐、腹泻、发烧等症状）、蜡样芽 胞杆菌（感染时引起食物中毒、腹泻、呕吐等症状）、单核细胞增多性李斯特氏菌（感染时引 起食物中毒、李氏杆菌病、败血症、脑炎、脑膜炎等疾病），具有很强的抑制效果（图3及图 4)。因此，本发明的抗菌组合物能够有效利用于预防和治疗细菌感染疾病的药物组合物。
[0091] 本发明的预防和治疗细菌感染疾病的组合物还可以添加药学中允许使用的载体， 能够与所述载体一起制成制剂，作为食品、保健食品、药品、准药品、饲料添加剂及饮用水添 加剂等提供。本发明中，术语一一 "药学中允许使用的载体"是指一种载体或稀释剂，其不 会刺激生物体，也不会影响所使用的化合物的生物活性及特性。
[0092] 在本发明中，对允许使用的所述载体种类并无限制，只要属于在该技术领域通常 使用并且药学中允许使用的载体即可。无限制的所述载体有生理盐水、消毒水、林格氏溶 液、缓冲盐水溶液、白蛋白注射液、葡萄糖溶液、麦芽糊精溶液、甘油、乙醇等。这些物质可以 单独使用或将2种以上混合使用。
[0093]另外，必要时可以添加抗氧化剂、缓冲液及/或抑菌剂等其他常用的添加剂使用， 还可以附加稀释剂、分散剂、表面活性剂、粘合剂、润滑剂等制造为水溶液、悬浮液、乳浊液 等注射剂型和丸剂、胶囊、颗粒或片剂等制剂进行使用。
[0094] 本发明的预防和治疗细菌感染疾病的组合物，对其给药方式无特别限制，可以按 照相应技术领域通常的给药方式给药。无限制的所述给药方式有口服组合物或以非口服方 式给药。本发明的预防、改善和治疗所述细菌感染疾病的组合物，可以根据其目标给药方式 制成各种形状的药剂。
[0095] 本发明的抗菌物质的药物给药制剂还可以按照药学上允许使用的盐的形态使用， 或者单独或与其他药物活性化合物结合使用或以合理地组合使用。
[0096] 作为本发明的另一个方面，本发明提供一种预防和治疗细菌感染疾病的方法，其 包括将预防和治疗所述细菌感染疾病的组合物向个体给药的步骤。在本发明中，术语一一 "个体"是指细菌感染疾病已发病或有可能发病的包括人类在内的所有动物。
[0097] 本发明的所述预防和治疗方法具体可以包括向细菌感染疾病已发病或有可能发 病的个体，以药学中有效的用量使用所述组合物的步骤。
[0098] 含有所述萃取物的组合物合理的日服用量可由医生根据准确的医学诊断判断确 定，可以分一次或数次给药。但是，优选地，为实现本发明的目的，治疗特定患者时，应根据 想要达到的反应的种类和程度、是否根据情况使用其他制剂等在内的具体组合物、患者的 年龄、体重、一般健康状态、性别及饮食、给药时间、给药途径及组合物的分泌率、治疗期间、 与具体组合物混合使用或同时使用的药物在内的各种因素以及医学领域熟知的类似因素， 分别确定具体的有效用量。
[0099] 本发明的抗菌物质可以通过各种途径向大鼠、小鼠、家畜及人类等所有哺乳动物 用药。用药的所有方式都可以预见到，比如可以通过口服或者直肠、静脉、肌肉、皮下、子宫 内硬膜或脑室内注射用药。
[0100] 作为本发明的另一个方面，本发明提供一种预防或改善细菌感染疾病的保健食 品，其含有所述抗菌组合物。
[0101] 此时，细菌感染疾病、预防及改善的含义如上文所述。
[0102] 作为本发明的另一个方面，本发明提供一种含有所述抗菌组合物的准药品组合 物。
[0103] 在本发明中，术语一一"准药品"是指：以治疗、减轻、处置或预防人或动物疾病为 目的使用的纤维、橡胶制品或类似物品；对人体的作用微弱或不直接产生作用，不属于仪器 或器械的物品和类似物品；作为以预防感染为目的使用的杀菌、杀虫或类似用途的制剂之 一，除了以诊断、治疗、减轻、处置或预防人或动物疾病为目的使用的物品中不属于仪器、器 械或设备的物品以及以药理学方式影响人或动物的结构和机能为目的使用的物品中不属 于仪器、器械或设备的物品之外的物品。另外，所述准药品可以包括外用皮肤病药物及个人 护理用品。优选地，可以是消毒清洁剂、沐浴露、漱口水、湿巾、肥皂、洗手液或软膏等，但不 限于此。
