功能生物肥。
[0038] 本发明的再一目的是提供解淀粉芽胞杆菌ZFH-3在制备多功能生物肥中的应用。
[0039] 本发明的上述发明目的是通过以下技术方案达到的：
[0040] 解淀粉芽胞杆菌ZFH-3在制备多功能生物肥中的应用，解淀粉芽胞杆菌ZFH-3通 过与蚕沙和烟梗混合形成组合物，有利于蚕沙和烟梗功能的发挥。
[0041] 有益效果：
[0042] 蚕沙是蚕排出的粪便和食剩的残桑以及蚕座中的垫料的统称，是一种全生态的 农业资源。蚕沙富含有机质和各类营养物质，其中蚕粪干物含量38% -35%，每百克蚕粪 干物中含有粗蛋白13. 47-14. 45%，粗脂肪2. 18-2. 29%、粗纤维15. 79-16. 24%、粗灰分 9. 85-9. 95%、可溶性无氮物56. 92~57. 44%，并含有钙、镁、铜、铁、锌等中微量元素，及少 量生物碱，类肾上腺皮质激素，烟酸，促生长因子等。蚕沙通过生物发酵制成蚕沙有机肥，土 壤施用蚕沙有机肥可显著提高土壤PH值，降低土壤酸度，显著增加土壤速效养分和有机质 含量，增加土壤磷酸酶、脲酶、蔗糖酶和过氧化氢酶活性，从而改善了土壤质量，提高土壤肥 力。
[0043] 烟梗是烟草生产过程中的废弃物，烟梗的化学成分主要是：碳水化合物约占 50%，烟碱约占1 % - 4%，树脂、多酚、木质素等约占15%，蛋白质约占30%，灰分约占 13%，具有药肥双效的功能。其中的特殊物质烟碱，杀虫活性较高，抑制害虫神经组织，使虫 体室息致死。主要起触杀作用，并有胃毒作用和熏蒸作用，以及一定的杀卵作用，是高效生 物杀虫驱虫剂，能有效预防、驱避多种地下害虫和线虫，大大降低农药投入，无公害无残留。 以烟梗为原料制成的产品施入土壤后，能有效驱避地下害虫和线虫，农作物的地下虫害明 显减少。
[0044] 解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3及含解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3的微 生物菌剂的试验结果表明，解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3对枯萎病菌（Fusarium oxysporum)、青枯病菌（Ralstonia solanacearum)、根腐病（Fusarium vasinfectum Atk)、 疫病（Phytophthora capsici Leonianv)、欧文氏杆菌（Erwinia)软腐病菌、立枯病菌 (Rhizoctonia solani/KUhn)具很强的抑制作用，对各土传病害的抑菌率在76%以上。解 淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3能通过酶的作用，可以激活作物抗逆系统，提高作物养分吸 收能力。
[0045] 本发明人经过试验，意外地发现：解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3与蚕沙和烟梗 相结合，除了它们各自具有的作用外，还具有超加合作用：解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3 使得蚕沙和烟梗的作用超水平发挥。
[0046] 本发明提供的蚕沙生物解淀粉芽胞杆菌ZFH-3多功能生物肥，提高土壤的有机质 含量，疏松土壤、活化养分，提高土壤养分可利用率，增加土壤肥力，增加土壤有益菌数，维 持土壤微生物态平衡，激活作物抗逆系统，提高作物养分吸收能力，减少和抑制土传病害， 驱避地下害虫和线虫，减少化肥和农药使用，改良土壤生态环境。
[0047] 下面通过【具体实施方式】对本发明进行详细说明。应该理解的是，所述的实施例仅 仅涉及本发明的优选实施方案，在不脱离本发明的精神和范围情况下，各种成分及含量的 变化和改进都是可能的。
【具体实施方式】
[0048] 实施例1 :
[0049] 本实施例的蚕沙解淀粉芽胞杆菌ZFH-3多功能生物肥为颗粒剂，由以下重量份的 原料制备而成：蚕沙550公斤，烟梗250公斤，解淀粉芽胞杆菌ZFH-3剂200公斤。
[0050] 上述蚕沙解淀粉芽胞杆菌ZFH-3多功能生物肥的步骤如下：
[0051] (1)蚕沙预处理：将在广东省清远市阳山县收集来的蚕沙，去除掉粗的桑枝和杂 质后，称重，得预处理蚕沙；
[0052] (2)解淀粉芽胞杆菌ZFH-3菌剂的制备：
[0053] ①活化菌种
[0054] 活化解淀粉芽抱杆菌植物亚种（Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum)ZFH-3菌株（该菌株已保藏，其保藏编号为：CGMCC No. 9884,保藏日期为2014 年10月30日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京 市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所），待解淀粉芽孢杆菌植物亚种 (Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum)ZFH_3 在 LB 固体培养基上菌落乳白色， 圆形，明显突起，表面光滑，不透明，边缘整齐；
