专利名称：以酰胺键连接的番荔枝内酯化合物、合成方法及用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种内酯化合物，具体地说是一种以酰胺键连接的手性番荔枝内酯类似物的合成方法及用途。
背景技术：
当前，癌症已经成为人类健康的最大威胁，并且它的发病率呈逐年上升的趋势。每年有超过20％的死亡是由癌症造成的，这个数字超过因艾滋病，肺结核和疟疾死亡人数的总和。传统治疗癌症的方法，如手术切除、放射疗法和化学疗法等，都有一定的缺陷，不是治疗不彻底就是毒副作用大。随着现代有机分离鉴定和合成技术的发展，许多化学家致力于从天然产物中分离和鉴定具有高度抗肿瘤活性并具选择性的天然化合物，并通过有机合成的手段来获取这种天然含量较低的化合物，然后再以天然化合物为先导化合物进行结构的简化与修饰来获得更多结构多样生物活性优异的化合物。
番荔枝内酯(Annonaceous acetogenin)是从番荔枝科植物中分离得到的一类天然产物。由于它们普遍具有强的抗肿瘤活性，引起的人们广泛的关注(A.Cave等，Progress in the Chemistry of Organic Natural ProductsAcetogenins fromAnnonaceae.New York，Springer-Verlag，1997，70，81-288)，吴毓林、姚祝军等人曾经报道了具有抗癌活性的番荔枝内酯类似物(CN97106368.0)，具有如下分子式 其中R1、R2、R3、R4为H或手性OH；L＝1-6；m＝8-12；n＝0-5；o＝3-12。并提供了该类化合物的制备方法及用途。该类化合物系由手性羟基酸原料合成含有经取代或重排的γ-丁内酯的环氧中间体，以聚乙二醇类化合物与环氧中间体经偶联、催化氢化、消除反应得到产物番荔枝内酯类似物但该方法没有获得手性产物。这类化合物对癌细胞的半致死量LC50为3-6E-05。随后吴毓林、姚祝军等人又报道了一类手性番荔枝内酯类似物(CN99125750.2)，具有如下分子式 其中Y＝C6-20的烷基，n＝1-3，m＝7-19。该化合物系由手性卤代烷与手性二羟基烷基羧酸酯发生偶联以及羟基保护的产物酯化合物与手性醛反应得到羟醛缩合产物，再经酸性内酯环化、消除水解得到。这类化合物较前一类化合物具有更好的生物活性对癌细胞的半致死量EC50为0.03-0.09μgmL-1。在此系列化合物中，分子的碳骨架通过醚键的连接方式构建，这使得其合成效率不高；并且这系列化合物的水溶性较差，这会限制其后期成药研究的进展。在此，在不影响化合物抗癌活性的基础上，人们期望用酰胺键连接替代醚键连接使合成效率提高，并且大极性的酰胺键结构的引入还可改善化合物的水溶性，为最终开发成一类新的抗癌药物做准备。
发明内容
本发明要解决的问题是提供一种以酰胺键连接的手性番荔枝内酯类似物，该类似物是具有光学活性且具有较高合成效率的化合物。
本发明还要解决的问题是提供一种上述化合物的制备方法。
本发明要解决的另一问题是提供上述化合物的用途。
本发明的以酰胺键连接的番荔枝内酯类似物是具有如下结构式的光学活性的或消旋的化合物 推荐为光学活性的上述化合物。
换言之，该化合物是
或 尤其是指 或 特别是指 或 其中，Y＝C6-20的烷基，n＝0-3，m＝7-19，R1，R2，R3，R4为H或C1～C10烷基，R1，R2，R3，R4是相同或不同的基团；当n＝0-2时，R3和R4为H、C1～C10烷基或相连形成五、六或七元环状结构，当n＝0时，R1和R2为H或C1～C10烷基或相连成五、六或七元环状结构。
本发明的上述以酰胺键连接的番荔枝内酯化合物可以用结构式为
的手性羧酸化合物与结构式为 的二胺化合物进行三个片段的连接获得。可采用的方法有首先，二胺化合物与氯碳酸苄酯反应进行单边保护；再与结构式为 的羧酸化合物缩合；然后产物在钯/碳以及氢气氛围下脱除氨基上的碳酸苄酯保护；然后与结构式为 的羧酸缩合，最后在酸催化脱除MOM基团获得最终产物。
可用下述反应式表示 其中，Y＝C6-20的烷基，n＝0-3，m＝7-19，R1，R2，R3，R4为H或C1～C10烷基，R1，R2，R3，R4是相同或不同的基团；当n＝0-2时，R3和R4为H、C1～C10烷基或相连形成五、六或七元环状结构，当n＝0时，R1和R2为H或C1～C10烷基或相连成五、六或七元环状结构。MOM＝甲氧基亚甲基，Cbz＝苄氧羰基。
本发明的制备方法推荐的反应条件可以是上述的二胺1与氯碳酸苄酯的摩尔比为1-5∶1，在极性溶剂中和0℃至室温下反应4-10h生成化合物2。
化合物2、3、EDCI和HOBt摩尔比为1-3∶1∶1-3∶1-3，在0℃至室温下和极性溶剂中反应1-3h，获得化合物4。
化合物4与钯/碳按照质量比100∶10-20，在室温和极性溶剂中反应2-4h，获得化合物5。
