专利名称：一种新的西维来司钠冻干制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及药物制剂领域，具有地说涉及一种新的西维来司钠的冻干制剂。
背景技术：
西维来司钠(sivelestat sodium hydrate)化学结构式如(I) 为日本小野药品工业公司(Ono)开发的全球首个治疗伴有全身性炎症反应综合征的急性肺损伤的药物，商品名为Elaspol，于2002年4月11日在日本获得生产许可。全身性炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome，SIRS)大多是由严重感染、严重创伤及胰腺炎等诱发，能引起与重症炎症或局部炎症无直接关系的肺、肝脏、肾脏等多脏器功能障碍，病情严重时还会造成死亡。在伴有SIRS的脏器功能障碍中，最难治疗的就是急性肺损伤(ALI)。目前，尚未阐明急性肺损伤的发病机制，一般认为，肺部炎症细胞的聚集并释放炎症介质，从而损伤肺微血管内皮细胞和肺泡上皮细胞，引发急性肺损伤。而其中中性粒细胞及其释放的弹性蛋白酶(NE)起了重要作用。
西维来司钠是弹性蛋白酶抑制剂，能选择性地抑制中性粒细胞释放NE，改善呼吸功能，缩短病人使用呼吸器的时间，降低安装呼吸器引起的压力及呼吸道感染症的并发率。另外，本品还能使病人尽早脱离危险期，从重症监护病房(ICU)中撤出，降低了医疗成本。本品能改善SIRS及特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis，IPF)等引发的急性肺损伤。礼来公司正在进行本品用于呼吸窘迫综合征的II期临床研究。
今年以来世界许多国家出现的非典型性肺炎，其临床表现为呼吸窘迫并伴有大面积的肺纤维化，因此，西维来司钠是针对性很强的药物。我国目前正对该药进行治疗“非典”的临床试验。
本品在日本上市的剂型为粉针剂，使用时将其溶解于生理盐水。通常剂量为4.8mg/Kg/日(0.2mg/Kg/小时)，不间断地静脉滴注。用药时间为14日以内。
由于本品水溶性极小，在水中的溶解度不到0.4mg/ml，而患有急性肺部病症的病人的病情严重，必须使用非肠道药品，因此在在专利申请CN1341591A中，通过用氢氧化钠或氢氧化钾或磷酸三钠调节pH值，使配制溶液的pH值达到一个特定值时本品完全溶解，再制成冻干剂。但氢氧化钠及氢氧化钾为强碱，考虑到西维来司钠结构中存在酯及酰胺，稳定性研究表明，该化合物对碱很不稳定，在大量的工业化生产时用强碱调PH，因碱用量大且搅拌难均匀形成局部过碱而影响到药物的稳定性。此外，磷酸三钠作为PH调节剂时用量较大，按日本专利JP88/145，450用量为磷酸三钠∶西维来司钠＝1∶2.2，而该物质尚未列入中华人民共和国药典及任何地方标准，也未有其作为药用辅料的报道，因而在注射剂中较大量使用时安全性存在隐患。
发明内容
本发明的目的是提供一种新的西维来司钠的冻干制剂，其采用一种或两种符合中华人民共和国药典标准的PH调节剂作为助溶剂，使该冻干制剂既有水溶性好、贮存稳定的优点，又有对血管刺激小，对人体安全性好的优点，更适于临床应用。
在对化合物I的冻干制剂的研究中，本课题组惊奇地发现，采用助溶剂如硼砂、甘油磷酸钠制成的冻干制剂不仅具有优良的保存稳定性，并且，再溶解时溶解迅速，溶液的澄明度好，更重要的是硼砂和甘油磷酸钠均已列入中华人民共和国药典二000年版，符合临床要求，毒性小，对人体刺激性小，作为药物制剂中的辅剂更适合临床应用，其具有更好的用药安全性。
本发明的详细内容如下一种含西维来司钠的冻干制剂，它含有活性化合物I、助溶剂和赋型剂，其中助溶剂选自硼砂、甘油磷酸钠的一种或两种。
其中溶剂优选水；为进一步减少冻干溶媒的体积，溶剂进一步优选水和有机醇的混合物，以及水和其他注射用溶媒的混合物。
