用于原发性免疫缺陷病基因筛查的引物组合物和试剂盒的制作方法
【专利摘要】本发明提供了一种用于原发性免疫缺陷病基因筛查的引物组合物和试剂盒，所述引物组合物包括分别针对与原发性免疫缺陷病相关的90个基因非重复区域的多个引物序列。
【专利说明】用于原发性免疫缺陷病基因筛查的引物组合物和试剂盒
【技术领域】
[0001]本发明涉及检测试剂盒领域，具体地说，涉及一种用于原发性免疫缺陷病基因筛查的引物组合物和试剂盒。
【背景技术】
[0002]免疫缺陷病(immunodeficiency diseases, IDD)是一组由于免疫系统发育不全或遭受损害所致的免疫功能缺陷引起的疾病。有两种类型:1、原发性免疫缺陷病，又称先天性免疫缺陷病，与遗传有关，多发生在婴幼儿；2、继发性免疫缺陷病，又称获得性免疫缺陷病，可发生在任何年龄，多因严重感染，尤其是直接侵犯免疫系统的感染、恶性肿瘤、应用免疫抑制剂、放射治疗和化疗等原因引起。
[0003]免疫缺陷病的病因比较复杂，在临床表现及实验室检查方面，原发性与继发性免疫缺陷病往往不容易区别。在临床上，原发性免疫缺陷往往也会伴有其他系统的继发免疫缺陷，如性联无丙种球蛋白血症患者可出现继发的抑制正常B细胞产生抗体的T细胞或单核细胞亚群。同样的临床表现和实验室检查异常可以由于不同的基因缺陷或致病因子作用引起，而同一基因不同的点突变可引起病变严重程度的不一致，由于这些因素的影响，有时要做出明确的免疫缺陷病病因诊断是比较困难的。在台湾儿童的原发性免疫缺陷病的发病率是2.17/10万，新加坡2.65/10万，瑞典8.4/10万，而我国10/10万，每年约有3_6万累计病例。大约40%的原发性免疫缺陷病起病于I岁以内，另外40%在5岁以内，15%于16岁以内，仅5 %发病于成人期。原发性免疫缺陷病种类较多，近年来分子生物学和遗传学技术快速发展，诊断技术不断改进，新原发性免疫缺陷病数目随之增加，仅2003年就发现12种新型原发性免疫缺陷病，使原发性免疫缺陷病疾病总数达到110种。
[0004]随着科学进步和人民生活水平不断提高，儿童期的疾病谱已发生了很大变化，外源性感染、中毒、外伤、缺氧、营养不良等非遗传因素造成的疾病得到了极大控制，遗传性因素在病因构成中日显突出。目前，人类的遗传性疾病的发病率和死亡率有逐年增高的趋势，人类的遗传性疾病已成为威胁人类健康的一个重要因素。原发性免疫缺陷病是遗传病中的一大类疾病，免疫球蛋白疾病、补体系统疾病、白细胞分化抗原疾病、细胞因子疾病、粘附分子疾病、淋巴细胞疾病、粒细胞疾病、炎症性疾病、免疫系统疾病、肉芽肿疾病、伴免疫缺陷疾病、综合征疾病，目前已发现的超过100种，虽然每种疾患均属少见病，但累积患病率相当可观，危害极大。
[0005]目前基因诊断方法较单一，主要是根据临床症状选择候选基因，进行单个或几个基因的重测序，费时费力。因此，寻找有效、快速、经济、简单的免疫缺陷病诊断技术，降低儿童/人类死亡率和致残率，已成为保障儿童健康中急待解决的难题。
【发明内容】
[0006] 为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种用于原发性免疫缺陷病基因筛查的引物组合物和试剂盒。
[0007]为了实现本发明目的，本发明首先提供一种用于原发性免疫缺陷病基因筛查的引物组合物，所述引物组合物包括分别针对CD79B (ID:974)、BTK(ID:695)、C5 (ID:727)、IRAK4 (ID:51135)、TNFRSF13B (ID:23495)、C6 (ID:729)、ILlRN (ID:3557)、STAT3 (ID:6774)、C7(ID:730)、IL2RA (ID:3559)、CD40LG (ID: 959)、SERPINGI (ID:710)、MASPl (ID: 5648)、IL2RG(ID:3561)、AICDA (ID: 57379)、CFP (ID: 5199)、MASP2 (ID: 10747)、CD40(ID:958)、CFH(ID:3075)、RFXAP (ID:5994)、UNG(ID:7374)、CFI (ID:3426)、RFX5(ID:5993)、OSMR(ID:9180)、ICOS(ID:29851)、CFB(ID:629)、RFXANK(ID:8625)、IL31RA(ID:133396)、ITPKC(ID:80271)、CFD(ID:1675)、TAPl(ID:6890)、IL7R(ID:3575)、IGLLl(ID:3543)、C2(ID:717) , TAP2(ID:6891)、CD3D(ID:915)、CD79A(ID:973)、C3(ID:718),TAPBP(ID:6892)、CD3E(ID:916)、BLNK(ID:29760)、C4A(ID:720)、CD8A(ID:925)、FAS (ID:355)、LRRC8A (ID:56262)、C4B(ID:721)、CD247 (ID:919)、RAGl (ID:5896)、BRWD3(ID:254065)、JAK3 (ID:3718)、NCFl (ID:653361)、CHSTll (ID:50515)、SLC35C1(ID:55343)、NCF2(ID:4688)、FSTL3(ID:10272)、FERMT3(ID:83706)、NCF4 (ID: 4689)、BCL2 (ID: 596)、CD40L (ID: 959)、CYBA (ID: 1535)、KLHDC8B (ID: 200942)、WAS(ID:7454), CYBB(ID:1536)、RARA(ID:5914)、TYK2 (ID:7297)、PML (ID: 5371)、RAG2 (ID:5897)、PNP (ID:4860)、ELANE (ID: 1991)、R0BLD3 (ID: 28956)、AIRE(ID:326)、GFIl(ID:2672)、MYD88(ID:4615)、BTGl (ID:694)、HAXl (ID:10456)、BCL3(ID:602)、IRAK4(ID:51135)、IKBKG(ID:8517)、TIRAP(ID:114609)、UNC93B1(ID:81622)、TLR3 (ID:7098)、G6PC3(ID:92579)、CARD9(ID:64 170)、CLEC7A(ID:6458 I)、IL17RA(ID:23765)、LBR(ID:3930)、IL17F(ID: 112744)、CSF3R(ID: 1441)、STAT1 (ID:6772)、和CXCR4(ID:7852)基因非重复区域的多个引物序列。
[0008]进一步地，所述引物组合物具体包括如下引物序列:
[0009]1)CD79B
[0010]
【权利要求】
1.用于原发性免疫缺陷病基因筛查的引物组合物，其特征在于，所述引物组合物包括分别针对基因 CD79B、BTK、C5、IRAK4、TNFRSF13B、C6、IL1RN、STAT3、C7、IL2RA、CD40LG、SERPING1、MASPl、IL2RG、AICDA、CFP、MASP2、CD40、CFH、RFXAP, UNG、CF1、RFX5、OSMR、I COS,CFB、RFXANK、IL31RA、CFD、TAP1、IL7R、IGLL1、C2、TAP2、CD3D、CD79A、C3、TAPBP、CD3E、BLNK、C4A、CD8A、FAS、LRRC8A、C4B、CD247、RAGl、BRWD3、NCFl、CHSTl1、SLC35C1、NCF2、FSTL3、FERMT3、NCF4、BCL2、CD40L、CYBA、KLHDC8B、WAS、CYBB、RARA、TYK2、PML、RAG2、PNP、ELANE、R0BLD3、AI RE、GF11、MYD88、BTG1、HAX1、BCL3、IRAK4、IKBKG、TI RAP、UNC93B1、TLR3、G6PC3、CARD9、CLEC7A、IL17RA、LBR、IL17F、CSF3R、STATl、CXCR4、ITPKC 和 JAK3 的非重复区域的多个引物序列。
2.根据权利要求1所述的引物组合物，其特征在于，所述引物组合物具体包括如下引物序列:
3.用于原发性免疫缺陷病基因筛查的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1或2所述的引物组合物。
4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括:5xPCR离子扩增mix、96孔板和96孔板封口膜。
【文档编号】C12Q1/68GK104131095SQ201410360259
【公开日】2014年11月5日 申请日期:2014年7月25日 优先权日:2014年7月25日
【发明者】封志纯, 王艳, 杨尧 申请人:封志纯