专利名称：一种枯草芽孢杆菌bc-198、及其富硒菌剂与应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及微生物技术领域，特别涉及一种枯草芽孢杆菌BC-198及其其富硒菌剂与应用。
背景技术：
硒是人类和动物必须的微量元素，有防癌和抗癌作用，长期缺硒，可引起多种疾病，是引起克山病的病因之一。现在人们认识到补硒必要性，通过食品补硒被认为最安全，最方便的手段。同世界大多数国家一样，我国也是缺硒地区。我国缺硒省市达20多个，土壤中硒含量约O. 03-0. lmg/kg,向土壤补硒是获得富硒农产品(食品)的一种有效办法。多年来，人们以富硒矿石、富硒煤矸石等原料，经粉碎、碱处理得到少部分(20%)可溶性无机硒，与 氮、磷、钾、铜、锌、铁、镁、硼等无机盐或有机质复混成富硒肥料，或把硒制备成硒酸钠、亚硒酸钠，并以其溶液再与无机或有机肥料混配成富硒肥料，喷施到作物叶片或直接施到土壤中，这些富硒肥料虽然可以生产富硒农产品和富硒食品，但对肥料中无机硒作物利用率仅10%-15%，仍很低，施用有机硒可能是提高作物对硒利用率的途径。农用微生物菌剂是一类有别于无机复合肥料、有机肥料的功能性微生物肥料。利用有益微生物转化硒，把无机硒转化成有机硒，以提高农作物对硒利用率，提高农产品含硒量。目前富硒微生物包括富硒酵母、富硒食用菌、光合细菌等。专利CN200710010871发明的一种富硒联合固氮菌剂，在制备菌剂中加入可溶性硒，利用固氮菌对无机硒进行转化，但其制剂中只采用固氮菌，仅具有单一固氮生理功能的富硒微生物肥料。专利CN102618469A，发明名称一种荚膜红细菌及其应用，公开了一种荚膜红细菌AYGHJ-16，属光合细菌，利用光能对物质进行代谢，促进无机硒的转化和吸收，并有固氮和固碳作用。专利100512666C，发明名称一种含硒微生物饲料添加剂及其制备方法，公开了利用微生物活菌为红假单孢菌、纳豆菌芽孢杆菌和酵母菌进行液体发酵、固体发酵，实现无机硒的微生物转化。与本发明相比，目前的菌剂对硒的转化或采用单一菌株或者同类菌株，对硒的转化以及植物对硒的利用仍比较低。而且推广使用的功能性微生物肥料如固氮、解钾、解磷、催腐、促生长、抗病等肥料大多是功能单一的普通微生物菌剂。
发明内容
本发明目的是提供一株枯草芽孢杆菌BC-198及其应用。本发明另一目的是提供含有上述枯草芽孢杆菌BC-198的菌剂。本发明再一目的是提供一种有效成分为枯草芽孢杆菌BC-198和褐球固氮菌ASl. 212的复合菌剂。本发明又一目的是提供所述复合菌剂的制备方法。本发明提供的枯草芽孢杆菌Bacillus Subitilis BC-198,已于2012年8月30日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC ;地址中国武汉，武汉大学；邮编430072)，保藏编号 CCTCCNo. M2012321。本发明还提供含有所述枯草芽孢杆菌BC-198的菌剂。本发明进一步提供一种复合菌剂，其有效成分为枯草芽孢杆菌BC-198和褐球固氮菌ASl. 212。所述枯草芽孢杆菌BC-198的活菌数为10-25亿/ml，所述褐球固氮菌ASl. 212的活菌数为10-25亿/ml。优选地，所述枯草芽孢杆菌BC-198的活菌数为15-19亿/ml，所述褐球固氮菌ASl. 212的活菌数为15-19亿/ml。本发明所述复合菌剂还含有防腐剂、保护剂；其中，所述防腐剂为苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钠盐、丙酸及其钠盐中的一种或几种；所述保护剂为多羟基聚合物，其中所述多羟基聚合物为海藻酸及其钠盐、聚谷氨酸及 其钠盐、羧甲基纤维素及其钠盐中的一种或几种。