专利名称：含有多西他赛的纳米结晶制剂及其冻干剂的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种含有多西他赛的纳米结晶冻干剂及其制备方法，属于医药技术领域。
背景技术：
多西他赛(docetaxel)系从欧洲红豆杉(Taxusbaccata L)中提取的前体化合物 10-脱乙酰基浆果赤霉素III经半合成得到的紫杉类化合物。多西他赛的作用机制与紫杉 醇类似，抗肿瘤活性是紫杉醇的1. 3 12倍，对乳腺癌、非小细胞肺癌和卵巢癌等常见肿瘤 均有确切疗效。 多西他赛结构式为C43H53N014，分子量为807. 88，结构式如下
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多西他赛在水中的溶解度很低约为3iig/ml， 口服生物利用度差，不足8%，为提 高其生物利用度，目前临床上使用其注射剂，上市剂型为注射用多西他赛和多西他赛注射 液，该类制剂在静脉滴注前以5%葡萄糖注射液或0.9%氯化钠注射液溶解、稀释才能使 用。该类制剂中还有吐温80和乙醇等溶剂，易产生溶血和过敏性反应，需提前服用地塞米 松等药物防治，临床用药不方便，用药安全性低。因多西他赛在溶液中长时间放置容易被氧 化、水解，从而降低主药多西他赛的含量，所以注射剂的质量稳定性差。迄今，并无解决上述 问题的方案。 纳米结晶是一种纯药物纳米颗粒的亚微细粒胶态分散体，以表面活性剂为增溶 剂。与脂质系统相比，该技术可成功地将既难溶于水又难溶于油的药物制成制剂，克服了制 备其它制剂需先溶解药物的缺点，通过简单的工艺和处方提高难溶性药物的生物利用度， 同时避免大量附加成分对患者的毒副作用。制剂制备时保持了最佳结晶状态且具有足够小 的药物粒度。另外此剂型的微粒特性可改变药物静脉注射的药代动力学特征，有高效低毒 的效果；粒子变小促进溶出，能解决许多与口服生物利用度低相关的问题；药物呈固态可 使其化学稳定；小粒子沉降慢，使其物理稳定。冷冻干燥后制成冻干制剂，进一步提高了制 剂的稳定性。 高压乳匀法制备纳米结晶制剂与此法制备乳剂相比，由于无需控制温度，无需先 将药物溶于油相中，无需考虑油相和水相的比例，制备过程更简单；制备过程中主要影响因素有表面活性剂和药物的浓度，影响因素少。制备过程简单，条件易于控制，重现性好的优势更利于高压乳匀法制备纳米结晶制剂进行工业化大规模生产。
发明内容
针对上述现有技术，本发明提供了一种含有多西他赛的纳米结晶冻干剂，其提高了多西他赛在制剂中的含量，解决了多西他赛在水中的溶解度低的问题，且不含吐温80，增加了该药的安全性。 本发明是通过以下技术方案实现的 —种含有多西他赛的纳米结晶制剂及其冻干剂的制备方法，包括如下步骤 (1)将表面活性剂溶解于水溶液中形成溶液A ; (2)将多西他赛分散于步骤(1)所得的溶液A中，形成混悬液B ; (3)将混悬液B高速剪切1 3分钟，形成初乳C ; (4)将初乳C采用高压乳匀法，形成多西他赛纳米结晶制剂； (5)向上述纳米结晶制剂中加入0. 5 20% (单位mg/ml)的冻干保护剂，过滤
除菌； (6)冷冻干燥去除水分，制备干燥的多西他赛纳米结晶冻干剂。 所述表面活性剂为大豆磷脂、卵磷脂、泊洛沙姆、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、羟丙基甲
基纤维素(HPMC)、甲基纤维素(MC)、胆酸钠、牛黄胆酸钠或/和聚乙二醇，优选大豆磷脂、卵
磷脂或泊洛沙姆，优选重量比为io : i ioo : i。 所述步骤(1)中的水溶液为双蒸水、0.9%氯化钠水溶液、5%葡萄糖水溶液、含5%葡萄糖和0. 9%氯化钠的注射用水、含5%葡萄糖的林格氏注射液或磷酸盐缓冲液中的任一种。所述步骤(3)中高速剪切转速为20000r/min。 所述步骤(4)中采用高压乳匀法时，分别在200bar循环10次，500bar循环10次，1000bar循环20次，此为经大量实验摸索出的最佳工艺，若循环压力太小或循环次数不够将不能制成结晶制剂或达到所要求的粒径。 所述步骤(5)中冻干保护剂为甘露醇、山梨醇、蔗糖、葡萄糖、乳糖、果糖、海藻糖、麦芽糖、右旋糖酐、氨基酸、氨基酸盐、磷酸盐或聚乙二醇中的任一种，或它们的混合物。