[0104] 本发明人已确认新分离的芽孢杆菌CJBV对所述白色念珠菌具有抗菌效果，利用 所述新型菌株的抗菌组合物能够有效应用于治疗、减轻、处置或预防包括皮肤真菌病、念珠 菌性阴道炎在内的细菌感染疾病的准药品。
[0105] (发明的效果）
[0106] 本发明新分离的芽孢杆菌CJBV对病原性霉菌、酵母等1种以上不同种类的真菌类 及细菌具有抗菌效果，能够作为植物及作物用抗菌剂、具有抗菌活性的食品以及预防、改善 和治疗细菌感染疾病的饲料、保健食品、准药品、医药品使用。
[0107] 尤其，本发明新分离的芽孢杆菌CJBV具有只抑制食品中的引起食物中毒的细菌 等主要有害菌的特定抗菌活性，能够直接使用于发酵食品。
【附图说明】
[0108] 图1显示从本发明的芽孢杆菌CJBV分离抗菌有效成分一一芽孢菌霉素D类似物 的过程。
[0109] 图2显示本发明的菌株产生的抗菌物质的ESI-MS和紫外光谱。
[0110] 图3显示对4种真菌类，即炭疽病菌、尖孢镰刀菌、白色念珠菌、拜耳接合酵母的抗 菌活性。
[0111] 图4显示对引起食物中毒的细菌一一蜡样芽胞杆菌、单核细胞增多性李斯特氏菌 和酱类发酵细菌一一枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌的抗菌活性。
【具体实施方式】
[0112] 以下，结合实施例，对本发明进行详细说明。但是，以下内容仅为本发明的实施例 而已，并非用于限定本法明。
[0113] 实施例1 :对产生抗菌物质的菌株进行分离和鉴别
[0114] (1)菌株的分离及筛选
[0115] 为了筛选具有抗菌活性的菌株，使用了从传统酱曲分离的芽孢杆菌菌株。在大豆 发酵液体培养基中，37°C温度下，对菌株进行36个小时预培养。在病原性霉菌及引起食物 中毒的细菌形成菌苔（lawncell)的固体琼脂培养基上，放置直径8_的纸圆片后，对预培 养的菌株进行接种。培养12小时以后，筛选培养基上接种的菌株周围对真菌类及细菌同时 生成透明圈的菌株。
[0116] (2)菌株的鉴别
[0117] 按照业内熟知的通常方法，对所述筛选的菌株进行16SrDNA和gyrA基因序列分 析。进行基因序列分析时，利用国家生物技术信息中心（NCBI)的基本本地队列搜索工具 (BLAST)，与GenBank数据库和所筛选菌株的16SrDNA基因序列（序列号1)及gyrA基因序 列（序列号2)进行比较。比较结果显示，本菌株的16SrDNA序列与芽孢杆菌表现出99% 同源性，gyrA基因序列与芽孢杆菌表现出100%同源性。
[0118] 根据以上结果，将通过本发明获得的菌株鉴别为芽孢杆菌菌株，命名为芽孢杆菌 CJBV，并于2014年4月17日，将所述菌株保藏于韩国微生物保藏中心（KCCM)，其保藏号为 KCCMl1528P。
[0119] 实施例2 :抗菌物质的分离及纯化
[0120] 进行实验，分离出新分离的芽孢杆菌CJBV产生的抗菌物质。其过程如图1所示。
[0121] 将所述菌株接种于400M1大豆发酵液体培养基之后，在37°C温度下，以200rpm振 荡培养48小时。在8000xg下，对所述培养液进行20分钟1?心分1?后，取得上清液，并利 用丁醇萃取。
[0122] 对分离的萃取液进行真空蒸发以后，利用YMCHPLC色谱柱（column)和C18胶柱 (Sep-PakC18Cartridge)进行色谱分析。各个馏分以一定比例混合80%v/v甲醇显色， 从中分离和纯化具有抗菌活性的馏分。
[0123] 在甲醇溶剂中溶解纯化的试料，采用ESI-MS方法测定，获得分离后活性物质的紫 外光谱和分子量（Mass)。
[0124]图2显示分离的抗菌物质的ESI-MS和紫外光谱。
[0125] 通过所述分析，确认根据本发明分离的物质是可由下面的式1表达的3种芽孢菌 霉素D类似物。
[0126] [式 1]
[0128] 在C14-芽孢菌霉素D中，所述R为CH3,在C15-芽孢菌霉素D中，所述R为 CH2-CH3,在C16-芽孢菌霉素D中，所述R为CH2-CH2-CH3。
[0129] 实施例3 :真菌类及引起食物中毒的细菌的抗菌活性试验
[0130] 进行如下抗菌活性实验，确认新分离的芽孢杆菌