一种多肽化合物及其制备方法与应用与流程
技术特征：
1.一种多肽化合物，其特征在于，其结构式为：(XAXBXCXDXEXFXG-X)2KY，或{(XAXBXCXDXEXFXG-X)2K}2KY，或{({XAXBXCXDXEXFXG-X}2K)2K}2KY；
XA、XB、XD、XE和XG分别为脂肪族氨基酸分子中的一种，XC和XF为脂肪族氨基酸分子或杂环族氨基酸分子，K为赖氨酸(Lys,K)，X或Y为空、任意一个氨基酸、多个氨基酸组成的肽片段、或能将氨基酸或肽片段连接起来的化学基团，X和Y可相同，可不同；
(XAXBXCXDXEXFXG-X)2KY结构见式4：
{(XAXBXCXDXEXFXG-X)2K}2KY结构见式5：
{({XAXBXCXDXEXFXG-X}2K)2K}2KY结构见式6：
2.根据权利要求1所述的多肽化合物，其特征在于，XA、XB、XD、XE和XG分别选自丙氨酸(Ala,A)、缬氨酸(Val，V)、亮氨酸(Leu，L)、异亮氨酸(Ile，I)、蛋氨酸(Met，M)、半胱氨酸(Cys，C)、精氨酸(Arg，R)、赖氨酸(Lys，K)、甘氨酸(Gly，G)、丝氨酸(Ser，S)、苏氨酸(Thr，T)、天冬氨酸(Asp,D)、天冬酰胺(Asn，N)、谷氨酸(Glu,E)或谷氨酰胺(Gln，Q)，XA、XB、XD、XE和XG可相同也可不相同；XA优选甘氨酸(Gly，G)、苏氨酸(Thr，T)、精氨酸(Arg，R)、谷氨酸(Glu,E)、丙氨酸(Ala,A)、赖氨酸(Lys，K)、亮氨酸(Leu，L)或丝氨酸(Ser，S)，更优选甘氨酸(Gly，G)、苏氨酸(Thr，T)或精氨酸(Arg，R)；XB优选谷氨酰胺(Gln，Q)、谷氨酸(Glu,E)、精氨酸(Arg，R)、丙氨酸(Ala,A)、苏氨酸(Thr，T)、亮氨酸(Leu，L)或赖氨酸(Lys，K)，更优选谷氨酰胺(Gln，Q)、精氨酸(Arg，R)或赖氨酸(Lys，K)；XD优选精氨酸(Arg，R)、丝氨酸(Ser，S)、亮氨酸(Leu，L)、赖氨酸(Lys，K)、天冬氨酸(Asp,D)、甘氨酸(Gly，G)或谷氨酸(Glu,E)，更优选精氨酸(Arg，R)、赖氨酸(Lys，K)或甘氨酸(Gly，G)；XE优选精氨酸(Arg，R)赖氨酸(Lys，K)、亮氨酸(Leu，L)或谷氨酰胺(Gln，Q)，更优选精氨酸(Arg，R)或赖氨酸(Lys，K)；XG优选精氨酸(Arg，R)、甘氨酸(Gly，G)、缬氨酸(Val，V)、赖氨酸(Lys，K)、亮氨酸(Leu，L)或谷氨酸(Glu,E)，更优选精氨酸(Arg，R)、甘氨酸(Gly，G)、缬氨酸(Val，V)或谷氨酸(Glu,E)。
3.根据权利要求2所述的多肽化合物，其特征在于，XC和XF分别选自丙氨酸(Ala,A)、缬氨酸(Val，V)、亮氨酸(Leu，L)、异亮氨酸(Ile，I)、蛋氨酸(Met，M)、半胱氨酸(Cys，C)、精氨酸(Arg，R)、赖氨酸(Lys，K)、甘氨酸(Gly，G)、丝氨酸(Ser，S)、苏氨酸(Thr，T)、天冬氨酸(Asp,D)、天冬酰胺(Asn，N)、谷氨酸(Glu,E)、谷氨酰胺(Gln，Q)、色氨酸(Trp,W)、组氨酸(His,H)或脯氨酸(Pro,P)，XC和XF可相同也可不相同；XC优选赖氨酸(Lys，K)、脯氨酸(Pro,P)、色氨酸(Trp,W)、丙氨酸(Ala,A)、亮氨酸(Leu，L)、组氨酸(His,H)或天冬氨酸(Asp,D)，更优选脯氨酸(Pro,P)、亮氨酸(Leu，L)或组氨酸(His,H)；XF优选脯氨酸(Pro,P)、谷氨酸(Glu,E)、天冬氨酸(Asp,D)、组氨酸(His,H)、甘氨酸(Gly，G)、丙氨酸(Ala,A)或赖氨酸(Lys，K)，更优选脯氨酸(Pro,P)、谷氨酸(Glu,E)、天冬氨酸(Asp,D)、组氨酸(His,H)或赖氨酸(Lys，K)。
