专利名称：一种胸腺法新原位凝胶制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及药物制剂领域，特别涉及一种胸腺法新原位凝胶制剂及其制备方法。
背景技术：
乙型病毒性肝炎，简称乙肝，是一种由乙型肝炎病毒感染机体后所引起的疾病，分为急性乙型肝炎和慢性乙型肝炎两种类型。其中，慢性乙型肝炎是指病毒检测为阳性、病程超过半年或发病日期不明确而临床有慢性肝炎表现的一种乙型肝炎类型，临床表现为乏力、畏食、恶心、腹胀、肝区疼痛等症状，肝大，质地呈中度硬度，有轻压痛，病情较重者可伴有慢性肝病面容、蜘蛛痣、肝掌、脾大，肝功能可时有异常或持续异常，最终导致肝衰竭、肝硬化或原发性肝癌等。据世界卫生组织统计，全世界慢性乙型肝炎病毒感染者约有3亿，其中大部分在亚洲地区。我国人群中慢性乙型肝炎病毒携带者约占10% 15%，慢性乙型肝炎患者中每年发生肝硬化和肝细胞癌者分别占2%和1%，因此治疗慢性乙型肝炎的药物具有广泛的市场需求。胸腺法新(Thymosin)是一种治疗慢性乙型肝炎的药物，它是由胸腺分泌的一种重要的T淋巴细胞调节因子，可通过刺激外周血液淋巴细胞丝裂原来促进T淋巴细胞的成熟，增加抗原或丝裂原激活后T细胞分泌的干扰素a、干扰素Y以及白介素2、白介素3等淋巴因子水平，同时增加T细胞表面淋巴因子受体水平；可通过对CD4细胞的激活，增强异体和自体的人类混合淋巴细胞反应。临床研究表明胸腺法新作为一种免疫调节剂在治疗慢性乙型肝炎方面具有良好的疗效，临床应用前景极为光明。目前，胸腺法新只有普通的注射剂型，在每次注射后出现血药浓度的峰谷现象，极易引起机体出现不良反应，且药物作用时间短；另外，临床应用上推荐每周注射2次，连续给药6个月，长期注射给患者带来了很大的痛苦和不便，致使患者的依从性很差，基于胸腺法新普通注射剂存在的这两个问题，临床上急需一种长效且具有缓释作用的胸腺法新制剂以减轻患者的痛苦，提高患者的依从性`。因此，为临床提供一种胸腺法新的长效缓释制剂具有重要的现实意义。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了一种胸腺法新原位凝胶制剂及其制备方法。该胸腺法新原位凝胶制剂具有缓释作用，避免了血药浓度的峰谷现象，药物作用时间长，减少了用药次数，极大地减轻了患者的痛苦，提高了患者的依从性，且对皮肤和结缔组织无刺激性；该胸腺法新原位凝胶制剂的制备方法简单，利于规模化生产，且载药能力高，成本低。为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案:本发明提供了一种胸腺法新原位凝胶制剂，由胸腺法新、原位凝胶材料和有机溶剂组成；以g/g/mL计，胸腺法新、原位凝胶材料与有机溶剂的质量体积比为(2 4.5):(15 35): (100 150)。
原位凝胶制剂是高分子材料以溶液或半固体状态给药后，在给药部位对外界刺激(如温度、pH、离子种类和浓度、光和特异化学物质等)发生响应，发生分散或构象的可逆转化，从而形成的半固体或固体制剂。原位凝胶制剂在注射前呈溶液态，在注射后能够流入并填充于组织间隙，注射后能在体内发生溶液凝胶相变，形成凝胶聚合物，药物随着凝胶聚合物的不断降解、溶蚀而缓慢释放，从而达到缓释的效果，延长了释药周期，降低了药物不良反应。作为优选，原位凝胶材料为温度敏感型原位凝胶材料、pH敏感型原位凝胶材料、离子强度敏感型原位凝胶材料或可生物降解原位凝胶材料中的一种或两者以上的混合物。在本发明提供的一些实施例中，原位凝胶材料为可生物降解原位凝胶材料。在本发明提供的另一些实施例中，原位凝胶材料为温度敏感型原位凝胶材料、pH敏感型原位凝胶材料或离子强度敏感型原位凝胶材料中的一种与可生物降解原位凝胶材料的混合物。作为优选，可生物降解原位凝胶材料选自PEO-PPO、PLA、PLGA、PLA-PEG、PLGA-PEG、PNIPA 或 SAIB。优选地，可生物降解原位凝胶材料选自PLA或PLGA。作为优选，PLGA的数均分子量为10000 40000D。作为优选，PLGA中乳酸与羟基乙酸的摩尔比为75: 25或50: 50。