6] 1. 2动物
[0037]C57化/6(C57化/6JMouse)小鼠，50只，雄性，体重18~22g，购自昆明楚商科技有 限公司，动物合格证号SCXK(湘）K2012-0002。
[0038] 1. 3 药物
[0039] 大麻药皂巧C由云南植物药业有限公司研究院实验室按实施例1制备；环憐酷胺 (CY)购自山西普德药业有限公司，批号：20141102。大麻药皂巧C根据小鼠预实验结果，设 高、中、低S个剂量：50mg/kg，100mg/kg，200mg/kg。
[0040]I. 4 仪器
[0041] 倒置显微镜，重庆光学仪器厂；超净工作台，苏州净化设备厂；LXJ2I型离屯、机，上 海医用分析仪器厂；=用电热恒溫水浴箱，北京长安科学仪器厂；旋满混合器，浙江乐城电 器厂。
[004引 2.实验方法
[0043] 选择接种Lewis肺癌14d后，一般情况良好的荷瘤鼠，脱颈处死，无菌剥取肿瘤组 织，匀浆，W生理盐水稀释成1XlOVml，计数活细胞数>95 %。取50只C57化/6小鼠，每只 小鼠右蔽皮下接种0. 2mL肿瘤细胞悬液。然后将小鼠随机分成5组，每组10只，分别为：荷 瘤模型组，阳性组，大麻药皂巧C高、中、低=个剂量组。各组小鼠按如下方法给药，每天1 次，连续12天：阳性组腹腔注射环憐酷胺30mg/kg;大麻药皂巧C高、中、低S个剂量组分别 腹腔注射200mg/kg、100mg/kg、50mg/kg的大麻药皂巧C;荷瘤模型组腹腔注射等容量的生 理盐水，0.ImL/lOg。给药后第13天处死小鼠，剥取瘤体称重，计算抑瘤率；并摘取脾脏和胸 腺，称重，计算脾指数和胸腺指数。抑瘤率=(对照组平均瘤重-用药组平均瘤重）/对照 组平均瘤X100% ;脾指数（胸腺指数）=脾重（胸腺重）/体重（单位：mg/g)。
[0044] 3.结果
[004引由表2可见，模型组的平均瘤重大于Ig,表示造模成功。阳性药CY能显著抑制小 鼠Lewis肺癌的生长，抑瘤率达81. 8%。大麻药皂巧C高、中剂量组对小鼠Lewis肺癌具有 明显的抑制作用，抑瘤率分别为57. 6%和50. 8%，与模型组比较有显著性差异（P<0. 01)。 大麻药皂巧C低剂量组对小鼠Lewis肺癌具有一定的抑制作用，抑瘤率为27. 3%，与模型组 比较无显著性差异（P〉0. 05)。CY在抑瘤的同时能显著抑制荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数 (P<0. 01)，而大麻药皂巧C=个剂量组对荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数无明显影响。
[004引表2.大麻药皂巧C对小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑制作用（；±v，!1= 10 )
[0048] 冲<0. 05, *冲<0. 01，与模型组比较
[0049](二）大麻药皂巧C对化PS肝癌小鼠的抑瘤作用
[0050] 1.材料
[0051] 1.1瘤株
[0052]小鼠肝癌实体型化巧S)，购自中国药科大学肿瘤实验室。
[0053] I. 2 动物
[0054] ICR小鼠，50只，雌雄各半，体重18~22g，购自昆明楚商科技有限公司，动物合格 证号SCXK(湘）K2012-0002。
[00巧]1. 3药物
[0056] 大麻药皂巧C由云南植物药业有限公司研究院实验室按实施例1制备；环憐酷胺 (CY)购自山西普德药业有限公司，批号：20141102。大麻药皂巧C根据小鼠预实验结果，设 高、中、低S个剂量：50mg/kg，100mg/kg，200mg/kg。
[0057] I. 4 仪器
[0058] 倒置显微镜，重庆光学仪器厂；超净工作台，苏州净化设备厂；LXJ2I型离屯、机，上 海医用分析仪器厂；=用电热恒溫水浴箱，北京长安科学仪器厂；旋满混合器，浙江乐城电 器厂。
[005引2.实验方法