其中有机醇优选自乙醇、异丙醇、丙二醇、正丁醇、聚乙二醇300、聚乙二醇400、聚乙二醇6000；其他注射溶媒优选二甲基亚砜。
本发明的冻干制剂，其中助溶剂的量相对于活性化合物I的量优选为20-100％重量百分比。
本发明的冻干制剂，其中赋形剂优选甘露醇和/或葡萄糖。特别优选甘露醇。
本发明的冻干制剂，其冻干前溶液的pH值为7.2-8.5，其冻干后再溶解时的pH值为7.5-9.0。
本发明的冻干制剂冻干前的溶液优选由活性化合物I、硼砂、乙醇、甘露醇和水组成。
本发明的冻干制剂冻干前的溶液还可优选由活性化合物I、硼砂、二甲基亚砜、甘露醇和水组成。
本发明的冻干制剂冻干前的溶液还可优选由活性化合物I、甘油磷酸钠、乙醇、甘露醇和水组成。
本发明冻干制剂的制备方法如下将赋形剂溶于水中，向混合物中加入活性化合物I，在搅拌下加入助溶剂，可适当微热以使化合物完全溶解，然后按常规方法灌装、冻干。
为了考察本发明冻干制剂的稳定性，我们对本发明的冻干制剂进行了强光(4500±500Lx)、高温60℃、高湿(相对湿度90±5％)考察，放置十天后，含量均在97％以上，并且色泽无变化，pH值稳定。以上实验结果表明，采用本发明制备的PFA冻干制剂对强光、高热、高湿均质量稳定，在包装及贮存上无需特殊的要求。
本产品在临床使用前将其溶解于注射用水或其它溶剂如生理盐水、葡萄糖注射液中。
由于本发明采用了特殊的pH调节剂，在冻干后再溶解时溶液的pH稳定，溶液澄明度好。
采用助溶剂如硼砂、甘油磷酸钠制成的冻干制剂不仅具有优良的保存稳定性，并且，再溶解时溶解迅速，溶液的澄明度好，更重要的是硼砂和甘油磷酸钠均已列入中华人民共和国药典二000年版，毒性小，对人体刺激性小，作为药物制剂的辅剂其安全性好，具坚实的法律基础。
以下是本发明冻干制剂的药理、毒理学数据1注射用西维来司钠溶血试验[摘要] 注射用西维来司钠在试管内终浓度达0.1mg/ml时，对兔红血球无溶血作用。观察注射用西维来司钠对兔红血球有无溶血作用。
规格 100mg/瓶。
溶媒0.9％氯化钠注射液。
配制方法将100mg/瓶注射用西维来司钠溶解于100ml生理盐水中备用。
来源、种属、品系、许可证新西兰兔，南京安立默科技有限公司提供，生产许可证号SCXK(苏)2002-0002。
取兔血10ml，加玻璃珠振摇去纤维蛋白，离心，弃去上清液，加生理盐水洗涤二次，取沉淀红血球加生理盐水配制成2％红血球悬液，置冰箱中备用。取试管7支，1-5管分别加入注射用西维来司钠溶液0.1ml，0.2ml，0.3ml，0.4ml，0.5ml；各管分别加入生理盐水2.4ml，2.3ml，2.2ml，2.1ml，2.0ml，2.5ml和蒸馏水2.5ml；每管加2％兔红血球悬液2.5ml。摇匀，置37℃水浴中，分别于不同时间观察溶血情况。
表1. 西维来司钠注射用溶血试验结果管号 1 2 34 5 6 7注射用西维来司钠(ml) 0.10.20.30.40.5 0.0 0.0生理盐水(ml) 2.42.32.22.12.0 2.5 0.0蒸馏水(ml)0.00.00.00.00.0 0.0 2.52％红血球(ml) 2.52.52.52.52.5 2.5 2.537℃ 水 浴 保 温溶 0.5h - - - - - - +血 1.0h - - - - - - +情 2.0h - - - - - - +况 3.0h - - - - - - +注-不溶血、+溶血判断标准如果溶液变清并染有红色，即表示溶血。凡第三管或第三管以前的各管在1小时出现溶血，部分溶血或出现凝集反应的制剂，不宜作静脉注射用。
肉眼观第7管呈全溶血，1-6管无溶血，镜下观1-6管未见红细胞凝集。
注射用西维来司钠在试管里终浓度(第5管)达0.1mg/ml时，观察三小时对兔红血球无溶血作用。2注射用西维来司钠对兔耳静脉刺激性试验[摘要] 注射用西维来司钠经兔耳静脉注射10ml/kg(1mg/ml)，每日1次，连续14天，局部血管未见明显刺激性。观察注射用西维来司钠经静脉滴注，对局部血管的刺激反应，为临床用药提供依据。
