专利名称：：地塞米松眼用纳米立方液晶制剂及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及一种地塞米松的新型眼用制剂——具体涉及一种地塞米松眼用纳米立方液晶制剂。本发明还涉及该地塞米松眼用纳米立方液晶制剂的制备方法。
背景技术：
：葡萄膜炎是一种常见的眼科疾病，在西方引起失明的眼病中，葡萄膜炎占到10%-15%。其临床主要表现为虹膜睫状体炎、脉络膜炎等。葡萄膜炎的发病机制复杂，除了感染性因素外，绝大多数是由于自身免疫应答所致。葡萄膜炎被视为眼科的"疑难杂症"，其治疗相当困难。眼球的正前方是致密的角膜组织，正常角膜上皮层由67层上皮细胞组成，且上皮细胞间存在紧密联结，在发挥正常生理防护功能的同时，也成为了多数眼用制剂经眼表给药后的主要屏障，它往往限制了许多药物在深部的眼组织发挥药效。而亲脂性分子型的药物(LogD23)比亲水性离子化的药物更容易透过角膜上皮进入眼组织内部。地塞米松是一种人工合成的肾上腺皮质激素，为难溶性的药物，目前临床上采用的眼用制剂主要是地塞米松磷酸钠滴眼液和眼膏剂。4试验表明即使在眼表组织的滞留时间延长，眼膏剂的生物利用度仍比滴眼液差(Cox等人，ArchOphthalmol.91，373(1972);Kupferman等人，ArchOphthalmol.91.373(1974))。滴眼液局部给药后，地塞米松以离子的形式存在，难以透过亲脂性的角膜上皮层进入眼球内部，故主要用于眼表组织的炎症治疗；对于眼组织深部炎症(如虹膜、睫状体等炎症)则疗效欠佳。专利(CN1266369)公开了一种地塞米松凝胶，虽然凝胶剂能够延长制剂在眼表组织的滞留时间，然而活性成分仍是地塞米松的钠盐，药物以离子形式存在，难以透过角膜屏障。一定浓度的两亲性类脂在水中会自发形成热力学稳定的脂双层，然后再重组成具有各种形状和结构的立方液晶体系。连续的立方液晶相在大量水的存在下，能够分散形成独立的纳米粒子，称为纳米立方液晶(Cubosome)。纳米立方液晶(Cubosome)具有生物l占附性，由于其独特的内部双水道结构，能够緩慢地释放出包封的药物，因》匕引起了人们的普遍关注。文献才艮道(LarssonK.Cubiclipid-waterphases:Structuresandbiomembraneaspects[J]./V^sCTzew,1989，93:7304—7314)，液晶具有与生物膜类似的微观结构，能够促进药物透过生物膜屏障。目前，已有该载体在皮肤给药、静脉注射和口服等领域的研究报道；但是，将纳米立方液晶作为新型眼用栽体制剂的应用尚未见报道。
发明内容本发明的目的在于提供一种地塞米松眼用纳米立方液晶制剂及其制备方法。根据本发明，提供了一种地塞米松纳米立方液晶制剂，基于1OOOml眼用纳米立方液晶制剂，主要由以下成分组成地塞米松10~1800mg脂质材料5~300g乳化剂0.25~60g增稠剂0~200g渗透压调节剂适量抑菌剂0.0~0.5gpH调节剂适量纯化水加至1000ml处方中脂质材料为能够形成立方液晶形态的两亲性类脂，包括单油酸甘油酯(GMO)、植烷三醇和卯磷脂中的一种或多种；乳化剂选择适合应用于眼部的安全无刺激性表面活性剂，包括泊洛沙姆407和聚乙烯醇(PVA)中的一种或多种。处方中的增稠剂为玻璃酸钠、卡波姆、泊洛沙姆、轻丙曱纤維素(HPMC)、甲基纤维素(MC)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和聚乙烯醇中的一种或多种。渗透压调节剂为甘油、葡萄糖、甘露醇和丙二醇中的一种或多种。渗透压调节剂在本发明中的含量，为使该制剂的渗透压在0.280-0.320mOsmol/Kg(冰点渗透压法)的范围内。