OblongifolinC分子印迹聚合物及其制备方法和应用_2

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物在应用于从云南 藤黄95%粗提物中提纯OblongifolinC和GuttiferoneK后,可通过10%乙酸甲醇溶液 洗脱再生、重复利用。
[0035] (4)将本发明中OblongifolinC分子印迹聚合物装柱后纯化粗提物,步骤简单, 效率高。
[0036] 本发明各个方面的细节将在随后的章节中得以详尽描述。通过下文以及权利要求 的描述,本发明的特点、目的和优势将更为明显。
【附图说明】
[0037] 图1是本发明实施例1中GuttiferoneK的HPLC-UV检测图谱(347nm);
[0038] 图2是本发明实施例1中OblongifolinC的HPLC-UV检测图谱(347nm)。
【具体实施方式】
[0039] 下面结合附图与实施例对本发明作进一步说明。应说明的是,这些实施例仅用于 解释说明本发明,并不对其内容进行限定。
[0040] 实施例1
[0041] ⑴备料
[0042] 本实施例各组分按如下用量配比配料:模板分子(OblongifolinC)84mg,功能 单体(丙烯酰胺)36mg,交联剂(二甲基丙烯酸乙二醇酯)250mg,引发剂(偶氮二异丁 腈)10mg,致孔剂(二甲亚砜)3mL。
[0043] (2)制备带有模板分子OblongifolinC的分子印迹聚合物
[0044] 将步骤(1)中备好的模板分子OblongifolinC、丙烯酰胺、二甲基丙烯酸乙二醇 酯、偶氮二异丁腈、二甲亚砜混合,超声10分钟,然后充氮气除氧10分钟,密封,60°c水浴聚 合24小时,得到带有模板分子OblongifolinC的分子印迹聚合物。
[0045] (3)制备脱去模板分子的分子印迹聚合物
[0046] 将步骤⑵中得到的带有模板分子OblongifolinC的分子印迹聚合物研磨,过 400目金属筛,用10%乙酸甲醇溶液回流,直至高效液相色谱检测显示无模板分子为止,然 后于60°C干燥,得到OblongifolinC分子印迹聚合物250mg。
[0047] OblongifolinC模板分子印迹聚合物在OblongifolinC和GuttiferoneK提取 中的应用:
[0048] 称取45g云南藤黄果实粉末,225mL乙醇溶剂,回流三次,每次3小时,浓缩干燥得 23. 3g粗浸膏。
[0049] 取250mg按照本实施例的方法制得的OblongifolinC的分子印迹聚合物装柱,用 30%甲醇润柱。取l.Og云南藤黄果实粗浸膏,用2ml80%甲醇超声溶解上柱,待上柱溶液 流尽后,用30%甲醇淋洗,直至高效液相色谱检测显示杂质已全部洗脱完毕。再用50%甲 醇水溶液洗脱,直至高效液相检测显示GuttiferoneK已全部洗脱完毕,合并洗脱液,浓缩 干燥得10mg纯度为85%的GuttiferoneK(1.0g浸膏换算所得产量,得率1.0%)。再用 70%甲醇洗脱,直至高效液相色谱检测显示OblongifolinC已全部洗脱完毕,合并洗脱液, 浓缩干燥得21mg纯度为89%的OblongifolinC(l. 0g浸膏换算所得产量,得率2. 1% )。
[0050] 所述高效液相色谱检测的色谱条件如下:
[0051]色谱柱:Shim_packVP-0DScolumn,250X4. 6mm,4. 5μm;
[0052] 流动相:C:乙腈,D:0· 1%甲酸水;
[0053]梯度洗脱程序:0-15min,C:D= 30:70 - 100:0,15-35min,C:D= 100:0 - 100:0, 35-50min,C:D= 100:0 - 30:70,50-60min,C:D= 30:70 - 30:70 ;
[0054] 流速:1.OmL/min;
[0055]检测波长:347nm。
[0056]OblongifolinC分子印迹聚合物的再生:将上述试验后的分子印迹聚合物,用 10%乙酸甲醇溶液以及甲醇依次洗脱,即可再生用于下一次的提取。
[0057] 化合物GuttiferoneK的HPLC-UV色谱图(图1)的相对峰面积数据如下:
[0058] 表 1
[0059]
[0060] 化合物GuttiferoneK的核磁数据如下:
[0061]tf-NMRGOOMHzinCD30D)及C13-NMR(101MHzinCD30D)数据见表 2 所示。
[0062]表 2 化合物GuttiferoneK的tf-NMR、C13_NMR数据
[0063]
[0064] 化合物OblongifolinC的HPLC-UV色谱图(图2)的相对峰面积数据如下:
[0065] 表 3
[0066]

