一种绿原酸及其类似化合物的制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种绿原酸及其类似化合物的制备方法，包括以下步骤：S1：利用提取剂进行回流提取；S2：将提取液浓缩至浸膏状；S3：将浸膏溶解后利用乙酸乙酯萃取；S4：调节萃取后的浓缩液的pH值为中性，过滤过大孔树脂柱；S5：利用薄层制备板，选用展开剂展开，经刮带、研磨，装柱，洗涤，浓缩干燥得到高纯绿原酸及其类似化合物。本发明所述的方法流程清晰、方法简单、成本低，纯化得到的产品颜色好、得率和纯度高，并且可同时得到多个绿原酸类似化合物，为绿原酸及其类似化合物能够得到更加广泛及有效的应用提供了依据。
【专利说明】
一种绿原酸及其类似化合物的制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种绿原酸及其类似化合物的制备方法，属于医药化工技术领域。
【背景技术】
[0002] 绿原酸（Chlorogenic acid )
是由咖啡酸（Caffeic acid)中的咖啡酰基与奎尼酸（Quinic acid)中的奎宁酸根 组成的缩酚酸，又名咖啡单宁酸。
[0003] 其中，咖啡酰基的结构是为：
上述的奎宁酸根结构式中的R1-R4代表的基团不同，则形成不同的绿原酸类似物，如以 下几种情况= (I)Ri=R3=咖啡酰基，R2=R4=H; (2)?=!?=咖啡酰基，R3= R4=H5(S)R1=R3= R4=H, 尺2=咖啡酰基；（4)1?1=1?2=1?4=11，1?3=咖啡酰基 ；（5)1?3=1?2=11，1?1=咖啡酰基，1?4=16。
[0004] 绿原酸及其类似化合物广泛存在于高等双子叶植物和蕨类植物中，主要存在于忍 冬科忍冬属（Lonicera )、菊科蒿属(A rtem isia )植物中，其中含量较高的植物主要 为杜仲、金银花、向日葵、继木、咖啡、可可树等。绿原酸具有广泛的生物活性，它的生物活性 主要表现在抗菌、抗病毒、保肝利胆、清除体内自由基、抑制突变和抗肿瘤以及其它方面，现 代科学对绿原酸生物活性的研究已深入到食品、保健、医药和日用化工等多 个领域。随着研究的进展，更多绿原酸类似物被发现，由于它们具有相同的母体，从而具有 相似的生物活性，而它们的区别与绿原酸的独特结构，使其具有新的生物活性。
[0005] 目前对绿原酸及其类似物的提取有石硫醇法、水提醇沉法、超声波法、聚酰胺柱层 析法等，之后利用不同的的柱层析法进行进一步提纯，但是所得化合物纯度一般在70%左 右，若要较高纯度的化合物（295%)，一般需要制备液相，但是其所要求的设备和材料昂贵， 成本将会提高很多。
【发明内容】
[0006] 为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种制备方法简单、成本低、最终产物 纯度高的绿原酸及其类似化合物的制备方法。
[0007] 本发明的技术方案为： 一种绿原酸及其类似化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： SI:提取:将干燥后的金银花加入到5~15倍金银花重量的提取剂中，在60-90°C的温度 条件下回流提取1~4小时，得到提取液； S2:浓缩:将Sl步骤得到的提取液在60-75 °C的温度条件下浓缩至浸膏状； S3:萃取:将S2步骤中得到的浸膏用2~8倍浸膏重量的水溶解，然后用乙酸乙酯萃取，得 乙酸乙酯萃取液，并将萃取液在60-75Γ的温度条件下浓缩至原萃取液的0.1-0.3倍； S4:层析:利用浓度为0.1mol · !/1NaOH将S3步骤中得到的浓缩液的pH值调整为中性， 过滤后过大孔树脂柱，再用浓度为50-70%的乙醇洗涤大孔树脂柱，合并流出液和水洗液， 在50-70°C的温度条件下浓缩至膏状； S5:制备高纯绿原酸及其类似化合物:将S4步骤中的l-2g浓缩液用甲醇溶解，然后利用 薄层制备板，选用展开剂展开，在紫外灯下观察，并分别将不同带刮下，研磨，装柱，利用洗 涤溶剂洗涤，洗涤液在50_70°C的温度条件下浓缩干燥，得到高纯绿原酸及其类似化合物。