化合物5、化合物6、EDCI和HOBt摩尔比为1-2∶1∶1-2∶1-2，在0℃至室温下反应1-3h，获得化合物7。
化合物7在极性溶剂中和0℃至室温下用路易斯酸或有机酸催化下反应10-20h，获得最终化合物8。所述的酸可以是三氟化硼乙醚和三氟醋酸等，三氟醋酸效果最佳。
结构式为 的化合物可以由结构式为 的醇首先经Dess-Martin(戴斯-马丁)氧化得到醛，然后在亚氯酸钠、磷酸二氢钾及2-甲基-2-丁烯条件下将醛氧化为羧酸。
其制备方法可进一步描述为(1)所述手性醇与Dess-Martin(戴斯-马丁)氧化剂摩尔比为1∶1-3，在极性溶剂中和0℃至室温下反应1-4h，获得 (2)上述(1)的产物、亚氯酸钠、磷酸二氢钾和2-甲基-2-丁烯摩尔比为1∶2-10∶2-10∶10∶30，在一种或多种极性溶剂中和0℃至室温下反应10-20h，获得
结构式为 的羧酸化合物可以由结构式为 的化合物首先与TBDPSCl(叔丁基二苯基硅氯)在咪唑存在下反应保护伯羟基，然后与MOMCl(氯甲基甲醚)和二异丙基乙基胺反应保护仲羟基得到结构式为 的化合物，此化合物与结构式为 的手性醛反应获得缩合产物，依次用酸、三氟醋酐/三乙胺处理获得α，β-不饱和内酯；含氟的铵盐作用下脱除硅基保护得到结构式为 的化合物；此化合物经Dess-Martin(戴斯-马丁)氧化得到醛，然后在亚氯酸钠、磷酸二氢钾及2-甲基-2-丁烯条件下将醛氧化为羧酸。可用下述反应式表示
手性羧酸化合物 的制备方法可以进一步描述为上述的手性二醇化合物9、TBDPSCl和咪唑摩尔比为1∶1-3∶2-6，在极性溶剂中和0℃至室温下反应3-6h，然后加入氯甲基甲醚和二异丙基乙基胺相对摩尔比为10-20∶20-50，继续在室温下反应4-6小时，获得化合物10。
化合物10、手性醛11、二异丙基胺锂摩尔比为1∶1-2∶1-5，在极性溶剂中和室温至-78℃下反应0.5-5h，获得化合物12。化合物12与无机酸在室温和极性溶剂中反应5-20小时后，加入相对摩尔比为1-10的三乙胺和1-3的三氟醋酐，在0℃至室温下反应1-10h，获得化合物14。
化合物14在极性溶剂中和0℃至室温下反应4-8h，在含氟的铵盐作用下获得化合物15。
化合物15与Dess-Martin(戴斯-马丁)氧化剂摩尔比为1∶1-3，在极性溶剂中和0℃至室温下反应1-4h，获得化合物16。
化合物16、亚氯酸钠、磷酸二氢钾和2-甲基-2-丁烯摩尔比为1∶2-10∶2-10∶10∶30，在一种或多种极性溶剂中和0℃至室温下反应10-20h，获得化合物17。
所述的极性溶剂可以是CH2Cl2，N，N-二甲基甲酰胺(DMF)，四氢呋喃(THF)，叔丁醇和水等。
所述的EDCI＝1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二酰亚胺盐酸盐，HOBt＝1-羟基苯并三氮唑，MOM＝甲氧基甲基，TBDPS＝叔丁基二苯基硅基，THP＝四氢吡喃基。
本发明提供了上述番荔枝内酯化合物的合成中间体，其结构式为 式中m如前所述，MOM代表甲氧基甲基。
本发明的化合物具有高的抗癌活性，对乳腺管癌(MDA-MB-435S)的IC50(μM)达到＜0.04。可用于抗癌药物。并且制备方法简易，适于工业化生产。
具体实施例方式
通过下述实施例将有助于理解本发明，但并不限制本发明的内容。
实施例1 冰水浴冷却下，向化合物18 2.00g的50mL二氯甲烷溶液中加入Dess-Martin氧化剂4.14g。反应体系在室温下搅拌2小时后以饱和亚硫酸钠溶液淬灭，乙酸乙酯萃取，合并有机相依次用饱和碳酸氢钠、饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品。将以上粗品以及2-甲基-2-丁烯9.6mL溶于40mL叔丁醇中，冷却至0℃，缓慢滴加亚氯酸钠2.22g和磷酸二氢钾3.35g的10mL水溶液。反应混合物与室温下搅拌过夜，减压旋出溶剂，乙酸乙酯萃取，合并有机相并以饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析得到1.90g白色固体19，收率81％。
D25＝-39.3(c1.23，CHCl3)；1HNMR(500 MHz，CDCl3)1.26(16H，m)，1.80(2H，m)，3.40(3H，s)，4.15(1H，t，J＝5.7Hz)，4.70(2H，m)ppm；IR(film)2918，2850，1737，1475，1464，1264，1205，1164，1118，1083，1028，945，900，828，727，669cm-1；MS(ESI，m/z)283(M++Na)；元素分析C14H28O4计算值C，64．58；H，10.84．实测值C，64.87；H，10.56.