[0055] ②一级种子液的制备
[0056] 选取LB固体培养基上的单菌落，接种于一级种子摇瓶中，摇瓶体积为250mL，一级 种子LB液态培养基（121°C下，灭菌20min)的装液量50ml，将一级种子摇瓶在32°C、180r/ min下培养14h，得到一级种子液；
[0057] ③二级种子液的制备
[0058] 种子罐中的培养基仍为LB液体培养基，121°C下，灭菌20min，将一级种子液接入 种子罐中，接种量为0. 5-1% (V/V);培养条件为：通气比1 :1，搅拌转速为250-400r/min， 培养温度32°C，罐压0. 05MPa，培养时间为12小时，培养结束时得到二级种子液，其活菌含 量为1-3X 10scfu/mL，0D值在0· 85左右，此时菌种活力强；
[0059] ④解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3菌液发酵
[0060] 发酵培养基配方（重量百分比）：玉米淀粉3%，豆柏粉3%，酵母膏0. 9%，氯化钠 0· 25 %，碳酸钙 0· 25 %，硫酸镁 0· 4 %，磷酸氢二钾 0· 3 %，ρΗ7· 2-7. 5，121°C 灭菌 30min ;
[0061] 将解淀粉芽抱杆菌植物亚种（Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum) ZFH-3的二级种子液，按照接种量为1% (V/V)接入发酵罐中，培养条件为：通气比为1 : 〇. 7,搅拌转速为180r/min、罐压0. 05MPa、培养温度32°C、培养时间为48h左右，发酵过程中 根据泡沫情况流加消泡剂；下罐时间以取样镜检芽孢90%以上释放为准，成熟发酵液中解 淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3活芽孢含量为30~40X 10scfu/mL，得到发酵成熟菌剂；
[0062] ⑤解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3菌粉
[0063] 步骤④所得的发酵成熟菌剂（活芽孢含量为30~40 X 10scfU/mL)经碟片离心机 或微滤设备浓缩后，加入轻质碳酸钙，浓缩成熟发酵菌剂与轻质碳酸钙的重量比为100:3， 得到液固混合物，将该液固混合物搅拌30min后，利用输料栗将液固混合物送入离心式喷 雾塔中干燥，得到解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3原粉；
[0064] 其中，LB培养基配方（g/L):蛋白胨10g，酵母膏5g，NaCl 10g，溶剂为水， pH7. 0-7. 2,固体培养基在液体培养基中加2%琼脂；
[0065] 其中，离心式喷雾塔的干燥条件为：进风口温度为180-200 °C，出风口温度为 80-85°C，菌原粉中含水量小于5 % (W/W)，活芽孢含量2000 X 10scfu/g ;
[0066] 最后往得到解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3原粉中加入豆柏粉3%、轻质碳酸钙 混合，使最终为每克含1X K^cfu解淀粉芽孢杆菌植物亚种ZFH-3活芽孢粉即解淀粉芽胞 杆菌ΖΠ 1-3菌剂；
[0067] (3)混合：在步骤⑴所得预处理蚕沙中加入在珠海市威利冠肥料有限公司买到 的烟梗，经粉碎机粉碎，混合均匀，然后调节混合物料的含水量至55 % -60 %，再加入步骤 (2)所得解淀粉芽胞杆菌ZFH-3菌剂，得混合物料；
[0068] (4)堆肥发酵：将步骤（3)所得混合物料堆肥发酵，三至五天后将温度升至60°C~ 70°C，发酵20至30天，每二至三天翻堆通气一次，当混合物料水分降至20%以下时，停止发 酵，得发酵混合物料；
[0069] (5)多功能生物肥的制备：将上述步骤（4)所得发酵混合物料通过翻堆混合均匀 后，经粉碎机粉碎成100目的细粉，装袋，得蚕沙解淀粉芽胞杆菌ZFH-3多功能生物肥1。
[0070] 实施例2
[0071] -种蚕沙解淀粉芽胞杆菌ZFH-3多功能生物肥，由以下重量份的原料制备而成： 蚕沙：250公斤；烟梗：450公斤；解淀粉芽胞杆菌ZFH-3菌剂：300公斤。
[0072] 上述蚕沙解淀粉芽胞杆菌ZFH-3多功能生物肥的步骤如下：
[0073] (1)蚕沙预处理：将在广东省清远市阳山县收集来的蚕沙，去除掉粗的桑枝和杂 质后，称重，得预处理蚕沙；
[0074] (2)解淀粉芽胞杆菌ZFH-3菌剂的制备：
[0075] ①活化菌种
[0076] 活化解淀粉芽抱杆菌植物亚种（Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum)ZFH_3菌株，待解淀粉芽抱杆菌植物亚种（Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum)ZFH-3在LB固体培养基上菌落乳白色，圆形，明显突起，表面光滑，不透 明，边缘整齐；
[0077] ②一级种子液的制备
[0078] 选取LB固体培养基上的单菌落，接种于一级种子摇瓶中，摇瓶体积为250mL，一级 种子LB液态培养基（121°C下，灭菌20min)的装液量50ml，将一级种子摇瓶在32°C、180r/ min下培养14