通过市购获得的常规产品。
[0037]在本发明的一个方面，本发明提供一种用于皮肤愈合和毛囊再生的药物组合物。根据本发明的实施例，该药物组合物包括:自组装多肽水凝胶，所述自组装多肽水凝胶是由RADA16-1和PRG的至少一种形成的；以及皮肤细胞，所述皮肤细胞设置于所述自组装多肽水凝胶内部。发明人发现，利用本发明的该药物组合物，能够有效促进皮肤愈合和毛囊再生。另外，本发明的药物组合物中的自组装多肽水凝胶全人工合成，不传播动物源性疾病，可根据不同组织的特点和用途灵活添加不同分子的功能片段，使之更具有组织特异性，有利于组织特异性干细胞分化微环境的构建，且材料来源更加稳定，质量标准易于控制。
[0038]根据本发明的实施例，所述自组装多肽水凝胶可以由RADA16-1和PRG的一种单独形成，也可以由RADA16-1和PRG的混合物形成，当所述水凝胶由RADA16-1和PRG共同形成时，在所述自组装多肽水凝胶中，所述RADA16-1和所述PRG的质量比为1:1。由此，自组装多肽水凝胶的性能较佳，能够有效支持皮肤细胞的生长和增殖。
[0039]根据本发明的实施例，在所述自组装多肽水凝胶中，所述皮肤细胞的含量不受特别限制，本领域技术人员可以根据实际情况灵活选择。根据本发明的一些实施例，皮肤细胞的含量可以为14-1O8个/mL。由此，本发明的药物组合物促进皮肤愈合和毛囊再生的效果较佳。
[0040]根据本发明的实施例，所述皮肤细胞的种类不受特别限制。根据本发明的一些实施例，皮肤细胞可以为选自真皮细胞和表皮细胞的至少一种。由此，能够有效促进皮肤愈合和毛囊再生。
[0041 ] 根据本发明的实施例，所述真皮细胞的种类不受特别限制。根据本发明的一些实施例，真皮细胞可以为新分离的真皮细胞或培养0-30代的真皮干细胞。由此，所述真皮细胞在自组装多肽水凝胶中的生长状态良好，能够有效增殖，进而能够有效发挥促进皮肤愈合和毛囊再生的功效。
[0042]根据本发明的实施例，所述表皮细胞的种类不受特别限制。根据本发明的一些实施例，表皮细胞可以为新分离的表皮细胞或培养0-30代的表皮干细胞。由此，所述表皮细胞在自组装多肽水凝胶中的生长状态良好，能够有效增殖，进而能够有效发挥促进皮肤愈合和毛囊再生的功效。
[0043]根据本发明的实施例，所述药物组合物还可以进一步包括:有利于细胞存活、生长的细胞活性因子和/或细胞外基质分子。根据本发明的实施例，所述细胞活性因子的种类不受特别限制，只要能够有效促进皮肤细胞的生长和增殖即可。根据本发明的一个具体示例，细胞活性因子可以为选自bFGF(碱性成纤维细胞生长因子)、EGF(表皮细胞生长因子)的至少一种。根据本发明的实施例，所述细胞外基质分子的种类不受特别限制。根据本发明的一些实施例，细胞外基质分子可以为选自透明质酸、纤维粘连蛋白的至少一种。由此，能够有效促进皮肤细胞的存活和生长，进而促进皮肤愈合和毛囊再生的效果较好。
[0044]在本发明的另一方面，本发明提供了一种制备前面所述的药物组合物的方法。根据本发明的实施例，该方法包括以下步骤:
[0045](I)提供RADA16-1溶液和PRG溶液，其中，所述RADA16-1溶液的浓度为0.l-lg/100ml，所述 PRG 溶液的浓度为 0.1-lg/lOOml。
[0046]根据本发明的实施例，所述RADA16-1溶液的浓度为lg/100mL。由此，所得到的自组装多肽水凝胶的性能较佳，皮肤愈合和毛囊再生的效果较好。
[0047]根据本发明的实施例，所述PRG溶液的浓度为lg/100mL。由此，所得到的自组装多肽水凝胶的性能较佳，皮肤愈合和毛囊再生的效果较好。
[0048]根据本发明的实施例，在进行后续步骤之前，预先将所述RADA16-1溶液和所述PRG溶液进行0.22 μ m过滤除菌处理。由此，能够有效对RADA16-1溶液和PRG溶液进行除菌，获得无菌的RADA16-1溶液和PRG溶液，便于后续步骤的操作。