本发明还提供所述复合菌剂的制备方法，包括以下步骤I)制备枯草芽孢杆菌BC-198种子液和褐球固氮菌ASl. 212种子液；2)枯草芽孢杆菌BC-198种子液和褐球固氮菌ASl. 212种子液发酵培养，制备发酵液。其中，所述种子培养条件为种子培养基在500晕升三角瓶装100-130晕升培养基，28-35°C恒温振荡培养12-16小时得种子液。培养枯草芽孢杆菌BC-198的种子培养基组成含硒溶液100毫升中加入葡萄糖O. 5%、淀粉O. 3%、蛋白胨O. 6%、酵母膏O. 25%、氯化钠O. 4%、磷酸氢二钾O. 1%、PH7. 2 ；褐球固氮菌ASl. 212的种子培养基组成含硒溶液100毫升中加入O. 3%葡萄糖、O. 8%蔗糖、O. 2%蛋白胨、O. 6%酵母膏、O. 4%氯化钠，硝酸钾O. 2%、PH7. 4。其中，所述发酵培养条件为装料体积为发酵罐容积的65-70%。枯草芽孢杆菌和褐球固氮菌的种子接入量分别与培养液体积比为I. 0-2. 0%和I. 5-2. 5%，罐内温度28-35°C、罐压O. 04-0. 06MPa、搅拌速度190220转/分钟，培养液体积与通入空气体积比I :O. 2-0. 4 (v/v)，混合发酵14-19小时得发酵液。发酵培养基组成为在含硒溶液中加入O. 3-0. 5%葡萄糖、O. 3-0. 7%蔗糖、O. 4-0. 6% 蛋白胨、O. 3-0. 5% 酵母膏、O. 2-0. 5% 氯化钠、PH7. 4。所述发酵液中进一步加入防腐剂、保护剂。所述防腐剂按发酵液体积加入质量体积比为O. 10%-0. 50%。所述保护剂按发酵液体积加入质量体积比为O. 15%-1. 0%。所述枯草芽孢杆菌BC-198或所述菌剂或所述复合菌剂可应用于生产富硒菌剂，用于提高植物对硒的吸收和利用。本发明优点是本发明提供的菌株可用于富硒菌剂的制备.制备方法可利用现成的通用发酵设备，操作简单，制作成本低，制得的产品对作物有固氮、促生长、防治真菌病害等多种功能，可溶性硒经微生物进一步活化和转化更有利于作物对硒吸收和利用，作物施用后可增加产量，改善农产品品质，生产农产品含硒量提高20倍，达到富硒产品质量标准。
图I为Bc-198细胞电镜图，放大倍数IOk ；图2为黄瓜使用枯草芽孢杆菌BC-198的长势效果图3为黄瓜未使用枯草芽孢杆菌BC-198的长势效果图。
具体实施例方式以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。若为特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。本发明中涉及到的百分号“％”，若未特别说明，食指质量百分比；但溶液的百分t匕，除另有规定外，是指溶液IOOml中含有溶质若干克；液体之间的百分比，是指20°C时容量的比例。实施例I富硒多功能菌株分离和鉴定 从湖北恩施市白杨坪的富硒烟草废弃物中，通过在O. 15%NaSe03、0. 6%葡萄糖、O. 5%蔗糖、O. 8%蛋白胨、O. 3%酵母膏、O. 4%氯化钠、水100毫升配制的培养基中富集分离纯化。拮抗试验和促生长试验，筛选得一株菌株BC-198，该菌株发酵液对大豆种子发芽率、根长、比对照提高30-40% ;对镰刀菌、青霉抑制圈均大于I. 5厘米。还具有蛋白酶、纤维素酶活力；该菌株形态或生理生化特征是；革兰氏染色阳性、细胞杆状、直径< lum、如图I所示，形成芽孢，不膨大，无伴胞晶体；接触酶、氧化酶阳性，好氧生长，VP试验阳性，VP < PH6试验阳性，VP > PH7试验阴性，甲基红试验阴性，利用葡萄糖、木糖、L-阿拉伯糖、甘露醇产酸；利用葡萄糖不产气；利用柠檬酸盐，还原硝酸盐，水解淀粉、液化明胶、分解酪素。