可采用的抑菌剂为季铵盐，例如苯扎氯铵、氯千羟乙铵或多聚季铵盐(polyquats);硫代水杨酸的烷基汞盐；三氯叔丁醇或胍衍生物；并优选为季铵盐、烷基汞盐或三氯叔丁醇。pH调节剂为盐酸、氢氧化钠、磷酸盐、硼酸、硼酸盐、三羟曱基氨基曱烷、枸橼酸、枸橼酸盐和三乙醇胺中的一种或多种。pH调节剂在本发明中的含量，为使该制剂的pH值在生理可耐受的68范围内。本发明还提供了地塞米松眼用纳米立方液晶制剂的制备方法，该方法包括以下步骤将脂质材料、乳化剂混合均匀，然后将地塞米杠、溶解在该混合物中，制成油相；取适量纯化水作为水相；将油相加入水相剪切乳化，进而用高压均质机均质，得到纳米立方液晶制剂，所得制剂用0.45pm的^L孔滤膜过滤。再加入含有适量渗逸压调节剂、抑菌剂和增稠剂的水溶液，最后用pH调节剂调节pH值至6~8，用纯化水补至足量即得。其中，高压均质压力大于等于200巴。本发明提供的地塞米松眼用纳米立方液晶制剂具有如下有益效果1、本发明含有地塞米松的眼用纳米立方液晶制剂采用能够形成立方液晶形态的两亲性类脂，包括单油酸甘油酯、植烷三醇或卵磷脂作为脂质材料；适合应用于眼部的安全无刺激性表面活性剂，包括泊洛沙姆407或聚乙烯醇作为乳化剂；制备得到了地塞米松的眼用纳米立方液晶制剂，解决了该脂溶性药物的溶解、分散问题，使其适合应用到眼部敏感部位，具有舒适度高、无刺激性的优点。2、本发明将地塞米松包裹于纳米立方液晶栽体中，眼部给药后，利用纳米立方液晶与生物膜类似的微观结构，其粒子中的单油酸甘油酯双分子层与角膜上皮细胞的脂质双分子层发生融合。伴随着脂质层的融合，纳米立方液晶发挥储库作用，通过其独特的双水道结构，》爰慢释放药物，为跨膜扩散提供动力，从而促进药物透过角膜屏障，提高眼部的生物利用度。3、与脂质体相比，纳米立方液晶内部由两亲性的脂质成分组成，对脂溶性的药物地塞米松的包载能力，显著高于内部为水相的脂质体。此外，纳米立方液晶的稳定性也显著优于脂质体，贮存过程中，药物不容易发生泄漏。图1显示了地塞米松不同制剂单位面积累积透过量-时间曲线图(n=3)。具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明作进一步阐述，但不限制本发明。平均粒径用动态光散射原理的粒度测定仪(Nicomp388/ZetaPALS,PSS，美国)测定。首先按照下面表1中给出实施例1的组成，将500mg地塞米松、10g泊洛沙姆407溶解于100gGMO中，6(TC混合均匀制成油相；将700ml纯化水预热至60。C，制成7K相；将油相加入水相剪切乳化(T25basicIKA高剪切乳匀机，lOOOOrpm),进而用高压均质机均质(350bar压力下，均质5遍)，得到纳米立方液晶溶液，用0.45pm的微孔滤膜过滤。将5g玻璃酸钠溶解于200ml纯化水，搅拌使完全溶解，加入0.05g苯扎氯胺、18g甘油，搅拌均匀，加至上述纳米立方液晶溶液，搅拌均匀；最后用浓度为0.5M的盐酸溶液调节到pH7.2，用纯化水补至1000ml，即得。采用与实施例l相同的制备方法，由表l中给出的组成和工艺参数，制得实施例2~6的纳米立方液晶制剂。表1实施例1~6地塞米+>纳米立方液晶制剂组成和工艺参数实施例1实施例2实施例3实施例4实施例5实施例6地塞米松500mg10mg500mg400mg200mg1800mg脂质材料GMO講g植烷三醇150g卵磷脂，gGMO濯g卵磷脂100gGMO5gGMO300g乳化剂泊洛沙姆40710g泊洛沙姆40715g泊洛沙姆4078gPVA4gPVA20gPVA0.25g泊洛沙姆40760g增稠剂玻璃酸钠50g卡波姆10gHPMC100gMC80gPVP40g玻璃酸钠細g抑菌剂苯扎氯胺0.05g尼伯金甲酯0.2g苯扎氯胺0.5g三氯叔丁醇0.2g疏杉P汞0.3g苯扎溴胺O.lg渗透压调节剂甘油18g丙二醇20g甘油21g甘露醇45g甘油20g甘油16gpH调节剂HCL0.5MNaOH0.5M/NaOH0.5M三羟甲基氨基甲烷0.5M硼酸钠纯化水至1000ml至1000ml至1000ml至揚Oml至1000ml至1000mlpH7.27.07.46.86.07.69<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>PI:为粒径多分散系数，采用粒度测定仪测得。