4.根据权利要求1或2所述的多肽化合物，其特征在于，X优选酪氨酸(Tyr，Y)、精氨酸(Arg，R)、丝氨酸(Ser，S)、天冬酰胺(Asn，N)、甘氨酸(Gly，G)、谷氨酸(Glu,E)或空，更优选酪氨酸(Tyr，Y)、精氨酸(Arg，R)或空；Y优选甘氨酸(Gly，G)、丙氨酸(Ala,A)、半胱氨酸(Cys，C)或空，更优选甘氨酸(Gly，G)、丙氨酸(Ala,A)或半胱氨酸(Cys，C)。
5.根据权利要求1-4任一所述的多肽化合物，其特征在于，还包含在所述多肽化合物氨基酸的侧链基团或序列末端基础之上通过化学修饰、改造得到的衍生物，如：
所述多肽化合物与有机酸或无机酸形成的盐类化合物；
所述多肽化合物所带有的羟基可形成但不限于所形成的醚、酯、苷或甙等的化合物；
所述多肽化合物所带有的巯基可形成但不限于所形成的硫醚、硫苷，或与半胱氨酸或含半胱氨酸的肽所形成的含有二硫键的化合物；
所述多肽化合物所带有的氨基可形成但不限于所形成的酰化物、烃化物、与糖类物质所形成的苷类物质等；
所述多肽化合物所带有的羧基可形成但不限于所形成的酯、酰胺类化合物等；
所述多肽化合物所带有的亚氨基可形成但不限于所形成的苷、酰化物、烃化物等；
所述多肽化合物所带有的酚羟基可形成但不限于所形成的酯、醚、苷、甙类化合物，或与有机碱、无机碱所形成的盐类化合物；
所述多肽化合物与金属离子所形成的配合物、络合物或螯合物；
所述多肽化合物所形成的水合物或溶剂物。
6.药物组合物，其含有权利要求1-5任一所述的多肽化合物、其几何异构体、其药学上可接受的盐或溶剂化合物以及可药用载体或赋形剂的药物组合物。
7.制备权利要求1-5任一所述多肽化合物的方法，其特征在于，
(XAXBXCXDXEXFXG-X)2KY合成路线见式1，
先把Y固定在WANG固相树脂上，再通过缩合连接赖氨酸Fmoc-Lys(Fmoc)-OH(Lys,K),形成具有一个分支节点的两分支骨架“>KY-WANG固相树脂”；
进而在“>KY-WANG固相树脂”中K的两个活性氨基末端与XAXBXCXDXEXFXG-X片段连接，形成两分支肽(XAXBXCXDXEXFXG-X)2KY-WANG固相树脂；或在“>KY-WANG固相树脂”中K的两个活性氨基末端逐一缩合连接氨基酸X、XG、XF、XE、XD、XC、XB、XA，得到(XAXBXCXDXEXFXG-X)2KY-WANG固相树脂；
最后将两分支肽从WANG固相树脂上裂解下来，通过纯化得到二拷贝XAXBXCXDXEXFXG-X的多肽化合物(XAXBXCXDXEXFXG-X)2KY；
{(XAXBXCXDXEXFXG-X)2K}2KY合成路线见式2，
把Y固定在WANG固相树脂上，再通过缩合连接赖氨酸Fmoc-Lys(Fmoc)-OH形成具有一个分支节点的两分支骨架“>KY-WANG固相树脂”。继续将“>KY-WANG固相树脂”中K的两个活性氨基末端与赖氨酸Fmoc-Lys(Fmoc)-OH的羧基端缩合连接，形成具有两个分支节点的四分支骨架“>K2KY-WANG固相树脂”；
进而将“>K2KY-WANG固相树脂”的每个赖氨酸K的两个活性氨基末端与XAXBXCXDXEXFXG-X片段连接，形成四分支肽(XAXBXCXDXEXFXG-X)2KY-WANG固相树脂；或将“>K2KY-WANG固相树脂”中K的两个活性氨基末端逐一缩合连接氨基酸X、XG、XF、XE、XD、XC、XB、XA，得到(XAXBXCXDXEXFXG-X)4K2KY-WANG固相树脂；
最后将四分支肽从WANG固相树脂上裂解下来，通过纯化得到四拷贝XAXBXCXDXEXFXG-X的多肽化合物{(XAXBXCXDXEXFXG-X)2K}2KY；
{({XAXBXCXDXEXFXG-X}2K)2K}2KY合成路线见式3，