[0060] 无菌抽取传代后8d的荷瘤小鼠的腹水，用无菌生理盐水稀释，调整细胞浓度至 5.OXlOVml，接种于小鼠右前肢皮下，每只0. 2ml。然后将小鼠随机分成5组，每组10只， 分别为：荷瘤模型组，阳性组，大麻药皂巧C高、中、低=个剂量组。各组小鼠按如下方法给 药，每天1次，连续12天：阳性组腹腔注射环憐酷胺30mg/kg;大麻药皂巧C高、中、低S个 剂量组分别腹腔注射200mg/kg、100mg/kg、50mg/kg的大麻药皂巧C;荷瘤模型组腹腔注射 等容量的生理盐水，0.ImL/lOg。给药后第13天处死小鼠，剥取瘤体称重，计算抑瘤率；并摘 取脾脏和胸腺，称重，计算脾指数和胸腺指数。抑瘤率=(对照组平均瘤重-用药组平均瘤 重）/对照组平均瘤X100%;脾指数（胸腺指数）=脾重（胸腺重）/体重（单位：mg/g)。 [00川3.结果
[0062] 由表3可见，模型组的平均瘤重大于Ig,表示造模成功。阳性药CY能显著抑制小 鼠化PS肝癌的生长，抑瘤率达69. 0%。大麻药皂巧C高剂量组对小鼠化PS具有明显的抑 制作用，其抑瘤率达31. 7%，与模型组比较有显著性差异（P<0. 01);大麻药皂巧C中、低剂 量组对小鼠化PS具有一定的抑制作用，抑瘤率分别为19. 0%和9. 5%，与模型组比较均无 显著性差异（P〉〇. 05)。CY在抑瘤的同时能显著抑制荷瘤小鼠的胸腺指数，而大麻药皂巧C 高剂量组能显著提高荷瘤小鼠的胸腺指数，中、低剂量组对荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数 无明显影响。
[006引表3大麻药皂巧C对小鼠移植性实体瘤化PS的抑制作用（；故，n=10 )
[0065] 冲<0. 05, *冲<0. 01，与模型组比较
[0066] 研究表明：本发明大麻药皂巧C的抑瘤率没有环憐酷胺高，但是环憐酷胺在抑瘤 的同时能显著影响到小鼠的胸腺指数和脾指数，而大麻药皂巧C=个剂量组对荷瘤小鼠的 胸腺指数和脾指数无明显影响，且有较强的抗癌活性。
【主权项】
1. 式I所示天然新化合物大麻药皂苷C或其药学上可接受的盐：2. 权利要求1所述的天然新化合物大麻药皂苷C的制备方法，其特在于该方法包括： 醇提大麻药粗粉，减压浓缩，经硅胶柱层析，以氯仿-甲醇梯度洗脱，分离提纯得到权利要 求1所述的天然新化合物大麻药阜苷C。3. 权利要求1所述的式I所示天然新化合物大麻药皂苷C或其药学上可接受的盐在制 备抗肿瘤药物中的应用。4. 权利要求3所述的应用，其特征在于：所述肿瘤为肺癌或肝癌。5. -种预防和/或治疗肿瘤的药物，其活性成分为权利要求1所述的式I所示天然新 化合物大麻药皂苷C或其药学上可接受的盐。6. 根据权利要求5所述预防和/或治疗肿瘤的药物，其特征在于：所述的药物为注射 剂、粉针剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂或滴丸。7. 根据权利要求5或6所述预防和/或治疗肿瘤的药物，其特征在于：所述肿瘤为肺 癌或肝癌。
【专利摘要】本发明公开了一种天然新化合物及其制备和应用。该化合物结构新颖、抗肿瘤活性强，分离自镰果扁豆(Dolichos？falcata？Klein)的根大麻药，同时公开了其制备方法，醇提大麻药粗粉，减压浓缩，经硅胶柱层析，以氯仿-甲醇梯度洗脱，分离提纯得到所述化合物，该新化合物外观呈白色粉末，为三萜皂苷，分子式为C36H56O10，命名为：大麻药皂苷C。
【IPC分类】C07J63/00, C07H1/08, A61P35/00, A61K31/704, C07H15/256
【公开号】CN105218615
【申请号】CN201510614197
【发明人】谢忠浪, 武正才, 吕小波, 黄春球, 腾利兵
【申请人】云南植物药业有限公司
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2015年9月23日