实施例2 冰浴冷却下，向100mg二醇20和50mg咪唑的5mL二氯甲烷中缓慢滴加102mg TBDPSCl的5mL二氯甲烷溶液。反应混合物在室温下搅拌2小时后，向体系中滴加0.58 mLi-Pr2NEt后冷却至0℃，缓慢注入0.12 MLMOMCl。反应体系于室温下搅拌过夜，饱和氯化铵淬灭，并以乙酸乙酯萃取，合并有机相依次用1N盐酸饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析得到无色液体175mg，收率90％。
D25＝-15.30(c1.70，CHCl3)；1H NMR(400MHz，CDCl3)1.05(9H，s)，1.29(20H，m)，1.62(4H，m)，2.30(2H，t，J＝7.5Hz)，3.34(3H，s)，3.64(6H，m)，4.64(1H，d，J=6.7 Hz)，4.77(1H，d，J=6.8Hz)，7.39(6H，m)，7.68(4H，m)ppm；MS(ESI，m/z)607(M++Na)；元素分析C35H56O5Si计算值C，71.87；H，9.65.实测值C，71.87；H，9.65.
实施例3
在-78℃下，向0.12mL二异丙胺的3mL THF缓慢滴加0.34mL(1.6Minhexane)正丁基锂，搅拌30分钟后，向反应体系中缓慢滴加0.16g化合物21的5mL无水THF溶液，继续搅拌30分钟后，缓慢滴加新鲜制备的0.087g醛23的3 mL无水THF溶液。反应体系搅拌2小时后，饱和氯化铵淬灭，体系以乙酸乙酯萃取，合并有机相用饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品溶解于10mL THF，加入1mL 10％H2SO4，室温下搅拌24小时，饱和碳酸氢钠淬灭并以乙酸乙酯萃取，合并有机相用饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到中间体溶解于5mL无水二氯甲烷中，氮气保护下，滴加无水2.16mL三乙胺，反应体系冷却至0℃，缓慢滴加0.45mL三氟醋酐，反应混合物于室温下搅拌6小时后以饱和氯化铵淬灭，乙酸乙酯萃取，合并有机相依次用水、1 N盐酸以及饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析得到淡0.100g黄色液体22，收率60％。
D25＝-3.37(c 2.70，CHCl3)；1HNMR(500MHz，CDCl3)1.05(9H，s)，1.31(20H，m)，1.40(3H，d，J＝6.8Hz)，1.55(4H，m)，2.26(2H，t，J＝7.4Hz)，3.35(3H，s)，3.64(3H，m)，4.64(1H，d，J＝6.7Hz)，4.77(1H，d，6.8Hz)，4.99(1H，dq，J＝1.6，6.8Hz)，6.97(1H，d，J＝1.4Hz)，7.39(6H，m)，7.68(4H，m)ppm；IR(film)3071，2928，2855，1759，1464，1428，1318，1196，1112，1036，919，824，741，703，614，505cm-1；MS(ESI，m/z)631(M++Na).
实施例4
冰水浴冷却下，向190mg化合物22和0.8mL吡啶的3mL THF溶液中缓慢滴加0.5mL 40％HF。反应混和物在室温下搅拌48小时后以饱和氯化铵淬灭，反应体系以乙酸乙酯萃取，合并有机相依次用1 N盐酸、饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析得90mg到白色固体23，收率78％。
D25＝+45.8(c3.0，CHCl3)；1H NMR(400MHz，CDCl3)1.26(20H，m)，1.40(3H，d，J＝6.8Hz)，1.53(4H，m)，2.26(2H，t，J＝7.6Hz)，3.42(3H，s)，3.55(3H，m)，4.68(1H，d，J＝6.9Hz)，4.74(1H，d，J＝6.9Hz)，4.99(1H，dq，J＝1.6，6.8Hz)，7.00(1H，d，J＝1.5Hz)ppm；IR(film)3074，2914，2851，1749，1653，1473，1437，1374，1328，1218，1164，1133，1084，1054，1028，974，888，869，810，765，717，637cm-1；MS(ESI，m/z)393(M++Na).