试验实施例1地塞米松纳米立方液晶制剂的眼用安全性试验1、试验材料与条件试验药物实施例1制备的地塞米松纳米立方液晶制剂，每次给药量为lOOpl;试验动物清洁级新西兰白兔4只，雌雄各半，体重2-3公斤(购自上海和平特种动植物繁殖场)；动物伺养环境室温20°C湿度30%-70%照明人工光线，12小时日光，12小时黑暗2、试^睑方法轻轻拉开家兔眼结膜囊，将100nl试验药物滴入右侧眼结膜嚢内，左侧给予生理盐水作为对照。给药后使眼晴被动闭合5~10秒(动作轻)，使药液与局部有充分接触。每日给药两次，连续给药一周。记录给药一周后6、24、48、72、96、120、144、168小时的眼的损伤情况，以Draize眼部刺激试验评分表示(依据《新药(西药)临床研究指导原则汇编(药理药理学毒理学)》眼刺激试验第208页)。观察时用荧光素钠检查角膜损害，用裂隙灯检查角膜透明度和虹膜紋理改变。3、试验结果各试验时间点家兔眼刺激分值见表2。表2各试验时间点家兔眼刺激分值时间6h24h48fi72h96h120h144h168hNol00100000No201000010No300010000No401000000总计02110010刺激分值00.50.250,25000.250根据Draize眼刺激性评价标准，0-3分为无刺激性，从表1可以看出，在各试验时间点的眼刺激分值为0~0.5,因此本发明制剂对家兔眼睛在各试验时间点均无刺激性。同时经裂隙灯和荧光素钠检查，角膜和虹膜均正常。由于该试验系统比人眼刺激反应敏感，因此刺激反应阴性可确定对人眼无刺激性。试验实施例2地塞米松纳米立方液晶制剂家兔角膜透过性评价1、试验材料与条件试验动物清洁级新西兰白兔3只，雌雄各半，体重2-3公斤(购自上海和平特种动植物繁殖场)；动物饲养环境室温20°C湿度30%-70%照明人工光线，12小时日光，12小时黑暗试验药物实施例1制备的地塞米松纳米立方液晶制剂；市售地11塞米松磷酸钠滴眼液(芜湖三益制药有限公司)2、试-睑方法家兔耳缘静脉注射空气针处死后，分离眼角膜，用37。C预热的林格溶液冲洗干净，放在改良后的Franz渗透扩散装置上(有效扩散面积0.785cm2)，角膜外侧向上，接收池内放2ml林格溶液，供给池内分别加入预计量的样品地塞米松磷酸钠滴眼液和地塞米+>纳米立方液晶制剂；于37。C恒温水浴开始实验，在设定时间点30、60、90、120、150、180、210、240、270、300、330、420min从接收池取样0.2ml用HPLC测定地塞米^^的浓度，同时补0.2ml37'C预热的林招^溶液，以保持扩散池内体积不变。3、试验结果各组制剂离体角膜透过结果如附图1。地塞米松纳米立方液晶制剂组药物的角膜透过量明显高于普通溶液剂组，提示纳米立方液晶能够发挥显著促进药物角膜透过的作用。试验实施例3地塞米松纳米立方液晶制剂初步稳定性评价1、加速试验按照实施例1所述的处方和方法制备的地塞米松纳米立方液晶制剂置玻璃西林瓶中，在温度为40°C±2°C，相对湿度为20±5%的环境中放置6个月，定时抽样检查外观、药物含量、包封率、pH值和粒径等指标。其试验结果见表3:表3加速试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>从表3可以看出，经相对湿度20%、温度40。