在PH5.7、7%NaCl、50°C均生长；该菌株16SrRNA基因序列测定结果如SEQ ID NO. I所示。根据细胞形态、生化试验结果，和基因序列测定结果，菌株BC-198鉴定为枯草芽孢杆菌Bacillus Subitilis0该菌株已于2012年8月30日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC ;地址中国武汉，武汉大学；邮编430072)，保藏编号CCTCCNo. M2012321。实施例2枯草芽孢杆菌BC-198与褐球固氮菌配伍试验(I)试验培养基组成1) O. 6%葡萄糖、O. 5%蔗糖、O. 8%蛋白胨、O. 3%酵母膏、O. 4%氯化钠水100毫升、PH7. 4 ；(2)固体培养基中加入I. 8%琼脂(2)枯草芽孢杆菌BC-198与褐球固氮菌培养250毫升三角瓶装上述培养液50毫升、O. IMPa灭菌25分钟，分别接入枯草芽孢杆菌和褐球固氮菌，放置摇瓶机上，28-30°C振荡培养14-20小时备用。(3)拮抗试验按上述配方配制100毫升固体培养基，O. IMPa灭菌25分钟，冷却到45°C时加入I毫升预先培养14小时的褐球固氮菌培养液，混匀后，吸取15毫升移入直径9厘米的培养皿，放置水平的桌面上制得琼脂培养皿，冷却40分钟后，再放置牛津杯，向牛津杯中滴加O. 3毫升预先培养20小时的枯草芽孢培养液的离心上清液，置28-30°C恒温箱培养24-36，牛津杯外缘未出现抑制圈。判定枯草芽孢杆菌BC-198对褐球固氮菌的生长无抑制作用。相似试验方法判定褐球固氮菌对枯草芽孢杆菌生长也无抑制。实施例3富硒菌剂的制备(I)富硒农用微生物菌剂采用菌种枯草芽孢杆菌BC-198 ；培养枯草芽孢杆菌BC-198的种子培养基组成含硒溶液(O. 249mg/ml) 100毫升中加入葡萄糖O. 5%、淀粉O. 3%、蛋白胨O. 6%、酵母膏O. 25%、氯化钠O. 4%、磷酸氢二钾O. 1%、PH7. 2 ；按上述配方配制种子培养基，在500毫升三角瓶中装量100毫升，O. IlMPa压力下灭菌25分钟，冷却到室温后，用接种竹铲挑取枯草芽孢BC-198菌种子母种，接入三角瓶培养基中，在转速190转/分钟的摇瓶机上，28°C ±1°C恒温振荡培养14小时，制得枯草芽孢杆菌种子液；(2)富硒农用微生物菌剂的罐上发酵培养富硒农用微生物菌剂在5升不锈钢自控发酵罐上进行。在3升含硒溶液(O. 3mg/ml)中加入O. 5%葡萄糖、O. 6%蔗糖、O. 6%蛋白胨、O. 5%酵母膏、O. 4%氯化钠、PH7. 4。培养基O. 12MPa灭菌25分钟，培养基温度下降到35°C，接入I. 8%枯草芽孢杆菌种子 液，设定罐压O. 04-0. 06MPa，罐温30 ±2°C，通气流量I :0. 2(v/v)，搅拌速度190转/分钟，发酵18小时得发酵培养液2. 86升。(3)加入O. 19%的苯甲酸钠，O. 9%的海藻酸钠，O. 09%的聚谷氨酸搅拌均匀，得含硒O. 284mg/ml，细菌活菌数34. 8亿/ml的富硒微生物菌剂。实施例4富硒复合菌剂的制备(I)富硒微生物菌剂的种子培养I)制备富硒农用微生物菌剂采用菌种枯草芽孢杆菌BC-198，和褐球固氮菌ASl. 212。2)富硒农用微生物菌剂种子培养基组成a.含硒水溶液制备硒矿粉碎，过100-200目，按硒矿粉质量体积比I :2_3的比例加入3%-4%氨水和1%-3%氢氧化钠混合溶液，搅拌24-36小时，用H3PO4调PH8. 5-9. O过滤得上清液，测定并调整硒浓度为O. 25-1. Omg/ml，或直接用NaSeO3配制。b.培养基组成培养枯草芽孢杆菌BC-198的种子培养基组成含硒溶液(O. 25mg/ml) 100毫升中加入葡萄糖O. 5%、淀粉O. 3%、蛋白胨O. 6%、酵母膏O. 25%、氯化钠O. 4%、磷酸氢二钾O. 1%、PH7. 2。褐球固氮菌ASl. 212的种子培养基组成含硒溶液(O. 25mg/ml) 100毫升中加入