实施例5 冰水浴冷却下，向90mg化合物23的5mL二氯甲烷溶液中加入134mgDess-Martin氧化剂。反应体系在室温下搅拌2小时后以饱和亚硫酸钠溶液淬灭，乙酸乙酯萃取，合并有机相依次用饱和碳酸氢钠、饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品。将以上粗品以及0.29mL 2-甲基-2-丁烯溶于4mL叔丁醇中，冷却至0℃，缓慢滴加66mg亚氯酸钠和100mg磷酸二氢钾的1mL水溶液。反应混合物与室温下搅拌过夜，减压旋出溶剂，乙酸乙酯萃取，合并有机相并以饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析得到80mg无色液体24，两步收率86％。
D25＝-6.82(c3.20，CHCl3)；1H NMR(500MHz，CDCl3)1.26(18H，m)，1.40(3H，d，J＝6.8Hz)，1.55(2H，m)，1.76(2H，m)，2.26(2H，t，J＝7.7Hz)，3.39(3H，s)，4.11(1H，t，J＝5.7Hz)，4.67(1H，d，J＝6.5Hz)，4.71(1H，d，J＝6.5Hz)，5.00(1H，dq，J＝1.5，6.8Hz)，7.00(1H，d，J＝1.3Hz)ppm；
13C NMR(125MHz，CDCl3)173.9，148.9，134.2，96.0，77.4，55.9，32.6，29.6，29.5，29.4，29.2，29.1，27.3，25.1，19.1 ppm；IR(film)2925，2853，1754，1593，1464，1319，1204，1154，1114，1079，1028，920cm-1；MS(ESI，m/z)407(M++Na)；HRMS(MALDI)，C21H36O6Na计算值407.2404，实测值407.2399.
实施例6 冰水浴冷却下，在氮气氛围下向0.26g化合物19，0.27g HOBt和0.23g胺25的20mL二氯甲烷中加入0.38g EDCI，反应体系于室温下搅拌5小时以饱和氯化铵淬灭，乙酸乙酯萃取，合并有机相依次用饱和碳酸氢钠、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析分别得到0.35g白色固体化合物26，收率82％。
D25＝-35.8(c 0.65，CHCl3)；1H NMR(500MHz，CDCl3)0.88(3H，t，J＝7.0Hz)，1.25(16H，m)，1.74(2H，m)，3.39(7H，m)，4.02(1H，t，J＝5.5Hz)，4.63(2H，m)，5.11(2H，s)，5.22(1H，s)，6.91(1H，s)，7.34(5H，m)ppm；IR(KBr)3325，2920，2851，1695，1656，1542，1455，1267，1232，1160，1105，1024，921，732 cm-1；MS(ESI，m/z)437(M++H)；元素分析C24H40N2O5计算值C，66.03；H，9.23；N，6.42.实测值C，66.42；H，9.33；N 6.26.
实施例7采用分子式为 分别与分子式为 的胺反应，操作同实施例6，结果分别获得 (化合物27) (化合物28) (化合物29) (化合物30) (化合物31)化合物27[α]D25＝-34.6(c 2.30，CHCl3)；1H NMR(500MHz，CDCl3)0.88(3H，t，J＝7.1Hz)，1.25(16H，m)，1.67(2H，m)，1.76(2H，m)，3.21(2H，m)，3.34(2H，m)，3.39(3H，s)，4.04(1H，t，J＝5.5Hz)，4.65(2H，s)，5.09(2H，s)，5.41(1H，s)，6.90(1H，s)，7.34(5H，m)ppm；IR(KBr)3327，2921，2852，1687，1652，1546，1458，1438，1276，1217，1143，1103，1039，989，916，751，707，695，620，574cm-1；MS(ESI，m/z)473(M++Na)；元素分析C25H42N2O5计算值C，66.64；H，9.39；N，6.22.实测值C，66.53；H，9.41；N 5.99.
化合物28[α]D25＝-31.4(c1.25，CHCl3)；1H NMR(500MHz，CDCl3)0.88(3H，t，J＝7.1Hz)，1.24(16H，m)，1.69(2H，m)，2.96(6H，m)，3.31-3.80(7H，m)，4.37(1H，m)，4.58(2H，m)，5.12(2H，s)，7.32(5H，m)ppm；IR(film)3327，2926，2856，1705，1528，1404，1361，1278，1216，1157，1033，921，768，697cm-1；MS(ESI，m/z)487(M++Na).
