大肠杆菌高效表达培养基的制作方法

文档序号:12248334阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种大肠杆菌高效表达培养基,其特征在于,包括大肠杆菌培养基及添加剂,所述大肠杆菌培养基为蛋白胨、酵母粉、氯化钠的大肠杆菌培养基,所述添加剂的组份包括蛋白胨、酵母提取物、碳源物质、离子元素、表面活性剂和蛋白稳定剂。

2.根据权利要求1所述的大肠杆菌高效表达培养基,其特征在于,所述蛋白胨为多种蛋白胨,包括蛋白胨、酪蛋白胨、胰蛋白胨、大豆蛋白胨及麦麸水解物,所述蛋白胨含量为1-6g/L,所述酪蛋白胨含量为1-6g/L,所述胰蛋白胨含量为1-3g/L,所述大豆蛋白胨含量为1-3g/L,所述麦麸水解物含量为0.1-0.3g/L。

3.根据权利要求1所述的大肠杆菌高效表达培养基,其特征在于,所述酵母提取物的添加量为3-6g/L。

4.根据权利要求1所述的大肠杆菌高效表达培养基,其特征在于,所述碳源物质包括葡萄糖、蔗糖、麦芽糖及甘油,所述葡萄糖含量为1-10g/L,所述蔗糖含量为1-10g/L,所述麦芽糖含量为1-5g/L,所述甘油为1-3g/L。

5.根据权利要求1所述的大肠杆菌高效表达培养基,其特征在于,所述离子元素包括氯化钠、七水硫酸亚铁、MnSO4·nH2O、七水硫酸锌、七水氯化铝、氯化铜、氯化钴及HBO4,所述氯化钠含量为3-8g/L,所述七水硫酸亚铁含量为1-20mg/L,所述MnSO4·nH2O含量为1-10mg/L,所述七水硫酸锌含量为0.1-2mg/L,所述七水氯化铝含量为0.1-10mg/L,所述氯化铜含量为0.10-1mg/L,所述氯化钴含量为0.1-4mg/L,所述HBO4含量为0.01-1mg/L。

6.根据权利要求1所述的大肠杆菌高效表达培养基,其特征在于,所述表面活性剂为普朗尼克,其含量为1-5g/L。

7.根据权利要求1所述的大肠杆菌高效表达培养基,其特征在于,所述蛋白稳定剂包括抑肽酶、PMSF、TPCK及山梨醇,所述抑肽酶含量为0.02-6μg/ml,所述PMSF含量为17-170μg/ml,所述TPCK含量为70-100μg/ml,所述山梨醇为6-60g/L。

8.根据权利要求1所述的大肠杆菌高效表达培养基,其特征在于,所述添加剂还包括腐胺,所述腐胺含量为0.1-1g/L。

9.一种利用权利要求1至8中任意一种所述的大肠杆菌高效表达培养基培育Escherichia Coli菌种的方法,其特征在于,包括如下步骤:

步骤一、Escherichia Coli菌种筛选与保存:选择E.coli B及其衍生菌株作为表达宿主菌,选择BL21(DE3)/BL21(Rosetta)/BL21(PLysS/E)等作为备选菌株;

步骤二、培养基的选择和优化:配制出合成培养基;

步骤三、发酵罐中培养菌种:在参数为溶氧30-50%,转速150-300转/分,pH6.9-7.6的发酵罐中加入培养基诱导表达。

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