[0008] 进一步，还包括同样提取条件重复提取的步骤，重复次数为1-2次。
[0009] 且在提取过程中，优选，干燥后的金银花加入到8倍重量的提取剂中，在70°C的温 度条件下回流提取2小时，重复次数为1次。
[0010] 更进一步，上述的提取剂为浓度为60-95%的乙醇。
[0011] 优选，提取剂为浓度为70-80%的乙醇。
[0012] 且上述的大孔树脂型号为NKA-9、D-101、XAD-16和NKA-Il中的任一种。
[0013] 优选，大孔树脂型号为NKA-9或D-101。
[0014] 而上述的薄层制备板上的硅胶为硅胶H。
[0015]且上述的展开剂为石油醚、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、丙酮中的任意一种或至少两种 任意比例的混合溶媒。
[0016] 上述的洗涤溶剂为氯仿、乙酸乙酯、丙酮中的任意一种或至少两种任意比例的混 合溶媒。
[0017] 本发明的有益效果为:本发明所述的方法流程清晰、方法简单、成本低，纯化得到 的产品颜色好、得率和纯度高，并且可同时得到多个绿原酸类似化合物，为绿原酸及其类似 化合物能够得到更加广泛及有效的应用提供了依据。
【具体实施方式】
[0018] 下面结合具体实施例对本发明进行详细的说明。
[0019] 实施例1: 将干燥后的金银花IOkg加入到6倍金银花重量浓度为85%的乙醇中，在85°C的温度条件 下回流提取3小时，过滤后滤渣重复提取1次，合并提取液155L;将提取液在75°C下浓缩至浸 膏状;然后将浸膏用3倍浸膏重量的水溶解，溶解后用乙酸乙酯萃取，得乙酸乙酯萃取液，并 将萃取液浓缩至原萃取液的0.3倍，得到浓缩液;再用0.1mol · IZ1NaOH将浓缩液的pH值调整 为中性，过滤后过D-101型大孔树脂柱，再用浓度为70%的乙醇洗涤大孔树脂柱，合并流出 液和水洗液，70°C温度下浓缩至膏状，60°C干燥，得淡绿色粉末325g，绿原酸及其类似化合 物的含量为90.1%;取Ig浓缩液用甲醇溶解，利用薄层制备板，选用展开剂石油醚-丙酮的混 合溶媒展开，本实施例中，薄层制备板上的硅胶为硅胶H，在紫外灯下观察，并分别将不同带 刮下，研磨，装柱，利用洗涤溶剂乙酸乙酯洗涤，洗涤液50°C温度下浓缩至膏状，60°C干燥， 利用核磁进行结构鉴定，得绿原酸含量为97.5%，3，5-二咖啡酰基奎宁酸酯含量为96.3%，3， 4- 二咖啡酰基奎宁酸酯含量为96.8%。
[0020] 实施例2: 将干燥后的金银花IOkg加入到8倍金银花重量浓度为70%的乙醇中，在(TC的温度条件 下回流提取2小时，过滤后滤渣重复提取为1次，合并提取液158L;将提取液70°C下浓缩至浸 膏状;然后将浸膏用5倍浸膏重量的水溶解，溶解后用乙酸乙酯萃取，得乙酸乙酯萃取液，并 将萃取液浓缩至原萃取液的0.15倍，得到浓缩液;再用0.1mol · !/1NaOH将浓缩液的pH值调 整为中性，过滤后过NKA-9型大孔树脂柱，再用浓度为65%的乙醇洗涤大孔树脂柱，合并流 出液和水洗液，70°C温度下浓缩至膏状，60°C干燥，得淡绿色粉末355g，绿原酸及其类似化 合物的含量为85.4%;取1.5g浓缩液甲醇溶解，利用薄层制备板，选用展开剂石油醚-乙酸乙 酯的混合溶媒展开，本实施例中，薄层制备板上的硅胶为硅胶H，在紫外灯下观察，并分别将 不同带刮下，研磨，装柱，利用洗涤溶剂丙酮洗涤，洗涤液60°C温度下浓缩至膏状，60°C干 燥，利用核磁进行结构鉴定，得绿原酸含量为98.5%，3，5-二咖啡酰基-7-甲基奎宁酸酯含量 为97.3%，3，4-二咖啡酰基奎宁酸酯含量为97.2%，3，5-二咖啡酰基-7-正丁基奎宁酸酯含量 为96.4%。