化合物29[α]D25＝-26.9(c 0.92，CHCl3)；1H NMR(500MHz，CDCl3)0.84(3H，t，J＝7.0Hz)，1.22(16H，m)，1.64(2H，m)，3.33(3H，s)，3.52(8H，m)，4.33(1H，t，J＝5.5Hz)，4.59(2H，s)，5.11(2H，s)，7.30(5H，m)ppm；IR(film)3489，2925，2854，1706，1651，1498，1463，1428，1360，1286，1230，1152，1125，1040，984，919，764，698，604，557cm-1；MS(ESI，m/z)485(M++Na).
化合物30[α]D25＝-59.09(c0.58，CHCl3)；1H NMR(500MHz，CDCl3)0.80(3H，t，J＝7.1Hz)，1.18(20H，m)，1.63(4H，m)，1.95(2H，m)，3.23(3H，s)，3.36(1H，m)，3.60(1H，m)，3.90(1H，t，J＝5.3Hz)，4.39(1H，d，J＝6.7Hz)，4.47(1H，d，J＝6.7Hz)，4.91(1H，d，J＝12.4Hz)，5.00(1H，d，J＝12.4Hz)，5.23(1H，d，J＝8.5Hz)，6.71(1H，d，J＝8.6Hz)，7.23(5H，m)ppm；IR(film)3314，2924，2854，1686，1647，1540，1454，1322，1282，1256，1239，1150，1132，1043，919，750，696cm-1；MS(ESI，m/z)513(M++Na).
化合物31[α]D25＝-9.66(c 0.58，CHCl3)；1H NMR(500MHz，CDCl3)0.80(3H，t，J＝7.1Hz)，1.14(20H，m)，1.57(4H，m)，1.96(2H，m)，3.31(3H，s)，3.31(1H，m)，3.62(1H，m)，3.93(1H，m)，4.56(2H，s)，4.89(1H，d，J＝12.5Hz)，5.06(1H，d，J＝12.5Hz)，5.18(1H，d，J＝8.1Hz)，6.65(1H，d，J＝8.6Hz)，7.23(5H，m)ppm；1IR(film)3308，2922，2853，1687，1649，1543，1467，1364，1320，1281，1239，1149，1133，1108，1042，918，856，775，722，695，654，574cm-1；MS(ESI，m/z)513(M++Na).
实施例8 将0.44g化合物26溶解于10mL甲醇中，在10％Pd/C催化下室温常压氢化4小时，过滤减压旋干溶剂得到中间体。将此中间体，0.19g化合物24和0.13gHOBt溶解于15mL无水二氯甲烷中冷却至0℃，但其保护下加入0.19g EDCI。反应体系于室温下反应4小时，饱和氯化铵淬灭，乙酸乙酯萃取，合并有机相依次用饱和碳酸氢钠、饱和食盐水，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析得到0.25g油状化合物，收率75％。
冰水浴冷却下，向上述油状物67mg的2mL二氯甲烷中缓慢滴加1.0mLTFA。反应体系于室温下搅拌1小时，减压旋干溶剂。残余物柱层析得到41mg白色蜡状物32，收率70％。
D25＝-21.2(c0.42，CHCl3)；1H NMR(500MHz，CDCl3/MeOD)0.88(3H，t，J＝7.1Hz)，1.26(34H，m)，1.41(3H，d，J＝6.8Hz)，1.55(4H，m)，1.78(2H，m)，2.26(2H，t，J＝8.0Hz)，3.30(2H，m)，3.46(2H，m)，3.98(2H，m)，5.00(1H，dq，J＝1.2，6.8Hz)，7.05(1H，J＝1.5Hz)ppm；IR(film)3404，3298，2918，2849，2530，2457，1747，1618，1482，1468，1429，1378，1319，1260，1104，1081，1027，951，721cm-1；MS(ESI，m/z)603(M++Na).
实施例9
采用化合物27，28，29，30，31分别与化合物24反应，操作如同实施例8。分别获得 (化合物33)、 (化合物34)、 (化合物35)、 (化合物36) (化合物37)。
化合物33[α]D25＝-11.0(c 0.60，CHCl3)；1H NMR(500MHz，CDCl3/MeOD)0.88(3H，t，J＝7.0Hz)，1.26(34H，m)，1.40(3H，d，J＝6.8Hz)，1.56(4H，m)，1.72(2H，m)，1.79(2H，m)，2.26(2H，t，J＝7.8Hz)，3.21(2H，m)，3.37(2H，m)，4.02(2H，m)，5.00(1H，q，J＝6.8Hz)，7.01(1H，s)，7.24(2H，brs)ppm；IR(film)3401，3299，2919，2848，2523，2456，1748，1614，1538，1484，1468，1437，1376，1317，1080，1027，934，721cm-1；MS(ESI，m/z)617(M++Na)；HRMS(MALDI)，C34H63N2O6Na计算值595.4680，实测值595.4678.