O.3%葡萄糖、O. 8%蔗糖、O. 2%蛋白胨、O. 6%酵母膏、O. 4%氯化钠，硝酸钾O. 2%、PH7. 4。c.种子培养条件配制好种子培养基在500毫升三角瓶内装量100毫升，O. IMPa灭菌25分钟，分别接入枯草芽孢杆菌BC-198和褐球固氮菌ASl. 212，放置200转/分旋转摇瓶机上，30_32°C恒温振荡培养12-16小时得富硒微生物菌剂的种子液。(2)发酵培养农用微生物菌剂制备在IOL发酵罐内进行，其培养基组成在6. 5L含硒溶液(O. 25mg/ml)中加入O. 5%葡萄糖、O. 6%蔗糖、O. 6%蛋白胨、O. 5%酵母膏、O. 4%氯化钠、PH7. 4。培养基装料体积为发酵罐容积的65%、0. 12MPa灭菌25分钟，培养基温度下降到32°C，同时接入I. 4%的枯草芽孢杆菌BC-198种子液和I. 5%的褐球固氮菌ASl. 212种子液，控制罐内温度30°C，罐内压力O. 06MPa,搅拌速度190转/分钟，培养基与通入空气体积比I :0. 4，接入种子液起，每隔2小时取样测定发酵的PH值和细菌细胞浓度，发现发酵18小时和19小时，细菌细胞浓度没有明显增长，发酵18-19小时得发酵培养液。(3)放出罐内培养液5. 8升，加入O. 27%的苯甲酸钠，O. 34%的聚谷氨酸，搅拌均匀得含硒量O. 24mg/ml的富硒微生物菌剂。枯草芽孢杆菌BC-198活菌数18. 3亿/ml，褐球固氮菌ASl. 212活菌数16. 7亿/ml。实施例5富硒复合菌剂的制备(I)富硒微生物菌剂的种子培养I)制备富硒农用微生物菌剂采用菌种枯草芽孢杆菌BC-198，和褐球固氮菌ASl. 2122)富硒农用微生物菌剂种子培养基组成a.含硒水溶液制备配制培养基的含硒浸出水制备硒矿经球磨机粉碎，过100目，加入硒矿粉质量的2倍体积的3%氨水、2%氢氧化钠混合溶液，搅拌30小时，用H3PO4调 PH8. 7离心过滤得富硒水溶液，调节溶液含硒量为O. 3mg/ml。b.培养基组成培养枯草芽孢杆菌BC-198的种子培养基组成含硒溶液100毫升中加入葡萄糖
O.5%、淀粉O. 3%、蛋白胨O. 6%、酵母膏O. 25%、氯化钠O. 4%、磷酸氢二钾O. 1%、PH7. 2。褐球固氮菌ASl. 212的种子培养基组成含硒溶液100毫升中加入O. 3%葡萄糖、
O.8%蔗糖、O. 2%蛋白胨、O. 6%酵母膏、O. 4%氯化钠，硝酸钾O. 2%、PH7. 4。c.菌种培养按上述培养基组成配制的种子培养基，在500毫升三角瓶中装量120毫升培养基，
O.12MPa灭菌25分钟，用接种铲挑取枯草芽孢杆菌BC-198和褐球固氮菌ASl. 212母种分别移到三角瓶培养液中，放置200转/分钟旋转摇瓶机上，30-32°C恒温培养15小时。(2)发酵培养富硒农用微生物菌剂的发酵在50升不锈钢自控发酵罐内进行。在35升含硒溶液中加入O. 5%葡萄糖、O. 6%蔗糖、O. 6%蛋白胨、O. 5%酵母膏、O. 4%氯化钠、PH7. 4。培养基装料体积为发酵罐容积的70%、0. 12MPa灭菌25分钟，培养基温度下降到30-35°C，接入I. 14%的枯草芽孢杆菌种子液和2. 43%的褐球固氮菌种子液，设定发酵搅拌速度195转/分钟，罐内温度28°C，罐内压力O. 05MPa，罐内空气流量I :0. 3 (v/v)。接入种子后，每隔3小时取样测定发酵液PH和细菌细胞浓度发现，发酵18小时时细菌细胞浓度与15小时相近，细胞浓度没有明显增加。(3)放出罐内发酵菌液33升，加入O. 2%的苯甲酸钠和O. 8%的聚谷氨酸，搅拌均匀，得含硒量O. 