上述制备方法制备得到的纳米结晶制剂及其冻干剂。 通过本发明制备工艺制备的多西他赛纳米结晶冻干剂具有安全性高、稳定性好、毒副作用低、疗效可靠等优点。 本发明的最大优点是由于此制剂制备工艺简单，可通过滤膜过滤除菌因此可以实现工业化生产。 为了提高多西他赛的生物利用度，降低毒性作用，本发明制备过程中不加入有机溶剂或聚氧乙烯蓖麻油而选择适当的表面活性剂及浓度，在适当的压力下循环数次即可形成多西他赛纳米结晶，由于本发明工艺条件的严格筛选，所得到的纳米结晶粒径较小，经微孔滤膜过滤后结晶未被破坏。取多西他赛纳米结晶混悬液适量，滴加于铜网上，用2%磷钨酸进行负染，自然干燥后在透射电镜下(TEM)下观察，粒径在50 200nm之间，如图1、图2所示。
图1为实施例1制备的纳米结晶冻干剂的透射电镜照片；(X5800) 图2为实施例2制备的纳米结晶冻干剂的粒径分布图(平均粒径67. 8nm)。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明作详细的阐述，但不限于这些具体记载的实施例。
实施例1 : 精密称取大豆磷脂300mg，加至60ml蒸馏水中溶解构成分散介质(溶液A)。加入30mg多西他赛，超声分散均匀得混悬液B。继续采用高速剪切机20000r/min高速剪切1 3min，制得初乳C。然后将初乳C采用高压乳匀法，分别在200bar循环10次，500bar循环10次，1000bar循环20次，制得多西他赛纳米结晶制剂。 以上制备的混悬液加入3. Og甘露醇后装入西林瓶中，置冰箱中_801:预冻2处，然后放入冷冻干燥机中-40°C、0. 5mbar 48h，得白色疏松状多西他赛纳米结晶冻干制剂，该冻干制剂加入2mL蒸馏水经振摇可于lmin内完全复溶。 取多西他赛纳米结晶混悬液适量，滴加于铜网上，用2%磷钨酸进行负染，自然干燥后在透射电镜下(TEM)下观察，如图l所示，由于本发明工艺条件的严格筛选，所得到的纳米结晶粒径较小，经微孔滤膜过滤后结晶未被破坏。
制得纳米结晶制剂平均粒径133. 5nm。
实施例2 : 精密称取大豆磷脂600mg，加至60ml蒸馏水中溶解构成分散介质(溶液A)。加入30mg多西他赛，超声分散均匀得混悬液B。继续采用高速剪切机20000r/min高速剪切1 3min，制得初乳C。然后将初乳C采用高压乳匀法，分别在200bar循环10次，500bar循环20次，1000bar循环20次，制得多西他赛纳米结晶制剂。 以上制备的混悬液加入3. Og甘露醇后装入西林瓶中，置冰箱中_801:预冻2处，然后放入冷冻干燥机中-40°C、0. 5mbar 48h，得白色疏松状多西他赛纳米结晶冻干制剂，该冻干制剂加入2mL蒸馏水经振摇可于lmin内完全复溶。
制得纳米结晶制剂平均粒径67. 8nm。
实施例3 : 精密称取大豆磷脂900mg，加至60ml蒸馏水中溶解构成分散介质(溶液A)。加入30mg多西他赛，超声分散均匀得混悬液B。继续采用高速剪切机20000r/min高速剪切1 3min，制得初乳C。然后将初乳C采用高压乳匀法，分别在200bar循环5次，500bar循环10次，1000bar循环20次，制得多西他赛纳米结晶制剂。 以上制备的混悬液加入3. Og甘露醇后装入西林瓶中，置冰箱中_801:预冻2处，然后放入冷冻干燥机中-40°C、0. 5mbar 48h，得白色疏松状多西他赛纳米结晶冻干制剂，该冻干制剂加入2mL蒸馏水经振摇可于lmin内完全复溶。
制得纳米结晶制剂平均粒径63. 2nm。
实施例4 : 精密称取大豆磷脂1200mg，加至80ml蒸馏水中溶解构成分散介质(溶液A)。加