化合物34[α]D25＝+10.3(c 0.90，CHCl3)；1H NMR(500MHz，CDCl3)0.88(3H，t，J＝7.0Hz)，1.26(36H，m)，1.40(3H，d，J＝6.8Hz)，1.54(4H，m)，2.26(2H，t，J＝8.0Hz)，3.01(6H，m)，3.56(4H+2OH，m)，4.30(2H，m)，4.99(1H，dq，J＝1.5，6.8Hz)，7.01(1H，d，J＝1.2Hz)ppm；IR(film)3412，2924，2852，2457，1755，1642，1466，1387，1318，1286，1199，1080，1027，722cm-1；MS(ESI，m/z)631(M++Na)；HRMS(MALDI)，C35H64N2O6Na计算值631.4656，实测值631.4685.
化合物35[α]D25＝-2.43(c 0.90，CHCl3)；1H NMR(500 MHz，CDCl3)0.88(3H，t，J＝7.0Hz)，1.29(32H，m)，1.34(3H，d，J＝6.8Hz)，1.49(5H，m)，1.59(3H，m)，2.26(2H，t，J＝8.0Hz)，3.43(5H+2OH，m)，3.70(2H，m)，3.83(1H，m)，4.36(2H，m)，4.99(1H，dq，J＝1.4，6.8Hz)，6.98(1H，d，J＝1.2Hz)ppm；IR(film)3419，2924，2853，1754，1641，1467，1395，1319，1283，1255，1082，1022，721cm-1；MS(ESI，m/z)629(M++Na)；HRMS(MALDI)，C35H62N2O6Na计算值629.4500，实测值629.4513.
化合物36[α]D25＝-61.2(c 1.25，CHCl3)；1H NMR(500MHz，CDCl3)0.88(3H，t，J＝7.1Hz)，1.29(38H，m)，1.40(3H，d，J＝6.8Hz)，1.55(4H，m)，1.72(4H，m)，1.94(2H，m)，2.26(2H，t，J＝8.0Hz)，3.72(2H，m)，3.98(2H，m)，4.99(1H，dq，J＝1.6，6.8Hz)，6.98(1H，d，J＝1.4Hz)，7.02(2H，m)ppm；IR(film)3281，3090，2920，2851，1753，1649，1618，1552，1467，1320，1202，1147，1115，1082，1027，950，856，721cm-1；
MS(ESI，m/z)657(M++Na)；HRMS(MALDI)，C37H66N2O6Na计算值657.4813，实测值657.4814.
化合物37[α]D25＝+20.5(c 0.95，CHCl3)；1H NMR(500MHz，CDCl3)0.87(3H，t，J＝7.1Hz)，1.25(38H，m)，1.40(3H，d，J＝6.8Hz)，1.54(4H，m)，1.77(4H，m)，2.01(2H，m)，2.26(2H，t，J＝8.0Hz)，3.69(2H，m)，4.00(2H，m)，4.99(1H，dq，J＝1.5，6.8Hz)，6.88(2H，brs)，6.98(1H，d，J＝1.4Hz)ppm；IR(film)3340，3260，2919，2451，1752，1651，1617，1539，1467，1320，1202，1114，1082，1027，721cm-1；MS(ESI，m/z)657(M++Na)；HRMS(MALDI)，C37H66N2O6Na计算值657.4813，实测值657.4822.
实施例10采用分子式为 和 与分子式为 的化合物操作如同实施例1和6得到产物，同时采用分子式为 和 的化合物操作如同实施例2、3、4和5得到产物。两种产物反应操作如同实施例8，分别得到 化合物38， 化合物39， 化合物40，
化合物41。
化合物38[α]D25＝-10.2(c2.0，CHCl3)；1H NMR(500MHz，CDCl3/MeOD)0.88(3H，t，J＝7.1Hz)，1.26(18H，m)，1.41(3H，d，J＝6.8Hz)，1.55(4H，m)，1.78(2H，m)，2.26(2H，t，J＝8.0Hz)，3.30(2H，m)，3.46(2H，m)，3.98(2H，m)，5.00(1H，dq，J＝1.2，6.8Hz)，7.05(1H，J＝1.5Hz)ppm；IR(film)3402，3296，2918，2849，2530，2457，1747，1618，1482，1468，1429，1378，1319，1260，1104，1081，951cm-1；MS(ESI，m/z)566(M++Na).