把Y固定在WANG固相树脂上，再通过缩合连接赖氨酸Fmoc-Lys(Fmoc)-OH,形成具有一个分支节点的两分支骨架“>KY-WANG固相树脂”；继续将K的两个活性氨基末端与赖氨酸Fmoc-Lys(Fmoc)-OH的羧基端缩合连接，形成四分支骨架“K2KY-WANG固相树脂”；再继续将四分支骨架“>K2KY-WANG固相树脂”中K的两个活性氨基末端与赖氨酸Fmoc-Lys(Fmoc)-OH的羧基端缩合连接，形成具有四个分支节点的八分支骨架“>K4K2KY-WANG固相树脂”；
进而在“>K4K2KY-WANG固相树脂”的每个赖氨酸K的两个活性氨基末端与XAXBXCXDXEXFXG-X片段连接，形成八分支肽(XAXBXCXDXEXFXG-X)8K4K2KY-WANG固相树脂；或在“>K4K2KY-WANG固相树脂”中K的两个活性氨基末端逐一缩合连接氨基酸X、XG、XF、XE、XD、XC、XB、XA，得到(XAXBXCXDXEXFXG-X)8K 4K2KY-WANG固相树脂；
最后将八分支肽从WANG固相树脂上裂解下来，通过纯化得到八拷贝XAXBXCXDXEXFXG-X的多肽化合物{({XAXBXCXDXEXFXG-X}2K)2K}2KY。
8.根据权利要求7所述方法，其特征在于，在将K的羧基端与Y-WANG固相树脂缩合前，需要先将K的两个氨基保护起来，优选叔丁氧羰基(Boc)保护法和芴甲氧羰基(Fmoc)保护法；
所述另外两个赖氨酸的羧基与KY中K的两个氨基缩合前，先将该每个赖氨酸的两个氨基保护起来；XAXBXCXDXEXFXG-X的羧基与该每个赖氨酸的氨基缩合前，先将XAXBXCXDXEXFXG-X中的氨基保护起来；保护方法优选叔丁氧羰基(Boc)保护法和芴甲氧羰基(Fmoc)保护法。
9.根据权利要求7或8所述方法，其特征在于，具体步骤为：
步骤一：用Fmoc保护法将赖氨酸K中的两个氨基保护起来；
步骤二：用多肽自动合成仪，将KY固定在WANG固相树脂上，连接顺序为：KY-WANG固相树脂；
制备二拷贝的多肽化合物时，在KY的赖氨酸活化后的两个氨基端上继续缩合连接另外两个XAXBXCXDXEXFXG-X，得到固定在WANG固相树脂上的二拷贝XAXBXCXDXEXFXG-X的多肽化合物(XAXBXCXDXEXFXG-X)2KY；或在KY的赖氨酸活化后的两个氨基端上继续缩合连接另外两个赖氨酸K，且该每个赖氨酸K上的两个氨基已被Fmoc保护，制备得到两分支骨架K2KY-WANG固相树脂；
制备四拷贝的多肽化合物时，在两分支骨架“K2”的每个赖氨酸K活化后的两个氨基末端继续进行两个XAXBXCXDXEXFXG-X的缩合，得到固定在WANG固相树脂上的四拷贝XAXBXCXDXEXFXG-X的多肽化合物{(XAXBXCXDXEXFXG-X)2K}2KY；或在两分支骨架“K2”的每个赖氨酸K活化后的两个氨基末端继续进行两个赖氨酸K的缩合，该每个赖氨酸K上的两个氨基已被Fmoc保护，制备得到四分支骨架K4K2KY-WANG固相树脂；
制备八拷贝的多肽化合物时，在四分支骨架“K4”的每个赖氨酸K活化后的两个氨基末端继续进行两个XAXBXCXDXEXFXG-X的缩合，得到固定在WANG固相树脂上的八拷贝XAXBXCXDXEXFXG-X的多肽化合物{({XAXBXCXDXEXFXG-X}2K)2K}2KY；
最后用TFA法将多肽化合物从WANG固相树脂上裂解下来，得到了多肽化合物粗品；
步骤三：用色谱柱(型号为Daiso C18，10μm,100,50x 250mm)纯化多肽化合物粗品，流动相A为(含0.05％三氟乙酸，2％乙腈的水溶液)，流动相B为90％乙腈/水，流速为每分钟25毫升，紫外检测波长220纳米；收集流出峰溶液，再经过冷冻干燥，得到呈白色絮状的多肽化合物。
10.权利要求1-5任一所述的多肽化合物或权利要求7至9任一所述方法制备得到的多肽化合物在制备人或动物用免疫药物或增强免疫功能药物中的应用。
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