作为优选，温度敏感型原位凝胶材料选自泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、甲基纤维素、羟丙甲纤维素、壳聚糖衍生物、PLA-PEG、PLGA-PEG、羟乙基纤维素、聚己内酯-聚乙二醇嵌段共聚物或PNIPA。优选地，温度敏感型原位凝胶材料选自泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、甲基纤维素、PLA-PEG, PLGA-PEG、聚己内酯-聚乙二醇嵌段共聚物或PNIPA。更优选地，温度敏感型原位凝胶材料选自泊洛沙姆407、泊洛沙姆188或甲基纤维素。作为优选，pH敏感型原位凝胶材料选自醋酸纤维素酞酸酯、HPMCP、卡波姆或壳聚糖。优选地，pH敏感型原位凝胶材料选自醋酸纤维素酞酸酯或卡波姆。作为优选，离子强度敏感型原位凝胶材料选自海藻酸盐或结冷胶。作为优选，有机溶剂选自NMP、甘油三醋酸酯、乳酸乙酯、甘油缩甲醛、苯甲酸苄酯、二甲亚砜、丙酮、乙醇、2-砒咯烷酮或碳酸丙烯酯。优选地，有机溶剂选自NMP、乳酸乙酯、甘油缩甲醛、乙醇或2-吡咯烷酮。更优选地，有机溶剂为NMP。作为优选，胸腺法新原位凝胶制剂的给药方式为肌内注射。本发明还提供了一种胸腺法新原位凝胶制剂的制备方法，包括如下步骤:将原位凝胶材料溶于有机溶剂中，获得聚合物溶液；将胸腺法新与聚合物溶液混合，在温度为30°C、转速为100 150rpm的条件下搅拌20 25min，经灭菌，即得。本发明提供了 一种胸腺法新原位凝胶制剂及其制备方法。该胸腺法新原位凝胶制剂由胸腺法新、原位凝胶材料和有机溶剂组成；以g/g/mL计，胸腺法新、原位凝胶材料与有机溶剂的质量体积比为(2 4.5): (15 35): (100 150)。本发明通过实验测定了胸腺法新原位凝胶制剂于ld、3d、5d、7d、14d、21d、28d时的释放度，结果表明该胸腺法新原位凝胶制剂具有缓释作用，避免了血药浓度的峰谷现象，药物作用时间达28d以上，只需每月用药I次，减少了用药次数，极大地减轻了患者的痛苦，提高了患者的依从性；通过将本发明制得的胸腺法新原位凝胶注射入试验小鼠体内30天后观察病理切片，与空白对照组相比，试验组小鼠的皮肤和结缔组织结构清晰，薄膜上皮呈柱状，纤毛存在，未见慢性炎症细胞浸润，结果表明该胸腺法新原位凝胶制剂对皮肤和结缔组织无刺激性；该胸腺法新原位凝胶制剂的制备方法包括:将原位凝胶材料溶于有机溶剂中，获得聚合物溶液；将胸腺法新与聚合物溶液混合，在温度为30°C、转速为100 150rpm的条件下搅拌20 25min,经灭菌，即得，制备方法简单，利于规模化生产，且载药能力高，成本较低。由此可见，该胸腺法新原位凝胶制剂具有缓释作用，避免了血药浓度的峰谷现象，药物作用时间长，减少了用药次数，极大地减轻了患者的痛苦，提高了患者的依从性；该胸腺法新原位凝胶制剂的制备方法简单，利于规模化生产，且载药能力高，成本低。
图1示实施例17中由实施例1提供的胸腺法新原位凝胶制剂的体外累积释放曲线图；图2示实施例17中由实施例2提供的胸腺法新原位凝胶制剂的体外累积释放曲线图；图3不实施例18提供的病理切片图；其中，图3 (a)不空白对照组的病理切片图，图3 (b)示实施例1提供胸腺法新原位凝胶制剂肌肉注射入实验小鼠体内30天后的病理切片图。
具体实施例方式本发明公开了一种胸腺法新原位凝胶制剂及其制备方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。说明书和权利要求书中所使用的缩写具体含义如下:缩写及英文含义PEO-PPO聚氧乙烯-聚氧丙稀嵌段共聚物PLA聚乳酸PLGA聚乳酸羟基乙酸共聚物PLA-PEG聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物PLGA-PEG聚乳酸羟基乙酸-聚乙二醇嵌段共聚物PNIPA聚N-异丙基丙烯酰胺SAIB醋酸-异丁酸蔗糖醋HPMCP羟丙甲纤维素酞酸酯