C的加速试验条件下放置6个月，本发明地塞米松纳米立方液晶制剂的外观性状、药物含量、包封率、pH值及粒径等各项指标均未发生明显改变，质量稳定。2、室温留样试验按照实施例1所述的处方和方法制备的地塞米松纳米立方液晶制剂置玻璃西林瓶中，在温度为25。C士2。C,相对湿度为60±10%的环境中放置6个月，定时抽样检查外观、药物含量、包封率、pH值和粒径等指标。其试验结果见表4:表4室温留样长期试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>从表4可以看出，经相对湿度60%、温度25。C的接近实际贮存条件下放置6个月，本发明地塞米松纳米立方液晶制剂的外观性状、药物含量、包封率、pH值及粒径等各项指标均未发生明显改变，质量稳定。权利要求1、一种地塞米松眼用纳米立方液晶制剂，其特征在于，基于1000ml眼用纳米立方液晶制剂，由如下成分组成地塞米松10～1800mg脂质材料5～300g乳化剂0.25～60g增稠剂0～200g渗透压调节剂适量抑菌剂0.0～0.5gpH调节剂适量纯化水加至1000ml2、根据权利要求1所述的地塞米松眼用纳米立方液晶制剂，其特征在于，所述脂质材料为单油酸甘油酯、植烷三醇和卵磷脂中的一种或多种。3、根据权利要求1所述的地塞米松眼用纳米立方液晶制剂，其特征在于，所述乳化剂为泊洛沙姆407和聚乙烯醇中的一种或多种。4、根据权利要求1所述的地塞米松眼用纳米立方液晶制剂，其特征在于，所述的增稠剂为玻璃酸钠、卡波姆、泊洛沙姆、羟丙曱纤维素、曱基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮和聚乙烯醇中的一种或多种。5、根据权利要求1所述的地塞米松眼用纳米立方液晶制剂，其特征在于，所述渗透压调节剂为甘油、葡萄糖、甘露醇和丙二醇中的一种或多种。6、根据权利要求l所述的地塞米松眼用纳米立方液晶制剂，其特征在于，所述抑菌剂为季铵盐、硫代水杨酸的烷基汞盐、三氯叔丁醇或胍衍生物中的一种或多种。7、根据权利要求l所述的地塞米松眼用纳米立方液晶制剂，其特征在于，所述的pH调节剂为盐酸、氢氧化钠、磷酸盐、硼酸、硼酸盐、三羟曱基氨基曱烷、枸橼酸、枸橼酸盐和三乙醇胺中的一种或多种。8、权利要求1所述的地塞米松眼用纳米立方液晶制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤将脂质材料、乳化剂混合均匀，然后将地塞米松溶解在该混合物中，制成油相；取适量纯化水作为水相；将油相加入水相剪切乳化，进而用高压均质才几均质，得到纳米立方液晶制剂，所得制剂用0.45pm的微孔滤膜过滤。再加入含有适量渗透压调节剂、抑菌剂和增稠剂的水溶液，最后用pH调节剂调节pH值至68，用纯化水补至足量即得。9、根据权利要求8所述的地塞米松眼用纳米立方液晶制剂的制备方法，其特征在于高压均质压力大于等于200巴。全文摘要本发明涉及一种地塞米松眼用纳米立方液晶制剂及其制备方法，该地塞米松眼用纳米立方液晶制剂由脂质材料、乳化剂、增稠剂、渗透压调节剂、抑菌剂、pH调节剂和纯化水制备而成；其特点在于采用能够形成立方液晶形态的两亲性类脂，包括单油酸甘油酯(GMO)、植烷三醇和卵磷脂中的一种或多种作为脂质材料；适合应用于眼部的安全无刺激性表面活性剂，包括泊洛沙姆407和聚乙烯醇(PVA)中的一种或多种作为乳化剂。本发明实现了脂溶性药物地塞米松的眼部给药，具有舒适度高、无刺激性的优点；眼部给药后，能够促进药物透过角膜屏障，从而发挥提高眼部生物利用度的作用。文档编号A61K47/34GK101502485SQ20091011906公开日2009年8月12日申请日期2009年3月20日优先权日2009年3月20日发明者朱家壁,勇甘,莉甘申请人:中国药科大学