5入40mg多西他赛，超声分散均匀得混悬液B。继续采用高速剪切机20000r/min高速剪切1 3min，制得初乳C。然后将初乳C采用高压乳匀法，分别在200bar循环5次，500bar循环10次，lOOObar循环20次，制得多西他赛纳米结晶制剂。 以上制备的混悬液加入1. 6g蔗糖后装入西林瓶中，置冰箱中_801:预冻2处，然后放入冷冻干燥机中-40°C、0. 5mbar 48h，得白色疏松状多西他赛纳米结晶冻干制剂，该冻干制剂加入2mL蒸馏水经振摇可于lmin内完全复溶。
制得纳米结晶制剂平均粒径68. Onm。
实施例5 : 精密称取大豆磷脂1600mg，加至80ml蒸馏水中溶解构成分散介质(溶液A)。加入40mg多西他赛，超声分散均匀得混悬液B。继续采用高速剪切机20000r/min高速剪切1 3min，制得初乳C。然后将初乳C采用高压乳匀法，分别在200bar循环5次，500bar循环10次，1000bar循环20次，制得多西他赛纳米结晶制剂。 以上制备的混悬液加入3. 2g乳糖后装入西林瓶中，置冰箱中_801:预冻2处，然后放入冷冻干燥机中-40°C、0. 5mbar 48h，得白色疏松状多西他赛纳米结晶冻干制剂，该冻干制剂加入2mL蒸馏水经振摇可于lmin内完全复溶。
制得纳米结晶制剂平均粒径97. lnm。
实施例6 : 精密称取大豆磷脂1800mg，加至60ml蒸馏水中溶解构成分散介质(溶液A)。加入40mg多西他赛，超声分散均匀得混悬液B。继续采用高速剪切机20000r/min高速剪切1 3min，制得初乳C。然后将初乳C采用高压乳匀法，分别在200bar循环10次，500bar循环10次，1000bar循环20次，制得多西他赛纳米结晶制剂。 以上制备的混悬液加入3. Og甘露醇后装入西林瓶中，置冰箱中-8(TC预冻24h，然后放入冷冻干燥机中-40°C、0. 5mbar 48h，得白色疏松状多西他赛纳米结晶冻干制剂，该冻干制剂加入2mL蒸馏水经振摇可于lmin内完全复溶。
制得纳米结晶制剂平均粒径98. 7nm。
实施例7 : 精密称取大豆磷脂2400mg，加至60ml蒸馏水中溶解构成分散介质(溶液A)。加入40mg多西他赛，超声分散均匀得混悬液B。继续采用高速剪切机20000r/min高速剪切1 3min，制得初乳C。然后将初乳C采用高压乳匀法，分别在200bar循环10次，500bar循环10次，1000bar循环20次，制得多西他赛纳米结晶制剂。 以上制备的混悬液加入3. 2g乳糖后装入西林瓶中，置冰箱中-8(TC预冻24h，然后放入冷冻干燥机中-40°C、0. 5mbar 48h，得白色疏松状多西他赛纳米结晶冻干制剂，该冻干制剂加入2mL蒸馏水经振摇可于lmin内完全复溶。
制得纳米结晶制剂平均粒径100. 5nm。
实施例8 : 精密称取大豆磷脂3000mg，加至60ml蒸馏水中溶解构成分散介质(溶液A)。加入40mg多西他赛，超声分散均匀得混悬液B。继续采用高速剪切机20000r/min高速剪切1 3min，制得初乳C。然后将初乳C采用高压乳匀法，分别在200bar循环10次，500bar循环10次，1000bar循环20次，制得多西他赛纳米结晶制剂。
以上制备的混悬液加入3. 2g乳糖后装入西林瓶中，置冰箱中_801:预冻2处，然后放入冷冻干燥机中-40°C、0. 5mbar 48h，得白色疏松状多西他赛纳米结晶冻干制剂，该冻干制剂加入2mL蒸馏水经振摇可于lmin内完全复溶。
制得纳米结晶制剂平均粒径124. 5nm。
实施例10 : 精密称取大豆磷脂1000mg，加至100ml蒸馏水中溶解构成分散介质(溶液A)。加入80mg多西他赛，超声分散均匀得混悬液B。继续采用高速剪切机20000r/min高速剪切1 3min，制得初乳C。然后将初乳C采用高压乳匀法，分别在200bar循环10次，500bar循环10次，1000bar循环20次，制得多西他赛纳米结晶制剂。 以上制备的混悬液加入5g甘露醇后装入西林瓶中，置冰箱中_801:预冻2处，然后放入冷冻干燥机中-40°C、0. 5mbar 48h，得白色疏松状多西他赛纳米结晶冻干制剂，该冻干制剂加入2mL蒸馏水经振摇可于lmin内完全复溶。