304mg/ml富硒农用多功能微生物的富硒菌剂。枯草芽孢杆菌BC-198活菌数15. 3亿/ml，褐球固氮菌ASl. 212活菌数18. 7亿/ml。实施例6富硒复合菌剂的制备( I)富硒微生物菌剂的种子培养I)制备富硒农用微生物菌剂采用菌种枯草芽孢杆菌BC-198，和褐球固氮菌ASl. 2122)富硒农用微生物菌剂种子培养基组成a.含硒水溶液制备b.培养基组成培养枯草芽孢杆菌BC-198的种子培养基组成含硒溶液(O. 249mg/ml) 100毫升中加入葡萄糖O. 5%、淀粉O. 3%、蛋白胨O. 6%、酵母膏O. 25%、氯化钠O. 4%、磷酸氢二钾O. 1%、PH7. 2。
褐球固氮菌ASl. 212的种子培养基组成含硒溶液(O. 249mg/ml) 100毫升中加入
0.3%葡萄糖、O. 8%蔗糖、O. 2%蛋白胨、O. 6%酵母膏、O. 4%氯化钠，硝酸钾O. 2%、PH7. 4c.种子培养按上述配方配制种子培养基，在500毫升三角瓶中装量100毫升，O. IlMPa压力下灭菌25分钟，冷却到室温后，用接种竹铲分别挑取枯草芽孢BC-198和褐球固氮菌ASl. 212菌种子母种，分别接入三角瓶培养基中，在转速190转/分钟的摇瓶机上，28°C ± I°C恒温振荡培养14小时，制得枯草芽孢杆菌种子液和褐球固氮菌种子液。(2)富硒农用微生物菌剂的罐上发酵培养富硒农用微生物菌剂在200升不锈钢自控发酵罐上进行。在140升含硒溶液(O. 3mg/ml)中加入O. 5%葡萄糖、O. 6%蔗糖、O. 6%蛋白胨、O. 5%酵母膏、O. 4%氯化钠、PH7. 4。 培养基装料体积为发酵罐容积的70%、0. 12MPa灭菌25分钟，培养基温度下降到35°C，接入
1.2%的升枯草芽孢杆菌种子液，I. 8%的褐球固氮菌种子液，设定罐压O. 04-0. 06MPa,罐温30±2°C，通气流量I :0. 2 (v/v)，搅拌速度190转/分钟，发酵18小时得发酵培养液132升。(3)加入O. 3%的苯甲酸钠，O. 5%的海藻酸钠，O. 15%的聚谷氨酸搅拌均匀，得含硒O. 284mg/ml的富硒微生物菌剂。枯草芽孢杆菌BC-198活菌数15. I亿/ml，褐球固氮菌ASL 212 活菌数 14. 9 亿/ml。实施例7菌剂的效果试验2008年冬在马铃薯上使用实施例5制备的富硒微生物菌剂每株使用含硒
O.304mg/ml富硒农用微生物菌剂O. 065kg,结果表明使用富硒微生物菌剂肥料组马铃薯平均产量3. 51kg/株，大薯比例70. 98%，马铃薯平均含硒2. I lmg/kg,未使用平均含硒
O.102mg/kg ;未使用本肥料的马铃薯平均产量2. 86kg/株，大薯比例60. 39%，；使用本肥料的马铃薯晚疫病病株率4. 51% ;未使用本肥料的马铃薯晚疫病病株率79. 12% ;使用本肥料后的农产品含硒量提高了 20. 68倍，达到富硒标准。2010年-2012年连续三年在黄瓜上使用实施例6制备的富硒微生物菌剂每株使用含硒O. 284mg/ml富硒农用微生物菌剂O. 062kg。鲜黄瓜平均含硒2. 226mg/kg,未使用的鲜黄瓜平均含硒O. llmg/kg，提高硒含量20. 23倍；使用本肥料的黄瓜平均产量3. 36kg/株，未使用本肥料的黄瓜平均产量I. 94kg/株，增产极显著。使用本肥料的黄瓜产品所含重金属达到有机绿色产品标准，且有极显著的增产效果。使用本肥料的黄瓜无病害，未使用的黄瓜白粉病病株率30. 4%。使用枯草芽孢杆菌BC-198的黄瓜长势效果如图2所示，植株高大，枝叶繁茂，叶子大，所接黄瓜大并且多；未使用枯草芽孢杆菌BC-198的黄瓜长势效果如图3所示，植株小，枝叶不繁茂，叶子小，所接黄瓜小并且不多。