化合物39[α]D25＝-15.5(c1.6，CHCl3)；1H NMR(500MHz，CDCl3)0.89(3H，t，J＝7.1Hz)，1.28(44H，m)，1.42(3H，d，J＝6.8Hz)，1.56(4H，m)，1.79(2H，m)，2.27(2H，t，J＝8.0Hz)，3.31(2H，m)，3.47(2H，m)，3.99(2H，m)，5.01(1H，dq，J＝1.2，6.8Hz)，7.05(1H，J＝1.5Hz)ppm；IR(film)3404，3298，2918，2849，2530，2457，1747，1618，1482，1468，1429，1378，1319，1260，1104，1081，1027，951，721cm-1；MS(ESI，m/z)679(M++Na).
化合物40[α]D25＝-30(c1.5，CHCl3)；1H NMR(500MHz，CDCl3)0.88(3H，t，J＝7.1Hz)，1.25(42H，m)，1.40(3H，d，J＝6.8Hz)，1.56(4H，m)，1.77(2H，m)，2.27(2H，t，J＝8.0 Hz)，3.31(2H，m)，3.47(2H，m)，3.99(2H，m)，5.01(1H，dq，J＝1.2，6.8Hz)，7.06(1H，J＝1.5Hz)ppm；IR(film)3400，3294，2916，2848，2529，2457，1747，1618，1482，1468，1429，1378，1319，1260，1104，1081，1027cm-1；MS(ESI，m/z)665(M++Na).
化合物41[α]D25＝-35(c 1.1，CHCl3)；1H NMR(500MHz，CDCl3)0.88(3H，t，J＝7.1Hz)，1.27(68H，m)，1.40(3H，d，J＝6.8Hz)，1.56(4H，m)，1.79(2H，m)，2.26(2H，t，J＝8.0Hz)，3.32(2H，m)，3.47(2H，m)，3.99(2H，m)，5.01(1H，dq，J＝1.2，6.8Hz)，7.06(1H，J＝1.5Hz)ppm；IR(film)3404，3298，2918，2849，2530，2457，1747，1618，1482，1468，1429，1378，1319，1260，1104，1081，951，721cm-1；MS(ESI，m/z)847(M++Na).
实施例11生物活性试验化合物32、33、34、35、36和37按照MTT方法对MDA-MB-435S、HCT116、SK-hep 1、Bel-7404、B16的癌细胞系的半致死量测定列于下表中
权利要求
1.一种以酰胺键连接的番荔枝内酯化合物，其特征是有如下结构式的光学活性或消旋化合物 其中，Y＝C6-20的烷基，n＝0-3，m＝7-19，R1，R2，R3，R4为H或C1～C10烷基，R1，R2，R3，R4是相同或不同的基团；当n＝0-2时，R3和R4为H、C1～C10烷基或相连形成五、六或七元环状结构，当n＝0时，R1和R2为H或C1～C10烷基或相连成五、六或七元环状结构。
2.如权利要求1所述的番荔枝内酯化合物，其特征是结构式为 或 式中Y、n、m、R1、R2、R3、R4如权利要求1或2所述。
3.如权利要求1所述的番荔枝内酯化合物，其特征是结构式为 或 式中Y、n、m、R1、R2、R3、R4如权利要求1或2所述。
4.如权利要求1所述的番荔枝内酯化合物，其特征是结构式为 或 式中Y、n、m、R1、R2、R3、R4如权利要求1或2所述。
5.如权利要求1所述的番荔枝内酯化合物的合成中间体，其特征是结构式为 式中m如权利要求1所述，MOM代表甲氧基甲基。
6.一种如权利要求1所述的番荔枝内酯化合物的制备方法，其特征是由结构式为 的手性羧酸化合物与结构式为 的二胺化合物进行三个片段的连接获得；首先，二胺化合物与氯碳酸苄酯反应进行单边保护；再与分子式为 的羧酸化合物缩合；然后产物在钯/碳以及氢气氛围下脱除氨基上的碳酸苄酯保护基；然后与结构式为 的羧酸缩合，最后在酸催化脱除MOM基团，其中Y，n，m，R1，R2，R3和R4如权利要求1或2中所述，MOM为甲氧基甲基。