NMPN-甲基毗咯烷酮本发明提供的胸腺法新原位凝胶制剂及其制备方法中所用原料药及试剂均可由市场购得。下面结合实施例，进一步阐述本发明:实施例1胸腺法新原位凝胶制剂的制备称取25g PLGA (Mn=10000, LA:GA=75:25)，加入 IOOmL NMP 溶剂中，混匀，配制成聚合物溶液，然后加入胸腺法新原料药3.5g，恒温加热搅拌(温度30°C，lOOrpm) 20min，形成半透明载药溶胶体系，经过Y射线辐射灭菌，即得。实施例2胸腺法新原位凝胶制剂的制备称取30g PLGA (Mn=15000, LA:GA=50:50)，加入 IOOmL NMP 溶剂中，混匀，配制成聚合物溶液，然后加入胸腺法新原料药3.5g，恒温加热搅拌(温度30°C，120rpm) 20min，形成半透明载药溶胶体系，经过Y射线辐射灭菌，即得。实施例3胸腺法新原位凝胶制剂的制备称取25g PLGA (Mn=20000，LA:GA=50: 50)和 4g 泊洛沙姆 407，溶于 IlOmL NMP 中，混勻，配制成聚合物溶液，然后加入3g胸腺法新,恒温加热搅拌(温度30°C, 100rpm)25min,形成半透明载药溶胶体系，经过Y射线辐射灭菌，即得。实施例4胸 腺法新原位凝胶制剂的制备称取20g PLGA (Mn=25000，LA:GA=50: 50)和 5g 泊洛沙姆 407，溶于 130mL NMP 中，混勻，配制成聚合物溶液，然后加入3g胸腺法新,恒温加热搅拌(温度30°C, 100rpm)20min,形成半透明载药溶胶体系，经过Y射线辐射灭菌，即得。实施例5胸腺法新原位凝胶制剂的制备称取15g PLGA (Mn=40000，LA:GA=50:50)，加入 120mL NMP 溶剂溶解后，加入胸腺法新原料药4g,恒温加热搅拌(温度30°C, 150rpm) 25min,形成半透明载药溶胶体系，经过Y射线辐射灭菌，即得。实施例6胸腺法新原位凝胶制剂的制备称取16g ΡΕ0-ΡΡ0,加入140mL甘油三醋酸酯溶剂溶解后，加入胸腺法新原料药2g,恒温加热搅拌(温度30°C, IlOrpm) 21min,形成半透明载药溶胶体系,经过、射线福射灭菌，即得。实施例7胸腺法新原位凝胶制剂的制备称取18g PLA，加入150mL乳酸乙酯溶剂溶解后，加入胸腺法新原料药2.5g，恒温加热搅拌(温度30°C, 120rpm) 22min,形成半透明载药溶胶体系，经过Y射线福射灭菌，即得。实施例8胸腺法新原位凝胶制剂的制备称取20g PNIPA，加入105mL甘油缩甲醛溶剂溶解后，加入胸腺法新原料药3g，恒温加热搅拌(温度30°C, 130rpm) 23min,形成半透明载药溶胶体系,经过Y射线福射灭菌，即得。实施例9胸腺法新原位凝胶制剂的制备称取22g泊洛沙姆188，加入115mL苯甲酸苄酯溶解后，加入胸腺法新原料药
3.5g,恒温加热搅拌(温度30°C, 140rpm) 24min,形成半透明载药溶胶体系，经过、射线福射灭菌，即得。实施例10胸腺法新原位凝胶制剂的制备称取24g甲基纤维素，加入125mL 二甲亚砜溶解后，加入胸腺法新原料药4g，恒温加热搅拌(温度30°C, 150rpm) 20min,形成半透明载药溶胶体系,经过Y射线福射灭菌，即得。实施例11胸腺法新原位凝胶制剂的制备称取20g壳聚糖衍生物和8g PLA,加入135mL丙酮溶解后，加入胸腺法新原料药
4.5g,恒温加热搅拌(温度30°C, 105rpm) 21min,形成半透明载药溶胶体系，经过Y射线福射灭菌，即得。实施例12胸腺法新原位凝胶制剂的制备称取30g醋酸纤维·素酞酸酯，加入145mL乙醇溶解后，加入胸腺法新原料药2.4g，恒温加热搅拌(温度30°C, 115rpm) 22min,形成半透明载药溶胶体系，经过Y射线福射灭菌，即得。实施例13胸腺法新原位凝胶制剂的制备称取30g卡波姆和3g PLGA,加入100mL2_砒咯烷酮溶解后，加入胸腺法新原料药
2.8g,恒温加热搅拌(温度30°C, 125rpm) 23min,形成半透明载药溶胶体系，经过Y射线福射灭菌，即得。实施例14胸腺法新原位凝胶制剂的制备称取35g海藻酸盐，加入120mL碳酸丙烯酯溶解后，加入胸腺法新原料药3.2g，恒温加热搅拌(温度30°C, 135rpm) 24min,形成半透明载药溶胶体系，经过、射线福射灭菌，即得。实施例15胸腺法新原位凝胶制剂的制备称取30g结冷胶和4g PLA,加入150mL乳酸乙酯溶解后，加入胸腺法新原料药