名称注射用西维来司钠。
规格 100mg/瓶。
溶媒 0.9％氯化钠注射液。
配制方法将100mg/瓶注射用西维来司钠溶解于100ml生理盐水中备用。
来源、种属、品系、许可证新西兰兔，南京安立默科技有限公司提供，生产许可证号SCXK(苏)2001-0007。
体重2.0-2.5kg。
性别雌雄各半。
动物数4只(其中对照组右耳，给药组左耳)。
剂量设置注射用西维来司钠8 10ml/kg(1mg/ml)和对照组0.9％氯化钠注射液10ml/kg。
每只动物接受容量静脉滴注均给10ml/kg，按体重给药。
取新西兰兔4只，雌雄各半。右耳给0.9％氯化钠注射液，左耳给注射用西维来司钠，静脉滴注速度为6ml/分钟，每日一次，连续给药14天，试验中观察刺激反应，末次给药后24小时取材做组织病理切片检查。
肉眼主要观察有无红肿、出血、坏死等，以镜检为主。
静脉滴注注射用西维来司钠 10ml/kg(1mg/ml)与对照组0.9％氯化钠注射液10ml/kg，肉眼观察注射部位未见红肿、血管异常等刺激反应，见表21.2；在距注射点1.3cm、2.6cm、4.0cm处分别取材，镜检所见对照组与给药组各取材点耳缘静脉管壁完整，血管无明显扩张，内皮细胞清晰、无肿胀、坏死，管壁及管周无明显炎细胞浸润，管腔内无明显血栓形成等病变。
注射用西维来司钠10ml/kg(1mg/ml)经兔耳静脉给药后，每日一次，连续14天，与对照组相比，局部血管未见明显刺激性。
表2 注射用西维来司钠对兔耳缘静脉组织病理学观察
注部位“近”----距进针点1.3cm；“中“----距进针点2.6cm；“远“----距进针点4.0cm3注射用西维来司钠过敏性试验[摘要] 注射用西维来司钠给豚鼠以0.5ml/只腹腔注射致敏，1.0ml/只静脉注射攻击的过敏试验为阴性。
观察注射用西维来司钠经静脉注射的过敏反应，为临床安全用药提供依据。
名称注射用西维来司钠。
批号 021103。
规格 100mg/瓶。
溶媒 0.9％氯化钠注射液。
配制方法将100mg/瓶注射用西维来司钠溶解于100ml生理盐水中备用。
阳性对照10％小牛血清，由省疾病预防控制中心提供，批号030315。
来源、种属、品系、许可证豚鼠18只，南京市江宁青龙山动物繁殖场，生产许可证号SCXK(苏)2001-0010。
体重250-300g。
性别雌雄各半。
分组情况给药组、阴性对照组(0.9％氯化钠注射液)、阳性对照组(10％小牛血清)。
每组动物数6只。
致敏、攻击剂量致敏剂量为0.5ml(1mg/ml)/只，攻击剂量为1.0ml(1mg/ml)/只。
致敏、攻击次数致敏三次，隔日一次；攻击时间，分别于首次致敏后第14天和第21天。
给药部位致敏为豚鼠腹腔注射，攻击为豚鼠后肢静脉注射。给药组6只豚鼠，分别腹腔注射(0.5ml/只)注射用西维来司钠致敏，隔日一次，连续三次，于首次注射后第14天和第21天各取3只豚鼠静脉注射(1.0ml/只)进行攻击，观察有无过敏反应。
阴性对照组和阳性对照组分别给予0.9％氯化钠注射液和10％小牛血清，方法同上。
豚鼠过敏反应级数反应级数 反 应 症 状0 无明显反应1 只有轻微抓鼻、颤抖或竖毛2 有几次咳嗽、有抓鼻、颤抖或竖毛3 多次或连续咳嗽、伴有呼吸困难或痉挛、抽搐等4 痉挛、抽搐、大小便失禁、休克死亡[观察指标] 按表计算过敏反应级数；反应级数达2级以上(包括2级)时，该试品为不合格。
给药后15分钟。
注射用西维来司钠组及阴性对照组均有个别动物出现轻微抓鼻，其他未见过敏反应，阳性对照组(10％小牛血清)动物均出现强阳性反应，动物全部死亡。