[0021] 实施例3: 将干燥后的金银花IOkg加入到14倍金银花重量浓度为65%的乙醇中，在65°C的温度条 件下回流提取4小时，过滤后滤渣重复提取为2次，合并提取液156L;将提取液70°C下浓缩至 浸膏状;然后将浸膏用8倍浸膏重量的水溶解，溶解后用乙酸乙酯萃取，得乙酸乙酯萃取液， 并将萃取液浓缩至原萃取液的0.1倍，得到浓缩液;再用0.1mol · IZ1NaOH将浓缩液的pH值调 整为中性，过滤后过NKA-Il型大孔树脂柱，再用浓度为60%的乙醇洗涤大孔树脂柱，合并 流出液和水洗液，70°C温度下浓缩至膏状，60°C干燥，得淡绿色粉末325g，绿原酸及其类似 化合物的含量为89.6%;取2g浓缩液甲醇溶解，利用薄层制备板，选用展开剂氯仿-甲醇的混 合溶媒展开，本实施例中，薄层制备板上的硅胶为硅胶H，在紫外灯下观察，并分别将不同带 刮下，研磨，装柱，利用洗涤溶剂丙酮洗涤，洗涤液50°C温度下浓缩至膏状，60°C干燥，利用 核磁进行结构鉴定，得绿原酸含量为98.8%，5-咖啡酰基-7-甲基奎宁酸酯含量为98.9%，3， 5- 二咖啡酰基奎宁酸酯含量为98.1%，3，5-二咖啡酰基-7-正丁基奎宁酸酯含量为97.6%。
[0022] 以上【具体实施方式】不以任何形式限制本发明，凡是以等同替换或等效变换的方式 所获得的技术方案，均落在本发明的保护范围内。
【主权项】
1. 一种绿原酸及其类似化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： S1:提取:将干燥后的金银花加入到5~15倍金银花重量的提取剂中，在60-90°C的温度 条件下回流提取1~4小时，得到提取液； S2:浓缩:将S1步骤得到的提取液在60-75 °C的温度条件下浓缩至浸膏状； S3:萃取:将S2步骤中得到的浸膏用2~8倍浸膏重量的水溶解，然后用乙酸乙酯萃取，得 乙酸乙酯萃取液，并将萃取液在60-75Γ的温度条件下浓缩至原萃取液的0.1-0.3倍； S4:层析:利用浓度为0. lmol · I^NaOH将S3步骤中得到的浓缩液的pH值调整为中性，过 滤后过大孔树脂柱，再用浓度为50-70%的乙醇洗涤大孔树脂柱，合并流出液和水洗液， 在50-70°C的温度条件下浓缩至膏状； S5:制备高纯绿原酸及其类似化合物:将S4步骤中的l-2g浓缩液用甲醇溶解，然后利用 薄层制备板，选用展开剂展开，在紫外灯下观察，并分别将不同带刮下，研磨，装柱，利用洗 涤溶剂洗涤，洗涤液在50_70°C的温度条件下浓缩干燥，得到高纯绿原酸及其类似化合物。2. 根据权利要求1所述的一种绿原酸及其类似化合物的制备方法，其特征在于，还包括 同样提取条件下重复提取的步骤，重复次数为1-2次。3. 根据权利要求2所述的一种绿原酸及其类似化合物的制备方法，其特征在于，在提取 过程中，干燥后的金银花加入到8倍重量的提取剂中，在70°C的温度条件下回流提取2小时， 重复次数1次。4. 根据权利要求1所述的一种绿原酸及其类似化合物的制备方法，其特征在于，所述的 提取剂为浓度为60-95%的乙醇。5. 根据权利要求1或4所述的一种绿原酸及其类似化合物的制备方法，其特征在于，所 述的提取剂为浓度为70-80%的乙醇。6. 根据权利要求1所述的一种绿原酸及其类似化合物的制备方法，其特征在于，所述的 大孔树脂型号为疆六-9、0-101、乂40-16和疆4-11中的任一种。7. 根据权利要求1或6所述的一种绿原酸及其类似化合物的制备方法，其特征在于，所 述的大孔树脂型号为NKA-9或D-101。8. 根据权利要求1所述的一种绿原酸及其类似化合物的制备方法，其特征在于，所述的 薄层制备板上的硅胶为硅胶H。9. 根据权利要求1所述的一种绿原酸及其类似化合物的制备方法，其特征在于，所述的 展开剂为石油醚、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、丙酮中的任意一种或至少两种任意比例的混合溶 媒。10. 根据权利要求1所述的一种绿原酸及其类似化合物的制备方法，其特征在于，所述 的洗涤溶剂为氯仿、乙酸乙酯、丙酮中的任意一种或至少两种任意比例的混合溶媒。
【文档编号】C07C67/58GK106008212SQ201610413715
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年6月14日
【发明人】季浩, 胡亚京, 于燕燕, 阚建伟, 孔繁博
【申请人】江苏天晟药业股份有限公司