3.6g,恒温加热搅拌(温度30°C, 145rpm) 25min,形成半透明载药溶胶体系,经过Y射线福射灭菌，即得。实施例16胸腺法新原位凝胶制剂中胸腺法新含量的测定取实施例1 3制得的胸腺法新原位凝胶制剂，按照药物含量测定法测定药物含量。具体方法为:精密称取装量项下混合均匀的内容物约25mg，置IOOmL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另精密称取胸腺法新对照品50mg，置50mL量瓶中，加流动相溶解并定量稀释至刻度，摇匀。精密量取5mL，置50mL量瓶中，用流动相定量稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。精密量取对照品溶液及供试品溶液各20 μ L，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，获得药物的标示含量，测定结果见表I。表1胸腺法新的含量测定结果
权利要求
1.一种胸腺法新原位凝胶制剂，其特征在于，由胸腺法新、原位凝胶材料和有机溶剂组成； 以g/g/mL计，所述胸腺法新、所述原位凝胶材料与所述有机溶剂的质量体积比为(2 4.5): (15 35): (100 150)。
2.根据权利要求1所述的胸腺法新原位凝胶制剂，其特征在于，所述原位凝胶材料为温度敏感型原位凝胶材料、PH敏感型原位凝胶材料、离子强度敏感型原位凝胶材料或可生物降解原位凝胶材料中的一种或两者以上的混合物。
3.根据权利要求2所述的胸腺法新原位凝胶制剂，其特征在于，所述可生物降解原位凝胶材料选自 PEO-PPO、PLA、PLGA, PLA-PEG, PLGA-PEG, PNIPA 或 SAIB。
4.根据权利要求2所述的胸腺法新原位凝胶制剂，其特征在于，所述可生物降解原位凝胶材料选自PLA或PLGA。
5.根据权利要求2所述的胸腺法新原位凝胶制剂，其特征在于，所述温度敏感型原位凝胶材料选自泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、甲基纤维素、羟丙甲纤维素、壳聚糖衍生物、PLA-PEG、PLGA-PEG、羟乙基纤维素、聚己内酯-聚乙二醇嵌段共聚物或PNIPA。
6.根据权利要求2所述的胸腺法新原位凝胶制剂，其特征在于，所述pH敏感型原位凝胶材料选自醋酸纤维素酞酸酯、HPMCP、卡波姆或壳聚糖。
7.根据权利要求2所述的胸腺法新原位凝胶制剂，其特征在于，所述离子强度敏感型原位凝胶材料选自海藻酸盐或结冷胶。
8.根据权利要求1所述的胸腺法新原位凝胶制剂，其特征在于，所述有机溶剂选自NMP、甘油三醋酸酯、乳酸乙酯、甘油缩甲醛、苯甲酸苄酯、二甲亚砜、丙酮、乙醇、2-砒咯烷酮或碳酸丙烯酯。`
9.根据权利要求1所述的胸腺法新原位凝胶制剂，其特征在于，所述胸腺法新原位凝胶制剂的给药方式为肌内注射。
10.一种如权利要求1 9任一项所述的胸腺法新原位凝胶制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤: 将所述原位凝胶材料溶于所述有机溶剂中，获得聚合物溶液； 将胸腺法新与所述聚合物溶液混合，在温度为30°C、转速为100 150rpm的条件下搅拌20 25min，经灭菌，即得。
全文摘要
本发明涉及药物制剂领域，特别涉及一种胸腺法新原位凝胶制剂及其制备方法。该胸腺法新原位凝胶制剂，由胸腺法新、原位凝胶材料和有机溶剂组成；以g/g/mL计，胸腺法新、原位凝胶材料与有机溶剂的质量体积比为(2～4.5)︰(15～35)︰(100～150)。本发明提供的胸腺法新原位凝胶制剂具有缓释作用，避免了血药浓度的峰谷现象，药物作用时间长，减少了用药次数，极大地减轻了患者的痛苦，提高了患者的依从性，且对皮肤和结缔组织无刺激性；该胸腺法新原位凝胶制剂的制备方法简单，利于规模化生产，且载药能力高，成本低。
文档编号A61P1/16GK103156806SQ20131010243
公开日2013年6月19日 申请日期2013年3月27日 优先权日2013年3月27日
发明者颜携国, 陶安进, 马亚平, 袁建成 申请人:深圳翰宇药业股份有限公司