2010年-2012年连续三年在马铃薯上使用实施例6制备的富硒微生物菌剂，每株使用含硒O. 284mg/ml富硒农用微生物菌剂O. 0625kg,马铃薯平均含硒I. 935mg/kg,未使用平均含硒O. 0941mg/kg，提高硒含量20. 56倍；使用本肥料的马铃薯平均产量3. 56kg/株，大薯比例70. 82% ;未使用本肥料的马铃薯平均产量2. 86kg/株，大薯比例60. 68% ;使用本肥料的马铃薯晚疫病病株率3. 94% ;未使用本肥料的马铃薯晚疫病病株率82. 3%。结论作物施用本发明菌剂后可增加产量，降低患病率，改善农产品品质，生产农产品含硒量提高20倍以上，达到富硒产品质量标准。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。·
权利要求
1.枯草芽孢杆菌(BacillusSubitilis) BC-198，其保藏号为 CCTCCNo. M2012321。
2.含有权利要求I所述枯草芽孢杆菌BC-198的菌剂。
3.一种复合菌剂，其有效成分为枯草芽孢杆菌BC-198和褐球固氮菌ASl. 212。
4.根据权利要求3所述的复合菌剂，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌BC-198的活菌数为10-25亿/ml，所述褐球固氮菌ASl. 212的活菌数为10-25亿/ml。
5.根据权利要求4所述的复合菌剂，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌BC-198的活菌数为15-19亿/ml，所述褐球固氮菌ASl. 212的活菌数为15-19亿/ml。
6.根据权利要求3-5任一项所述的复合菌剂，其特征在于，还含有防腐剂、保护剂； 其中，所述防腐剂为苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钠盐、丙酸及其钠盐中的一种或几种； 所述保护剂为多羟基聚合物，其中所述多羟基聚合物为海藻酸及其钠盐、聚谷氨酸及其钠盐、羧甲基纤维素及其钠盐中的一种或几种。
7.根据权利要求3-6任一项所述的复合菌剂，其特征在于，按照如下方法制备 1)制备枯草芽孢杆菌BC-198种子液和褐球固氮菌ASl.212种子液；2)枯草芽孢杆菌BC-198种子液和褐球固氮菌ASl.212种子液复合发酵培养，制备发酵液。
8.根据权利要求7所述的复合菌剂，其特征在于，所述复合发酵培养是将枯草芽孢杆菌BC-198种子液、褐球固氮菌ASl. 212种子液的接入量分别为1_2%和I. 5-2. 5%。
9.根据权利要求7或8所述的复合菌剂，其特征在于，进一步加入防腐剂、保护剂。
10.权利要求I所述枯草芽孢杆菌BC-198或权利要求2所述菌剂或权利要求3所述复合菌剂在提高植物对硒的吸收和利用中的应用。
全文摘要
本发明涉及一种枯草芽孢杆菌BC-198、及其富硒菌剂与应用。所述枯草芽孢杆菌(Bacillus Subitilis)BC-198，其保藏号为CCTCCNo.M2012321。本发明还提供了一种复合菌剂，其有效成分为枯草芽孢杆菌BC-198和褐球固氮菌AS1.212。本发明提供的富硒菌剂的制备方法可利用现成的通用发酵设备，操作简单，制作成本低，制得的产品对作物有固氮、促生长、防治真菌病害等多种功能，作物施用后可增加产量，改善农产品品质，生产农产品含硒量提高20倍以上，达到富硒产品质量标准。
文档编号A01P3/00GK102888376SQ20121038896
公开日2013年1月23日 申请日期2012年10月12日 优先权日2012年10月12日
发明者陈家任, 刘金龙 申请人:恩施和诺生物工程有限责任公司, 陈家任, 刘金龙