[0049](2)将所述RADA16-1溶液和所述PRG溶液等体积混合，以便获得混合水凝胶溶液。
[0050]根据本发明的实施例，在将RADA16-1溶液和PRG溶液混合前，可以预先将RADA16-1溶液和PRG溶液分别超声30分钟。
[0051](3)在所述RADA16-1溶液、所述PRG溶液或所述混合水凝胶溶液中接种皮肤细胞，并在适于所述皮肤细胞生长的条件下进行孵育，以便获得所述药物组合物。
[0052]根据本发明的实施例，所述接种皮肤细胞进一步包括:用10%无菌蔗糖溶液将所述皮肤细胞配成浓度为14-1O8个/mL的细胞悬液，将所述混合水凝胶溶液和所述细胞悬液按照体积比为5:1的比例混合。由此，在适当pH条件下，混合水凝胶溶液中的RADA16-1和PRG可自发组装成纳米纤维，并进一步发生交联，形成多孔网状结构的水凝胶，从而有效获得内部设置有皮肤细胞的自组装多肽水凝胶，即本发明的药物组合物。
[0053]根据本发明的实施例，所述皮肤细胞的种类不受特别限制。根据本发明的一些实施例，皮肤细胞可以为选自表皮细胞和真皮细胞的至少一种。由此，促进皮肤愈合和毛囊再生的效果较好。
[0054]根据本发明的实施例，所述真皮细胞的种类不受特别限制。根据本发明的一些实施例，真皮细胞可以为新分离的真皮细胞或培养0-30代的真皮干细胞。由此，所述真皮细胞在自组装多肽水凝胶中的生长状态良好，能够有效增殖，进而能够有效发挥促进皮肤愈合和毛囊再生的功效。
[0055]根据本发明的实施例，所述表皮细胞的种类不受特别限制。根据本发明的一些实施例，表皮细胞可以为新分离的表皮细胞或培养0-30代的表皮干细胞。由此，所述表皮细胞在自组装多肽水凝胶中的生长状态良好，能够有效增殖，进而能够有效发挥促进皮肤愈合和毛囊再生的功效。
[0056]根据本发明的实施例，所述孵育进一步包括:每隔30分钟，移除孔板中的培养基，补加等体积新鲜培养基到孔板中，重复3-5次。由此，能够有效调节自组装多肽水凝胶的pH值，使其适合皮肤细胞的生长与增殖，从而有效用于皮肤愈合和毛囊再生。根据本发明的实施例，所述培养基中包含有利于细胞存活、生长的细胞活性因子和/或细胞外基质分子，根据本发明的实施例，所述细胞活性因子为选自bFGF、EGF的至少一种，所述细胞外基质分子为选自透明质酸、纤维粘连蛋白的至少一种。由此，能够有效促进皮肤细胞的存活和生长，进而促进皮肤愈合和毛囊再生的效果较好。
[0057]发明人发现，利用本发明的该方法能够快速有效地制备前面所述的药物组合物，且操作简单、方便快捷、容易控制、易于实现规模化生产。
[0058]在本发明的又一方面，本发明提供了前面所述的药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于皮肤愈合和毛囊再生。发明人发现，在本发明的药物组合物中，自组装多肽水凝胶具有良好的细胞和组织相容性，无毒，能够有效支持皮肤细胞的生长与增殖，植入体内后可逐步被吸收，皮肤细胞在自组装多肽水凝胶中能够有效生长与增殖，在自组装多肽水凝胶的支持作用下，能够有效促进皮肤愈合和毛囊再生。
[0059]在本发明的再一方面，本发明提供了一种用于皮肤愈合和毛囊再生的药物。根据本发明的实施例，该药物包含前面所述的药物组合物。发明人发现，本发明的该药物组合物能够有效用于皮肤愈合和毛囊再生。
[0060]下面详细描述本发明的实施例，如无特殊说明，下述实施例中离体皮肤干细胞从C57小鼠的皮肤组织分离并培养；皮肤细胞的分离方法为:将小鼠皮肤剪成小块用dispaseII (sigma), 37°C消化2小时,剥离真皮和表皮,分别用I型胶原酶(sigma)消化得到新分离的真皮和表皮细胞；碳酸酯膜(transwell)购自于Corning公司，产品目录号为3470 ;细胞培养基组成为DMEM/F12(3:1)(购买于Invitrogen公司)，含2% B27(购买于Invitrogen公司)，40ng/ μ L bFGF (Peprotech)和