表3 注射用西维来司钠对豚鼠过敏试验结果观察时间 药物 动物数 反应级数结果(天) (只) 01234反应动物数(n)注射用西维来司钠 3 30000 阴性14 阴性对照 3 30000 阴性小牛血清 3 00003 阳性注射用西维来司钠 3 21000 阴性21 阴性对照 3 30000 阴性小牛血清 3 00003 阳性[结论]本发明的注射用西维来司钠给豚鼠以0.5ml/只腹腔注射致敏，1.0ml/只静脉注射攻击的过敏试验为阴性。
以上药理、毒理学试验结果显示，本发明的冻干制剂不会引起溶血、并且刺激性小，低剂量不会引起过敏反应，因此在临床应用中具有安全性。
以下是本发明的实施例，但本发明并不仅仅限于下列实施例。
实施例2
称取西维来司钠0.5g、甘露醇100mg、硼砂0.3g溶于10ml蒸馏水中，向混合溶液中滴加乙醇至澄清，加水至15ml，经0.22μm微孔滤膜过滤，此时pH为8.05。按常规方法灌装、冻干。
实施例3称取西维来司钠0.5g、甘露醇100mg、硼砂0.3g溶于10ml蒸馏水中，向混合溶液中滴加聚乙二醇300至澄清，加水至15ml，经0.22μm微孔滤膜过滤，此时pH为7.94。按常规方法灌装、冻干。
实施例4称取西维来司钠0.5g、甘露醇100mg、硼砂0.3g溶于10ml蒸馏水中，向混合溶液中滴加聚乙二醇400至澄清，加水至15ml，经0.22μm微孔滤膜过滤，此时pH为8.15。按常规方法灌装、冻干。
实施例5称取西维来司钠0.5g、甘露醇100mg、硼砂0.3g溶于10ml蒸馏水中，向混合溶液中滴加丙二醇至澄清，加水至15ml，经0.22μm微孔滤膜过滤，此时pH为7.36。按常规方法灌装、冻干。
实施例6称取西维来司钠0.5g、甘露醇100mg、硼砂0.3g溶于10ml蒸馏水中，向混合溶液中滴加二甲亚砜至澄清，加水至15ml，经0.22μm微孔滤膜过滤，此时pH为8.22。按常规方法灌装、冻干。
实施例7称取西维来司钠0.5g、葡萄糖100mg、硼砂0.3g溶于10ml蒸馏水中，向混合溶液中滴加乙醇至澄清，加水至15ml，经0.22μm微孔滤膜过滤，此时pH为8.47。按常规方法灌装、冻干。
实施例8称取西维来司钠0.5g、葡萄糖100mg、硼砂0.3g、聚乙二醇6000 0.35g溶于15ml蒸馏水中，稍加热冷却后得澄清溶液，经0.22μm微孔滤膜过滤，此时pH为7.85。按常规方法灌装、冻干。
权利要求
1.含式(I)化合物的冻干制剂，含有活性化合物I、助溶剂和赋型剂，其特征是其中助溶剂选自硼砂和/或甘油磷酸钠。
2.权利要求1的冻干制剂，其中溶剂是水。
3.权利要求1的冻干制剂，其中溶剂是水和有机醇的混合物，其中有机醇选自乙醇、异丙醇、丙二醇、正丁醇、聚乙二醇300、聚乙二醇400、聚乙二醇6000的一种或几种。
4.权利要求1的冻干制剂，其中溶剂是水和注射用溶媒的混合物。
5.权利要求3的冻干制剂，其中注射用溶酶为二甲基亚砜。
6.权利要求1的冻干制剂，其中助溶剂的量相对于化合物I的量为20-100％重量百分比。
7.权利要求1的冻干制剂，其中赋形剂是甘露醇和/或葡萄糖。
8.权利要求1的冻干制剂，其冻干前溶液的pH值为7.2-8.5，其冻干后再溶解时的pH值为7.5-9.0。
9.权利要求1的冻干制剂，其冻干前的溶液由活性化合物I、硼砂、乙醇、甘露醇和水组成。
10.权利要求1的冻干制剂，其冻干前的溶液由活性化合物I、甘油磷酸钠、乙醇、甘露醇和水组成。
全文摘要
本发明涉及药物制剂领域，公开了一种新的西维来司钠的冻干制剂，其通过在配方中加入硼砂和/或甘油磷酸钠助溶剂，增加西维来司钠的水溶性及稳定性，同时，该助溶剂对人体血管刺激性小，更具安全性，适合临床应用。
文档编号A61P29/00GK1456152SQ03131629
公开日2003年11月19日 申请日期2003年6月3日 优先权日2003年6月3日
发明者蔡惠明 申请人:蔡惠明