7.如权利要求7所述的番荔枝内酯化合物的制备方法，其特征是通过下述方法制得(1)所述的二胺与氯碳酸苄酯摩尔比为1-5∶1，在极性溶剂中和0℃至室温下反应4-10h，获得 (2)上述(1)中产物、 、EDCI，HOBt摩尔比为1-3∶1∶1-3∶1-3，在0℃至室温下和极性溶剂中反应1-3h，获得 (3)上述(2)中产物与钯/碳按照重量比100∶10-20，在室温和极性溶剂中反应2-4h，获得 (4)上述(3)中产物、 、EDCI和HOBt摩尔比为1-2∶1∶1-2∶1-2，在0℃至室温下反应1-3h，获得 (5)在极性溶剂中和0℃至室温下，上述(4)中产物用路易斯酸或有机酸催化下反应10-20h，获得最终产物。上述分子式中Y，n，m，R1，R2，R3，R4如权利要求7中所述，所述的EDCI＝1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二酰亚胺盐酸盐，HOBt＝1-羟基苯并三氮唑，MOM为甲氧基甲基。
8.如权利要求6中所述的方法，其特征是所述的路易斯酸或有机酸是三氟化硼乙醚或三氟醋酸。
9.如权利要求6所述的方法，其特征是所述的羧酸化合物 是由结构式为 的醇首先经Dess-Martin(戴斯-马丁)氧化得到醛，然后在亚氯酸钠、磷酸二氢钾及2-甲基-2-丁烯条件下将醛氧化为羧酸，其中Y如权利要求7所述，MOM为甲氧基甲基。
10.如权利要求9所述的方法，其特征是所述的手性羧酸化合物 是通过下述方法制得(1)所述手性醇与Dess-Martin(戴斯-马丁)氧化剂摩尔比为1∶1-3，在极性溶剂中和0℃至室温下反应1-4h，获得 (2)上述(1)的产物、亚氯酸钠、磷酸二氢钾和2-甲基-2-丁烯摩尔比为1∶2-10∶2-10∶10∶30，在一种或多种极性溶剂中和0℃至室温下反应10-20h，获得 其中Y、MOM如权利要求10所述。
11.如权利要求6所述的方法，其特征是所述的羧酸化合物 是由结构式为 的手性二醇化合物首先与叔丁基二苯基硅氯在咪唑存在下反应保护伯羟基，然后与氯甲基甲醚和二异丙基乙基胺反应保护仲羟基得到结构式为 的化合物，此化合物与结构式为 的手性醛反应获得缩合产物，依次用酸、三氟醋酐/三乙胺处理获得α，β-不饱和内酯；含氟的铵盐作用下脱除硅基保护得到结构式为 的化合物；此化合物经Dess-Martin(戴斯-马丁)氧化得到醛，然后在亚氯酸钠、磷酸二氢钾及2-甲基-2-丁烯条件下将醛氧化为羧酸，其中MOM、m如权利要求7所述，TBDPS代表叔丁基二苯基硅基，THP代表四氢吡喃基。
12.如权利要求11所述的方法，其特征是所述的手性羧酸化合物 通过下述方法制得(1)所述的手性二醇化合物、TBDPSCl和咪唑摩尔比为1∶1-3∶2-6，在极性溶剂中和0℃至室温下反应3-6h，然后加入氯甲基甲醚和二异丙基乙基胺相对摩尔比为10-20∶20-50，继续在室温下反应4-6小时，获得 (2)上述(1)中产物、结构式为 的手性醛、二异丙基胺锂摩尔比为1∶1-2∶1-5，在极性溶剂中和室温至-78℃下反应0.5-5h，再与无机酸在室温和极性溶剂中反应5-20小时后，加入相对摩尔比为1-10的三乙胺和1-3的三氟醋酐，在0℃至室温下反应1-10h，获得 (3)上述(2)产物在极性溶剂中和0℃至室温下反应4-8h，在含氟的铵盐作用下获得 (4)上述(3)产物与Dess-Martin(戴斯-马丁)氧化剂摩尔比为1∶1-3，在极性溶剂中和0℃至室温下反应1-4h，获得 (5)上述(4)的产物、亚氯酸钠、磷酸二氢钾和2-甲基-2-丁烯摩尔比为1∶2-10∶2-10∶10∶30，在极性溶剂中和0℃至室温下反应10-20h，获得 其中MOM、m、TBDPS如权利要求12所述。
13.如权利要求11或12所述的羧酸 的制备方法，其特征是所述的含氟铵盐是氟化氢吡啶盐。
14.一种如权利要求1、2、3、4或5所述的以酰胺键连接的手性番荔枝内酯化合物在制备抗癌药物中的用途。
全文摘要
本发明涉及一种以酰胺键连接的番荔枝内酯化合物、合成方法和用途。该化合物具有如上结构式的光学活性或消旋化合物，其中，Y＝C
文档编号A61K31/365GK101092408SQ200710043519
公开日2007年12月26日 申请日期2007年7月6日 优先权日2007年7月6日
发明者姚祝军, 刘海侠, 张焕明 申请人:中国科学院上海有机化学研究所