[0067] 化合物OblongifolinC的核磁数据如下:
[0068]tf-NMRGOOMHzinCD30D)及C13-NMR(101MHzinCD30D)数据见表 4 所示。
[0069]表 4 化合物OblongifolinC的tf-NMR、C13-NMR数据
[0070]
[0071]

[0072] 实施例2
[0073] (1)备料
[0074] 本实施例各组分按如下用量配比配料:模板分子(OblongifolinC)84mg,功能单 体(4-乙烯基吡啶)65. 4mg,交联剂(二乙稀苯)325mg,引发剂(偶氮二异戊腈)12mg,致孔 剂(乙腈)〇· 5mL。
[0075] (2)制备带有模板分子OblongifolinC的分子印迹聚合物
[0076] 将步骤⑴中备好的模板分子OblongifolinC、4_乙烯基吡啶、二乙稀苯、偶氮二 异戊腈、乙腈混合,超声10分钟,然后充氮气除氧10分钟,密封,40°C水浴聚合12小时,得 到带有模板分子OblongifolinC的分子印迹聚合物。
[0077] (3)制备脱去模板分子的分子印迹聚合物
[0078] 将步骤⑵中得到的带有模板分子OblongifolinC的分子印迹聚合物研磨,过 400目金属筛,用10%乙酸甲醇溶液回流,直至高效液相色谱检测显示无模板分子为止,然 后于60°C干燥,得到分子印迹聚合物268mg。
[0079]OblongifolinC模板分子印迹聚合物在OblongifolinC和GuttiferoneK提取 中的应用:
[0080] 称取45g云南藤黄果实粉末,225mL乙醇溶剂,回流三次,每次3小时,浓缩干燥得 23. 3g粗浸膏。
[0081] 取268mg按照本实施例的方法制得的分子印迹聚合物装柱,用30%甲醇润柱。取 1. 5g云南藤黄果实粗浸膏,用4. 5ml90%甲醇超声溶解上注,待上柱溶液流尽后,用40% 甲醇淋洗,直至高效液相色谱检测显示杂质已全部洗脱完毕。再用50%甲醇水溶液洗脱,直 至高效液相色谱检测显示GuttiferoneK被全部洗脱完毕,合并洗脱液,浓缩干燥得18mg 纯度为87%的GuttiferoneK(1.5g浸膏换算所得产量,得率1.2%)。再用70%甲醇洗 脱,直至高效液相色谱检测显示OblongifolinC被全部洗脱完毕,合并洗脱液,浓缩干燥得 31mg纯度为91%的OblongifolinC(1.5g浸膏换算所得产量,得率2.1%)。
[0082] 本实施例的高效液相色谱检测的色谱条件同实施例一。
[0083] Oblongifolin分子印迹聚合物的再生:将上述试验后的分子印迹聚合物,用10% 乙酸甲醇溶液以及甲醇依次洗脱,即可再生用于下一次的提取。
[0084] 实施例3
[0085] (1)备料
[0086] 本实施例各组分按如下用量配比配料:模板分子(OblongifolinC)84mg,功能 单体(甲基丙烯酸)75mg,交联剂(二甲基丙烯酸乙二醇酯)250mg,引发剂(偶氮二异丁 腈)20mg,致孔剂(氯仿)5mL。
[0087] (2)制备带有模板分子OblongifolinC的分子印迹聚合物
[0088] 将步骤(1)中备好的模板分子OblongifolinC、甲基丙烯酸、二甲基丙烯酸乙二 醇酯、偶氮二异丁腈、氯仿混合,超声10分钟,然后充氮气除氧10分钟,密封,40°C水浴聚合 20小时,得到带有模板分子OblongifolinC的分子印迹聚合物。
[0089] (3)制备脱去模板分子的分子印迹聚合物
[0090] 将步骤(2)中得到的带有模板分子OblongifolinC的分子印迹聚合物研磨,过 400目金属筛,用10%乙酸甲醇溶液回流,直至高效液相色谱检测无模板分子为止,然后于 60°C干燥,得到分子印迹聚合物230mg。
[0091]OblongifolinC模板分子印迹聚合物在Oblongi
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