制得纳米结晶制剂平均粒径146. 5nm。
实施例11 : 精密称取泊洛沙姆(F68) 200mg，加至80ml蒸馏水中溶解构成分散介质(溶液A)。加入40mg多西他赛，超声分散均匀得混悬液B。继续采用高速剪切机20000r/min高速剪切1 3min，制得初乳C。然后将初乳C采用高压乳匀法，分别在200bar循环10次，500bar循环10次，1000bar循环20次，制得多西他赛纳米结晶制剂。 以上制备的混悬液加入4. Og甘露醇后装入西林瓶中，置冰箱中-80°〇预冻2处，然后放入冷冻干燥机中-40°C、0. 5mbar 48h，得白色疏松状多西他赛纳米结晶冻干制剂，该冻干制剂加入2mL蒸馏水经振摇可于lmin内完全复溶。
权利要求
一种含有多西他赛的纳米结晶制剂及其冻干剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤(1)将表面活性剂溶解于水溶液中形成溶液A；(2)将多西他赛分散于步骤(1)所得的溶液A中，形成混悬液B；(3)将混悬液B高速剪切1～3分钟，形成初乳C；(4)将初乳C采用高压乳匀法，形成多西他赛纳米结晶制剂；(5)向上述纳米结晶制剂中加入0.5～20％的冻干保护剂，过滤除菌；(6)冷冻干燥去除水分，制备干燥的多西他赛纳米结晶冻干剂。
2. 根据权利要求1所述的含有多西他赛的纳米结晶制剂及其冻干剂的制备方法，其特征在于所述步骤(1)中，表面活性剂为大豆磷脂、卵磷脂、泊洛沙姆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、胆酸钠、牛黄胆酸钠或/和聚乙二醇。
3. 根据权利要求1所述的含有多西他赛的纳米结晶制剂及其冻干剂的制备方法，其特征在于所述步骤(1)中，表面活性剂为大豆磷脂或卵磷脂或泊洛沙姆，表面活性剂与多西他赛的重量比为io : i ioo : i。
4. 根据权利要求1所述的含有多西他赛的纳米结晶制剂及其冻干剂的制备方法，其特 征在于所述步骤(1)中的水溶液为双蒸水、0.9%氯化钠水溶液、5%葡萄糖水溶液、含5% 葡萄糖和0. 9%氯化钠的注射用水、含5%葡萄糖的林格氏注射液或磷酸盐缓冲液中的任 一种。
5. 根据权利要求1所述的含有多西他赛的纳米结晶制剂及其冻干剂的制备方法，其特 征在于所述步骤(3)中高速剪切转速为20000r/min。
6. 根据权利要求1所述的含有多西他赛的纳米结晶制剂及其冻干剂的制备方法，其特 征在于所述步骤(4)中采用高压乳匀法时，分别在200bar循环10次，500bar循环10次， 1000bar循环20次。
7. 根据权利要求1所述的含有多西他赛的纳米结晶制剂及其冻干剂的制备方法，其特 征在于所述步骤(5)中冻干保护剂为甘露醇、山梨醇、蔗糖、葡萄糖、乳糖、果糖、海藻糖、 麦芽糖、右旋糖酐、氨基酸、氨基酸盐、磷酸盐或聚乙二醇中的任一种，或它们的混合物。
8. 根据权利要求1 7任一项所述的含有多西他赛的纳米结晶制剂及其冻干剂的制备 方法所制备得到的纳米结晶制剂及其冻干剂。
全文摘要
本发明公开了一种含有多西他赛的纳米结晶制剂及其冻干剂的制备方法，包括如下步骤(1)将表面活性剂溶解于水溶液中形成溶液A；(2)将多西他赛分散于步骤(1)所得的溶液A中，形成混悬液B；(3)将混悬液B高速剪切1～3分钟，形成初乳C；(4)将初乳C采用高压乳匀法，形成多西他赛纳米结晶制剂；(5)向上述纳米结晶制剂中加入0.5～20％(单位mg/ml)的冻干保护剂，过滤除菌；(6)冷冻干燥去除水分，制备干燥的多西他赛纳米结晶冻干剂。通过本发明制备工艺制备的多西他赛纳米结晶冻干剂具有安全性高、稳定性好、毒副作用低、疗效可靠等优点。
文档编号A61K9/10GK101773480SQ20101001148
公开日2010年7月14日 申请日期2010年1月19日 优先权日2010年1月19日
发明者孙晓利, 张娜, 王丽丽, 黄桂华 申请人:山东大学